一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本實用新型涉及檢測試劑盒技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種用于制備多基因捕獲探針的 試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)有技術(shù)中，檢測使用的一種Capture基因分型的基因捕獲檢測試劑盒，一般結(jié) 構(gòu)包括盒體、盒體上部設(shè)有盒蓋，盒體的腔體內(nèi)設(shè)有固定座和試劑瓶槽，在固定座上設(shè)有 I. 5ml EP管容器孔和0. 5ml EP管容器孔，所述I. 5ml EP管容器孔內(nèi)設(shè)有I. 5ml EP管，所 述0.5ml EP管容器孔內(nèi)設(shè)有0.5ml EP管，所述試劑瓶槽內(nèi)設(shè)有裝洗液的試劑瓶。 【實用新型內(nèi)容】
[0003] 本實用新型的目的：提供一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，設(shè)計更合理化， 克服了現(xiàn)有試劑盒底部易與容器孔的底部發(fā)生碰撞而破損，且盒蓋和盒體之間經(jīng)常有密封 不嚴(yán)，在運輸和移動過程中無法保持穩(wěn)定性的問題。
[0004] 為了實現(xiàn)上述目的，本實用新型的技術(shù)方案是：
[0005] 一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，包括試劑盒本體、盒蓋、固定架、旋轉(zhuǎn)軸 套、轉(zhuǎn)動軸、手持部、海綿墊、多支EP管、多個試劑瓶及密封條；所述的旋轉(zhuǎn)軸套水平設(shè)置在 所述的試劑盒本體的后端頂部，且所述的旋轉(zhuǎn)軸套的一側(cè)端開口，所述的轉(zhuǎn)動軸的一端通 過所述的旋轉(zhuǎn)軸套的開口端同軸插入在所述的旋轉(zhuǎn)軸套內(nèi)，所述的轉(zhuǎn)動軸的另一端位于所 述的旋轉(zhuǎn)軸套的外側(cè)一端，并與所述的手持部同軸連接；所述的旋轉(zhuǎn)軸套上設(shè)有多個旋轉(zhuǎn) 通孔，所述的旋轉(zhuǎn)通孔為四分之一圓弧結(jié)構(gòu)，所述的轉(zhuǎn)動軸上設(shè)有多個轉(zhuǎn)動齒，所述的多個 轉(zhuǎn)動齒與所述的多個旋轉(zhuǎn)通孔一一對應(yīng)；所述的多個轉(zhuǎn)動齒分別與所述的盒蓋的一側(cè)端連 接，所述的盒蓋罩蓋在所述的試劑盒本體上，并繞所述的轉(zhuǎn)動軸轉(zhuǎn)動，所述的密封條設(shè)置在 所述的盒蓋內(nèi)，所述的盒蓋通過所述的密封條與所述的試劑盒本體密封連接；所述的固定 架設(shè)置在所述的試劑盒本體內(nèi)，所述的固定架與所述的試劑盒本體為一體結(jié)構(gòu)，所述的海 綿墊設(shè)置在所述的固定架內(nèi)，所述的海綿墊上設(shè)有多個EP管插孔及洗液瓶插孔，所述的多 支EP管及多個試劑瓶分別對應(yīng)插入在所述的海綿墊上的多個EP管插孔及洗液瓶插孔內(nèi)； 所述的多支EP管的容量為I. 5ml及0. 5ml，所述的多支EP管內(nèi)灌裝有雜交液、探針及阻遏 劑等；所述的多個試劑瓶的容量為l〇〇ml。
[0006] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的盒蓋的上端面上設(shè)有標(biāo) 記區(qū)，所述的標(biāo)記區(qū)向下凹陷設(shè)置。
[0007] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的試劑盒本體的外側(cè)壁上 設(shè)有防滑紋，所述的防滑紋為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
