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      時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量和成像方法及其裝置的制作方法

      文檔序號(hào):6101318閱讀:138來源:國(guó)知局
      專利名稱:時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量和成像方法及其裝置的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明是一種可以同時(shí)獲取生物樣品熒光光譜和熒光壽命信息的測(cè)量方法和裝置。由于熒光壽命和熒光光譜分別對(duì)熒光分子所處的微環(huán)境和熒光團(tuán)分子的種類敏感,因此,二者的同時(shí)測(cè)量能夠?yàn)樯镝t(yī)學(xué)檢測(cè)和分析提供互補(bǔ)的功能信息,本發(fā)明將在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)等研究領(lǐng)域以及臨床醫(yī)學(xué)診斷方面具有重要的應(yīng)用。
      背景技術(shù)
      熒光光譜技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)研究及臨床診斷領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的有力工具。由于熒光分子所發(fā)出熒光的光譜取決于熒光團(tuán)的組分、分子種類及其能級(jí)結(jié)構(gòu),因此熒光光譜的測(cè)量提供了一種區(qū)分樣品中熒光分子種類的手段,在臨床診斷中有助于揭示生物組織的各種代謝過程和病變狀態(tài)。熒光壽命的測(cè)量提供了一種和光譜測(cè)量互補(bǔ)的對(duì)比信息,對(duì)于許多熒光光譜相同或類似的分子,通過測(cè)量其熒光壽命完全可以將它們區(qū)分開來;另外,由于熒光壽命和許多分子過程,如淬滅、擴(kuò)散等的馳豫時(shí)間類似,因此,熒光壽命的測(cè)量也提供了熒光分子所處微環(huán)境的信息,可對(duì)pH值、離子濃度(Ca2+,Na+等)、氧壓等生理參數(shù)進(jìn)行定量測(cè)量。時(shí)間分辨熒光光譜技術(shù)已經(jīng)引起了人們的廣泛關(guān)注,并在生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)及分析中獲得應(yīng)用。
      由于生物醫(yī)學(xué)中熒光團(tuán)(包括自體熒光團(tuán)和外源熒光團(tuán))的種類很多,熒光壽命范圍很寬,一般在幾百ps到幾十ns,甚至到幾百ns,因此時(shí)間分辨熒光光譜的測(cè)量,除要求具有很高的靈敏度和特異性外,還要求系統(tǒng)測(cè)量時(shí)間短、時(shí)間和光譜分辨率高、壽命測(cè)量范圍寬以及能夠同時(shí)測(cè)量各個(gè)波長(zhǎng)處的熒光壽命。目前常用的時(shí)間分辨熒光光譜裝置無法滿足這些要求,其原因在于用于時(shí)間和光譜測(cè)量的探測(cè)器是分離的器件,沒有很好地將光譜測(cè)量和壽命測(cè)量結(jié)合,因此,所得到的要么是一些有限的分立光譜的熒光壽命(如將時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)器和多色儀結(jié)合),要么是需要通過多次測(cè)量來獲得樣品的時(shí)間分辨光譜信息,測(cè)量時(shí)間很長(zhǎng)(如掃描單色儀和脈沖取樣測(cè)量或成像光譜儀和門控脈沖像增強(qiáng)器結(jié)合)。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明采用皮秒掃描相機(jī)作為探測(cè)器,用色散器件對(duì)樣品所發(fā)出的熒光進(jìn)行分光,其色散方向與掃描相機(jī)的狹縫一致,與相機(jī)的掃描方向垂直,一次測(cè)量就可以獲得樣品時(shí)間分辨的熒光光譜信息。
      本發(fā)明的原理及裝置的舉例說明如圖1所示,主要由高重復(fù)頻率超短脈沖激光器101、脈沖提取器102、擴(kuò)束透鏡107和108、光電轉(zhuǎn)換器105、數(shù)字延遲器106、顯微物鏡110、分光棱鏡113、聚焦透鏡114、皮秒掃描相機(jī)115、CCD讀出系統(tǒng)116以及計(jì)算機(jī)117等組成。
