專利名稱：鑒定響應抗癌療法的可能性升高的患者的方法
技術(shù)領域：
本申請致力于用于鑒定哪些患者會最多地受益于抗癌劑治療及對患者監(jiān)測他們對抗癌劑治療的敏感性和響應性的方法。
背景技術(shù)：
癌癥是對人類健康的最致命威脅之一。僅在美國，癌癥每年影響近130萬新患者，而且是位于心血管疾病之后的第二位死因，占4例死亡中的大約I例。實體瘤對大多數(shù)那些死亡負有責任。雖然某些癌癥的醫(yī)學治療中已經(jīng)取得了重大進步，但是所有癌癥的總體5年存活率在最近20年里只改進了約10%。癌癥(或稱作惡性腫瘤)以不受控制的方式快速生長和轉(zhuǎn)移，使得及時檢測和處理極端困難。根據(jù)癌癥類型，患者通常有數(shù)個治療選項可用，包括化療、輻射和基于抗體的藥物。對于預測不同治療方案的臨床結(jié)果有用的診斷方法會大大有利于對這些患者進行臨床安排。如此，需要更有效的手段來確定哪些患者會響應哪種治療、并且將此確定納入對患者更有效的抗癌劑療法治療方案，無論用作單一藥劑或是與其它藥劑組合。發(fā)明概述本發(fā)明提供用于鑒定會響應抗癌劑，例如VEGF-A拮抗劑諸如例如貝伐單抗治療的患者的方法。本發(fā)明的一個實施方案提供鑒定會受益于包含VEGF拮抗劑的抗癌療法治療的患者的方法，該方法包括:測定自患者獲得的樣品中VEGF121和VEGFlltl的表達水平，其中自患者獲得的樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平(例如與參照樣品相比)指示該患者會受益于該抗癌療法的治療。在一些實施方案中，所述癌癥選自下組:結(jié)腸直腸癌，成膠質(zhì)細胞瘤，腎癌，卵巢癌，乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性ffiR-2陰性乳腺癌)，胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，胃癌和肺癌。在一些實施方案中，所述自患者獲得的樣品是選自下組的成員:全血，血漿，血清，及其組合。在一些實施方案中，所述VEGF121和VEGF110水平是蛋白質(zhì)水平。在一些實施方案中，所述VEGF121和VEGFlltl蛋白質(zhì)水平是通過測量VEGF121和VEGFlltl血漿蛋白質(zhì)水平而測定的。在一些實施方案中，血漿VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平指示該患者會受益于該抗癌療法，更有可能響應該抗癌療法，或具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。在一些實施方案中，該方法進一步包括對所述患者施用有效量的包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第二抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第三抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，所述VEGF-A拮抗劑是抗體。在一些實施方案中，所述癌癥是乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性ffiR-2陰性乳腺癌)且所述第二抗癌療法是多西他賽(docetaxel)。在一些實施方案中，所述癌癥是胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，所述第二抗癌療法是吉西他濱(gemcitabine)，且所述第三抗癌療法是厄洛替尼(erlotinib)。在一些實施方案中，所述癌癥是胃癌，所述第二抗癌療法是卡培他濱(capecitabine),且所述第三抗癌療法是順鉬(cisplatin)。在一些實施方案中，所述癌癥是肺癌，所述第二抗癌療法是吉西他濱，且所述第二抗癌療法是順鉬。本發(fā)明的又一個實施方案提供預測患有癌癥的患者對包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法治療的響應性的方法，該方法包括:測定自患者獲得的樣品中VEGF121和VEGFlltl的表達水平，其中自患者獲得的樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平(例如與參照樣品相比)指示該患者更有可能響應該抗癌療法的治療。在一些實施方案中，所述癌癥選自下組:結(jié)腸直腸癌，成膠質(zhì)細胞瘤，腎癌，卵巢癌，乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌)，胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，胃癌，和肺癌。在一些實施方案中，所述自患者獲得的樣品是選自下組的成員:全血，血漿，血清，及其組合。在一些實施方案中，所述VEGF121和VEGFlltl蛋白質(zhì)水平是通過測量VEGF121和VEGFlltl血漿蛋白質(zhì)水平而測定的。在一些實施方案中，血漿VEGF121和VEGFnc^K平處于或高于參照水平指示該患者會受益于該抗癌療法，更有可能響應該抗癌療法，或具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。在一些實施方案中，該方法進一步包括對所述患者施用有效量的包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第二抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第三抗癌療法:細胞毒劑， 化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，所述VEGF-A拮抗劑是抗體。在一些實施方案中，所述抗體是貝伐單抗。在一些實施方案中，所述抗體是貝伐單抗。在一些實施方案中，所述癌癥是乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性ffiR-2陰性乳腺癌)且所述第二抗癌療法是多西他賽。在一些實施方案中，所述癌癥是胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，所述第二抗癌療法是吉西他濱，且所述第二抗癌療法是厄洛替尼。在一些實施方案中，所述癌癥是胃癌，所述第二抗癌療法是卡培他濱，且所述第三抗癌療法是順鉬。在一些實施方案中，所述癌癥是肺癌，所述第二抗癌療法是吉西他濱，且所述第二抗癌療法是順鉬。