[0008] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的多支1.5ml的EP管內(nèi)分 別裝有雜交液、阻遏劑I及阻遏劑II。
[0009] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的多支0. 5ml的EP管內(nèi)分 別裝有帶生物素標(biāo)記的捕獲探針以及分子級別的水。
[0010] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的試劑瓶內(nèi)裝有洗液I及 洗液II。
[0011] 本實用新型結(jié)構(gòu)簡單、設(shè)計合理、使用方便、制造容易、檢測過程不易受污染，試劑 盒在多基因捕獲時具有敏感性高、特異性強、耗時短等優(yōu)點，插孔的設(shè)計使得容器底部磕碰 破損，保證試劑盒密封安全，方便運輸。
【附圖說明】
[0012] 圖1是本實用新型一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0013] 圖2是本實用新型一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒的盒蓋的俯視圖。
【具體實施方式】
[0014] 以下結(jié)合附圖進(jìn)一步說明本實用新型的實施例。
[0015] 請參見附圖1所示，一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，包括試劑盒本體1、 盒蓋2、固定架3、旋轉(zhuǎn)軸套4、轉(zhuǎn)動軸5、手持部6、海綿墊7、多支EP管8、多個試劑瓶9及密 封條10 ;所述的旋轉(zhuǎn)軸套4水平設(shè)置在所述的試劑盒本體1的后端頂部，且所述的旋轉(zhuǎn)軸 套4的一側(cè)端開口，所述的轉(zhuǎn)動軸5的一端通過所述的旋轉(zhuǎn)軸套4的開口端同軸插入在所 述的旋轉(zhuǎn)軸套4內(nèi)，所述的轉(zhuǎn)動軸6的另一端位于所述的旋轉(zhuǎn)軸套4的外側(cè)一端，并與所述 的手持部6同軸連接；所述的旋轉(zhuǎn)軸套4上設(shè)有多個旋轉(zhuǎn)通孔11，所述的旋轉(zhuǎn)通孔11為四 分之一圓弧結(jié)構(gòu)，所述的轉(zhuǎn)動軸5上設(shè)有多個轉(zhuǎn)動齒12,所述的多個轉(zhuǎn)動齒12與所述的多 個旋轉(zhuǎn)通孔11 一一對應(yīng)；所述的多個轉(zhuǎn)動齒12分別與所述的盒蓋2的一側(cè)端連接，所述的 盒蓋2罩蓋在所述的試劑盒本體1上，并繞所述的轉(zhuǎn)動軸5轉(zhuǎn)動，所述的密封條10設(shè)置在 所述的盒蓋2內(nèi)，所述的盒蓋2通過所述的密封條10與所述的試劑盒本體1密封連接；所 述的固定架3設(shè)置在所述的試劑盒本體1內(nèi)，所述的固定架3與所述的試劑盒本體1為一 體結(jié)構(gòu)，所述的海綿墊7設(shè)置在所述的固定架3內(nèi)，所述的海綿墊7上設(shè)有多個EP管插孔 及洗液瓶插孔，所述的多支EP管8及多個試劑瓶9分別對應(yīng)插入在所述的海綿墊7上的多 個EP管插孔及洗液瓶插孔內(nèi)；所述的多支EP管8的容量為I. 5ml及0. 5ml，所述的多支EP 管8內(nèi)灌裝有雜交液、探針及阻遏劑等；所述的多個試劑瓶9的容量為100ml。
[0016] 請參見附圖2所示，所述的盒蓋2的上端面上設(shè)有標(biāo)記區(qū)13,所述的標(biāo)記區(qū)13向 下凹陷設(shè)置，可將標(biāo)簽貼在標(biāo)記區(qū)13內(nèi)，以便區(qū)分不同類型的試劑盒及不同病人使用的試 劑盒。
[0017] 所述的試劑盒本體1的外側(cè)壁上設(shè)有防滑紋14,所述的防滑紋14為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，便 于攜帶，避免打滑摔落。