      本發(fā)明在高重復(fù)頻率超短脈沖激光器如飛秒激光器光路中采用了脈沖提取裝置,將高重復(fù)頻率超短脈沖激光器如鈦寶石激光器輸出的超短脈沖重復(fù)頻率從76MHz降到≤1MHz,因此可測(cè)的熒光壽命范圍可從皮秒級(jí)到微秒級(jí)。
      本發(fā)明采用特殊設(shè)計(jì)的擴(kuò)束鏡對(duì)激光束進(jìn)行均勻擴(kuò)束,以充分利用顯微物鏡的數(shù)值孔徑,并通過顯微物鏡對(duì)樣品進(jìn)行高空間分辨照明,通過多光子或單光子激發(fā),使樣品被照明的點(diǎn)發(fā)出熒光。
      本發(fā)明用一個(gè)分光棱鏡實(shí)現(xiàn)熒光光譜分辨,分光后的光束再經(jīng)過一個(gè)聚焦透鏡后在掃描相機(jī)的狹縫上形成沿狹縫方向色散開的熒光譜線。
      本發(fā)明利用一個(gè)三維微位移系統(tǒng),通過樣品的三維微位移,可以選擇對(duì)樣品中的不同位置和深度進(jìn)行時(shí)間分辨熒光光譜的測(cè)量。
      本發(fā)明采用特殊設(shè)計(jì)的掃描變像管和斜坡電壓掃描電路,可在≤1MHz的重復(fù)頻率下工作,并可在相同的重復(fù)頻率下送出具有不同斜率的斜坡電壓脈沖,從而可提供不同的時(shí)間分辨率和不同的時(shí)間量程。
      本發(fā)明通過圖像增強(qiáng)技術(shù)、高效光耦合技術(shù)和同步掃描工作模式,實(shí)現(xiàn)對(duì)微弱信號(hào)的高靈敏度探測(cè)。
      本發(fā)明采用特殊設(shè)計(jì)的光學(xué)系統(tǒng)或光錐實(shí)現(xiàn)同步掃描變像管熒光屏和CCD讀出系統(tǒng)之間的高效光耦合。通過CCD實(shí)時(shí)讀出系統(tǒng)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和記錄樣品的熒光光譜和時(shí)間分辨熒光強(qiáng)度等數(shù)據(jù)信息。


      圖1時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量方法及其裝置。
      圖2時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量方法示意圖-1。
      圖3時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量方法示意圖-2。
      圖4時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量方法示意圖-3。
      具體實(shí)施例方式
      下面結(jié)合附圖對(duì)技術(shù)方案的實(shí)施作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
      圖1中,由高重復(fù)頻率超短光脈沖激光器如鈦寶石鎖模飛秒激光器101,輸出的超短脈沖經(jīng)過脈沖提取器102后,重復(fù)頻率從76MHz降到≤1MHz,通過反射鏡103反射到時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量系統(tǒng)的光學(xué)平臺(tái)上,被分束鏡104分為兩束光,其中一束光的能量較低,用于觸發(fā)光電探測(cè)器PIN105,通過數(shù)字延遲器106后,輸入到掃描相機(jī)115用以觸發(fā)掃描電路;另外一束光為主光束,用于激發(fā)樣品。主光束經(jīng)一對(duì)擴(kuò)束透鏡107和108擴(kuò)束,通過雙色鏡109后,平行照射到顯微物鏡110的后焦面,在樣品112上會(huì)聚成一點(diǎn),用于對(duì)樣品的雙光子激發(fā)。樣品所發(fā)出的熒光被顯微物鏡收集,形成平行光束,經(jīng)過棱鏡分光系統(tǒng)113后,被聚焦透鏡114會(huì)聚到掃描相機(jī)115的光電陰極上,并且光譜的色散方向與狹縫方向一致,與掃描相機(jī)的掃描方向垂直。通過掃描電路和同步掃描變像管偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)的共同作用,可測(cè)量出不同光譜的熒光壽命,即實(shí)現(xiàn)熒光光譜和熒光壽命的同時(shí)測(cè)量。通過特殊設(shè)計(jì)的光學(xué)系統(tǒng)或光錐實(shí)現(xiàn)同步掃描變像管熒光屏與CCD116的光耦合。通過該實(shí)時(shí)讀出系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)117,可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和記錄樣品的熒光光譜和時(shí)間分辨熒光強(qiáng)度等數(shù)據(jù)信息。通過高精度樣品臺(tái)111的三維移動(dòng),可選擇對(duì)樣品上不同位置和深度進(jìn)行同時(shí)熒光光譜和壽命的測(cè)量。
