z, 2H), 7.30 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.28 (d, / = 7.6 Hz, 1H), 7.25 (t, / = 8.4 Hz, 2H), 7.18 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 7.14 (d, / = 8.4 Hz, 2H), 6.85 (d, / = 8.8 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.67 (s, 1H), 5.45 (t, / = 3.6Hz, 1H), 4.11 (s, 7H), 4.06 (s, 2H), 3.77 (m, 1H), 3.69 (m, 2H), 2.43 (m, 3H), 2.31 (t, / = 7.6Hz, 3H), 1.68 (t, /= 6.4Hz, 3H), 1.59 (m, 3H), 1.34 (m, 4H).13CNMR(100MHz,Acetone-^) 8174.95, 172.34, 158.54, 158.41, 148.58, 143.42, 142.24, 142.13, 141.90, 139.24, 137.59, 130.60, 130.30, 129.66, 129.12, 128.47, 124.73, 123.92, 122.79, 120.24, 116.41, 88.56, 85.22, 83.60, 69.44, 69.37, 68.40, 61.32, 37.74, 35.91, 34.21, 31.52, 31.30, 29.83, 26.26, 25.64;HRMS(ESI)calcdfor C44H4454FeN08S[M-H] , 800.21379;found800.2137. 實(shí)施例10:乂羥基-V_苯基辛二酰胺基團(tuán)或其類似結(jié)構(gòu)的的二茂鐵氧橋雙 環(huán)-[2. 2. 1]-庚烯類化合物的抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn) MCF-7、MDA-MB-231和VER0細(xì)胞在含10%胎牛血清的有酚紅DMEM液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 細(xì)胞密度至80%~90%時(shí)，消化細(xì)胞，并用含10%胎牛血清的無(wú)酚紅DMEM培養(yǎng)基將細(xì)胞懸浮 液鋪至96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中。待細(xì)胞完全貼壁后，棄去原培養(yǎng)液，每孔加入100y1新鮮的用 含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基配制的化合物溶液，化合物濃度梯度為：1X10 7M，1X10 6 M，1X105M，5X105M，1X104M。藥物處理培養(yǎng)3至5天后，取出培養(yǎng)板，每孔加入20 yl5mg/mLMTT工作液，置于37 °C、5%C02培養(yǎng)箱中孵育4小時(shí)。之后吸去每孔液體，然 后每孔加入100yL二甲亞砜（DMS0)，放在微量攪拌器上震蕩10~15分鐘使結(jié)晶物充分溶 解。在酶標(biāo)儀上讀板，選取490nm處波長(zhǎng)為主波長(zhǎng)，630nm處波長(zhǎng)為參照波長(zhǎng)，分析實(shí)驗(yàn)結(jié) 果，并計(jì)算出IC5。。
[0015] 這類新型，羥基-V_苯基辛二酰胺基團(tuán)或其類似結(jié)構(gòu)的二茂鐵氧橋雙 環(huán)-[2. 2. 1]-庚烯類化合物體外實(shí)驗(yàn)表明，對(duì)MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞均有較強(qiáng)的 抑制活性，尤其是對(duì)非荷爾蒙依賴型（MDA-MB-231)乳腺癌有較好的抑制作用；同時(shí)化合物 TC1-9對(duì)正常細(xì)胞Vero沒(méi)有毒性，但是他莫昔芬有毒性?；衔颰C1-9的抑制活性見(jiàn)表1。
[0016] 表1.本發(fā)明合成的代表性目標(biāo)化合物1-9的MCF-7、MDA-MB-231和VER0細(xì)胞細(xì) 胞抑制活性結(jié)果（IC5。，yM)
上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：合成的化合物都具有很好抗乳腺癌活性，尤其是側(cè)鏈為SAHA的 衍生物（化合物TC4-6)不僅對(duì)荷爾蒙依賴型（MCF-7)乳腺癌，而且對(duì)非荷爾蒙依賴型 (MDA-MB-231)乳腺癌均顯示出了較好的抗乳腺癌活性?；衔颰C1-9(IC5?！?34yM)對(duì) 非荷爾蒙依賴型（MDA-MB-231)乳腺癌的抑制活性明顯的強(qiáng)于藥物他莫昔芬（IC5。> 100 uM)〇
