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      以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng)及其檢測(cè)方法

      文檔序號(hào):5884449閱讀:218來源:國(guó)知局
      專利名稱:以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng)及其檢測(cè)方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及一種以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng)及其檢測(cè)方法。
      背景技術(shù)
      2000年,日本東京大學(xué)的Kitamori領(lǐng)導(dǎo)的研究組發(fā)表了一種基于微球的微流體芯片檢測(cè)裝置,該法用高分子聚苯乙烯微球作為生物學(xué)反應(yīng)載體,標(biāo)記在二抗上的納米金作為檢測(cè)信號(hào),利用一個(gè)在微流體通道加工有隔擋的微流體反應(yīng)和檢測(cè)裝置,通過熱力顯微鏡在隔擋附近微球上方對(duì)標(biāo)記在微球表面的納米金顆粒進(jìn)行結(jié)果觀察。其檢測(cè)系統(tǒng)見附圖1。Kitamori利用該系統(tǒng)進(jìn)行腫瘤標(biāo)志物免疫學(xué)檢測(cè),方法準(zhǔn)確、靈敏,與目前常用的ELISA相比,可將反應(yīng)時(shí)間從幾十小時(shí)縮短至幾十分鐘,但該系統(tǒng)仍存在以下缺點(diǎn)1.該系統(tǒng)在100μm深度的反應(yīng)通道1中設(shè)置了一個(gè)90μm高的隔擋2,在反應(yīng)通道1中隔擋2的上部留有10μm的間隙3。由于間隙3的設(shè)計(jì),在整個(gè)檢測(cè)過程中,會(huì)存在以下問題無法準(zhǔn)確控制反應(yīng)和清洗過程;少部分加入反應(yīng)通道1中的反應(yīng)液未在聚苯乙烯微球反應(yīng)載體4表面反應(yīng)即直接被沖出通道之外;在反應(yīng)及清洗過程中反應(yīng)通道1存在死角即死體積,這樣不但使反應(yīng)物在微球反應(yīng)載體4表面反應(yīng)不充分,還會(huì)因?yàn)榍逑床粡氐自斐梢恍┓磻?yīng)物在死角留存,影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度。
      2.由于隔擋2高度的限制,需要粒徑較大的微球作為反應(yīng)載體4,研究中使用約45μm的聚苯乙烯高分子微球,,與同樣質(zhì)量的小粒徑微球相比,可以進(jìn)行固相反應(yīng)的表面積相對(duì)較小,不是理想的反應(yīng)載體;若使用粒徑較小的微球作反應(yīng)載體4,檢測(cè)時(shí)易在隔擋2處形成微球的堆積,則僅以最上層高分子微球反應(yīng)載體4上所帶的納米金顆粒作為信號(hào)記錄,下層積累微球的檢測(cè)信號(hào)無法被熱力顯微鏡捕獲,因此該方法只可用于定性檢測(cè)若定量會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確度。
      3.由于檢測(cè)微球反應(yīng)載體4表面的反應(yīng)信號(hào)時(shí),檢測(cè)器5采用熱顯微鏡,只能定位在隔擋2附近反應(yīng)載體4聚集的地方,其目前僅用于對(duì)微球反應(yīng)載體4表面標(biāo)記的納米金進(jìn)行檢測(cè),而未用于對(duì)熒光標(biāo)記物進(jìn)行檢測(cè)和酶對(duì)底物催化后引起的顏色變化進(jìn)行比色測(cè)定;
      4.研究中已經(jīng)采用加工多通道同時(shí)對(duì)四個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)的方法,但該法仍無法滿足幾十甚至上百個(gè)反應(yīng)的高通量檢測(cè)。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明解決了背景技術(shù)結(jié)構(gòu)不合理,只可用于定性檢測(cè),無法滿足高通量檢測(cè)的技術(shù)問題。
      本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),包括微流體裝置6、光學(xué)分析系統(tǒng)8和設(shè)置于光學(xué)分析系統(tǒng)8輸出端的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)9,所述的微流體裝置6內(nèi)設(shè)置有反應(yīng)載體4,所述的光學(xué)分析系統(tǒng)8所包括的檢測(cè)器5,其特殊之處在于所述的反應(yīng)通道1和檢測(cè)通道11的連接處設(shè)置有閥門10;所述的反應(yīng)載體4為磁性微球或磁性熒光微球。
