金霉素預(yù)混劑提取工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了金霉素預(yù)混劑提取工藝,包括種子培養(yǎng)、發(fā)酵培養(yǎng)及產(chǎn)品提煉三個步驟,產(chǎn)品提煉的步驟包括：取金霉素放罐發(fā)酵液，加入氧化鈣；使發(fā)酵處理液的pH值為7.8～9.5，常溫下絡(luò)合攪拌30min、轉(zhuǎn)速60??80r/min，得鈣化絡(luò)合液；經(jīng)板框過濾、沸騰烘干得到金霉素預(yù)混劑成品。本發(fā)明提取工藝可提高金霉素預(yù)混劑產(chǎn)品質(zhì)量、含量和收率，降低生產(chǎn)成本。
【專利說明】
金霉素預(yù)混劑提取工藝
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及抗生素制備工藝，特別是一種高含量金霉素預(yù)混劑的提取工藝。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前金霉素產(chǎn)品主要有金霉素預(yù)混劑和鹽酸金霉素兩種類型，鹽酸金霉素因其提 取工藝較復(fù)雜，且需要有較大的廠房和較高的設(shè)備投入而受到很大限制。而金霉素預(yù)混劑 的提取工藝方面也存在很大的不確定性，運(yùn)樣也導(dǎo)致產(chǎn)品批之間的含量(生物效價(jià))和收率 方面存在較大差異。尤其是客戶對高生物活性成分含量金霉素預(yù)混劑產(chǎn)品的需求。
[0003] 發(fā)明專利(CN 102899377 A)公開了一種金霉素預(yù)混劑的制備方法，提取時(shí)在發(fā)酵 液中加入相當(dāng)于發(fā)酵液體積0-12%的碳酸巧，攬拌20-40分鐘，板框過濾，壓濾完畢后，將板 框?yàn)V餅進(jìn)行旋轉(zhuǎn)閃蒸干燥，干燥物料經(jīng)振動篩分，得到金霉素預(yù)混劑。金霉素預(yù)混劑主要活 性成分為金霉素巧鹽。金霉素巧鹽主要是金霉素與巧離子結(jié)合而成的難溶于水的沉淀。若 只按發(fā)酵液體積來加入碳酸巧，由于沒有考慮到具體發(fā)酵液的單位的高低差異，使得制備 出的預(yù)混劑生物活性成份含量差異大。另由于碳酸巧難溶于水，且加入碳酸巧后的混合液 呈弱酸性或中性，不能更好地與溶解在發(fā)酵液中的金霉素結(jié)合成鹽而沉淀，使得濾液中殘 留金霉素效價(jià)偏高，造成提取收低，增加了污水處理成本。且采用加入碳酸巧得到的預(yù)混劑 生物活性成份含量較低，不能滿足客戶對高生物活性成份含量產(chǎn)品的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種金霉素預(yù)混劑提取工藝，特別是一種高含量金霉素預(yù) 混劑的提取工藝。W提高金霉素預(yù)混劑產(chǎn)品質(zhì)量、生物活性成分含量和收率，降低生產(chǎn)成 本。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案： 金霉素預(yù)混劑提取工藝，包括種子培養(yǎng)、發(fā)酵培養(yǎng)及產(chǎn)品提煉Ξ個步驟:將金色鏈霉菌 接種入種子罐進(jìn)行培養(yǎng)，將培養(yǎng)好的種子培養(yǎng)液接入發(fā)酵罐，根據(jù)發(fā)酵液的總糖濃度控制 指標(biāo)進(jìn)行補(bǔ)入糖水及生長因子的發(fā)酵培養(yǎng)，產(chǎn)品提煉的步驟如下： 51. 取金霉素放罐發(fā)酵液，加入氧化巧，氧化巧的加入量Me。。按下列公式計(jì)算： Mcao化g)=U(u/ml) X V(m3)今 1000 X C 其中Mca。為氧化巧的加入質(zhì)量，U為發(fā)酵液化學(xué)效價(jià)，V為發(fā)酵液體積，C為加氧化巧系 數(shù) C=0.11±0.01; 52. 加入氧化巧后使發(fā)酵處理液的pH值為7.8~9.5,常溫下絡(luò)合攬拌30min、轉(zhuǎn)速 60-80r/min，得巧化絡(luò)合液； 53. 將巧化絡(luò)合液進(jìn)行板框過濾，控制壓力為0.5~0.75Mpa;過濾后得到濾餅進(jìn)行破碎 或制粒； 54. 步驟S3得到的顆粒進(jìn)行沸騰烘干得到金霉素預(yù)混劑成品。