      圖2中,由高重復(fù)頻率超短光脈沖激光器如鈦寶石鎖模飛秒激光器201輸出的近紅外超短脈沖經(jīng)過脈沖提取器202后,重復(fù)頻率從76MHz降到≤1MHz。低重復(fù)頻率的光脈沖通過倍頻器203后,波長(zhǎng)變?yōu)樵瓉淼囊话?,通過反射鏡204反射到時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量系統(tǒng)的光學(xué)平臺(tái)上,被分束鏡205分為兩束光,其中一束光的能量較低,用于觸發(fā)光電探測(cè)器PIN206,通過數(shù)字延遲器207后,輸入到掃描相機(jī)216用以觸發(fā)掃描電路;另外一束光為主光束,用于激發(fā)樣品。主光束經(jīng)一對(duì)擴(kuò)束透鏡208和209擴(kuò)束,通過雙色鏡210后,平行照射到顯微物鏡211的后焦面,在樣品213上會(huì)聚成一點(diǎn),用于對(duì)樣品的單光子激發(fā)。樣品所發(fā)出的熒光被顯微物鏡收集,形成平行光束,經(jīng)過棱鏡分光系統(tǒng)214后,被聚焦透鏡215會(huì)聚到掃描相機(jī)216的光電陰極上,并且光譜的色散方向與狹縫方向一致,與掃描相機(jī)的掃描方向垂直。通過掃描電路和同步掃描變像管偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)的共同作用,可測(cè)量出不同光譜的熒光壽命,即實(shí)現(xiàn)熒光光譜和熒光壽命的同時(shí)測(cè)量。通過特殊設(shè)計(jì)的光學(xué)系統(tǒng)或光錐實(shí)現(xiàn)同步掃描變像管熒光屏與CCD217的光耦合。通過該實(shí)時(shí)讀出系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)218,可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和記錄樣品的熒光光譜和時(shí)間分辨熒光強(qiáng)度等數(shù)據(jù)信息。通過高精度樣品臺(tái)212的三維移動(dòng),可選擇對(duì)樣品上不同位置和深度進(jìn)行同時(shí)熒光光譜和壽命的測(cè)量。
      圖3中,由輸出波長(zhǎng)為近紫外或藍(lán)紫光的、重復(fù)頻率可調(diào)的超短光脈沖激光器301輸出的超短脈沖,通過反射鏡302反射到時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量系統(tǒng)的光學(xué)平臺(tái)上,被分束鏡303分為兩束光,其中一束光的能量較低,用于觸發(fā)光電探測(cè)器PIN304,通過數(shù)字延遲器305后,輸入到掃描相機(jī)314用以觸發(fā)掃描電路;另外一束光為主光束,用于激發(fā)樣品。主光束經(jīng)一對(duì)擴(kuò)束透鏡306和307擴(kuò)束,通過雙色鏡308后,平行照射到顯微物鏡309的后焦面,在樣品311上會(huì)聚成一點(diǎn),用于對(duì)樣品的單光子激發(fā)。樣品所發(fā)出的熒光被顯微物鏡收集,形成平行光束,經(jīng)過棱鏡分光系統(tǒng)312后,被聚焦透鏡313會(huì)聚到掃描相機(jī)314的光電陰極上,并且光譜的色散方向與狹縫方向一致,與掃描相機(jī)的掃描方向垂直。通過掃描電路和同步掃描變像管偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)的共同作用,可測(cè)量出不同光譜的熒光壽命,即實(shí)現(xiàn)熒光光譜和熒光壽命的同時(shí)測(cè)量。通過特殊設(shè)計(jì)的光學(xué)系統(tǒng)或光錐實(shí)現(xiàn)同步掃描變像管熒光屏與CCD315的光耦合。通過該實(shí)時(shí)讀出系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)316,可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和記錄樣品的熒光光譜和時(shí)間分辨熒光強(qiáng)度等數(shù)據(jù)信息。通過高精度樣品臺(tái)310的三維移動(dòng),可選擇對(duì)樣品上不同位置和深度進(jìn)行同時(shí)熒光光譜和壽命的測(cè)量。
