專(zhuān)利名稱(chēng)：一種血脂康膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥膠囊劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，特別涉及血脂康膠囊的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
血脂康膠囊是以中藥紅曲為原料，經(jīng)按照第200510134728.4號(hào)專(zhuān)利工藝研制而成的具有除濕祛痰、活血化瘀、健脾消食等功效的產(chǎn)品。臨床還用于治療高血脂癥及動(dòng)脈硬化引起的心腦血管疾病。隨著血脂康膠囊知名度的提高，市場(chǎng)上已出現(xiàn)一些假冒產(chǎn)品，這些產(chǎn)品嚴(yán)重危害人民的生命安全，而現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅以測(cè)定單一成分洛伐他汀含量為指標(biāo)，較難區(qū)別假冒產(chǎn)品。另外，單一的含量測(cè)定指標(biāo)也無(wú)法全面反映并控制制劑質(zhì)量，為提高藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，必須建立藥品指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種血脂康膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法。
本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明血脂康膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法包括指紋圖譜的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法包括如下步驟照高效液相色譜法測(cè)定，《中華人民共和國(guó)藥典》一部附錄VID；色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％磷酸為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm；柱溫為室溫；流速為1.0ml/min；參照物溶液的制備，精密稱(chēng)取洛伐他汀對(duì)照品1mg于5ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度，即得；供試品溶液的制備，取血脂康膠囊內(nèi)容物0.3g，加入乙腈2ml，超聲提取10～20min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即為供試品溶液；測(cè)定法，將供試品溶液10μl，注入高效液相色譜儀，記錄55min色譜。試品指紋圖譜應(yīng)與對(duì)照指紋圖譜有良好的相似性，相似度＞0.90(以《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)B版》計(jì)算，國(guó)家藥典委員會(huì)頒)；
上述測(cè)定方法中流動(dòng)相梯度洗脫程序?yàn)?～45分鐘流動(dòng)相A體積比由25％線性上升到84％，流動(dòng)相B體積比由75％線性下降到16％；45～55分鐘流動(dòng)相A體積比由84％線性下降到25％，流動(dòng)相B體積比由16％線性上升到75％；55～65分鐘流動(dòng)相A體積比保持為25％、流動(dòng)相B體積比保持為75％。其中指紋圖譜完成時(shí)間為55分鐘，55～65分鐘為系統(tǒng)平衡時(shí)間。
上述測(cè)定方法中的色譜柱優(yōu)選Apollo C18柱，規(guī)格為250×4.6mm、5μm。上述測(cè)定方法中波長(zhǎng)檢測(cè)器為DAD檢測(cè)器。
血脂康膠囊指紋圖譜可以有15個(gè)共有指紋峰，參照峰為洛伐他汀S；15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315±0.002，2號(hào)峰為0.328±0.002，3號(hào)峰為0.378±0.002，4號(hào)峰為0.397±0.006，5號(hào)峰為0.447±0.001，6號(hào)峰為0.566±0.001，7號(hào)峰為0.593±0.001，8號(hào)峰為0.683±0.003，9號(hào)峰為0.784±0.001，10號(hào)峰為0.834±0.001，11號(hào)峰為0.895±0.000，12號(hào)峰為0.920±0.000，13號(hào)峰為0.952±0.000，14號(hào)峰即S峰為1.000±0.000，15號(hào)峰為1.225±0.001；15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191±0.028，2號(hào)峰0.031±0.005，3號(hào)峰0.1269±0.031，4號(hào)峰0.061±0.027，5號(hào)峰0.307±0.047，6號(hào)峰0.067±0.012，7號(hào)峰0.132±0.021，8號(hào)峰0.032±0.013，9號(hào)峰0.073±0.008，10號(hào)峰0.073±0.015，11號(hào)峰0.115±0.030，12號(hào)峰0.083±0.010，13號(hào)峰0.039±0.010，14號(hào)峰即S峰1.000±0.000，15號(hào)峰0.119±0.036。