[0006] 進(jìn)一步地，所述的種子罐培養(yǎng)基中各原料的質(zhì)量配比如下:淀粉20%~35%，玉米漿 ο. 9%~3.8%，輕質(zhì)碳酸巧ο. 4%~ο. 9%，促進(jìn)劑Μ ο. ο 1%~ο. 05%，硫酸錠ο. 2%~ο. 5%，淀粉酶 0.03%~0.15%;氯化巧0.2%~0.5%，余量水。
[0007] 進(jìn)一步地，發(fā)酵培養(yǎng)過程中發(fā)酵罐溫度26~33°C、通氣量1:0.45~0.8巾八/111111、罐 壓0.02~0.05 MPa、攬拌速度100~145 r/min，總糖濃度控制指標(biāo)為:發(fā)酵培養(yǎng)0~9小時(shí)控 制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度不低于4.5%、發(fā)酵培養(yǎng)10~40小時(shí)控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃 度4.0~3.0%、發(fā)酵培養(yǎng)40~90小時(shí)控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度3.0~2.5%、發(fā)酵培養(yǎng)90 ~100小時(shí)控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度2.5~2.0%、發(fā)酵培養(yǎng)100小時(shí)后控制發(fā)酵液總糖 質(zhì)量百分濃度不低于1.3%。
[000引優(yōu)選地，發(fā)酵放罐效價(jià)使金霉素不低于18000 u/ml，濾速不少于8ml/5min。
[0009] 優(yōu)選地，步驟S4中，沸騰烘干時(shí)控制進(jìn)口溫度為150~160°C、出口溫度為50~70 Γ。
[0010] 采用上述技術(shù)方案后，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)： 1、本發(fā)明生產(chǎn)工藝簡單，可實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作和控制。采用氧化巧為絡(luò)合劑來制備金霉 素預(yù)混劑，且采用公式來計(jì)算加入氧化巧的量，有利于標(biāo)準(zhǔn)化操作和控制。本發(fā)明得到的成 品含量高達(dá)25%W上。
[0011] 2、氧化巧加入到發(fā)酵液中，使發(fā)酵處理液的pH值為7.8~9.5。氧化巧與水反應(yīng)生 成氨氧化巧，氨氧化巧在水中可W電離出巧離子和氨氧根離子.氨氧根離子使混合液中的 抑呈堿性，在堿性條件下巧離子與金霉素作用生成難溶性的鹽。形成馨合物，最主要的馨合 位置是β-11,12-二酬系統(tǒng)。β-二酬是酸性基團(tuán)，故沉淀應(yīng)在堿性中進(jìn)行較完全。 3、氨氧化巧在水中可電離成巧離子。巧離子與發(fā)酵液中的游離的金霉素絡(luò)合成金霉素 巧鹽。氧化巧既可作發(fā)酵液巧絡(luò)合時(shí)的抑調(diào)節(jié)劑，又可作金霉素巧鹽的絡(luò)合劑，使金霉素巧 鹽巧化絡(luò)合時(shí)在適合的抑下絡(luò)合較完全，提高了產(chǎn)品生物效價(jià)(生物活性成分）、產(chǎn)品質(zhì)量， 同時(shí)降低了濾液中的金霉素含量，降低污水處理成本，提高了收率。
【附圖說明】
[0012] 圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，W下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對 本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。