      圖4中,401是時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量系統(tǒng)的光源,該光源既可以是飛秒超短光脈沖激光器耦合脈沖提取器(如圖1所示),又可以是飛秒光脈沖激光器和脈沖提取器輸出的倍頻光(如圖2所示),或者是輸出波長(zhǎng)為近紫外或藍(lán)紫光的、重復(fù)頻率可調(diào)的超短光脈沖激光器(如圖3所示)。401的輸出通過反射鏡402反射到時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量系統(tǒng)的光學(xué)平臺(tái)上,被分束鏡403分為兩束光,其中一束光的能量較低,用于觸發(fā)光電探測(cè)器PIN404,通過數(shù)字延遲器405后,輸入到掃描相機(jī)414用以觸發(fā)掃描電路;另外一束光為主光束,用于激發(fā)樣品。主光束經(jīng)一對(duì)擴(kuò)束透鏡406和407擴(kuò)束,通過雙色鏡408后,平行照射到顯微物鏡409的后焦面,在樣品411上會(huì)聚成一點(diǎn),用于對(duì)樣品的單光子或雙光子的激發(fā)。樣品所發(fā)出的熒光被顯微物鏡收集,經(jīng)過光學(xué)系統(tǒng)412后輸入到棱鏡或光柵光譜儀413中分光,然后成像到掃描相機(jī)414的光電陰極上,光譜的色散方向與狹縫方向一致,并與掃描相機(jī)的掃描方向垂直。通過掃描電路和同步掃描變像管偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)的共同作用,可測(cè)量出不同光譜的熒光壽命,即實(shí)現(xiàn)熒光光譜和熒光壽命的同時(shí)測(cè)量。通過特殊設(shè)計(jì)的光學(xué)系統(tǒng)或光錐實(shí)現(xiàn)同步掃描變像管熒光屏與CCD相機(jī)415的光耦合。通過該實(shí)時(shí)讀出系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)416,可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和記錄樣品的熒光光譜和時(shí)間分辨熒光強(qiáng)度等數(shù)據(jù)信息。通過高精度樣品臺(tái)410的三維移動(dòng),可選擇對(duì)樣品上不同位置和深度進(jìn)行同時(shí)熒光光譜和壽命的測(cè)量。
      綜上所述,本發(fā)明利用超短脈沖飛秒激光器或近紫外和藍(lán)紫光的超短脈沖激光器實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的單或雙光子激發(fā),通過物鏡收集樣品所發(fā)出的熒光,并利用棱鏡或光柵分光系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行分光,當(dāng)色散方向與掃描相機(jī)的狹縫方向一致,并與掃描方向垂直時(shí),就可以同時(shí)獲取樣品的熒光光譜信息和壽命信息。解決了目前同時(shí)熒光光譜和熒光壽命測(cè)量中的測(cè)量時(shí)間長(zhǎng)、時(shí)間分辨率不夠高、壽命測(cè)量范圍不夠?qū)挼葐栴},對(duì)實(shí)時(shí)、在體觀察和分析生物體具有重要的應(yīng)用價(jià)值,可廣泛用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)等研究領(lǐng)域以及臨床醫(yī)學(xué)診斷方面。
      權(quán)利要求
      1.一種同時(shí)測(cè)量熒光光譜和熒光壽命或者時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量的方法,其特征是將高重復(fù)頻率激光器、脈沖提取器、熒光顯微鏡、樣品臺(tái)、微位移系統(tǒng)、分光棱鏡、皮秒掃描相機(jī)、CCD相機(jī)與計(jì)算機(jī)數(shù)字處理技術(shù)結(jié)合起來,形成一套基于高重復(fù)頻率皮秒同步掃描相機(jī)的時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量系統(tǒng)或熒光光譜和熒光壽命同時(shí)測(cè)量系統(tǒng)。