本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及一種抑制il-23基因表達的sirna及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、銀屑病是一種由多致病因子刺激引起的t細胞介導(dǎo)的自身免疫病，不具有傳染性。在致病機制上，大多數(shù)認為th1和th17通道是銀屑病發(fā)病的主要原因，代表性細胞因子有tnt-α、il-2、il-23和il-17。il-23是一種異二聚體蛋白，是由il-23(p19)和il-23(p40)兩個亞基通過二硫鍵連接而形成的二聚體細胞因子。il-23的p19亞基與il-12的p35亞基及其它細胞因子如il-6和il-11均具有同源性，可以活化巨噬細胞、t細胞和內(nèi)皮細胞表達產(chǎn)生；p40亞基與造血細胞因子受體胞外結(jié)構(gòu)域同源。

2、真皮樹突狀細胞產(chǎn)生il-23參與誘導(dǎo)th17細胞、th1細胞和th22細胞產(chǎn)生il-17a，il-17f，il-6，il-22，tnf-α等促炎細胞因子，這些促炎細胞因子作用于角質(zhì)形成細胞，導(dǎo)致表皮增生和角化過度。在皮膚炎癥的微環(huán)境下，角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生更多的il-23與真皮樹突狀細胞產(chǎn)生的il-23相互作用構(gòu)成循環(huán)，協(xié)同誘導(dǎo)銀屑病的產(chǎn)生與發(fā)展。

3、il-23之所以作為成藥靶點，是因為它是銀屑病致病核心通路il-23/th17軸的“上游”調(diào)控因子，是銀屑病皮膚炎癥的中央?yún)f(xié)調(diào)者，驅(qū)動致病性t細胞中il-17a、il-17f、il-22和其他炎性細胞因子的擴增和穩(wěn)定化；而il-17是“下游”效應(yīng)因子，致病性t細胞可以產(chǎn)生il-17、il-22等多種炎癥因子作為效應(yīng)因子促進皮膚炎癥。靶向作用于il-23，可以全面下調(diào)th17細胞產(chǎn)生的多種炎癥因子，對銀屑病發(fā)病進行整體調(diào)控。

4、il-23抑制劑靶向于il-23，可以特異性阻斷th17細胞產(chǎn)生il-17而不影響其它來源的il-17正常的表達，由于il-23位于“il-23/th17通路”上游，所以il-23抑制劑具有較好的長效性。當前上市用于治療銀屑病的il-23抑制劑主要有g(shù)uselkumab(tremfya)、tildrakizumab(ilumya)、risankizumab(skyrizi)。銀屑病的治療效果受到多種因素的影響，一般情況下由于患者群體和病情特征的差異，可能會導(dǎo)致生物制劑對不同群體的療效存在個體差異，在這一方面il-23抑制劑表現(xiàn)出較為穩(wěn)定的療效。

5、隨著近些年對于銀屑病相關(guān)基礎(chǔ)研究的的深入，針對銀屑病發(fā)病機理涉及靶點的生物制劑相繼被推出，在眾多的生物制劑中，il-23抑制劑較為熱門。阻斷il-23的治療可顯著減少銀屑病皮膚病變，甚至令其消退，并改善大多數(shù)銀屑病患者的生活質(zhì)量。以il-23為靶點的生物制劑兼具有效性和安全性，是近十年來皮膚病學(xué)的一大成就。銀屑病患者服用特異性抑制il-23的單克隆抗體后，可能會直接減少il-17的產(chǎn)生，進而使皮損減少甚至完全消失。此外，il-23單抗藥物靶向性強，不良反應(yīng)小，無傳統(tǒng)的免疫抑制作用，可長期使用，為銀屑病患者提供了一個較為有效、安全的治療方法。綜上，il-23在銀屑病的致病機制中發(fā)揮了重要作用，針對該靶點設(shè)計的生物制劑經(jīng)過實驗論證及長時間的實際應(yīng)用效果，證實了il-23靶點治療的可行性和安全性。

6、現(xiàn)有以il-23作為靶點的藥物有烏司奴單抗和古塞奇尤單抗，這兩款藥物都是治療銀屑病的單抗藥物，作用方式為皮下注射，烏司奴單抗每12周注射一次，古塞奇尤單抗每8周注射一次，注射頻率和費用較高。