[0014] 如圖1所示，本發(fā)明公開了一種金霉素預(yù)混劑提取工藝，包括種子培養(yǎng)、發(fā)酵培養(yǎng) 及產(chǎn)品提煉Ξ個步驟： (1)種子培養(yǎng):將金色鏈霉菌接種入種子罐進(jìn)行培養(yǎng)，種子罐培養(yǎng)基中各原料的質(zhì)量配 比如下：淀粉20%~35%，玉米漿0.9%~3.8%，輕質(zhì)碳酸巧0.4%~0.9%，促進(jìn)劑Μ 0.01%~ 0.05%，硫酸錠0.2%~0.5%，淀粉酶0.03%~0.15%;氯化巧0.2%~0.5%，余量水。將金色鏈霉 菌接種入種子罐進(jìn)行培養(yǎng)。
[0015] (2)發(fā)酵培養(yǎng):將培養(yǎng)好的種子培養(yǎng)液接入發(fā)酵罐，根據(jù)發(fā)酵液的總糖濃度控制指 標(biāo)進(jìn)行補(bǔ)入糖水及生長因子的發(fā)酵培養(yǎng)，該混合糖水培養(yǎng)基包括碳源、氮源、無機(jī)鹽和玉米 漿，通過限定培養(yǎng)基中碳源、氮源的濃度來實(shí)現(xiàn)。并根據(jù)發(fā)酵液的總糖濃度控制指標(biāo)添加補(bǔ) 糖水及生長因子、到金霉素發(fā)酵罐的培養(yǎng)基中。
[0016] 發(fā)酵罐工況為：發(fā)酵罐溫度26~33 °C、通氣量1:0.45~0.8v/v/min、罐壓0.02~ 0.05 MPa、攬拌速度100~145巧m/min，總糖濃度控制指標(biāo)為:發(fā)酵培養(yǎng)0~9小時(shí)控制發(fā)酵 液總糖質(zhì)量百分濃度不低于4.5%、發(fā)酵培養(yǎng)10~40小時(shí)控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度4.0 ~3.0%、發(fā)酵培養(yǎng)40~90小時(shí)控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度3.0~2.5%、發(fā)酵培養(yǎng)90~100 小時(shí)控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度2.5~2.0%、發(fā)酵培養(yǎng)100小時(shí)后控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百 分濃度不低于1.3%。為了減少溶氧需求，同時(shí)利于金霉素合成，發(fā)酵時(shí)間為90-124h，放罐效 價(jià)使金霉素不低于18000 u/ml，濾速不少于8ml/5min。
[0017] (3)產(chǎn)品提煉，步驟如下： 51. 取金霉素放罐發(fā)酵液，加入氧化巧，氧化巧的加入量Mea。按下列公式計(jì)算： Mcao化g)=U(u/ml) X V(m3)今 1000 X C 其中Mca。為氧化巧的加入質(zhì)量，U為發(fā)酵液化學(xué)效價(jià)，V為發(fā)酵液體積，C為加氧化巧系 數(shù)C=0.11 ± 0.01;表1是幾個批次的發(fā)酵液用公式計(jì)算加入氧化巧進(jìn)行提取的結(jié)果表：
52. 加入氧化巧后使發(fā)酵處理液的pH值為7.8~9.5，常溫下絡(luò)合攬拌30min、轉(zhuǎn)速60- 8化/min，得巧化絡(luò)合液； 53. 將巧化絡(luò)合液進(jìn)行板框過濾，控制壓力為0.5~0.75Mpa;過濾后得到濾餅進(jìn)行破碎 或制粒； 54. 步驟S3得到的顆粒進(jìn)行沸騰烘干得到金霉素預(yù)混劑成品。沸騰烘干時(shí)控制進(jìn)口溫 度為150~160°C、出口溫度為50~70°C。
[0018]
【申請人】在提取金霉素預(yù)混劑時(shí)發(fā)現(xiàn)在產(chǎn)品提煉過程中，加入氧化巧與傳統(tǒng)制法中 加入碳酸巧的工藝相比較，提高了金霉素預(yù)混劑產(chǎn)品質(zhì)量、生物效價(jià)(生物活性成份)和收 率，降低了濾液中金霉素的殘留，有利于降低污水處理成本。