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種含有乂羥基-V-苯基辛二酰胺基或其類似結(jié)構(gòu)的二茂鐵氧橋雙 環(huán)-[2. 2. 1]-庚烯類化合物，結(jié)構(gòu)式如下： 其中，n為 5、6、7 ; X為〇12或(：0。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，其為 3- (4-羥基苯基）-4-庚二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(3-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-庚二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-庚二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵基芐基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-辛二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(3-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-辛二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-辛二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵基芐基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-壬二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(3-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-壬二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵羰基苯基）_酯或 3- (4-羥基苯基）-4-壬二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵基芐基）_酯。3. 權(quán)利要求1或2所述含有乂羥基-V-苯基辛二酰胺基或其類似結(jié)構(gòu)的二茂鐵氧 橋雙環(huán)-[2. 2. 1]-庚烯類化合物的制備方法，包括以下步驟： (1) 將對(duì)氨基苯乙酸溶于無(wú)水乙腈中，然后加入a-溴代對(duì)甲氧基苯乙酮和無(wú)水三乙 胺，室溫下攪拌12小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束之后蒸除乙腈和三乙胺得粗品，經(jīng)柱層析純化后得黃色 固體2-(4_甲氧基苯基）-2_羰基乙基-2-(4-氨基苯基）乙酸酯化合物;對(duì)氨基苯乙酸、 a_溴代對(duì)甲氧基苯乙酮和無(wú)水三乙胺的物質(zhì)的量比為1 :1 :1 ; (2) 將2-(4-甲氧基苯基）-2-羰基乙基-2-(4-氨基苯基）乙酸酯溶于無(wú)水二甲基亞 砜中，加入NaH，在25°C下攪拌2個(gè)小時(shí)后用水萃滅反應(yīng)，然后用乙酸乙酯萃取，水洗后， 用無(wú)水硫酸鈉干燥；旋干后用柱層析分離，得到化合物3-(4_氨基苯基）-4-(4_甲氧基苯 基）呋喃-2-酮化合物；2-(4-甲氧基苯基）-2-羰基乙基-2-(4-氨基苯基）乙酸酯與NaH的物質(zhì)的量比為1 :2 ; (3) 將3-(4_氨基苯基）-4-(4_甲氧基苯基）呋喃-2-酮溶于無(wú)水四氫呋喃中， 在-78°C下加入二異丁基氫化鋁，反應(yīng)12個(gè)小時(shí)；乙醚萃取，先后用水和飽和氯化鈉洗 滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干，柱層析分離，得白色固體3- (4-氨基苯基）-4- (4-甲氧基苯基） 呋喃化合物；3-(4-氨基苯基）-4-(4-甲氧基苯基）呋喃-2-與二異丁基氫化鋁的物質(zhì)的 量比為1 :4 ; (4) 將3_(4_氨基苯基）-4-(4_甲氧基苯基）咲喃（560mg, 2. 11mmol)溶于無(wú)水 二氯甲烷中，-20 °C下加入三溴化硼（1.570g，6. 34mmol)，反應(yīng)12h后，加入水萃滅反 應(yīng)，用飽和碳酸氫鈉洗滌，用乙酸乙酯萃取，無(wú)水硫酸鈉干燥，柱層析分離，得3- (4-氨基苯 基）-4- (4-羥基苯基）呋喃化合物，3- (4-氨基苯基）-4- (4-甲氧基苯基）呋喃與三溴化 硼的物質(zhì)的量比為1:3; (5) 將物質(zhì)的量比為1:1.5的3-(4-氨基苯基）-4-(4-羥基苯基）呋喃和庚（辛、壬） 二酸酐溶于四氫呋喃中，室溫反應(yīng)2h，過(guò)濾后蒸干有機(jī)相得到粗品，粗品用硅膠柱層析分 離，得3-(4-羥基苯基）-4-庚（辛、壬）二酸單酰苯胺基-呋喃化合物13a-c; (6) 將A1C13溶解于二氯甲烷中，冰浴下加入3-甲氧基苯甲酰氯或4-甲氧基苯甲酰氯， 攪拌反應(yīng)30min后加入二茂鐵，在0 °C下反應(yīng)12h后，加水淬滅反應(yīng)，用飽和碳酸氫鈉洗 滌，用二氯甲烷萃取，無(wú)水硫酸鈉干燥，柱層析分離，得深紅色的化合物16a或16b;AlCl3、 3-甲氧基苯甲酰氯或4-甲氧基苯甲酰氯與二茂鐵物質(zhì)的量比為4 :1. 2 :1 ; (7)將二茂鐵和對(duì)甲氧基苯甲醇溶解于二氯甲烷中，冰浴下加入三氟乙酸，在0 °C下反 應(yīng)2h，加入水淬滅反應(yīng)，用二氯甲烷萃取，無(wú)水硫酸鈉干燥，柱層析分離，得深紅色的化合物 16c，二茂鐵、對(duì)甲氧基苯甲醇和三氟乙酸物質(zhì)的量比為1 :1. 