其中，15個(gè)共有指紋峰的優(yōu)選相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315，2號(hào)峰為0.328，3號(hào)峰為0.378，4號(hào)峰為0.3968，5號(hào)峰為0.447，6號(hào)峰為0.566，7號(hào)峰為0.593，8號(hào)峰為0.683，9號(hào)峰為0.784，10號(hào)峰為0.834，11號(hào)峰為0.895，12號(hào)峰為0.920，13號(hào)峰為0.952，14號(hào)峰即S峰為1.000，15號(hào)峰為1.225；15個(gè)共有指紋峰的優(yōu)選相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191，2號(hào)峰0.031，3號(hào)峰0.126，4號(hào)峰0.061，5號(hào)峰0.307，6號(hào)峰0.067，7號(hào)峰0.132，8號(hào)峰0.032，9號(hào)峰0.073，10號(hào)峰0.073，11號(hào)峰0.115，12號(hào)峰0.083，13號(hào)峰0.039，14號(hào)峰即S峰1.000，15號(hào)峰0.119。
血脂康膠囊指紋圖譜還可以在上述15個(gè)共有指紋峰中選用9個(gè)共有峰作為指紋圖譜，參照峰為洛伐他汀S；9個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315±0.002，2號(hào)峰為0.328±0.002，3號(hào)峰為0.378±0.002，4號(hào)峰為0.397±0.006，5號(hào)峰為0.447±0.001，6號(hào)峰為0.566±0.001，7號(hào)峰為0.593±0.001，14號(hào)峰即S峰為1.000±0.000，15號(hào)峰為1.225±0.001；9個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191±0.028，2號(hào)峰0.031±0.005，3號(hào)峰0.1269±0.031，4號(hào)峰0.061±0.027，5號(hào)峰0.307±0.047，6號(hào)峰0.067±0.012，7號(hào)峰0.132±0.021，14號(hào)峰即S峰1.000±0.000，15號(hào)峰0.119±0.036。
其中，9個(gè)共有指紋峰的優(yōu)選相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315，2號(hào)峰為0.328，3號(hào)峰為0.378，4號(hào)峰為0.3968，5號(hào)峰為0.447，6號(hào)峰為0.566，7號(hào)峰為0.593，14號(hào)峰即S峰為1.000，15號(hào)峰為1.225；9個(gè)共有指紋峰的優(yōu)選相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191，2號(hào)峰0.031，3號(hào)峰0.126，4號(hào)峰0.061，5號(hào)峰0.307，6號(hào)峰0.067，7號(hào)峰0.132，14號(hào)峰即S峰1.000，15號(hào)峰0.119。
采用本發(fā)明指紋圖譜檢測(cè)方法對(duì)血脂康膠囊進(jìn)行質(zhì)量控制后，提高了血脂康膠囊的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，保證了該藥物的功效，而且本發(fā)明指紋圖譜測(cè)定方法操作起來(lái)具有簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。


圖1本發(fā)明血脂康膠囊(15峰)指紋圖譜圖2流動(dòng)相系統(tǒng)為甲醇-0.05％磷酸的血脂康膠囊指紋圖譜圖3流動(dòng)相系統(tǒng)為甲醇-乙腈-0.05％磷酸的血脂康膠囊指紋圖譜圖4流動(dòng)相系統(tǒng)為乙腈-水的血脂康膠囊指紋圖譜圖5流動(dòng)相系統(tǒng)為乙腈-0.1％磷酸的血脂康膠囊指紋圖譜下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)例 血脂康膠囊指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法的研究1.供試品溶液的制備血脂康膠囊為紅曲的75％乙醇提取物，比較甲醇、75％乙醇、乙腈三種提取溶劑，三者提取物的指紋圖譜概貌相同，但乙腈提取液顏色淺很多，色譜圖中tR＜10min的色素成分溶出相對(duì)較少。三者tR＞10min的共有指紋峰相似，為減少柱污染，延長(zhǎng)柱壽命，采用乙腈作為提取溶劑。
比較超聲提取和加熱回流提取，前者方法簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好。
比較超聲提取5min、10min、20min的色譜圖，10min后，指紋圖譜中各物質(zhì)提取率變化不大，所以提取時(shí)間確定為10min。
采用HP-20和D-101大孔吸附樹(shù)脂祛除色素干擾，效果不理想，重現(xiàn)性差；硅膠、氧化鋁祛除色素效果較好，但共有峰損失較多，不予采用。
2.參照物溶液的制備洛伐他汀是血脂康膠囊的降血脂活性成分，含量大并且性質(zhì)穩(wěn)定，適合作為參照物。
3.檢測(cè)方法(1)色譜柱的選擇相同條件下，比較了Apollo，YMC，Kromasil三種C18色譜柱(250×4.6mm，5μm)，三者對(duì)樣品勻有良好分離，Apollo柱使用壽命更長(zhǎng)，性?xún)r(jià)比更高。
(2)流動(dòng)相的選擇共篩選了5種組成及梯度不同的流動(dòng)相系統(tǒng)甲醇-0.05％磷酸(見(jiàn)附圖2)、甲醇-乙腈-0.05％磷酸(見(jiàn)附圖3)、乙腈-水(見(jiàn)附圖4)、乙腈-0.05％磷酸(見(jiàn)附圖1)、乙腈-0.1％磷酸(見(jiàn)附圖5)。結(jié)果表明，以乙腈-0.05％磷酸按上述條件梯度洗脫，圖譜基線平穩(wěn)，各色譜峰分離良好，指紋圖譜完成時(shí)間適中。