[0019] W下結(jié)合對比實(shí)施說明。
[0020] 實(shí)施例一、取金霉素放罐發(fā)酵液90m3,等體積分成2份。
[0021] -組:取其中一份金霉素放罐發(fā)酵液45m3,用計(jì)算公式計(jì)算出加入氧化巧的量，常 溫條件下加入氧化巧，得發(fā)酵處理液pH為7.8,攬拌30min，轉(zhuǎn)速60~80 r/min，得巧化絡(luò)合 液;將巧化絡(luò)合液進(jìn)行板框過濾，控制壓力為0.5~0.75Mpa;過濾后得到濾餅進(jìn)行破碎;經(jīng) 破碎的顆粒進(jìn)行沸騰烘干，控制進(jìn)口溫度為150~160°C、出口溫度為50~70°C，得到金霉素 預(yù)混劑成品。
[0022] -組對照組:取另一份金霉素放罐發(fā)酵液45m3,常溫下直接加入相當(dāng)于發(fā)酵液體 積5%的碳酸巧，攬拌30min，轉(zhuǎn)速60~80 r/min，得巧化絡(luò)合液。料液進(jìn)行板框過濾，控制壓 力為0.5~0.75Mpa;過濾后得到濾餅進(jìn)行破碎;經(jīng)破碎的顆粒進(jìn)行沸騰烘干，控制進(jìn)口溫度 為150~160°C、出口溫度為50~70°C，得到金霉素預(yù)混劑成品。
[0023] 實(shí)施例二、取金霉素放罐發(fā)酵液89m3,等體積分成2份。
[0024] 二組:取其中一份金霉素放罐發(fā)酵液44.5m3，用計(jì)算公式計(jì)算出加入氧化巧的量， 常溫條件下加入氧化巧，得發(fā)酵處理液抑為8.5，其它提取工藝與一組相同。
[0025] 二組對照組：取另一份金霉素放罐發(fā)酵液44.5m3，常溫下直接加入相當(dāng)于發(fā)酵液 體積5%的碳酸巧，其它提取工藝與一組對照組相同。
[0026] 實(shí)施例Ξ、取金霉素放罐發(fā)酵液91m3,等體積分成2份。
[0027] Ξ組:取其中一份金霉素放罐發(fā)酵液45.5m3，用計(jì)算公式計(jì)算出加入氧化巧的量， 常溫條件下加入氧化巧，得發(fā)酵處理液抑為9.0，其它提取工藝與一組相同。
[00%] Ξ組對照組:取另一份金霉素放罐發(fā)酵液45.5m3，常溫下直接加入相當(dāng)于發(fā)酵液 體積6%的碳酸巧，其它提取工藝與一組對照組相同。
[0029] Ξ個實(shí)施例得到的檢測結(jié)果如表2所示。
[0030] 從W上實(shí)施對比可W看出，本發(fā)明改進(jìn)了生產(chǎn)工藝，氧化巧可做為pH調(diào)節(jié)劑使得 發(fā)酵處理液成堿性，同時(shí)電離出的巧離子又能在堿性下與金霉素作用生成難溶性的鹽而沉 淀，使巧化絡(luò)合后的處理液板框過濾使產(chǎn)品收率提高2.4%，同時(shí)濾液中的金霉素含量降低 32%左右，提高了產(chǎn)品質(zhì)量和生物活性成分含量(生物效價(jià)可達(dá)29%W上）。本發(fā)明生產(chǎn)工藝 簡單，可實(shí)現(xiàn)操作標(biāo)準(zhǔn)化和控制、提高了產(chǎn)品質(zhì)量和活性成分含量、還有利于降低污水處理 成本，實(shí)現(xiàn)環(huán)境保護(hù)。滿足客戶對高生物活性成分含量金霉素預(yù)混劑的需求，也為企業(yè)帶來 減少產(chǎn)品加工量及減少產(chǎn)品外運(yùn)運(yùn)輸費(fèi)用的收益，可降低客戶轉(zhuǎn)移和儲存產(chǎn)品的費(fèi)用，W 達(dá)到雙贏。