      上述微流體裝置6采用的基體材料可包括硅、石英玻璃、PMMA,通道截面是矩形、梯形、三角形或非標(biāo)準(zhǔn)圓形。
      上述微流體分析系統(tǒng)中的閥門10可為氣流、動(dòng)力方式主動(dòng)或被動(dòng)控制的閥門。
      上述反應(yīng)通道1可設(shè)置可控制的外加磁場(chǎng)7。
      上述外加磁場(chǎng)7可設(shè)置于反應(yīng)通道1的外部,置于反應(yīng)通道1的上部或下部。所述的外加磁場(chǎng)7為稀土永磁材料的釹鐵硼永磁鐵或電磁鐵。
      上述微球反應(yīng)載體可為磁性高分子微球或磁性高分子熒光微球;所述的微球反應(yīng)載體粒徑是微米級(jí)或納米級(jí)。
      上述反應(yīng)通道1之前可設(shè)置樣品預(yù)處理槽或樣品處理通道。
      上述檢測(cè)器5可設(shè)置于檢測(cè)通道11的上方,或設(shè)置于反應(yīng)通道1的上方,并通過檢測(cè)口與微流體通道連接。
      上述檢測(cè)器5可為CCD圖像拍攝儀、光譜儀、熒光光度計(jì)、集成式微型光譜儀或激光光源系統(tǒng)。
      一種采用如權(quán)利要求1所述以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng)的檢測(cè)方法,其特殊之處在于該方法的檢測(cè)包括1].反應(yīng),關(guān)閉閥門,反應(yīng)載體4在反應(yīng)通道1內(nèi)與反應(yīng)物進(jìn)行生物化學(xué)反應(yīng),反應(yīng)載體4表面包覆或共價(jià)結(jié)合生物活性分子或小分子配體;2].清洗,反應(yīng)結(jié)束后,加外磁場(chǎng)7,開啟閥門10,對(duì)反應(yīng)后反應(yīng)載體4表面的非特異性結(jié)合物質(zhì)進(jìn)行反復(fù)清洗;3].檢測(cè),通過檢測(cè)器5對(duì)反應(yīng)載體4進(jìn)行識(shí)別,并對(duì)反應(yīng)載體4表面發(fā)生的生物或化學(xué)反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行檢測(cè);上述對(duì)反應(yīng)載體4進(jìn)行清洗時(shí),可先加上外加磁場(chǎng)7,再開啟閥門10。
      上述檢測(cè)反應(yīng)結(jié)果或?qū)z測(cè)器5可置于反應(yīng)通道的上方,通過測(cè)定微球反應(yīng)載體4表面熒光信號(hào)或反應(yīng)后溶液中的顏色,確定被測(cè)物質(zhì)的含量;或?qū)z測(cè)器5設(shè)置于檢測(cè)通道1上方,通過流式計(jì)數(shù)的方法對(duì)每一種微球反應(yīng)載體4進(jìn)行識(shí)別,并對(duì)每一種微球反應(yīng)載體4表面的生物化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行確定。
      上述對(duì)被測(cè)物質(zhì)的檢測(cè)可包括基于免疫學(xué)反應(yīng)原理的檢測(cè)包括,包括1]酶聯(lián)免疫學(xué)檢測(cè),通過測(cè)定反應(yīng)后溶液顏色的變化,確定被測(cè)物質(zhì)的含量;包括2]熒光免疫學(xué)檢測(cè),通過測(cè)定磁性微球表面熒光物質(zhì)的強(qiáng)度值,確定被測(cè)物質(zhì)的含量。
      上述采用檢測(cè)器5檢測(cè)反應(yīng)結(jié)果為是CCD拍攝圖像分析結(jié)果,通過光譜儀進(jìn)行比色測(cè)定,或采用激光光源系統(tǒng)對(duì)磁性熒光微球以及微球表面的熒光信號(hào)進(jìn)行結(jié)果的確定。
      本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1.微流體芯片據(jù)需要可加工成兩種不同深寬比的反應(yīng)通道和檢測(cè)通道。在反應(yīng)通道1和檢測(cè)通道的連接口處設(shè)置可控制的閥門,當(dāng)進(jìn)行生物或化學(xué)反應(yīng)時(shí),閥門關(guān)閉,清洗時(shí),閥門開啟,反應(yīng)和清洗更充分、更徹底;在微流體芯片裝置中設(shè)置有外加磁場(chǎng),可在反應(yīng)和清洗過程中對(duì)磁性微球進(jìn)行控制;2.微球反應(yīng)載體4采用磁性高分子微球或磁性高分子熒光微球。