專利名稱:一種在硬水中養(yǎng)殖雨生紅球藻的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種在硬水中養(yǎng)殖雨生紅球藻的方法。
背景技術(shù)：
我國養(yǎng)殖螺旋藻等淡水微藻的主要基地是在云南省程海地區(qū)，作為水源的程海湖，水質(zhì)偏堿性、硬度大，其中Ca2+溶液濃度O. 3-0. 7 g/L，Mg2+濃度為O. 25 g/L以上，pH為7. 2-8. 5,水的硬度大于O. 55 g/L。這樣的水質(zhì)條件非常適宜養(yǎng)殖螺旋藻。由于螺旋藻為喜高溫種類，低溫時期生長緩慢，螺旋藻養(yǎng)殖一般在每年的3月份到11月份，因此，每年有4個月由于溫度低的原因，不宜于養(yǎng)殖螺旋藻。此時養(yǎng)殖雨生紅球藻比較適宜，而雨生紅球藻養(yǎng)殖在硬水中生長率低下，迄今為止還沒有直接利用硬水養(yǎng)殖雨生紅球藻的研究與成功的案例。目前已經(jīng)有硬水的預(yù)處理的方法報道，如公開號為CN101157504的發(fā)明專利“利用尾氣中so2、co2軟化硬水的工藝”，就公開了含so2、co2尾氣與硬水在吸收塔中反應(yīng)，混合液pH為2. 5-5. 5時，停止反應(yīng)，用堿液調(diào)整pH值為6. 5-7. 5，過濾得軟化水。又如公開號為CN1915865的發(fā)明專利“一種硬水軟化劑”，就公開了一種處理硬水的硬水軟化劑。它是由碳酸鈉5% 15%，明礬5% 15%，聚合氯化鋁O. 5% 15%，具有pH調(diào)節(jié)，氧化還原，絮凝沉降的綜合作用而軟化硬水。還有如公開號為CN1076916的發(fā)明專利“硬水軟化器再生養(yǎng)護增效催化劑”，就公開了由乙二氨乙醚基纖維素、羧甲基纖維素鈉，乙二胺四乙酸等物質(zhì)組成一種藥物組合，能降低該反應(yīng)的活化能，提高硬水軟化器的再生效率。
通過水處理等技術(shù)措施將實現(xiàn)雨生紅球藻與螺旋藻的輪換養(yǎng)殖，即高溫時期養(yǎng)殖螺旋藻，低溫時期養(yǎng)殖雨生紅球藻，有利于促進生產(chǎn)設(shè)備、人員的高效化，從而提高整個生產(chǎn)效益。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述硬水中養(yǎng)殖雨生紅球藻的不足，本發(fā)明目的是提供一種在硬水中養(yǎng)殖雨生紅球藻的方法，本方法是以硬水作為培養(yǎng)液的前提下，規(guī)?；B(yǎng)殖雨生紅球藻的方法。
本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為 a、對硬水進行軟化處理
即直接軟化硬水的物理處理法，在自來水中加入褐藻酸鈉，配制成體積濃度5%的褐藻酸鈉溶液，煮沸3 min，待液體冷卻成膠體后，放置在300目的篩絹中，懸掛在需要處理的水體中至少12小時，利用褐藻酸鈉吸附Ca2+和Mg2+，得到初步軟化的培養(yǎng)液，Ca2+溶液濃度降低20-50%，Mg2+濃度降低至少25%。
b、誘變及馴化藻種
采用處于指數(shù)生長期的雨生紅球藻的藻液100 mL，離心棄部分上清液使藻液細胞密度每毫升在IO6個細胞，注入化學(xué)誘變劑甲基磺酸乙酯EMS，使雨生紅球藻藻液中的EMS最終濃度為O. 3% — O. 5% ;36°C黑暗條件下處理I小時；4500 rpm離心去除誘變劑EMS，用a步驟得到的初步軟化培養(yǎng)液洗滌2次，在24空板中加入初步軟化的培養(yǎng)液，并在培養(yǎng)液中加入IO5個誘變后的細胞；觀察生長情況，反復(fù)進行，得到生長迅速的藻種；在生長良好的空板中篩選藻種，繼續(xù)在a步驟獲得的培養(yǎng)液馴化，重復(fù)進行3個月，獲得能夠適應(yīng)部分軟化后硬水的藻種；
C、改變培養(yǎng)液的配方
采用間接軟化的步驟，利用偏磷酸或正磷酸代替磷酸鹽，以降低培養(yǎng)液中的Ca2+和Mg2+離子濃度，同時降低水體的PH值到8. O ;利用多聚偏磷酸根離子可以與Ca2+、Mg2+離子形成配合物，在大池培養(yǎng)采用濃度40克/噸的硝酸銨作為氮源，濃度3-5克/噸的偏磷酸或正磷酸作為磷源；
d、改變接種策略，增大雨生紅球藻接種量，提高藻種與培養(yǎng)液的比例，采用的比例是按體積重量藻種與培養(yǎng)液的比例為1/4一 1/2，按照生長狀態(tài)，觀察藻液呈上浮狀態(tài)，并分批添加培養(yǎng)液。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的優(yōu)點在于本發(fā)明適合于在硬水中大規(guī)模養(yǎng)殖雨生紅球藻，具有投資小、方便操作的特點，能夠充分利用養(yǎng)殖設(shè)施的基本功能，降低了生產(chǎn)成本，提