(3)檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇血脂康膠囊中有紫外吸收的物質(zhì)主要為色素、黃酮、他汀。本試驗(yàn)采用DAD檢測(cè)器，經(jīng)比較在256nm下，圖譜基線平穩(wěn)，各色譜峰分離度良好，吸收度適中，因此選擇256nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。
(4)方法學(xué)考察①血脂康膠囊指紋圖譜精密度試驗(yàn)取同一供試品溶液，按上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5針，結(jié)果見(jiàn)表1。各指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜比較相似度＞0.90；表1 血脂康膠囊指紋圖譜精密度考察結(jié)果

②血脂康膠囊指紋圖譜穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，按上述色譜條件分別于0、8、16、24、36h進(jìn)樣，結(jié)果見(jiàn)表2。各指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜比較相似度＞0.90，結(jié)果表明供試品溶液在36h內(nèi)穩(wěn)定；表2 血脂康膠囊指紋圖譜穩(wěn)定性考察結(jié)果

③血脂康膠囊指紋圖譜重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一供試品，分別制備5份供試品溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果見(jiàn)表3。各指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜比較相似度＞0.90，結(jié)果表明方法重現(xiàn)性良好。
表3 血脂康膠囊指紋圖譜重現(xiàn)性考察結(jié)果

實(shí)施例1血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法采用指紋圖譜檢測(cè)方法所用儀器Waters 600-996-717高效液相色譜儀(梯度滯后時(shí)間為2.75min)，Millennium32色譜工作站；色譜柱Apollo C18(4.6mm*250mm，5μ)分析柱，TIANHE(P/NTH0011，5μ，C18)保護(hù)柱；該方法按如下步驟檢測(cè)照高效液相色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》一部附錄VID)，結(jié)合指紋圖譜要求測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％磷酸為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm；柱溫為室溫；流速為1.0ml/min；
參照物溶液的制備，精密稱(chēng)取洛伐他汀對(duì)照品1mg于5ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度，即得；供試品溶液的制備，取血脂康膠囊內(nèi)容物0.3g，加入乙腈2ml，超聲提取10min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即為供試品溶液；測(cè)定法，分別將各批供試品溶液10μl注入高效液相色譜儀，記錄55min色譜。
供試品指紋圖譜應(yīng)與對(duì)照指紋圖譜有良好的相似性，相似度＞0.90(以《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)B版》計(jì)算，國(guó)家藥典委員會(huì)頒)。
實(shí)施例2血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法采用指紋圖譜檢測(cè)方法所用儀器Waters 600-996-717高效液相色譜儀(梯度滯后時(shí)間為2.75min)，Millennium32色譜工作站；色譜柱Apollo C18(4.6mm*250mm，5μ)分析柱，TIANHE(P/NTH0011，5μ，C18)保護(hù)柱；該方法按如下步驟檢測(cè)照高效液相色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》一部附錄VID)，結(jié)合指紋圖譜要求測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％磷酸為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫，流動(dòng)相梯度洗脫程序?yàn)?～45分鐘流動(dòng)相A體積比由25％線性上升到84％，流動(dòng)相B體積比由75％線性下降到16％；45～55分鐘流動(dòng)相A體積比由84％線性下降到25％，流動(dòng)相B體積比由16％線性上升到75％；55～65分鐘流動(dòng)相A體積比保持為25％、流動(dòng)相B體積比保持為75％；其中指紋圖譜完成時(shí)間為55分鐘，55～65分鐘為系統(tǒng)平衡時(shí)間；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm；柱溫為室溫；流速為1.0ml/min；參照物溶液的制備，精密稱(chēng)取洛伐他汀對(duì)照品1mg于5ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度，即得；供試品溶液的制備，取血脂康膠囊內(nèi)容物0.3g，加入乙腈2ml，超聲提取10min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即為供試品溶液；測(cè)定法，將供試品溶液10μl注入高效液相色譜儀，記錄55min色譜。供試品指紋圖譜應(yīng)與對(duì)照指紋圖譜有良好的相似性，相似度＞0.90(以《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)B版》計(jì)算，國(guó)家藥典委員會(huì)頒)。
