本發(fā)明涉及食品添加劑制備，特別涉及一種高萊鮑迪苷n、萊鮑迪苷o含量的甜菊糖苷組合物的制備方法。

背景技術：

1、甜葉菊別名甜菊、糖草，屬菊科，含14種微量元素、32種營養(yǎng)成分，在體內(nèi)不代謝、不蓄積、不致癌、無毒性，其安全性已經(jīng)得到國際上多個組織(如fao、who等)的認可，因此其既是極好的糖源，又是良好的營養(yǎng)來源。

2、甜菊糖苷是從甜葉菊中提取的天然甜味劑，它具有高甜度、低熱量的功能特點，其甜度是蔗糖的100-300倍，熱量僅為蔗糖的1/300。2022版甜菊糖苷新國標中，糖苷范圍從2014版的9種(ra、st、rc、rd、da、rub、rb、sbio、rf)增加至13種，與國際標準jecfa(2017)一致，新增了萊鮑迪苷e(re)、萊鮑迪苷m(rm)、萊鮑迪苷n(rn)、萊鮑迪苷o(ro)這4種化合物。

3、文獻cn?108712864a的中國專利介紹了含有低含量萊鮑迪苷n、o組分的甜菊糖苷表現(xiàn)出與含有高含量萊鮑迪苷a、d、m等甜菊糖苷相似的口感，這表明萊鮑迪苷n、o對甜菊糖苷的甜味特征起到了顯著的積極影響，因此提升甜菊糖苷組合物中rn和ro的含量對于甜菊糖苷組合物的口感具有十分重要的意義。

4、甜葉菊浸提是常見的甜菊糖苷組合物的主要制備方法，然而甜葉菊葉片中rn和ro的含量較低，雖然經(jīng)一定的提純富集后含量有一定提升，但是很難將rn和ro與其他單苷分離并提純得到高rn和ro含量的甜菊糖苷組合物。由于提升困難也使得高rn和ro含量的甜菊糖苷研究較少，因此，現(xiàn)有技術中亟需一種能有效提純得到高rn和ro含量的甜菊糖苷的技術方案。

技術實現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種高萊鮑迪苷n、萊鮑迪苷o含量的甜菊糖苷組合物的制備方法，用于從rn和ro含量較低的甜葉菊中通過逐步富集最終得到高rn和ro含量的甜菊糖苷組合物(rn和ro含量均在15％以上)，從而得到了口感更好的甜菊糖苷組合物。

2、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：

3、本發(fā)明提供一種高萊鮑迪苷n、萊鮑迪苷o含量的甜菊糖苷組合物的制備方法，包括以下步驟：

4、對甜葉菊進行浸提，得到浸提液；

5、將所述浸提液用苯乙烯骨架的非極性或弱極性的大孔樹脂進行吸附；

6、將所述吸附后的苯乙烯骨架的非極性或弱極性的大孔樹脂用醇溶液1進行解析，得到解析液1，所述解析液1經(jīng)干燥后得到甜菊糖苷組合物粗品；

7、利用醇溶液2對所述甜菊糖苷組合物粗品進行結晶后過濾，得到結晶母液；

8、將所述結晶母液用二乙烯苯骨架的非極性大孔樹脂進行吸附，收集得到流出液；

9、將所述吸附后的二乙烯苯骨架的非極性大孔樹脂用醇溶液3進行解析，得到解析液2，將所述流出液和解析液2混合得到混合液，所述混合液經(jīng)干燥后得到高萊鮑迪苷n、萊鮑迪苷o含量的甜菊糖苷組合物。

10、本發(fā)明公開一種高萊鮑迪苷n、萊鮑迪苷o含量的甜菊糖苷組合物的制備方法，包括以下步驟：對甜葉菊進行浸提，得到浸提液；將所述浸提液用苯乙烯骨架的非極性或弱極性的大孔樹脂進行吸附；將所述吸附后的苯乙烯骨架的非極性或弱極性的大孔樹脂解析并干燥得到甜菊糖苷組合物粗品；將所述甜菊糖苷組合物粗品加入結晶溶液中進行結晶，結晶后經(jīng)過濾得到結晶母液；將所述結晶母液用二乙烯苯骨架的非極性大孔樹脂進行吸附；將所述吸附后的二乙烯苯骨架的非極性大孔樹脂進行解析并干燥得到高萊鮑迪苷n、萊鮑迪苷o含量的甜菊糖苷組合物。在現(xiàn)有技術中，以甜葉菊葉片為原料制備甜菊糖苷組合物的方案是本領域的常規(guī)技術方案，然而，甜葉菊葉片中ro和rn的含量一般在0.5％(甜菊糖苷總苷量的0.5％)以下，含量極低，造成了分離和富集困難，ro、rd、rn、rm含有較多的羥基，極性相對其他糖苷大，本發(fā)明選擇了苯乙烯骨架的非極性或弱極性的大孔樹脂進行首次吸附，使ro、rd、rn、rm在樹脂吸附分離過程中相對于其他糖苷屬于弱吸附，通過適當?shù)倪M料量，使ro、rn、rd、rm被吸附后再被其他強吸附糖苷解離，從而實現(xiàn)與其他糖苷的分離；然后通過結晶的方式，將rd和rm有效析出，從而進一步提升甜菊糖苷組合物中rn和ro的含量；最后通過二次進柱吸附的方式，更進一步實現(xiàn)了對ro、rn的有效富集和提純。最終提純到了rn和ro含量均大于15％的甜菊糖苷組合物，優(yōu)化了甜菊糖苷組合物的口感，提升了產(chǎn)品的商業(yè)價值。

技術特征：

1.一種高萊鮑迪苷n、萊鮑迪苷o含量的甜菊糖苷組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述苯乙烯骨架的非極性或弱極性的大孔樹脂裝填于樹脂柱中；所述浸提液的進料量為所述苯乙烯骨架的非極性或弱極性的大孔樹脂體積的20-25bv；流速為1-2bv/h。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述醇溶液1為60-70v/v％的乙醇溶液，所述醇溶液1的用量為所述苯乙烯骨架的非極性或弱極性的大孔樹脂體積的2-3bv。

4.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述醇溶液2為60-90v/v％的甲醇或乙醇溶液，所述醇溶液2的用量為所述甜菊糖苷組合物粗品體積的2-5bv。

5.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述結晶的溫度為25-35℃，攪拌速率為80-150rpm，時間為12-24h。

6.根據(jù)權利要求1或5所述的制備方法，其特征在于，在所述結晶后，得到結晶母液前還包括：將所述過濾得到的濾液進行干燥得到晶體，將所述晶體加入醇溶液4中進行再結晶，再結晶后過濾得到所述結晶母液。

7.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述二乙烯苯骨架的非極性大孔樹脂裝填于樹脂柱中；所述結晶母液的進料量為所述二乙烯苯骨架的非極性大孔樹脂體積的1％-20％bv；流速為1-2bv/h。

8.根據(jù)權利要求1或7所述的制備方法，其特征在于，所述醇溶液3為0-30v/v％的乙醇溶液，所述醇溶液3的用量為所述二乙烯苯骨架的非極性大孔樹脂體積的1-2bv。

9.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在將所述流出液和解析液2混合后，對所述混合液進行干燥前，還包括：向所述混合液中加入樹脂或活性炭進行脫色處理。

10.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于，對所述解析液1或混合液進行干燥的溫度為80-85℃，干燥時間為1-2h。

技術總結
本發(fā)明公開一種高萊鮑迪苷N、萊鮑迪苷O含量的甜菊糖苷組合物的制備方法，包括以下步驟：對甜葉菊進行浸提，得到浸提液；將浸提液用苯乙烯骨架的非極性或弱極性的樹脂進行吸附；將樹脂解析并干燥得到甜菊糖苷粗品；將甜菊糖苷粗品加入結晶溶液中進行結晶，結晶后經(jīng)過濾得到結晶母液；將結晶母液進料至裝填有二乙烯苯骨架的非極性樹脂的樹脂柱中進行吸附；將樹脂進行解析并干燥得到高RN、RO含量的甜菊糖苷組合物。本發(fā)明以低RN、RO含量的甜葉菊為原料，通過溶液浸提、樹脂吸附、結晶、樹脂再吸附等過程逐步實現(xiàn)對RN和RO的富集，最終提純到了RN和RO含量均大于15％的甜菊糖苷組合物，該組合物具備更好的口感和商業(yè)價值。

技術研發(fā)人員：朱理平,宋維才,何冬生,劉浩,曹欣欣,程雙武
受保護的技術使用者：東臺市浩瑞生物科技有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/10/24