該系統(tǒng)采用擴(kuò)束鏡和顯微物鏡實(shí)現(xiàn)樣品的高效單光子或多光子激發(fā);用一個(gè)分光棱鏡實(shí)現(xiàn)樣品所發(fā)熒光的光譜分辨;通過選擇光譜的色散方向與掃描相機(jī)的狹縫方向一致,并與變像管偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)的偏轉(zhuǎn)方向垂直,可實(shí)現(xiàn)熒光光譜和熒光壽命的同時(shí)測(cè)量,或?qū)崿F(xiàn)熒光光譜的測(cè)量,或?qū)崿F(xiàn)熒光壽命的測(cè)量;通過樣品的三維微位移,可選擇對(duì)樣品上不同位置和深度進(jìn)行熒光光譜和壽命的同時(shí)測(cè)量。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是采用高重復(fù)頻率激光器,如鈦寶石鎖模飛秒激光器或其它高重復(fù)頻率飛秒或皮秒激光器作為多光子或單光子激發(fā)的時(shí)間分辨熒光光譜測(cè)量系統(tǒng)的激發(fā)光源。
      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征是所述的激光器其光譜范圍既可是固定波長(zhǎng)的也可是可調(diào)波長(zhǎng)的,波長(zhǎng)允許變化范圍400-1000nm,其脈沖重復(fù)頻率既可是固定的,也可在一定的范圍內(nèi)改變,但每一次工作頻率應(yīng)當(dāng)是穩(wěn)定的,重復(fù)頻率變化范圍Hz-500MHz。
      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是在高重復(fù)頻率激光器光路中采用脈沖提取裝置,將高重復(fù)頻率激光器輸出的超短脈沖重復(fù)頻率從50MHz-500MHz降到50kHz-1MHz。
      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是擴(kuò)束鏡采用特殊設(shè)計(jì),可以對(duì)激光束均勻擴(kuò)束,使光束能量在空間的分布均勻化。
      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是用一個(gè)具有大數(shù)值孔徑的顯微物鏡,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的高效雙光子或單光子激發(fā)。
      7.根據(jù)權(quán)利要求1和6所述的方法,其特征是從樣品發(fā)出的熒光通過顯微物鏡收集放大后,形成平行熒光光束。
      8.根據(jù)權(quán)利要求1和7所述的方法,其特征是通過顯微物鏡所形成的熒光變成平行光,再通過分光棱鏡分光,實(shí)現(xiàn)光譜分辨。
      9.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的方法,系統(tǒng)的色散元件可以是棱鏡,也可以光柵。
      10.根據(jù)權(quán)利要求1、8和9所述的方法,系統(tǒng)的光譜分辨率可以通過更換棱鏡或光柵進(jìn)行改變。
      11.根據(jù)權(quán)利要求1和9所述的方法,光柵分光系統(tǒng),既可以只包含單個(gè)光柵,也可以包含多個(gè)光柵。
      12.根據(jù)權(quán)利1和11所述的方法,光柵分光系統(tǒng)既可以是掃描輸出單個(gè)波長(zhǎng)的單色儀,也可以是連續(xù)輸出的多色儀。
      13.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的方法,其特征是位于棱鏡和同步掃描相機(jī)光電陰極之間的會(huì)聚透鏡可以由不同焦距的單透鏡或復(fù)合透鏡來代替。
      14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是熒光顯微鏡為多光子或單光子激發(fā)共焦顯微鏡,由于所完成的特殊設(shè)計(jì),在400-1000nm光譜范圍內(nèi)都具有高的空間分辨率。
      15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是同步掃描變像管具有大工作面積的光電陰極,具有好的像質(zhì)和小的時(shí)間畸變的電子光學(xué)聚焦系統(tǒng),具有滿足寬電子束像質(zhì)要求的偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)。