實(shí)施例3血脂康膠囊15峰質(zhì)量檢測(cè)方法采用指紋圖譜檢測(cè)方法所用儀器Waters 600-996-717高效液相色譜儀(梯度滯后時(shí)間為2.75min)，Millennium32色譜工作站；色譜柱Apollo C18(4.6mm*250mm，5μ)分析柱，TIANHE(P/NTH0011，5μ，C18)保護(hù)柱；該方法按如下步驟檢測(cè)照高效液相色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》一部附錄VID)，結(jié)合指紋圖譜要求測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％磷酸為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫，流動(dòng)相梯度洗脫程序?yàn)?～45分鐘流動(dòng)相A體積比由25％線性上升到84％，流動(dòng)相B體積比由75％線性下降到16％；45～55分鐘流動(dòng)相A體積比由84％線性下降到25％，流動(dòng)相B體積比由16％線性上升到75％；55～65分鐘流動(dòng)相A體積比保持為25％、流動(dòng)相B體積比保持為75％；其中指紋圖譜完成時(shí)間為55分鐘，55～65分鐘為系統(tǒng)平衡時(shí)間；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm；柱溫為室溫；流速為1.0ml/min；參照物溶液的制備，精密稱(chēng)取洛伐他汀對(duì)照品1mg于5ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度，即得；供試品溶液的制備，取血脂康膠囊內(nèi)容物0.3g，加入乙腈2ml，超聲提取10min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即為供試品溶液；測(cè)定法，將供試品溶液10μl注入高效液相色譜儀，記錄55min色譜；供試品指紋圖譜應(yīng)與對(duì)照指紋圖譜(見(jiàn)附圖1)有良好的相似性，相似度＞0.90(以《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)B版》計(jì)算，國(guó)家藥典委員會(huì)頒)；血脂康膠囊對(duì)照指紋圖譜共有15個(gè)共有指紋峰，參照峰S為洛伐他汀；其中15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315±0.002，2號(hào)峰為0.328±0.002，3號(hào)峰為0.378±0.002，4號(hào)峰為0.397±0.006，5號(hào)峰為0.447±0.001，6號(hào)峰為0.566±0.001，7號(hào)峰為0.593±0.001，8號(hào)峰為0.683±0.003，9號(hào)峰為0.784±0.001，10號(hào)峰為0.834±0.001，11號(hào)峰為0.895±0.000，12號(hào)峰為0.920±0.000，13號(hào)峰為0.952±0.000，14號(hào)峰即S峰為1.000±0.000，15號(hào)峰為1.225±0.001；15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191±0.028，2號(hào)峰0.031±0.005，3號(hào)峰0.1269±0.031，4號(hào)峰0.061±0.027，5號(hào)峰0.307±0.047，6號(hào)峰0.067±0.012，7號(hào)峰0.132±0.021，8號(hào)峰0.032±0.013，9號(hào)峰0.073±0.008，10號(hào)峰0.073±0.015，11號(hào)峰0.115±0.030，12號(hào)峰0.083±0.010，13號(hào)峰0.039±0.010，14號(hào)峰即S峰1.000±0.000，15號(hào)峰0.119±0.036。
實(shí)施例4血脂康膠囊9峰質(zhì)量檢測(cè)方法采用指紋圖譜檢測(cè)方法所用儀器Waters 600-996-717高效液相色譜儀(梯度滯后時(shí)間為2.75min)，Millennium32色譜工作站；色譜柱Apollo C18(4.6mm*250mm，5μ)分析柱，TIANHE(P/NTH0011，5 μ，C18)保護(hù)柱；該方法按如下步驟檢測(cè)照高效液相色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》一部附錄VID)，結(jié)合指紋圖譜要求測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％磷酸為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫，流動(dòng)相梯度洗脫程序?yàn)?