7、sirna藥物療法是一種近年極為火熱的疾病治療策略，它是基于rnai(rnainterference)原理開發(fā)的，利用長度約21bp的雙鏈rna靶向目的mrna片段，從而沉默相關(guān)蛋白的表達。sirna藥物，最大的優(yōu)點是1)候選靶點豐富；2)靶向特異性強：3)治療周期中，用藥次數(shù)少，單次用藥維持藥效時間長，以及價格適中患者易接受。2018年首款sirna藥物onpattro被fda獲批上市，這是sirna藥物研發(fā)的里程碑。2023年諾華宣布，其長效降脂藥inclisiran(英克司蘭鈉注射液，商品名：樂可為)已獲得國家藥監(jiān)局批準上市，用于治療高膽固醇血癥。而sirna治療的重要優(yōu)勢之一給藥頻率，以最早在國內(nèi)獲批的依洛尤單抗為例，其每月一次皮下注射，因此比起需要天天服用的口服制劑依從性更高，不過，inclisiran是每年用藥兩次，屬于超長效pcsk9抑制劑，因此具有更高的依從性，也是一眾pcsk9抑制劑中的“異類”；目前，國內(nèi)小核酸藥物研發(fā)正處于激烈競爭且快速上升期中，本發(fā)明設(shè)計了sirna-il23序列，特異性靶向銀屑病的關(guān)鍵靶點，借助遞送載體，將sirna-il23作為活性成分遞送進皮膚，使銀屑病中高表達的核心靶點表達降低，從而緩解或治療銀屑病。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、為解決現(xiàn)有技術(shù)中以il-23作為靶點的藥物的不足，鑒于小核酸藥物的多種優(yōu)勢，本發(fā)明提供了一種針對il-23設(shè)計及修飾的抑制il-23基因表達的sirna及其應(yīng)用，以期為銀屑病的治療提供一種新的有效手段。

2、本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

3、本發(fā)明的第一個目的，在于提供了一種抑制il-23基因表達的sirna，所述sirna的正義鏈的序列為ss-5’uucugcuugcaaaggaucctt-3’，反義鏈的序列為as-5’ggauccuuugcaagcagaatt-3。

4、進一步地，所述sirna還包括對其正義鏈進行化學(xué)修飾。

5、進一步地，所述化學(xué)修飾是將正義鏈中尿嘧啶用假尿嘧啶替代。

6、進一步地，所述假尿嘧啶的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下所示：

7、

8、本發(fā)明的第二個目的，在于提供了一種上述sirna在制備治療銀屑病的藥物中的應(yīng)用。

9、進一步地，所述藥物采用皮膚用藥的方式進行給藥。

10、本發(fā)明所具有的有益效果如下：

11、1、本發(fā)明設(shè)計了一條sirna-il23序列，并通過試驗篩選出有效的化學(xué)修飾方法，既增強了sirna抵抗酶水解的能力，又具有良好的敲降靶基因的功能。

12、2、本發(fā)明設(shè)計的sirna-il23序列在ncbi上對比后，理論上，可完全靶向人、大鼠和小鼠，是一種靶向多物種且特異性強的sirna序列。

13、3、采用基于本發(fā)明的sirna藥物治療銀屑病，相較于以il-23作為靶點的單抗藥物，如烏司奴單抗和古塞奇尤單抗，具有以下優(yōu)勢：

14、(1)作用于mrna水平，比作用于蛋白水平的單抗藥物更早，用藥頻率低，總費用低；(2)固相合成，來源簡單；(3)可以結(jié)合遞送載體，做成涂抹的透皮制劑，減少患者痛感。

技術(shù)特征：

1.一種抑制il-23基因表達的sirna，其特征在于，所述sirna的正義鏈的序列為ss-5’uucugcuugcaaaggaucctt-3’，反義鏈的序列為as-5’ggauccuuugcaagcagaatt-3。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制il-23基因表達的sirna，其特征在于，所述sirna還包括對其正義鏈進行化學(xué)修飾。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抑制il-23基因表達的sirna，其特征在于，所述化學(xué)修飾是將正義鏈中尿嘧啶用假尿嘧啶替代。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抑制il-23基因表達的sirna，其特征在于，所述假

5.一種sirna在制備治療銀屑病的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述sirna為權(quán)利要求1～4任一項所述的sirna。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的sirna在制備治療銀屑病的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物采用皮膚用藥的方式進行給藥。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種抑制IL?23基因表達的siRNA及其應(yīng)用，所述siRNA的正義鏈的序列為SS?5’UUCUGCUUGCAAAGGAUCCTT?3’，反義鏈的序列為AS?5’GGAUCCUUUGCAAGCAGAATT?3。本發(fā)明不僅設(shè)計出了siRNA?IL23序列，還通過試驗篩選出有效的化學(xué)修飾方法，即將正義鏈中尿嘧啶用假尿嘧啶替代，修飾后的siRNA既增強了抵抗酶水解的能力，又具有良好的敲降靶基因的功能，為銀屑病的治療提供一種新的有效手段。

技術(shù)研發(fā)人員：唐雪明,李萍,蒙羽涵,徐維勇,徐松琳
受保護的技術(shù)使用者：羿美誠?。ㄉ虾＃┥镝t(yī)藥有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10