[0018] 所述的多支I. 5ml的EP管8內(nèi)分別裝有雜交液、阻遏劑I及阻遏劑II。
[0019] 所述的多支0. 5ml的EP管8內(nèi)分別裝有帶生物素標(biāo)記的捕獲探針以及稀釋用的 分子級別的水。
[0020] 所述的試劑瓶9內(nèi)裝有洗液I及洗液II。
[0021] 盒蓋2可通過旋轉(zhuǎn)手持部6打開，盒蓋2通過密封條10與試劑盒本體1之間保持 密封連接；海綿墊7可對多支EP管8、多個試劑瓶9內(nèi)的EP管和試劑瓶起到保護(hù)作用。
[0022] 本實用新型的操作方法：
[0023] 多基因 DNA捕獲：
[0024] I.制備如下混合液：
[0025] 3. 5ul 500ng DNA 庫（用 Illumina 方法制備好的庫）
[0026] I. 5ul 200uM 的 Adaptor Block
[0027] 5ul capture probe (200ng/ul)
[0028] 在 PCR 儀中，95。7min，65° 5min
[0029] 再加入IOul 65°預(yù)熱的2X雜交液(終濃度IX)
[0030] 在PCR儀上65度雜交24h (設(shè)定熱蓋105° )
[0031] II.洗脫程序：
[0032] L 用 IX binding buffer (IM NaCl, IOmM Tris-HCl, pH 7· 5，and EDTA)漂洗 IOOul Dynabeads? 3 次，最后懸浮于 200ul IX binding buffer 中.
[0033] 2.把 20ul 雜交產(chǎn)物加入到 200ul Dynabeads? IX binding buffer 中。禍旋震蕩 混勻，使用移液器輕輕吹打10次充分混勻。室溫?fù)u動孵育30分鐘。
[0034] 3.將反應(yīng)管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清（約5分鐘） 小心移除上清。
[0035] 4.保持I. 5ml管始終處于磁力架中，用洗液I清洗15 min。
[0036] 5.再用65° C溫浴的洗液II洗3次。
[0037] 6.將反應(yīng)管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清（約5分鐘） 小心移除上清。
[0038] 7.加入50 μ 1滅菌超純水，渦旋震蕩混勻，使用移液器輕輕吹打10次充分混勻。 室溫孵育5分鐘。（捕獲的DNA還在生物素結(jié)合的磁珠上)。
[0039] III.捕獲后的擴(kuò)增：（用高保真酶的反應(yīng)擴(kuò)增體系）
[0040] 5Χ phusionPCR Buffer 稀釋為 IX
[0041] 模板 20 ul (磁珠震蕩混勻）
[0042] 各引物 IuM
[0043] Hotstar phusion 酶 5 U
[0044] DMSO 2 ul
[0045] dNTP I mM
[0046] 總體積 50uL
[0047] PCR反應(yīng)條件如下：
[0048]
[0049] IV :擴(kuò)增產(chǎn)物用磁珠純化后，用Nanodrop定量至20ng/ul，分裝保存。
[0050] 綜上所述，本實用新型結(jié)構(gòu)簡單、設(shè)計合理、使用方便、制造容易、檢測過程不易受 污染，試劑盒在多基因捕獲時具有敏感性高、特異性強、耗時短等優(yōu)點，插孔的設(shè)計使得容 器底部磕碰破損，保證試劑盒密封安全，方便運輸。