～45分鐘流動(dòng)相A體積比由25％線性上升到84％，流動(dòng)相B體積比由75％線性下降到16％；45～55分鐘流動(dòng)相A體積比由84％線性下降到25％，流動(dòng)相B體積比由16％線性上升到75％；55～65分鐘流動(dòng)相A體積比保持為25％、流動(dòng)相B體積比保持為75％；其中指紋圖譜完成時(shí)間為55分鐘，55～65分鐘為系統(tǒng)平衡時(shí)間；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm；柱溫為室溫；流速為1.0ml/min；參照物溶液的制備，精密稱(chēng)取洛伐他汀對(duì)照品1mg于5ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度，即得；供試品溶液的制備，取血脂康膠囊內(nèi)容物0.3g，加入乙腈2ml，超聲提取10min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即為供試品溶液；測(cè)定法，將供試品溶液10μl注入高效液相色譜儀，記錄55min色譜；供試品指紋圖譜應(yīng)與對(duì)照指紋圖譜(見(jiàn)附圖1)有良好的相似性，相似度＞0.90(以《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)B版》計(jì)算，國(guó)家藥典委員會(huì)頒)；血脂康膠囊對(duì)照指紋圖譜共有9個(gè)共有指紋峰，參照峰S為洛伐他汀；9個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315±0.002，2號(hào)峰為0.328±0.002，3號(hào)峰為0.378±0.002，4號(hào)峰為0.397±0.006，5號(hào)峰為0.447±0.001，6號(hào)峰為0.566±0.001，7號(hào)峰為0.593±0.001，14號(hào)峰即S峰為1.000±0.000，15號(hào)峰為1.225±0.001；9個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191±0.028，2號(hào)峰0.031±0.005，3號(hào)峰0.1269±0.031，4號(hào)峰0.061±0.027，5號(hào)峰0.307±0.047，6號(hào)峰0.067±0.012，7號(hào)峰0.132±0.021，14號(hào)峰即S峰1.000±0.000，15號(hào)峰0.119±0.036。
權(quán)利要求
1.一種血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)步驟照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％磷酸為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm；柱溫為室溫；流速為1.0ml/min；參照物溶液的制備，精密稱(chēng)取洛伐他汀對(duì)照品1mg于5ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度，即得；供試品溶液的制備，取血脂康膠囊內(nèi)容物0.3g，加入乙腈2ml，超聲提取10～20min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即為供試品溶液；測(cè)定法，將供試品溶液10μl，注入高效液相色譜儀，記錄55min色譜。
2.如權(quán)利要求1所述的血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)中流動(dòng)相梯度洗脫程序?yàn)?～45分鐘流動(dòng)相A體積比由25％線性上升到84％，流動(dòng)相B體積比由75％線性下降到16％；45～55分鐘流動(dòng)相A體積比由84％線性下降到25％，流動(dòng)相B體積比由16％線性上升到75％；55～65分鐘流動(dòng)相A體積比保持為25％、流動(dòng)相B體積比保持為75％。
3.如權(quán)利要求1或2所述的血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于指紋圖譜有15個(gè)共有指紋峰，參照峰S為洛伐他??；其中15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315±0.002，2號(hào)峰為0.328±0.002，3號(hào)峰為0.378±0.002，4號(hào)峰為0.397±0.006，5號(hào)峰為0.447±0.001，6號(hào)峰為0.566±0.001，7號(hào)峰為0.593±0.001，8號(hào)峰為0.683±0.003，9號(hào)峰為0.784±0.001，10號(hào)峰為0.834±0.001，11號(hào)峰為0.895±0.000，12號(hào)峰為0.920±0.000，13號(hào)峰為0.952±0.000，14號(hào)峰即S峰為1.000±0.000，15號(hào)峰為1.225±0.001；15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191±0.028，2號(hào)峰0.031±0.005，3號(hào)峰0.1269±0.031，4號(hào)峰0.061±0.027，5號(hào)峰0.307±0.047，6號(hào)峰0.067±0.012，7號(hào)峰0.132±0.021，8號(hào)峰0.032±0.013，9號(hào)峰0.073±0.008，10號(hào)峰0.073±0.015，11號(hào)峰0.115±0.030，12號(hào)峰0.083±0.010，13號(hào)峰0.039±0.010，14號(hào)峰即S峰1.000±0.000，15號(hào)峰0.119±0.036。
