專利名稱：一種胃液提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種胃液提取物及其制備方法。
背景技術(shù)：
胃癌是人類常見的惡性腫瘤之一，對(duì)其要早發(fā)現(xiàn)、早治療，才有可能減小其對(duì) 患者的傷害。目前常用的胃癌診斷方法有胃鏡、鋇餐造影等。但是這些方法操作比 較復(fù)雜，費(fèi)用昂貴，敏感性和特異性有限，還會(huì)給患者帶來痛苦。因此，亟待需要 一種快速診斷胃癌的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種胃液提取物。
本發(fā)明所提供的胃液提取物，它的有效組分包括結(jié)構(gòu)與色氨酸類似的、相對(duì)分
子質(zhì)量為216，具有吲哚結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。
其中，所述胃液提取物可以是將離體的胃液進(jìn)行高效液相色譜分離得到的； 所述高效液相色譜分離包括如下步驟以20%(體積百分含量)甲醇和水的混
合溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，混合溶液的流速為lml/min，收集保留時(shí)間為10. 5
11.5min的洗脫峰，即得胃液提取物；
所述高效液相色譜分離中所用的色譜柱的填充介質(zhì)可以為0DS-3，孔徑5um。 所述高效液相色譜分離中在進(jìn)行分離前還可包括將所述離體的胃液進(jìn)行離心
濃縮的步驟。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種制備胃液提取物的方法。
本發(fā)明所提供的制備胃液提取物的方法，是將離體的胃液進(jìn)行高效液相色譜分 離得到胃液提取物；
所述高效液相色譜分離包括如下步驟以20%(體積百分含量)甲醇和水的混 合溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，混合溶被的流速為lml/min，收集保留時(shí)間為10. 5 11.5min的洗脫峰，即得胃液提取物；
其中，所用的色譜柱的填充介質(zhì)可為0DS-3，孔徑5um。
所述高效液相色譜分離中在進(jìn)行分離前還可包括將所述離體的胃液進(jìn)行離心 濃縮的步驟。本發(fā)明的胃液提取物可用來輔助診斷胃癌，具體可以是通過高效液相檢測(cè)提取 物的峰面積值來判斷是否患有胃癌，實(shí)驗(yàn)證明，結(jié)果可靠、安全、快速；另外，本 發(fā)明制備胃液提取物的方法簡(jiǎn)單、省時(shí)省力。因此，本發(fā)明的胃液提取物及其制備 方法在胃癌診斷領(lǐng)域中具有廣闊的應(yīng)用前景。


圖1為胃癌患者和正常人的胃液提取物的高效液相色譜圖。
具體實(shí)施例方式
下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。 下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。 實(shí)施例l、胃液提取物的制備及應(yīng)用 一、制備方法
1、 取離體的人胃液20ml， 3000 rpm離心5min，取上清液10ml，低溫離心濃 縮至500ul。
2、 將上清液進(jìn)行高效液相分離-
色譜柱為InertsilC-18(GL Sciences公司，JAPAN)，柱長(zhǎng)250陽，孔徑4. 6mm， 填充介質(zhì)為ODS-3，孔徑5um;柱溫25"C; 自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣，進(jìn)樣量100ul;
梯度洗脫液為流動(dòng)相的組成為20%的甲醇(A液)-水溶液(B液)；流速
為1 ml/min;梯度洗脫時(shí)間為lh;
檢測(cè)器為熒光檢測(cè)器，檢測(cè)激發(fā)波長(zhǎng)288nm，發(fā)射波長(zhǎng)為330nm; 收集保留時(shí)間為10. 5 11. 5min的洗脫峰，得到胃液提取物，并記錄峰面積值。
梯度洗脫步驟如下
時(shí)間(分) A(%) B(%)
0 10 35 65
11 20 50 50
21 30 65 35
31 40 80 20
41 50 95 5
51 60 100 03、 比較正常人和胃癌患者的胃液提取物的峰面積值
在如上色譜條件下，取20例正常人的離體胃液和20例胃癌患者的離體胃液進(jìn) 行提取。
結(jié)果，正常人的胃液提取物的峰面積值為328553土119425，胃癌患者的胃液提 取物的峰面積值為2225455±1824224 (圖l， A為胃癌患者，B為正常人)。
4、 胃液提取物中組分的鑒定
將上述提取物進(jìn)行質(zhì)譜鑒定MALDI-T0F測(cè)定質(zhì)荷比(m/z)。
結(jié)果測(cè)得，胃液提取物的平均相對(duì)分子質(zhì)量為216，包含色氨酸的吲哚環(huán)。
二、胃液提取物的應(yīng)用
另取20例已知胃癌患者的胃液，按照上述實(shí)驗(yàn)一中所述方法進(jìn)行提取，再進(jìn) 行峰面積值記錄。結(jié)果表明，其峰面積值也均為2225455士1824224。 上述結(jié)果表明，本發(fā)明的胃液提取物可用于輔助診斷胃癌。
權(quán)利要求
1、一種胃液提取物，它的有效組分包括相對(duì)分子質(zhì)量為216且具有吲哚結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的胃液提取物，其特征在于所述胃液提取物是將離體的胃液進(jìn)行高效液相色譜分離得到的；所述高效液相色譜分離包括如下步驟以20%(體積百分含量)甲醇和水的混合溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，混合溶液的流速為lral/min，收集保留時(shí)間為10. 5 11.5min的洗脫峰，即得胃液提取物。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的胃液提取物，其特征在于所述高效液相色譜分離中所用的色譜柱的填充介質(zhì)為0DS-3，孔徑5um。
4、 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的胃液提取物，其特征在于所述高效液相色譜分離中在進(jìn)行分離前包括將所述離體的胃液進(jìn)行離心濃縮的步驟。
5、 一種制備胃液提取物的方法，是將離體的胃液進(jìn)行高效液相色譜分離得到胃液提取物；所述高效液相色譜分離包括如下步驟以20%(體積百分含量)甲醇和水的混合溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，混合溶液的流速為lml/min，收集保留時(shí)間為10. 5 11.5min的洗脫峰，即得胃液提取物。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述高效液相色譜分離中所用的色譜柱的填充介質(zhì)為0DS-3，孔徑5rnn。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述高效液相色譜分離中在進(jìn)行分離前包括將所述離體的胃液進(jìn)行離心濃縮的步驟。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種胃液提取物及其制備方法。該胃液提取物的有效組分包括相對(duì)分子質(zhì)量為216且具有吲哚結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。本發(fā)明的胃液提取物可用來輔助診斷胃癌，具體可以是通過高效液相檢測(cè)提取物的峰面積值來判斷是否患有胃癌，實(shí)驗(yàn)證明，結(jié)果可靠、安全、快速；另外，本發(fā)明制備胃液提取物的方法簡(jiǎn)單、省時(shí)省力。因此，本發(fā)明的胃液提取物及其制備方法在胃癌診斷領(lǐng)域中具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)G01N30/06GK101498696SQ200910078859
公開日2009年8月5日 申請(qǐng)日期2009年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月4日
發(fā)明者周麗雅, 淵 李, 林三仁 申請(qǐng)人:北京大學(xué)第三醫(yī)院