在反應(yīng)和清洗過程中可利用磁性微球的磁性控制其過程的準(zhǔn)確進(jìn)行;由于反應(yīng)和檢測(cè)過程可控,因此,反應(yīng)載體4可根據(jù)需求選擇粒徑不同的磁性微球或磁性熒光微球;根據(jù)微球直徑的大小,可設(shè)計(jì)較小的檢測(cè)通道,以適應(yīng)對(duì)小粒徑微球的計(jì)數(shù),并對(duì)其表面發(fā)生的反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè);3.檢測(cè)系統(tǒng)??筛鶕?jù)需要將檢測(cè)器設(shè)置在系統(tǒng)的不同位置,如可在檢測(cè)通道的閥門附近設(shè)置檢測(cè)口,通過讀取微球反應(yīng)載體4表面或反應(yīng)后溶液中的顏色確定結(jié)果;也可將檢測(cè)器設(shè)置在檢測(cè)通道內(nèi),通過流式計(jì)數(shù)的方法對(duì)每一種微球反應(yīng)載體4進(jìn)行識(shí)別,并對(duì)每一種微球反應(yīng)載體4表面的生物化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行確定;檢測(cè)器可使用CCD拍攝圖像的方式分析結(jié)果,通過光譜儀進(jìn)行比色測(cè)定,也可使用激光光源系統(tǒng)對(duì)磁性熒光微球以及微球表面的熒光信號(hào)進(jìn)行結(jié)果的確定;4.應(yīng)用該系統(tǒng)裝置,可對(duì)基于免疫學(xué)反應(yīng)原理的檢測(cè)、核酸雜交檢測(cè)以及化學(xué)小分子物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定??傊景l(fā)明具有檢測(cè)靈敏、準(zhǔn)確、快速和裝置便攜等特點(diǎn),系統(tǒng)是利用磁性微球或磁性熒光微球的超順磁性、可識(shí)別性以及反應(yīng)載體的特點(diǎn)與,微流體分析系統(tǒng)結(jié)合的便攜式檢測(cè)裝置,并將其擴(kuò)展用于食品安全性檢測(cè)、興奮劑檢測(cè)、生物戰(zhàn)劑檢測(cè)和藥物篩選等領(lǐng)域。


      圖1為現(xiàn)有技術(shù)中基于聚苯乙烯微球載體的微流體芯片檢測(cè)裝置的結(jié)構(gòu)示意圖;圖2為本發(fā)明的原理框圖;圖3、4為本發(fā)明微流體裝置通過在反應(yīng)溶液的比色測(cè)定確定單個(gè)物質(zhì)含量的檢測(cè)過程示意圖;圖5、6為本發(fā)明微流體裝置采用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的原理對(duì)磁性熒光微球識(shí)別并確定被測(cè)物質(zhì)含量的工作示意圖。
      具體實(shí)施例方式
      本發(fā)明針對(duì)不同的反應(yīng),如抗原-抗體反應(yīng)、核酸雜交反應(yīng)、受體-配體的反應(yīng)等原理,在磁性微球或磁性熒光微球表面固定一種生物活性分子,在微流體芯片中完成整個(gè)的反應(yīng)、清洗過程,并進(jìn)一步通過設(shè)計(jì)在微流體芯片上方的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)生物活性分子的單通量或多通量檢測(cè)。
      參見圖2,本發(fā)明的微流體分析系統(tǒng)由微流體裝置6、反應(yīng)載體4、可控制的外加磁場(chǎng)7及光學(xué)分析系統(tǒng)8和數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)9組成,反應(yīng)載體4可采用磁性高分子微球或磁性高分子熒光微球。
      圖3、4表明了微流體裝置的結(jié)構(gòu)以及用該裝置進(jìn)行生物分子檢測(cè)的過程示意圖。其中微流體裝置6可選擇耐熱玻璃、硅、二氧化硅及相關(guān)有機(jī)高分子聚合材料加工制作;反應(yīng)通道1和檢測(cè)通道11,可根據(jù)反應(yīng)載體4的大小加工不同直徑的通道。微流體裝置6中的閥門10可設(shè)計(jì)為氣流、動(dòng)力、磁流體等方式控制的閥門。除反應(yīng)通道1和檢測(cè)通道11外,根據(jù)檢測(cè)過程的需要,反應(yīng)通道1也可兼作樣品的預(yù)處理通道。
      反應(yīng)載體4可采用磁性微球,即磁性高分子微球或磁性高分子熒光微球。磁性微球可使用商品化的磁性高分子微球,也可利用化學(xué)合成方法制備的磁性微球或磁性熒光微球作為反應(yīng)載體。。
      外加磁場(chǎng)7可采用稀土永磁材料的釹鐵硼永磁鐵,以可移動(dòng)磁場(chǎng)為宜,通過設(shè)置與撤去可控制反應(yīng)和清洗過程。也可使用電磁鐵,通過對(duì)線圈的通電與斷電來控制磁性微球在微流體裝置中的清洗和洗滌過程。
      光學(xué)分析系統(tǒng)8可采用新型濾光技術(shù)原理的光譜儀、光纖化學(xué)傳感技術(shù)原理的熒光光度計(jì)以及通過微細(xì)加工制作集成式微型光譜儀等。