4.如權(quán)利要求3所述的血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于指紋圖譜有15個(gè)共有指紋峰，參照峰S為洛伐他汀；其中，15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315，2號(hào)峰為0.328，3號(hào)峰為0.378，4號(hào)峰為0.3968，5號(hào)峰為0.447，6號(hào)峰為0.566，7號(hào)峰為0.593，8號(hào)峰為0.683，9號(hào)峰為0.784，10號(hào)峰為0.834，11號(hào)峰為0.895，12號(hào)峰為0.920，13號(hào)峰為0.952，14號(hào)峰即S峰為1.000，15號(hào)峰為1.225；15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191，2號(hào)峰0.031，3號(hào)峰0.126，4號(hào)峰0.061，5號(hào)峰0.307，6號(hào)峰0.067，7號(hào)峰0.132，8號(hào)峰0.032，9號(hào)峰0.073，10號(hào)峰0.073，11號(hào)峰0.115，12號(hào)峰0.083，13號(hào)峰0.039，14號(hào)峰即S峰1.000，15號(hào)峰0.119。
5.一種血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下步驟照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％磷酸為流動(dòng)相B按如下洗脫程序進(jìn)行梯度洗脫；0～45分鐘流動(dòng)相A體積比由25％線性上升到84％，流動(dòng)相B體積比由75％線性下降到16％；45～55分鐘流動(dòng)相A體積比由84％線性下降到25％，流動(dòng)相B體積比由16％線性上升到75％；55～65分鐘流動(dòng)相A體積比保持為25％、流動(dòng)相B體積比保持為75％；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm；柱溫為室溫；流速為1.0ml/min；參照物溶液的制備，精密稱(chēng)取洛伐他汀對(duì)照品1mg于5ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度，即得；供試品溶液的制備，取血脂康膠囊內(nèi)容物0.3g，加入乙腈2ml，超聲提取10min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即為供試品溶液；測(cè)定法，將供試品溶液10μl，注入高效液相色譜儀，記錄55min色譜；血脂康膠囊對(duì)照指紋圖譜共有15個(gè)共有指紋峰，參照峰S為洛伐他汀；其中15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315±0.002，2號(hào)峰為0.328±0.002，3號(hào)峰為0.378±0.002，4號(hào)峰為0.396±0.006，5號(hào)峰為0.447±0.001，6號(hào)峰為0.566±0.001，7號(hào)峰為0.593±0.001，8號(hào)峰為0.683±0.003，9號(hào)峰為0.784±0.001，10號(hào)峰為0.834±0.001，11號(hào)峰為0.895±0.000，12號(hào)峰為0.920±0.000，13號(hào)峰為0.952±0.000，14號(hào)峰即S峰為1.000±0.000，15號(hào)峰為1.225±0.001；15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191±0.028，2號(hào)峰0.031±0.005，3號(hào)峰0.126±0.031，4號(hào)峰0.061±0.027，5號(hào)峰0.307±0.047，6號(hào)峰0.067±0.012，7號(hào)峰0.132±0.021，8號(hào)峰0.032±0.013，9號(hào)峰0.073±0.008，10號(hào)峰0.073±0.015，11號(hào)峰0.115±0.030，12號(hào)峰0.083±0.010，13號(hào)峰0.039±0.010，14號(hào)峰即S峰1.000±0.000，15號(hào)峰0.119±0.036。
6.如權(quán)利要求5所述的血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下步驟照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％磷酸為流動(dòng)相B按如下洗脫程序進(jìn)行梯度洗脫；0～45分鐘流動(dòng)相A體積比由25％線性上升到84％，流動(dòng)相B體積比由75％線性下降到16％；45～55分鐘流動(dòng)相A體積比由84％線性下降到25％，流動(dòng)相B體積比由16％線性上升到75％；55～65分鐘流動(dòng)相A體積比保持為25％、流動(dòng)相B體積比保持為75％；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm；柱溫為室溫；流速為1.0ml/min；參照物溶液的制備，精密稱(chēng)取洛伐他汀對(duì)照品1mg于5ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度，即得；供試品溶液的制備，取血脂康膠囊內(nèi)容物0.3g，加入乙腈2ml，超聲提取10min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即為供試品溶液；測