(4-fluorophenyl)imidazo[l，2-c]thieno[2,3-e]pyrimidin-7(8H)-〇ne】25.8 克固體產(chǎn)物，產(chǎn)率90 %。
[0047] 1H NMR(DMS0d6)300MHz(ppm):8.35(lH，s)，7.81(lH，s)，7.81(2H，m)，7.43(2H，m); MS:m/z(M+l)286.08.
[0048] 合成路線如下：
[0049]
[0050] 實(shí)施例2:2，3，5-位取代的咪唑[I，2-c]-噻吩[2，3-e]嘧啶-7(8H)酮雜環(huán)化合物的 合成
[0051] (1)在一 100毫升單口圓底燒瓶中加入3-氨基-5-(4-氟苯基)噻吩-2-甲腈21.8克 (0.1摩爾）和N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛40克。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。TLC和 HPLC分析表明反應(yīng)完成。旋蒸、回收N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛。殘余物用冷的乙醚洗滌 (2x5毫升），然后真空干燥得純的淺黃色中間體(E)-N'-(2-甲腈-5-(4-氟苯基噻吩)-3-N， N-二甲基甲咪【（E)-N'-(2-cyan〇-5-(4-fluorophenyl)thiophen-3-yl)-N，N-dimethylformimidamide】24.1 克，產(chǎn)率88%。
[0052] (2)在一 50毫升單口圓底燒瓶中加入(E)-N'-(2-甲腈-5-(4-氟苯基噻吩)-3-N，N- 二甲基甲咪13.7克(0.05摩爾）和甘氨酸乙酯6.2克(0.06摩爾），然后加入N，N-二甲基甲酰 胺30毫升。反應(yīng)混合物被在140°C下攪拌加熱12小時(shí)。TLC和HPLC跟蹤反應(yīng)待反應(yīng)完成后旋 蒸除去大部分N，N-二甲基甲酰胺，殘余物從DMF、冰醋酸中重結(jié)晶提純得2-(4_氟苯基)-咪 口坐[1，2-(：]-噻吩[2,3-6]啼啶-7(8!1)酮【2-(4-;1^111〇1'〇卩1161171);[1111(1&20[1，2-(3]1:111611〇[2,3-e]pyrimidin-7(8H)-〇ne】12.1 克固體產(chǎn)物，產(chǎn)率 85%。
[0053] 實(shí)施例3:2，3，5-位取代的咪唑[I，2-c]-噻吩[2，3-e]嘧啶-7(8H)酮雜環(huán)化合物的 合成
[0054] (1)在一 500毫升單口圓底燒瓶中加入3-氨基-5-(4-氟苯基）噻吩-2-甲腈87.3克 (0.4摩爾)和N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛100克。然后加入乙腈200毫升，反應(yīng)混合物在70 °C攪拌過(guò)夜。TLC和HPLC分析表明反應(yīng)完成。旋蒸除去乙腈和N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮 醛。殘余物用石油醚洗滌，然后真空干燥得淺黃色中間體(E)-N'-(2-甲腈-5-(4-氟苯基噻 吩） _3_N，N-二甲基甲咪【（E)-N'-(2-cyan〇-5-(4-fluorophenyl)thiophen-3-yl)-N，N-dimethylformimidamide】98· 3克，產(chǎn)率90%。
[0055] (2)在一 250毫升單口圓底燒瓶中加入(E)-N'-(2-甲腈-5-(4-氟苯基噻吩)-3-N， N-二甲基甲咪41克(0.15摩爾）和甘氨酸乙酯26.8克(0.25摩爾），然后加入丙酸100毫升。反 應(yīng)混合物被在120°C下攪拌加24小時(shí)。TLC和HPLC跟蹤反應(yīng)待反應(yīng)完成后旋蒸除去丙酸，殘 余物從DMF、冰醋酸中經(jīng)兩次重結(jié)晶提純得2-(4-氟苯基)-咪唑[I，2-c ]-噻吩[2，3-e ]嘧啶-7(8H)酮【2-(4-fluorophenyl)imidazo[I，2_c]thieno[2，3-e]pyrimidin-7(8H)-〇ne】31·2 克固體產(chǎn)物，產(chǎn)率73 %。