      數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)9可通過商業(yè)化分析軟件或自行研制的分析軟件等進(jìn)行分析。
      圖3所示利用表面包覆或共價(jià)結(jié)合有生物活性分子或小分子配體的反應(yīng)載體4即磁性高分子微球,對(duì)反應(yīng)完成后的溶液進(jìn)行比色測(cè)定的示意圖。整個(gè)檢測(cè)過程可分為反應(yīng)步驟、清洗步驟和檢測(cè)步驟三個(gè)階段,而在檢測(cè)過程中可選擇兩種模式進(jìn)行檢測(cè)。
      圖5、6為本發(fā)明微流體裝置采用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的原理對(duì)磁性高分子熒光微球識(shí)別并確定被測(cè)物質(zhì)進(jìn)行多通量檢測(cè)的示意圖。磁性高分子熒光微球作為反應(yīng)和檢測(cè)載體4,每種微球表面或內(nèi)部結(jié)合有特征的熒光物質(zhì),表面還包覆或共價(jià)結(jié)合有生物活性分子或小分子配體。通過外加磁場(chǎng)7以及閥門10的控制,以及檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)微球的識(shí)別對(duì)微球表面發(fā)生的生物或化學(xué)反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行多通量檢測(cè)。與圖3不同的是,測(cè)定結(jié)果可由熒光光度計(jì)對(duì)多種熒光微球表面所發(fā)生生物化學(xué)反應(yīng)的熒光強(qiáng)度值進(jìn)行確定。
      本發(fā)明可用于生物和化學(xué)分子的單通量或多通量檢測(cè)。
      單個(gè)樣品的檢測(cè)微流體芯片集樣品的預(yù)處理、分離、純化與檢測(cè)為一體,如該分析系統(tǒng)可與固相萃取技術(shù)聯(lián)用,如將內(nèi)壁表面經(jīng)過一定處理的微萃取管埋入微流體通道中,結(jié)合后續(xù)基于磁性微球的微流體分析系統(tǒng),將食物標(biāo)本的處理和分析檢測(cè)系統(tǒng)整合在一塊芯片上。以瘦肉精檢測(cè)為例,其檢測(cè)原理及過程的描述如下檢測(cè)原理基于抗原-抗體結(jié)合反應(yīng)的競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫學(xué)檢測(cè)。用兔IgG的羊抗體固定于磁性微球表面,加入羊抗克倫特羅抗體,室溫孵育洗滌后后加入克倫特羅酶結(jié)合物、克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)液或樣品液,游離的克倫特羅與克倫特羅酶結(jié)合物競(jìng)爭(zhēng)抗克倫特羅結(jié)合位點(diǎn)(競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)),沒有結(jié)合的酶結(jié)合物被洗去,再向反應(yīng)通道中加入酶反應(yīng)底物(過氧化物)和色原(鄰苯二胺),在酶的作用下將其轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物,加入終止液,顏色由藍(lán)變黃,于450nm波長(zhǎng)下在檢測(cè)通道測(cè)量吸光值,吸光值與樣品中克倫特羅含量成反比。提供試劑每套試劑盒中所帶試劑足以滿足96個(gè)測(cè)量單位用。
      檢測(cè)過程磁性微球表面抗體的固定化方法羧基末端的磁性微粒和氨基末端的磁性微粒表面抗體可分別采用碳二亞胺和戊二醛作為偶聯(lián)劑,將市售或自制的兔IgG(Clenbuterol抗體)的羊抗體在磁性微球表面進(jìn)行固定化。具體檢測(cè)過程1).具有雙通道微流體檢測(cè)芯片中標(biāo)明標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的通道位置;2).加入同樣量50~100μL已經(jīng)包覆有抗體的磁性微球;3).在兩個(gè)通道中分別加入稀釋兔抗鹽酸克倫特羅抗體50~100μl,室溫下孵育15min;4).加外磁場(chǎng),打開反應(yīng)通道的閥門,排出反應(yīng)殘余溶液,用250~300μL的水反復(fù)清洗2~3次;5).將10~20μl標(biāo)準(zhǔn)品或準(zhǔn)備好的樣品分別按平行孔(雙份)要求加入微檢測(cè)分析系統(tǒng)地反應(yīng)通道中;6).在平行的兩通道中加入50~100μl稀釋后的酶結(jié)合物,室溫下孵育30分鐘;7).同4)操作反復(fù)洗滌2次以上;8).關(guān)閉閥門,兩通道中加入25~50μl過氧化物和25~50μl顯色液,充分混勻后室溫暗盒中孵育15分鐘;9).兩通道各加入50~100μl終止液,加磁場(chǎng),通過檢測(cè)裝置于450nm波長(zhǎng)下測(cè)量每管的吸光值。