2 :4 ; (8) 在無(wú)水無(wú)氧和通氬氣下，將化合物16a、16b或16c溶解于二氯甲燒中，-20 °C下 加入BBr3，反應(yīng)24h后，加入水淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，無(wú)水似304干燥，減壓脫溶后得 到的粗產(chǎn)物用硅膠柱純化，得到化合物17a、17b或17c;化合物16a、16b或16c與BBr3物 質(zhì)的量比為1 :3 ; (9)在無(wú)水無(wú)氧和通氬氣下，將化合物17a、17b或17c溶解于二氯甲燒中，0° C下加入 氯乙磺酰氯和無(wú)水三乙胺反應(yīng)24 h后，減壓脫溶，用乙酸乙酯溶解，加入2NHC1洗滌，有 機(jī)層無(wú)水NaS04干燥，減壓脫溶后得到的粗產(chǎn)物用硅膠柱純化，得到化合物18a、18b或18c; 化合物17a、17b或17c、氯乙磺酰氯和無(wú)水三乙胺物質(zhì)的量比為8 :6 :5 ; (10)將3-(4-羥基苯基）-4-庚（辛、壬）二酸單酰苯胺基-呋喃化合物13a、13b或 13c和二茂鐵乙烯磺酸酯衍生物18a、18b或18c溶解在四氫呋喃中，在90 °C反應(yīng)3小時(shí)一 步制備得權(quán)利要求1結(jié)構(gòu)式所示的含有乂羥基-V-苯基辛二酰胺基或其類似結(jié)構(gòu)的二茂 鐵氧橋雙環(huán)-[2. 2. 1]-庚烯類化合物； 化合物 13a、13b、13c，化合物 16a、16b、16c，化合物 17a、17b、17c，化合物 18a、18b、18c結(jié)構(gòu)式如下： CN 105111244 A _權(quán)利要求書(shū)_ _3/3頁(yè)4. 權(quán)利要求1所述的乂羥基-A" _苯基辛二酰胺基或其類似結(jié)構(gòu)的二茂鐵氧橋雙 環(huán)-[2. 2. 1]-庚烯類化合物在制備抗乳腺癌藥物中的應(yīng)用。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述二茂鐵氧橋雙環(huán)-[2. 2. 1]-庚烯類化 合物為： 3- (4-羥基苯基）-4-庚二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(3-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-庚二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-庚二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵基芐基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-辛二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(3-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-辛二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-辛二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵基芐基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-壬二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(3-二 茂鐵羰基苯基）_酯、 3- (4-羥基苯基）-4-壬二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵羰基苯基）_酯或 3- (4-羥基苯基）-4-壬二酸單酰苯胺-7-氧橋雙環(huán)[2. 2. 1] -5-庚烯-2-磺酸-(4-二 茂鐵基芐基）_酯。6. -種抗乳腺癌藥物組合物，包含權(quán)利要求1所述的化合物和一種或多種藥學(xué)上可接 受的助劑。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種含有<i>N</i>-羥基-<i>N</i>’-苯基辛二酰胺基或其類似結(jié)構(gòu)的二茂鐵氧橋雙環(huán)-[2.2.1]-庚烯類化合物。以3-(4-羥基苯基)-4-辛二酸單酰苯胺基-呋喃或其類似物和二茂鐵乙烯磺酸酯衍生物為原料，無(wú)需溶劑和催化劑，在90？oC反應(yīng)3小時(shí)一步制備得到含有辛二酸單酰苯胺基團(tuán)的二茂鐵氧橋雙環(huán)-[2.2.1]-庚烯類化合物。體外實(shí)驗(yàn)表明，這類新型二茂鐵氧橋雙環(huán)-[2.2.1]-庚烯類化合物與現(xiàn)有抗乳腺癌藥物他莫昔芬比較，對(duì)荷爾蒙依賴型乳腺癌MCF-7細(xì)胞和非荷爾蒙依賴型乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞均具有更強(qiáng)的抑制活性，而且這些新型二茂鐵氧橋雙環(huán)-[2.2.1]-庚烯類化合物對(duì)正常細(xì)胞VERO細(xì)胞沒(méi)有毒性，而現(xiàn)有抗乳腺癌藥物他莫昔芬對(duì)正常細(xì)胞VERO細(xì)胞有毒性。
【IPC分類】A61K31/555, A61P35/00, C07F17/02
【公開(kāi)號(hào)】CN105111244
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510501650
【發(fā)明人】周海兵, 黃健, 唐初, 李長(zhǎng)浩
【申請(qǐng)人】銥諾(武漢)藥業(yè)有限公司
【公開(kāi)日】2015年12月2日
【申請(qǐng)日】2015年8月17日