[0056] 實(shí)施例4:2，3，5-位取代的咪唑[I，2-c]-噻吩[2，3-e]嘧啶-7(8H)酮雜環(huán)化合物的 合成
[0057] (1)在一25毫升單口圓底燒瓶中加入3-氨基-5-(4-氟苯基）噻吩-2-甲腈4.36克 (0.02摩爾）和N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛8克。然后加入四氫呋喃15毫升，反應(yīng)混合物在 室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。TLC和HPLC分析表明反應(yīng)完成。旋蒸除去四氫呋喃和N，N-二甲基甲酰胺二甲 基縮醛。殘余物用冷的乙醚洗滌，然后真空干燥得純的淺黃色中間體(E)-N'-(2-甲腈-5-(4-氣苯基噻吩）-3_N，N-二甲基甲咪【（E)-N'-(2-cyan〇-5-(4-fluorophenyl)thiophen-3-yl)-N，N-dimethylformimidamide】5· 10克，產(chǎn)率99%。
[0058] (2)在一 50毫升單口圓底燒瓶中加入(E)-N'-(2-甲腈-5-(4-氟苯基噻吩)-3-N，N- 二甲基甲咪5.10克(0.0186摩爾)和甘氨酸乙酯3.09克(0.03摩爾），然后加入冰醋酸15毫升 和丁醇10毫升。反應(yīng)混合物在ll〇°C下攪拌加熱12小時(shí)。TLC和HPLC跟蹤反應(yīng)待反應(yīng)完成后 旋蒸除去冰醋酸，殘余物經(jīng)硅膠柱層析(溶劑：甲醇/二氯甲烷= 5/95,得2-(4_氟苯基)-咪 口坐[1，2-(：]-噻吩[2,3-6]啼啶-7(8!1)酮【2-(4-;1^111〇1'〇卩1161171);[1111(1&20[1，2-(3]1:111611〇[2,3-e]pyrimidin-7(8H)-〇ne】2.6克固體產(chǎn)物，產(chǎn)率 49%。
[0059]實(shí)施例5:化合物的生物活性測(cè)定
[0060] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期生長(zhǎng)狀態(tài)良好的SW1990細(xì)胞以2X 103/0.1 mL/孔的密度接種于96孔 培養(yǎng)板，每組設(shè)5個(gè)平行孔，在37°C，5 % CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在含10 %小牛血清的培養(yǎng)液中培 養(yǎng)24h后，試驗(yàn)組換為含有實(shí)施例1的化合物[濃度分別為0.2ug/mL，0.6ug/mL，1.0 ug/mL]的 培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，空白對(duì)照組加等量培養(yǎng)基。培養(yǎng)24h后，加 MTT 20uL( 5mg/mL)再培養(yǎng)3h， 棄上清，加入IOOuL二甲亞砜(DMSO)，振蕩15分鐘，待其沉淀物完全溶解后，于酶聯(lián)檢測(cè)分析 儀上570nm波長(zhǎng)，空白調(diào)零，測(cè)定各孔OD值，上述每組重復(fù)3次。
[0061 ] 抑制率=(對(duì)照組OD-實(shí)驗(yàn)組OD)/對(duì)照組OD X 100%
[0063]上述雖然結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行了描述，但并非對(duì)本發(fā)明保護(hù) 范圍的限制，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明白，在本發(fā)明的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本領(lǐng)域技術(shù)人員 不需要付出創(chuàng)造性勞動(dòng)即可做出的各種修改或變形仍在本發(fā)明的保護(hù)范圍以內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種2，3，5-位取代的咪挫[1，2-c]-嚷吩[2，3-e ]喀晚-7 (8H)酬雜環(huán)化合物，其結(jié)構(gòu) 如式(I)所示：式中，Ri為-H，-F，-C1，-Br、-OMe或取代苯基； 化為-H，-F，-C1，-Br 或-OMe; 化為-Η或C廣C6的烷基。