專利名稱：羅丹明b衍生物作為細(xì)胞線粒體熒光染色劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有甲基氯羰基哌嗪的羅丹明B衍生物的用途，具體涉及具有甲基氯羰基哌嗪的羅丹明B衍生物作為細(xì)胞線粒體熒光染色劑的用途。線粒體(mitochondria)是真核細(xì)胞中的一種細(xì)胞器，其內(nèi)部環(huán)境呈弱堿性。線粒體不僅能夠?yàn)榧?xì)胞提供能量，還與細(xì)胞自吞噬、凋亡、免疫防御、癌癥的發(fā)展等有著直接的關(guān)聯(lián)(Poot，Μ.，Y. Ζ. Zhang, et al. Analysis of mitochondrial morphology and function with novel fixable fluorescent stains. Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 1999;44(12) : 1363-1372.)。因此幵發(fā)和應(yīng)用能夠標(biāo)記并追蹤活細(xì)胞中線粒體的分子探針對于研究線粒體的生物功能，以及活體癌細(xì)胞的診斷都有重要的意義 (Ishiguro, K. , T. Ando, et al. Novel application of 4-nitro_7-(1-piperazinyl )-2, 1, 3-benzoxadiazole to visualize lysosomes in live cells. BioTechniques. 2008; 45 (4): 465-468.)?，F(xiàn)在已有多種可以標(biāo)記線粒體的分子探針，用于研究線粒體的生物功能。這些探針帶有正電荷，由于線粒體膜表面帶負(fù)電荷，故這些探針可以選擇性聚集在線粒體內(nèi)，如最常用hvitrogen開發(fā)的熒光探針(mitotracker red、rhodamine 123等)。一些線粒體探針，如rhodamine 123，在細(xì)胞內(nèi)的保留期短，隨時(shí)間的延長，細(xì)胞內(nèi)探針容易流失。本發(fā)明用羅丹明B和叔丁氧基羰基哌嗪、氯乙酸酐合成了羅丹明B衍生物(2、 Nguyen, Τ. and Μ. B. Francis. Practical Synthetic Route to Functionalized Rhodamine Dyes. Organic Letters. 2003; 5(18) : 3245—3248·)。該 行生物帶有正電荷， 能夠特異性的進(jìn)入細(xì)胞線粒體，并且該衍生物具有低背景、高穩(wěn)定性和長久保留在細(xì)胞內(nèi)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種羅丹明B衍生物的應(yīng)用。該羅丹明B衍生物可作為細(xì)胞線粒體熒光染色劑用于高選擇性、長期穩(wěn)定標(biāo)記細(xì)胞線粒體。本發(fā)明涉及羅丹明B衍生物作為細(xì)胞線粒體熒光染色劑的應(yīng)用，該羅丹明B衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.羅丹明B衍生物作為細(xì)胞線粒體熒光染色劑的應(yīng)用，其特征在于所述羅丹明B衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下
2.如權(quán)利要求1所述羅丹明B衍生物作為細(xì)胞線粒體熒光染色劑的應(yīng)用，其特征在于 所述羅丹明B衍生物是具有甲基氯羰基哌嗪的羅丹明B衍生物。
3.如權(quán)利要求1所述羅丹明B衍生物作為細(xì)胞線粒體熒光染色劑的應(yīng)用，其特征在于 合成所述羅丹明B衍生物的原料之一為羅丹明B，合成所述羅丹明B衍生物的原料之二為叔丁氧基羰基哌嗪，合成所述羅丹明B衍生物的原料之三為氯乙酸酐。
全文摘要
本發(fā)明公開一類具有甲基氯羰基哌嗪的羅丹明B衍生物作為細(xì)胞線粒體熒光染色劑的用途。該羅丹明B衍生物可作為細(xì)胞線粒體熒光染色劑用于高選擇性、長期穩(wěn)定標(biāo)記細(xì)胞線粒體。該羅丹明B衍生物與不同類型的細(xì)胞孵育后，進(jìn)入細(xì)胞的線粒體。這種羅丹明B衍生物在細(xì)胞線粒體內(nèi)不僅保留時(shí)間長，而且穩(wěn)定性高，不易被光猝滅，不與細(xì)胞內(nèi)的活性物質(zhì)反應(yīng)。利用這種羅丹明B衍生物對不同細(xì)胞的線粒體能進(jìn)行專一、穩(wěn)定的標(biāo)記。該羅丹明B衍生物可以作為不同類型細(xì)胞的線粒體熒光標(biāo)記物質(zhì)，可以用于長時(shí)間標(biāo)記、跟蹤細(xì)胞內(nèi)線粒體。
文檔編號C09K11/06GK102516993SQ20111040786
公開日2012年6月27日 申請日期2011年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月9日
發(fā)明者吳淑琪, 韓守法, 韓家淮 申請人:廈門大學(xué)