[0031] W上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實(shí)施方式】，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此， 任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明掲露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換， 都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 金霉素預(yù)混劑提取工藝，包括種子培養(yǎng)、發(fā)酵培養(yǎng)及產(chǎn)品提煉三個步驟:將金色鏈霉 菌接種入種子罐進(jìn)行培養(yǎng)，將培養(yǎng)好的種子培養(yǎng)液接入發(fā)酵罐，根據(jù)發(fā)酵液的總糖濃度控 制指標(biāo)進(jìn)行補(bǔ)入糖水及生長因子的發(fā)酵培養(yǎng)，其特征在于，產(chǎn)品提煉的步驟如下：51. 取金霉素放罐發(fā)酵液，加入氧化鈣，氧化鈣的加入量Mea。按下列公式計(jì)算： Mca〇(kg)=U(u/ml) XV(m3)^1000XC 其中MCa。為氧化鈣的加入質(zhì)量，U為發(fā)酵液化學(xué)效價(jià)，V為發(fā)酵液體積，C為加氧化鈣系 數(shù) C=0.11±0.01;52. 加入氧化鈣后使發(fā)酵處理液的pH值為7.8~9.5，常溫下絡(luò)合攪拌30min、轉(zhuǎn)速60- 80r/min，得鈣化絡(luò)合液；53. 將鈣化絡(luò)合液進(jìn)行板框過濾，控制壓力為0.5~0.75Mpa;過濾后得到濾餅進(jìn)行破碎 或制粒；54. 步驟S3得到的顆粒進(jìn)行沸騰烘干得到金霉素預(yù)混劑成品。2. 如權(quán)利要求1所述的金霉素預(yù)混劑提取工藝，其特征在于，所述的種子罐培養(yǎng)基中各 原料的質(zhì)量配比如下：淀粉20%~35%，玉米漿0.9%~3.8%，輕質(zhì)碳酸鈣0.4%~0.9%，促進(jìn)劑Μ 0 · 01%~0 · 05%，硫酸銨0 · 2%~0 · 5%，淀粉酶0 · 03%~0 · 15%;氯化鈣0 · 2%~0 · 5%，余量水。3. 如權(quán)利要求2所述的金霉素預(yù)混劑提取工藝，其特征在于，所述的種子培養(yǎng)的溫度為 26~33°C，時(shí)間為20~28小時(shí)。4. 如權(quán)利要求1或2或3所述的金霉素預(yù)混劑提取工藝，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)過程中發(fā) 酵罐溫度26~33°C、通氣量1:0 · 45~0 · 8v/v/min、罐壓0 · 02~0 · 05 MPa、攪拌速度100~145 r/min，總糖濃度控制指標(biāo)為：發(fā)酵培養(yǎng)0~9小時(shí)控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度不低于 4.5%、發(fā)酵培養(yǎng)10~40小時(shí)控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度4.0~3.0%、發(fā)酵培養(yǎng)40~90小時(shí) 控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度3.0~2.5%、發(fā)酵培養(yǎng)90~100小時(shí)控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分 濃度2.5~2.0%、發(fā)酵培養(yǎng)100小時(shí)后控制發(fā)酵液總糖質(zhì)量百分濃度不低于1.3%。5. 如權(quán)利要求4所述的金霉素預(yù)混劑提取工藝，其特征在于，發(fā)酵放罐金霉素效價(jià)不低 于 18000 u/ml，濾速不少于8ml/5min。6. 如權(quán)利要求1所述的金霉素預(yù)混劑提取工藝，其特征在于，步驟S4中，沸騰烘干時(shí)控 制進(jìn)口溫度為150~160 °C、出口溫度為50~70 °C。
【文檔編號】C12R1/49GK106011212SQ201610385325
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年6月3日
【發(fā)明人】吳新芝, 馮獻(xiàn), 毛紅衛(wèi), 徐文雪, 許意鋒, 章輝
【申請人】浦城正大生化有限公司