2. 如權(quán)利要求1所述的2，3，5-位取代的咪挫[1，2-C ]-嚷吩[2，3-e ]喀晚-7 (8Η)酬雜環(huán) 化合物，其特征在于，所述取代苯基為面素取代的苯基。3. -種權(quán)利要求1或2所述化合物的合成方法，其特征在于，所述化合物的制備方法包 括使式(II)所示的化合物與式(III)所示的化合物反應(yīng)得到式(I)所示的化合物；其中，Ri、R2和R3如在權(quán)利要求1中所定義;R4為C1-C4烷基。4. 如權(quán)利要求3所述的合成方法，其特征在于，式（II)所示的化合物的制備方法為：由 式A所示的化合物與式B所示的化合物反應(yīng)得到；化和R3如在權(quán)利要求1中所定義。5. 如權(quán)利要求3所述的合成方法，其特征在于，式（II)所示的化合物與式（III)所示的 化合物反應(yīng)的條件為:將式（II)所示的化合物、式（III)所示的化合物和溶劑B按摩爾比1: (1-20) :(1-70)混合，在0-180°C反應(yīng)1-4她，純化，即得式（I)所示的化合物;優(yōu)選的，所述式 (II)所示的化合物、式(III)所示的化合物和溶劑B按摩爾比1:(1-20) :(1-50)混合，在100- 180°C反應(yīng)6-2地。6. 如權(quán)利要求5所述的合成方法，其特征在于，所述溶劑B為二氯甲燒、氯仿、四氨巧喃、 乙酸乙醋、乙臘、甲醇、乙醇、丙醇、叔下醇、乙酸、Ξ氣醋酸、正丙酸、異丙酸或下酸中的任一 種或多種的混合。7. 如權(quán)利要求4所述的合成方法，其特征在于，式A所示的化合物與式B所示的化合物反 應(yīng)的條件為:將化合物A、化合物B和溶劑A按摩爾比為1:(1-80) :(0-180)混合，在0-180°C反 應(yīng)1-4她，純化，即得式（II)所示的化合物;優(yōu)選的，化合物A、化合物B和溶劑A按摩爾比為1: (1-50) :(1-100)混合，在 15-80°C反應(yīng) 1-4她。8. 如權(quán)利要求7所述的合成方法，其特征在于，所述溶劑A為二氯甲燒、1,2-二氯甲燒、 氯仿、四氨巧喃、乙酸乙醋、乙臘、甲苯、二甲苯或乙酸中的任一種或多種的混合。9. 如權(quán)利要求4所述的合成方法，其特征在于，化為-邸寸，式(II)所示的化合物的合成方 法為：由式A所示的化合物、DMF和苯橫酷氯按摩爾比1:(1-25) :(1-3)混合反應(yīng)，分離純化， 即得。10. 權(quán)利要求1或2所述的2，3，5-位取代的咪挫[1，2-C ]-嚷吩[2，3-e ]喀晚-7 (8H)酬雜 環(huán)化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種2,3,5-位取代的咪唑[1,2-c]-噻吩[2,3-e]嘧啶-7(8H)酮雜環(huán)化合物，其結(jié)構(gòu)如式(I)所示：本發(fā)明還公開(kāi)了該化合物的制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的2,3,5-位取代的咪唑[1,2-c]-噻吩[2,3-e]嘧啶-7(8H)酮雜環(huán)化合物采用兩步合成法，采用一鍋反應(yīng)形成兩個(gè)雜環(huán)，反應(yīng)原料易得，操作方便，反應(yīng)條件溫和，反應(yīng)時(shí)間適中，易于控制，后處理簡(jiǎn)單，產(chǎn)品純度和收率高，具有操作步驟少、產(chǎn)率高、不含磷等試劑,毒性低,以及操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。
【IPC分類】C07D495/14, A61P35/00, A61K31/519
【公開(kāi)號(hào)】CN105541865
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610064864
【發(fā)明人】韓迎, 高肇林, 鄭輝, 史永強(qiáng), 張興柱, 魏正風(fēng)
【申請(qǐng)人】山東益康藥業(yè)股份有限公司
【公開(kāi)日】2016年5月4日
【申請(qǐng)日】2016年1月29日