      16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是所設(shè)計(jì)的掃描電路可以在50kHz-1MH重復(fù)頻率下正常工作,并在相同的工作頻率下可以具有不同的掃描電壓斜率,從而獲得不同的時(shí)間量程和時(shí)間分辨率。
      17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是快速光電轉(zhuǎn)換器在超短光脈沖作用下產(chǎn)生電脈沖,并用該電脈沖觸發(fā)掃描電路,產(chǎn)生所需的高壓高重復(fù)頻率斜坡電壓脈沖,用于驅(qū)動(dòng)同步掃描變像管的偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)。
      18.根據(jù)權(quán)利要求1和17所述的方法,其特征是在快速光電轉(zhuǎn)換器之前引入可變光延時(shí)器或在光電轉(zhuǎn)換器和掃描電路之間引入一可變電延時(shí)器,通過調(diào)節(jié)其延時(shí)使入射到同步掃描變像管光電陰極上的光脈沖產(chǎn)生的電子脈沖與加在偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)上的斜坡電壓脈沖同步。
      19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是同步掃描相機(jī)的時(shí)間掃描方向相對(duì)于分光系統(tǒng)的色散方向垂直,從而可精確測(cè)量不同光譜的熒光壽命。
      20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是采用CCD實(shí)時(shí)讀出系統(tǒng),且CCD實(shí)時(shí)讀出系統(tǒng)和同步掃描變像管之間的光耦合或者通過光學(xué)透鏡或者通過光錐實(shí)現(xiàn)。
      21.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征是采用三維微位移系統(tǒng),通過樣品的三維微位移,可以選擇對(duì)樣品上不同位置和深度進(jìn)行同時(shí)熒光光譜和熒光壽命的測(cè)量。
      22.根據(jù)權(quán)利要求1和21所述的方法,其特征是采用三維微位移系統(tǒng)或樣品臺(tái),通過對(duì)樣品的移動(dòng),實(shí)現(xiàn)樣品兩維或三維熒光光譜和壽命的測(cè)量或成像。
      23.根據(jù)權(quán)利要求1和21所述的方法,其特征是采用光束掃描裝置,使激發(fā)光點(diǎn)在樣品上做兩維快速掃描,實(shí)現(xiàn)樣品兩維熒光光譜和壽命的測(cè)量和成像。
      全文摘要
      本發(fā)明是一種利用皮秒掃描相機(jī)同時(shí)獲取樣品熒光光譜和熒光壽命信息的測(cè)量方法和裝置。從超短脈沖激光器所發(fā)出的藍(lán)紫光或近紅外光在擴(kuò)束后被物鏡聚焦到樣品上用于樣品的單光子或雙光子激發(fā),樣品所發(fā)出的熒光被物鏡收集后由分光元件分光,通過聚束透鏡會(huì)聚成像在皮秒掃描相機(jī)的光電陰極上。熒光的色散方向與掃描相機(jī)的狹縫方向相同,與掃描方向垂直,通過掃描電路和掃描變像管偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)的共同作用,可以同時(shí)測(cè)量出不同光譜的熒光壽命。由于熒光壽命和熒光光譜分別對(duì)熒光分子所處的微環(huán)境和熒光團(tuán)分子的種類敏感,因此,二者的同時(shí)測(cè)量能夠?yàn)樯镝t(yī)學(xué)檢測(cè)和分析提供互補(bǔ)的功能信息,本發(fā)明將在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)等研究領(lǐng)域以及臨床醫(yī)學(xué)診斷方面具有重要的應(yīng)用。
      文檔編號(hào)G01N21/01GK1912587SQ200510092520
      公開日2007年2月14日 申請(qǐng)日期2005年8月12日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月12日
      發(fā)明者屈軍樂, 牛憨笨, 劉立新, 陳丹妮, 林子揚(yáng), 郭寶平 申請(qǐng)人:深圳大學(xué)
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