      1.當(dāng)樣品需要前期處理時(shí),可先在樣品反應(yīng)通道進(jìn)行預(yù)處理,然后再進(jìn)行反應(yīng)和檢測(cè)。
      2.1).酶聯(lián)免疫學(xué)檢測(cè)通過測(cè)定反應(yīng)后溶液顏色的變化,確定被測(cè)物質(zhì)的含量;2).熒光免疫學(xué)檢測(cè)通過測(cè)定磁性微球表面熒光物質(zhì)的強(qiáng)度值,確定被測(cè)物質(zhì)的含量。
      3.受體-配體檢測(cè)體系也和用于PCR-ELISA檢測(cè)體系。
      4.可用于檢測(cè)小分子化合物,也可檢測(cè)蛋白、抗體、核酸等大分子物質(zhì)。
      5.可用于食品安全、興奮劑檢測(cè)、生物戰(zhàn)劑檢測(cè)等。
      6.可用于人類基因的SNP檢測(cè)、食品中多種農(nóng)藥的殘留量、臨床診斷中對(duì)多種細(xì)菌或病毒的同時(shí)確定、戰(zhàn)地對(duì)可能生物戰(zhàn)劑的實(shí)地檢測(cè)等。
      權(quán)利要求
      1.一種以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),包括微流體裝置6、光學(xué)分析系統(tǒng)8和設(shè)置于光學(xué)分析系統(tǒng)8輸出端的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)9,所述的微流體裝置6內(nèi)設(shè)置有反應(yīng)載體4,所述的光學(xué)分析系統(tǒng)8所包括的檢測(cè)器5,其特征在于所述的反應(yīng)通道1和檢測(cè)通道11的連接處設(shè)置有閥門10;所述的反應(yīng)載體4為磁性微球或磁性熒光微球。
      2.如權(quán)利要求1所述的以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),其特征在于所述的微流體裝置6采用的基體材料包括硅、石英玻璃、PMMA,通道截面是矩形、梯形、三角形或非標(biāo)準(zhǔn)圓形。
      3.如權(quán)利要求1所述的以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),其特征在于所述的微流體分析系統(tǒng)中的閥門10為氣流、動(dòng)力方式主動(dòng)或被動(dòng)控制的閥門。
      4.如權(quán)利要求1所述的以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),其特征在于所述的反應(yīng)通道1設(shè)置有可控制的外加磁場(chǎng)7。
      5.如權(quán)利要求2所述的以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),其特征在于所述的外加磁場(chǎng)7設(shè)置于反應(yīng)通道1的外部,置于反應(yīng)通道1的上部或下部。所述的外加磁場(chǎng)7為稀土永磁材料的釹鐵硼永磁鐵或電磁鐵。
      6.如權(quán)利要求1或2所述的以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),其特征在于所述的微球反應(yīng)載體為磁性高分子微球或磁性高分子熒光微球;所述的微球反應(yīng)載體粒徑是微米級(jí)或納米級(jí)。
      7.如權(quán)利要求4所述的以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),其特征在于所述的反應(yīng)通道1之前設(shè)置有樣品預(yù)處理槽或樣品處理通道。
      8.如權(quán)利要求5所述的以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),其特征在于所述的檢測(cè)器5設(shè)置于檢測(cè)通道11的上方,或設(shè)置于反應(yīng)通道1的上方,并通過檢測(cè)口與微流體通道連接。
      9.如權(quán)利要求6所述的以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),其特征在于所述的檢測(cè)器5為CCD圖像拍攝儀、光譜儀、熒光光度計(jì)、集成式微型光譜儀或激光光源系統(tǒng)。