高養(yǎng)殖的效率。
具體實施方式
實施例I
一種在硬水中養(yǎng)殖雨生紅球藻的方法，按如下步驟進行
①直接對硬水進行軟化
在自來水中加入褐藻酸鈉，配制成體積濃度5%褐藻酸鈉溶液，煮沸，待上述液體后冷卻成膠體，放置在300目的篩絹中，懸掛在需要處理的水體中，水體與懸掛物的重量比例為200 1,12小時后，Ca2+溶液濃度降低20_50%，Mg2+濃度降低25%以上。形成硬水的物理處
理方法。
②誘變及馴化藻種
適應(yīng)品系的誘變處理，利用處于指數(shù)生長期的藻液100 mL，離心棄部分上清液使細胞密度在IO6個細胞每毫升左右。注入化學(xué)誘變劑甲基磺酸乙酯(EMS)，使EMS最終濃度分別為O. 3% — 0.5%。36°C黑暗條件下處理I小時。4500 rpm離心去除誘變劑，用新鮮培養(yǎng)液洗滌2次，在24空板中，加入步驟①獲得的培養(yǎng)液，加入IO5個誘變后的細胞。觀察生長情況，在生長良好的空板中篩選藻種，繼續(xù)在步驟①獲得的培養(yǎng)液馴化，重復(fù)進行3個月，獲得能夠適應(yīng)部分軟化后硬水的藻種。
③改變培養(yǎng)液的配方
采用間接軟化的方法，利用偏磷酸或正磷酸代替磷酸鹽，以降低培養(yǎng)液中的Ca2+和Mg2+離子濃度，同時降低水體的pH值到8. O ;利用多聚偏磷酸根離子可以與Ca2+、Mg2+離子形成配合物，在大池培養(yǎng)采用濃度40克/噸的硝酸銨作為氮源，濃度3-5克/噸的偏磷酸或正磷酸作為磷源。
④改變接種策略，增大雨生紅球藻接種量，提高藻種與培養(yǎng)液的比例，按體積重量藻種與培養(yǎng)液的比例為1/4一 1/2 ;按照生長狀態(tài)，并分批添加培養(yǎng)液，這樣盡可能減少環(huán)境參數(shù)變化程度，維持雨生紅球藻具有較長時間的快速生長期。
權(quán)利要求
1.一種在硬水中養(yǎng)殖雨生紅球藻的方法，其特征是針對硬水進行軟化處理，誘變及馴化藻種的適應(yīng)性，并改變培養(yǎng)液的配方，實現(xiàn)規(guī)模化培養(yǎng)，步驟如下 a、對硬水進行軟化 在自來水中加入褐藻酸鈉，配制成體積濃度5%的褐藻酸鈉溶液，煮沸3 min，待液體冷卻成膠體后，放置在300目的篩絹中，懸掛在需要處理的水體中吸附Ca2+和Mg2+，處理至少12小時，得到軟化的培養(yǎng)液； b、誘變及馴化藻種 采用處于指數(shù)生長期的雨生紅球藻的藻液100 mL，離心棄部分上清液使藻液細胞密度每毫升在IO6個細胞，注入化學(xué)誘變劑甲基磺酸乙酯EMS，使雨生紅球藻藻液中的EMS最終濃度為O. 3% — O. 5% ;36°C黑暗條件下處理I小時；4500 rpm離心去除誘變劑EMS，用得到的軟化培養(yǎng)液洗滌2次，在24空板中加入軟化的培養(yǎng)液，并在培養(yǎng)液中加入IO5個誘變后的細胞；觀察生長情況，反復(fù)進行，得到生長迅速的藻種；在生長良好的空板中篩選藻種，繼續(xù)在a步驟獲得的培養(yǎng)液馴化，重復(fù)進行3個月，獲得能夠適應(yīng)部分軟化后硬水的藻種；C、改變培養(yǎng)液的配方 采用間接軟化的步驟，利用偏磷酸或正磷酸代替磷酸鹽，以降低培養(yǎng)液中的Ca2+、Mg2+離子濃度，同時降低水體的PH值到8. O ;在大池培養(yǎng)采用濃度40克/噸的硝酸銨作為氮源，濃度3-5克/噸的偏磷酸或正磷酸作為磷源； d、改變接種策略，增大雨生紅球藻接種量，提高藻種與培養(yǎng)液的比例，按體積重量藻種與培養(yǎng)液的比例為1/4一 1/2，按照生長狀態(tài)，觀察藻液呈上浮狀態(tài)，并分批添加培養(yǎng)液。
2.根據(jù)權(quán)利要求
I所述的在硬水中養(yǎng)殖雨生紅球藻的方法，其特征是，a步驟中水體與懸掛物的重量比例為200 :1。
專利摘要
本發(fā)明公開了一種在硬水中養(yǎng)殖雨生紅球藻的方法，其特征是針對硬水進行軟化處理，誘變及馴化藻種的適應(yīng)性，并改變培養(yǎng)液的配方，實現(xiàn)規(guī)?；囵B(yǎng)，本發(fā)明適合于在硬水中大規(guī)模養(yǎng)殖雨生紅球藻，具有投資小、方便操作的特點，能夠充分利用養(yǎng)殖設(shè)施的基本功能，降低了生產(chǎn)成本，提高養(yǎng)殖的效率。
文檔編號C12R1/89GKCN102978120SQ201210560096
公開日2013年3月20日 申請日期2012年12月21日
發(fā)明者徐青山, 駱其君, 嚴小軍, 譚應(yīng)宏, 陳海敏 申請人:麗江程海保爾生物開發(fā)有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan