專利名稱:寬口徑填充毛細(xì)管柱的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本實(shí)用新型涉及液相色譜技術(shù),特別提供了一種臺(tái)錐形柱尾的填充毛細(xì)管液相色譜柱。
填充毛細(xì)管液相色譜(μ-HPLC)由于具有消耗低,污染小,易于與其它檢測方法在線聯(lián)用,柱惰性好而適于生物樣品的分析等優(yōu)點(diǎn),在研究及應(yīng)用領(lǐng)域具有廣闊的前景。μ-HPLC柱流量小(如0.25mm內(nèi)徑柱的流量在0.5μL/min~1.5μL/min),絕大多數(shù)商品化的液相色譜泵不能提供穩(wěn)定的低流量,限制了μ-HPLC的發(fā)展;柱容量小使得現(xiàn)有的檢測池難以與之適配,所以填充毛細(xì)管液相色譜采用柱上檢測,這種檢測方式的光程短,靈敏度會(huì)受到限制。文獻(xiàn)報(bào)道當(dāng)柱徑大于2mm([1].Guan Y,ZhouL,ShangZ. J.High Resolut.Chromatogr.1992,15:434-436 [2].Vissers J P C,de ru Anoudlt,Urseur M,Cheuret J-P.J.Chromatogr.A 1996,746:1-7)或小于0.32mm([3].Verzele M,Dewaele C.J.Chromatogr.1987,391:111-118 [4].Majors R E.LC-GC 1987,5,292-298)時(shí)柱效可達(dá)到或接近理論值,但是這一柱徑范圍內(nèi)的填充柱已經(jīng)不再具有毛細(xì)管柱的各種優(yōu)點(diǎn)。而當(dāng)柱徑范圍在0.5mm和1mm之間時(shí),其柱流量在5μL/min~50μL/min,多數(shù)商品泵不加改裝便可提供穩(wěn)定的流量;與0.25mm柱相比其柱容量提高一個(gè)數(shù)量級(jí)以上,較粗的柱管也易于與現(xiàn)有的1μL檢測池適配;并且可容忍較大的柱外效應(yīng)。這一柱徑范圍內(nèi)的色譜柱仍然具有填充毛細(xì)管柱的各種優(yōu)點(diǎn),但柱徑范圍在0.5mm和2mm之間的柱效([5].Scott R P W,Kucera P.J.Chromatogr.1976,125:251 [6].Scott R P W,Kucera P. J.Chromatogr.1979,169:51)一直難以提高。原因是這種規(guī)格的色譜柱既不能象常規(guī)液相色譜柱那樣可以采取點(diǎn)進(jìn)樣以避免管壁效應(yīng),也無法象內(nèi)徑≤0.32mm柱那樣柱塞狀進(jìn)樣,且樣品在柱內(nèi)從中心區(qū)到管壁區(qū)的物質(zhì)交換不易達(dá)到快速平衡。但是這個(gè)規(guī)格的微柱是最有實(shí)用價(jià)值的。提高色譜柱的柱效是色譜工作者多年來的研究重點(diǎn)之一。
本實(shí)用新型的目的在于提供一種寬口徑填充毛細(xì)管柱,其在寬流速范圍內(nèi)具有較高的柱效,并且色譜峰的對(duì)稱性接近理想值。
本實(shí)用新型提供了一種寬口徑填充毛細(xì)管柱,其特征在于柱尾端設(shè)計(jì)成圓錐形結(jié)構(gòu),錐形尾端的圓臺(tái)面與軸向垂直,同時(shí)滿足D/d=1.5~25,L/D=3~50,其中D為毛細(xì)管內(nèi)徑,d為毛細(xì)管尾端出口內(nèi)徑,L為錐形尾端的長度。
本實(shí)用新型適用于內(nèi)徑D在0.32~2mm之間的毛細(xì)管,特別是內(nèi)徑D在0.5~1mm之間的毛細(xì)管。
本實(shí)用新型采用與現(xiàn)有設(shè)計(jì)完全不同的思路,將柱尾端設(shè)計(jì)成圓錐體結(jié)構(gòu),并使擔(dān)體填入其中,形成一小段錐形柱,或稱梯度柱徑色譜柱。多孔過濾片放在錐體的最細(xì)端用以支撐擔(dān)體床。錐體最細(xì)端的直徑與引出管內(nèi)徑相同或相近。
本實(shí)用新型發(fā)展了錐形柱尾用于寬口徑柱的制備,與常規(guī)柱尾連接方式(黏結(jié)式)的比較結(jié)果表明前者柱效比后者高出30%~50%,van Deemter曲線高流速部分的流速-柱效關(guān)系明顯改善。色譜峰的不對(duì)稱因子接近1,呈理想形狀。且K′值越小,峰對(duì)稱性越好,從而證明流動(dòng)相在柱內(nèi)流型的顯著改善。采用有色染料譜帶對(duì)比觀察了流型變化,發(fā)現(xiàn)譜帶的拋物線狀流型在錐形柱尾處得到改善,使拋物線的曲率變小,并且減緩連接處的流型變化和減小死體積,使色譜峰對(duì)稱,柱效得到提高。
下面通過實(shí)施例詳述本實(shí)用新型。
附
圖1為黏結(jié)型柱尾結(jié)構(gòu)示意。
附圖2為錐形柱尾結(jié)構(gòu)示意。
附圖3為0.53mm柱管的h(折合板高)~v(折合流速)曲線;●.黏結(jié);■.尾錐形。
附圖4為0.32mm柱管的h(折合板高)~v(折合流速)曲線;●.黏結(jié);■.尾錐形。
附圖5硫脲和多環(huán)芳烴在黏結(jié)和尾錐形柱尾色譜柱(0.53mm)中的色譜圖;a.臺(tái)錐柱尾的色譜柱,b.膠接柱尾的色譜柱;條件為固定相為Kromasil C18(5μm),流動(dòng)相為甲醇∶水=80∶20,流動(dòng)相流速為8.5μL/min;樣品峰(1)苯,(2)甲苯,(3)萘,(4)聯(lián)苯,(5)蒽,(6)菲。
附圖6是在高流速下,硫脲和芳烴在黏結(jié)和尾錐型色譜柱中的色譜圖;a.臺(tái)錐柱尾的色譜柱,b.膠接柱尾的色譜柱;條件填料,Dromasil C18(5μm);流動(dòng)相,甲醇∶水=80∶20;流速,36μL/min;樣品峰(1)苯,(2)甲苯,(3)萘,(4)聯(lián)苯,(5)蒽,(6)菲。
附圖7圖4是高流速下氯苯類樣品的分析譜圖;a.臺(tái)錐柱尾的色譜柱,b.膠接柱尾的色譜柱;條件填料,Kromasil C18(5μm);流動(dòng)相,甲醇∶水=80∶20;2min走梯度(100%甲醇);流速,30μL/min;樣品峰(7)氯苯,(8)鄰二氯苯,(9)間二氯苯,(10)1,2,3-三氯代苯,(11)1,2,4-三氯代苯,(12)1,3,5-三氯代苯,(13)1,2,4,5-四氯代苯,(14)五氯代苯,(15)六氯代苯。
實(shí)施例10.53mm分析柱尺寸為15cm×0.53mm,尾錐形柱尾滿足D/d=2.65,L/D=22;引出管8cm×0.12mm。
0.32mm分析柱尺寸為25cm×0.32mm,尾錐形柱尾滿足D/d=1.6,L/D=9.4;引出管8cm×0.12mm。
分別以上述兩種尺寸兩種結(jié)構(gòu)(黏結(jié)型,尾錐型)的毛細(xì)管柱,在固定相為Kromasil C18(5μm);流動(dòng)相為甲醇∶水=80∶20的條件下,對(duì)樣品萘檢測,進(jìn)行柱效評(píng)價(jià),結(jié)果見附圖3、4。
可見,采用尾錐形柱尾后,柱效與van-Deemter曲線形狀均得到改善。對(duì)于黏結(jié)型柱尾的0.53mm柱由于膠團(tuán)處存在孔隙和膠接處的變徑較大(0.53mm→0.12mm),樣品帶流經(jīng)此處時(shí)的滯留引起了區(qū)帶展寬,導(dǎo)致柱效損失而使得曲線沒有最低點(diǎn);而對(duì)于臺(tái)錐形0.53mm柱,柱尾的直徑為0.20mm,引出管直徑為0.12mm,且連接處通暢無死區(qū)(見圖2),柱效損失降到最低,van-Deemter曲線形狀恢復(fù)正常,折合板高h(yuǎn)min為2.7(v為3.5)。0.32mm柱管的變徑程度小于0.53mm柱管,柱效提高程度小于后者,其折合板高h(yuǎn)min由2.93降至2.41(v為3.4)。
實(shí)施例2用實(shí)施例1中0.53mm黏結(jié)和尾錐形柱尾色譜柱對(duì)硫脲和多環(huán)芳烴分別在低流速和高流速的條件下進(jìn)行分析,見圖5、6。
由譜圖5中a和b的峰拖尾情況可以看出,使用尾錐柱尾后,樣品峰的分離度和對(duì)稱性明顯改善,尤其是對(duì)于保留值較小的峰(如保留時(shí)間為4-8min的峰),這說明尾錐柱尾的確在減小死區(qū)及減緩樣品譜帶展寬中起到重要作用。對(duì)比圖中a和b的峰5,6,可見b的峰5相對(duì)偏低,定量結(jié)果偏小,這說明柱尾處環(huán)氧膠對(duì)較大容量因子的樣品有吸附作用。使用錐尾有效的避免了吸附現(xiàn)象。
譜圖6是在高流速下,硫脲和芳烴在黏結(jié)和尾錐型色譜柱中的色譜圖。由圖6中a和b中峰拖尾情況可以看出,使用尾錐型柱時(shí)色譜峰的對(duì)稱性明顯改善。從圖中a和b中的5號(hào)、6號(hào)峰的峰高和面積變化看出,黏結(jié)的柱尾連接結(jié)構(gòu)對(duì)高容量因子的樣品有吸附滯留,使峰面積減少。在快速分析中造成樣品峰形差異的原因除了柱結(jié)構(gòu)改變使樣品吸附滯留現(xiàn)象得到改善,另一原因就是柱效的差異。用峰高1/10處的不對(duì)稱性來評(píng)價(jià)峰形,結(jié)果如表1所示。表中數(shù)據(jù)證明尾錐型柱的峰形非常對(duì)稱,這在液相色譜中是十分罕見的。
表1.兩種柱結(jié)構(gòu)對(duì)色譜峰不對(duì)稱因子(b/a)的影響。Table 4 -2.Comparison of peak asymmetric factor(b/a)between tow types of columns. 實(shí)施例3用實(shí)施例1中的0.53mm黏結(jié)和尾錐形柱尾色譜柱在高流速下對(duì)氯苯類樣品進(jìn)行了分析,見圖7,圖中同樣顯示出了兩種柱型在柱效和分離性能方面的差別。
權(quán)利要求1.一種寬口徑填充毛細(xì)管柱,其特征在于柱尾端設(shè)計(jì)成圓錐形結(jié)構(gòu),錐形尾端的圓臺(tái)面與軸向垂直,同時(shí)滿足D/d=1.5~25,L/D=3~50,其中D為毛細(xì)管內(nèi)徑,d為毛細(xì)管尾端出口內(nèi)徑,L為錐形尾端的長度。
2.按權(quán)利要求1所述寬口徑填充毛細(xì)管柱,其特征在于所述毛細(xì)管內(nèi)徑D在0.32~2mm之間。
3.按權(quán)利要求2所述寬口徑填充毛細(xì)管柱,其特征在于所述毛細(xì)管內(nèi)徑D在0.5~1mm之間。
專利摘要一種寬口徑填充毛細(xì)管柱,其特征在于:柱尾端設(shè)計(jì)成圓錐形結(jié)構(gòu),錐形尾端的圓臺(tái)面與軸向垂直,同時(shí)滿足D/d=1.5~25,L/D=3~50,其中D為毛細(xì)管內(nèi)徑,d為毛細(xì)管尾端出口內(nèi)徑,L為錐形尾端的長度。本實(shí)用新型在寬流速范圍內(nèi)具有較高的柱效,并且色譜峰的對(duì)稱性接近理想值。
文檔編號(hào)G01N30/00GK2439026SQ0021027
公開日2001年7月11日 申請(qǐng)日期2000年9月13日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月13日
發(fā)明者關(guān)亞風(fēng), 朱翠茹, 江濤, 朱道乾 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所