      10.一種采用如權(quán)利要求1所述以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng)的檢測(cè)方法,其特征在于該方法的檢測(cè)包括1]反應(yīng),關(guān)閉閥門,反應(yīng)載體4在反應(yīng)通道1內(nèi)與反應(yīng)物進(jìn)行生物化學(xué)反應(yīng),反應(yīng)載體4表面包覆或共價(jià)結(jié)合生物活性分子或小分子配體;2]清洗,反應(yīng)結(jié)束后,加外磁場(chǎng)7,開啟閥門10,對(duì)反應(yīng)后反應(yīng)載體4表面的非特異性結(jié)合物質(zhì)進(jìn)行反復(fù)清洗;3]檢測(cè),通過檢測(cè)器5對(duì)反應(yīng)載體4進(jìn)行識(shí)別,并對(duì)反應(yīng)載體4表面發(fā)生的生物或化學(xué)反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行檢測(cè);
      11.如權(quán)利要求10所述以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng)的檢測(cè)方法,其特征在于所述的對(duì)反應(yīng)載體4進(jìn)行清洗時(shí),先加上外加磁場(chǎng)7,再開啟閥門10。
      12.如權(quán)利要求10或11所述以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng)的檢測(cè)方法,其特征在于所述的檢測(cè)反應(yīng)結(jié)果或?qū)z測(cè)器5置于反應(yīng)通道的上方,通過測(cè)定微球反應(yīng)載體4表面熒光信號(hào)或反應(yīng)后溶液中的顏色,確定被測(cè)物質(zhì)的含量;或?qū)z測(cè)器5設(shè)置于檢測(cè)通道1上方,通過流式計(jì)數(shù)的方法對(duì)每一種微球反應(yīng)載體4進(jìn)行識(shí)別,并對(duì)每一種微球反應(yīng)載體4表面的生物化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行確定。
      13.如權(quán)利要求12所述以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng)的檢測(cè)方法,其特征在于所述的對(duì)被測(cè)物質(zhì)的檢測(cè)包括基于免疫學(xué)反應(yīng)原理的檢測(cè)包括,包括1]酶聯(lián)免疫學(xué)檢測(cè),通過測(cè)定反應(yīng)后溶液顏色的變化,確定被測(cè)物質(zhì)的含量;包括2]熒光免疫學(xué)檢測(cè),通過測(cè)定磁性微球表面熒光物質(zhì)的強(qiáng)度值,確定被測(cè)物質(zhì)的含量。
      14.如權(quán)利要求13所述以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng)的檢測(cè)方法,其特征在于所述的采用檢測(cè)器5檢測(cè)反應(yīng)結(jié)果是CCD拍攝圖像分析結(jié)果,通過光譜儀進(jìn)行比色測(cè)定,或采用激光光源系統(tǒng)對(duì)磁性熒光微球以及微球表面的熒光信號(hào)進(jìn)行結(jié)果的確定。
      全文摘要
      一種以磁性微球介導(dǎo)的微流體分析系統(tǒng),包括微流體裝置、光學(xué)分析系統(tǒng)和設(shè)置于光學(xué)分析系統(tǒng)輸出端的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng),微流體裝置內(nèi)設(shè)置有反應(yīng)載體,光學(xué)分析系統(tǒng)所包括的檢測(cè)器,反應(yīng)通道和檢測(cè)通道的連接處設(shè)置有閥門;反應(yīng)載體為磁性微球或磁性熒光微球。本發(fā)明可在反應(yīng)和清洗過程中可利用磁性微球的磁性控制其過程的準(zhǔn)確進(jìn)行;由于反應(yīng)和檢測(cè)過程可控,因此,反應(yīng)載體可根據(jù)需求選擇粒徑不同的磁性微球或磁性熒光微球??筛鶕?jù)需要將檢測(cè)器設(shè)置在系統(tǒng)的不同位置,檢測(cè)器可使用CCD拍攝圖像的方式分析結(jié)果,通過光譜儀進(jìn)行比色測(cè)定,也可使用激光光源系統(tǒng)對(duì)磁性熒光微球以及微球表面的熒光信號(hào)進(jìn)行結(jié)果的確定。
      文檔編號(hào)G01N33/53GK1598579SQ03134319
      公開日2005年3月23日 申請(qǐng)日期2003年9月18日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月18日
      發(fā)明者崔亞麗, 陳超 申請(qǐng)人:陜西西大北美基因股份有限公司
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