[0051] 以上所述僅為本實用新型的優(yōu)選實施例，并非因此限制本實用新型的專利范圍， 凡是利用本實用新型說明書內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)變換，或直接或間接運用附屬在其他相關(guān) 產(chǎn)品的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本實用新型的專利保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其特征在于：包括試劑盒本體、盒蓋、固定 架、旋轉(zhuǎn)軸套、轉(zhuǎn)動軸、手持部、海綿墊、多支EP管、多個試劑瓶及密封條；所述的旋轉(zhuǎn)軸套 水平設(shè)置在所述的試劑盒本體的后端頂部，且所述的旋轉(zhuǎn)軸套的一側(cè)端開口，所述的轉(zhuǎn)動 軸的一端通過所述的旋轉(zhuǎn)軸套的開口端同軸插入在所述的旋轉(zhuǎn)軸套內(nèi)，所述的轉(zhuǎn)動軸的另 一端位于所述的旋轉(zhuǎn)軸套的外側(cè)一端，并與所述的手持部同軸連接；所述的旋轉(zhuǎn)軸套上設(shè) 有多個旋轉(zhuǎn)通孔，所述的旋轉(zhuǎn)通孔為四分之一圓弧結(jié)構(gòu)，所述的轉(zhuǎn)動軸上設(shè)有多個轉(zhuǎn)動齒， 所述的多個轉(zhuǎn)動齒與所述的多個旋轉(zhuǎn)通孔一一對應(yīng)；所述的多個轉(zhuǎn)動齒分別與所述的盒蓋 的一側(cè)端連接，所述的盒蓋罩蓋在所述的試劑盒本體上，并繞所述的轉(zhuǎn)動軸轉(zhuǎn)動，所述的密 封條設(shè)置在所述的盒蓋內(nèi)，所述的盒蓋通過所述的密封條與所述的試劑盒本體密封連接； 所述的固定架設(shè)置在所述的試劑盒本體內(nèi)，所述的固定架與所述的試劑盒本體為一體結(jié) 構(gòu)，所述的海綿墊設(shè)置在所述的固定架內(nèi)，所述的海綿墊上設(shè)有多個EP管插孔及洗液瓶插 孔，所述的多支EP管及多個試劑瓶分別對應(yīng)插入在所述的海綿墊上的多個EP管插孔及洗 液瓶插孔內(nèi)；所述的多支EP管的容量為I. 5ml及0. 5ml，所述的多支EP管內(nèi)灌裝有雜交液、 探針及阻遏劑；所述的多個試劑瓶的容量為l〇〇ml。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其特征在于：所述的盒 蓋的上端面上設(shè)有標(biāo)記區(qū)，所述的標(biāo)記區(qū)向下凹陷設(shè)置。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其特征在于：所述的試 劑盒本體的外側(cè)壁上設(shè)有防滑紋，所述的防滑紋為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
【專利摘要】本實用新型公開了一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，包括試劑盒本體、盒蓋、固定架、旋轉(zhuǎn)軸套、轉(zhuǎn)動軸、手持部、海綿墊、多支EP管、多個試劑瓶及密封條；旋轉(zhuǎn)軸套設(shè)在試劑盒本體頂部，轉(zhuǎn)動軸插在旋轉(zhuǎn)軸套內(nèi)并與手持部連接；旋轉(zhuǎn)軸套上設(shè)有旋轉(zhuǎn)通孔，轉(zhuǎn)動軸上設(shè)有轉(zhuǎn)動齒，轉(zhuǎn)動齒與盒蓋連接，盒蓋通過密封條與試劑盒本體密封連接；固定架設(shè)在試劑盒本體內(nèi)，海綿墊設(shè)在固定架內(nèi)，EP管及試劑瓶插在海綿墊內(nèi)。本實用新型結(jié)構(gòu)簡單、設(shè)計合理、使用方便、制造容易、檢測過程不易受污染，試劑盒在多基因捕獲時具有敏感性高、特異性強、耗時短等優(yōu)點，插孔的設(shè)計使得容器底部磕碰破損，保證試劑盒密封安全，方便運輸。
【IPC分類】C12M1/34
【公開號】CN204644365
【申請?zhí)枴緾N201520300883
【發(fā)明人】張道允, 鞏子英
【申請人】上海允英醫(yī)療科技有限公司
【公開日】2015年9月16日
【申請日】2015年5月12日