(cè)定法，將供試品溶液10μl，注入高效液相色譜儀，記錄55min色譜；血脂康膠囊對(duì)照指紋圖譜共有15個(gè)共有指紋峰，參照峰S為洛伐他?。?5個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315，2號(hào)峰為0.328，3號(hào)峰為0.378，4號(hào)峰為0.3968，5號(hào)峰為0.447，6號(hào)峰為0.566，7號(hào)峰為0.593，8號(hào)峰為0.683，9號(hào)峰為0.784，10號(hào)峰為0.834，11號(hào)峰為0.895，12號(hào)峰為0.920，13號(hào)峰為0.952，14號(hào)峰即S峰為1.000，15號(hào)峰為1.225；15個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191，2號(hào)峰0.031，3號(hào)峰0.126，4號(hào)峰0.061，5號(hào)峰0.307，6號(hào)峰0.067，7號(hào)峰0.132，8號(hào)峰0.032，9號(hào)峰0.073，10號(hào)峰0.073，11號(hào)峰0.115，12號(hào)峰0.083，13號(hào)峰0.039，14號(hào)峰即S峰1.000，15號(hào)峰0.119。
7.如權(quán)利要求1或2所述的血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于血脂康膠囊對(duì)照指紋圖譜有9個(gè)共有指紋峰，參照峰S為洛伐他?。?個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315±0.002，2號(hào)峰為0.328±0.002，3號(hào)峰為0.378±0.002，4號(hào)峰為0.397±0.006，5號(hào)峰為0.447±0.001，6號(hào)峰為0.566±0.001，7號(hào)峰為0.593±0.001，14號(hào)峰即S峰為1.000±0.000，15號(hào)峰為1.225±0.001；9個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積比分別為1號(hào)峰0.191±0.028，2號(hào)峰0.031±0.005，3號(hào)峰0.1269±0.031，4號(hào)峰0.061±0.027，5號(hào)峰0.307±0.047，6號(hào)峰0.067±0.012，7號(hào)峰0.132±0.021，14號(hào)峰即S峰1.000±0.000，15號(hào)峰0.119±0.036。
8.如權(quán)利要求7所述的血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于血脂康膠囊對(duì)照指紋圖譜共有9個(gè)共有指紋峰，參照峰S為洛伐他??；9個(gè)共有指紋峰的優(yōu)選相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰為0.315，2號(hào)峰為0.328，3號(hào)峰為0.378，4號(hào)峰為0.3968，5號(hào)峰為0.447，6號(hào)峰為0.566，7號(hào)峰為0.593，14號(hào)峰即S峰為1.000，15號(hào)峰為1.225；9個(gè)共有指紋峰的相對(duì)峰面積分別為1號(hào)峰0.191，2號(hào)峰0.031，3號(hào)峰0.126，4號(hào)峰0.061，5號(hào)峰0.307，6號(hào)峰0.067，7號(hào)峰0.132，14號(hào)峰即S峰1.000，15號(hào)峰0.119。
9.如權(quán)利要求1-8所述的任意一種血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)中色譜柱為Apollo C18色譜柱，規(guī)格為250×4.6mm、5μm。
10.如權(quán)利要求1-8所述的任意一種血脂康膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)中波長(zhǎng)檢測(cè)器為DAD檢測(cè)器。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種血脂康膠囊的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％磷酸為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm；柱溫為室溫；流速為1.0ml/min；稱(chēng)取洛伐他汀對(duì)照品1mg于5ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度得參照物溶液；取血脂康膠囊內(nèi)容物0.3g，加入乙腈2ml，超聲提取10～20min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，得供試品溶液；照高效液相色譜法測(cè)定；供試品指紋圖譜應(yīng)與對(duì)照指紋圖譜有良好的相似性，相似度＞0.90。本發(fā)明指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好。
文檔編號(hào)G01N30/86GK1987449SQ200610145838
公開(kāi)日2007年6月27日 申請(qǐng)日期2006年11月17日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月19日
發(fā)明者段震文, 馬學(xué)敏, 郭樹(shù)仁 申請(qǐng)人:北京維信學(xué)知科技發(fā)展有限公司