本發(fā)明的還有另一個實施方案提供用于確定有癌癥的患者會展現(xiàn)出受益于包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法的可能性的方法，該方法包括:測定自患者獲得的樣品中VEGF121和VEGFlltl的表達水平，其中自患者獲得的樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平(例如與參照樣品相比)指示該患者具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。在一些實施方案中，所述癌癥選自下組:結(jié)腸直腸癌，成膠質(zhì)細胞瘤，腎癌，卵巢癌，乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性ffiR-2陰性乳腺癌)，胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，胃癌，和肺癌。在一些實施方案中，所述自患者獲得的樣品是選自下組的成員:全血，血漿，血清，及其組合。在一些實施方案中，所述VEGF121和VEGFlltl蛋白質(zhì)水平是通過測量VEGF121和VEGFlltl血漿蛋白質(zhì)水平而測定的。在一些實施方案中，血漿VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平指示該患者會受益于該抗癌療法，更有可能響應該抗癌療法，或具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。在一些實施方案中，該方法進一步包括對所述患者施用有效量的包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第二抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第三抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，所述VEGF-A拮抗劑是抗體。在一些實施方案中,所述抗體是貝伐單抗。在一些實施方案中，所述抗體是貝伐單抗。在一些實施方案中，所述癌癥是乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性ffiR-2陰性乳腺癌)且所述第二抗癌療法是多西他賽。在一些實施方案中，所述癌癥是胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，所述第二抗癌療法是吉西他濱，且所述第三抗癌療法是厄洛替尼。在一些實施方案中，所述癌癥是胃癌，所述第二抗癌療法是卡培他濱，且所述第二抗癌療法是順鉬。在一些實施方案中，所述癌癥是肺癌，所述第二抗癌療法是吉西他濱，且所述第二抗癌療法是順鉬。本發(fā)明的甚至另一個實施方案提供用于優(yōu)化包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法的治療功效的方法，該方法包括:測定自患者獲得的樣品中VEGF121和VEGFlltl的表達水平，其中自患者獲得的樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平(例如與參照樣品相比)指示該患者具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。在一些實施方案中，所述癌癥選自下組:結(jié)腸直腸癌，成膠質(zhì)細胞瘤，腎癌，卵巢癌，乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌)，胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，胃癌，和肺癌。在一些實施方案中，所述自患者獲得的樣品是選自下組的成員:全血，血漿，血清，及其組合。在一些實施方案中，所述VEGF121和VEGFlltl蛋白質(zhì)水平是通過測量VEGF121和VEGFlltl血漿蛋白質(zhì)水平而測定的。在一些實施方案中，血漿VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平指示該患者會受益于該抗癌療法，更有可能響應該抗癌療法，或具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。在一些實施方案中，該方法進一步包括對所述患者施用有效量的包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第二抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第三抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，所述VEGF-A拮抗劑是抗體。在一些實施方案中，所述抗體是貝伐單抗。在一些實施方案中，所述抗體是貝伐單抗。在一些實施方案中，所述癌癥是乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌)且所述第二抗癌療法是多西他賽。在一些實施方案中，所述癌癥是胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，所述第二抗癌療法是吉西他濱，且所述第三抗癌療法是厄洛替尼。在一些實施方案中，所述癌癥是胃癌，所述第二抗癌療法是卡培他濱，且所述第二抗癌療法是順鉬。在一些實施方案中，所述癌癥是肺癌，所述第二抗癌療法是吉西他濱，且所述第三抗癌療法是順鉬。本發(fā)明的又一個實施方案提供用于治療患者中的癌癥的方法，該方法包括:確定自患者獲得的樣品具有處于或高于VEGF121和VEGFlltl參照水平的水平(例如與參照樣品相比)，并對所述患者施用有效量的包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法，由此所述癌癥得到治療。在一些實施方案中，所述癌癥選自下組:結(jié)腸直腸癌，成膠質(zhì)細胞瘤，腎癌，卵巢癌，乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌)，胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，胃癌，和肺癌。在一些實施方案中，所述自患者獲得的樣品是選自下組的成員:全血，血漿，血清，及其組合。在一些實施方案中，所述VEGF121和VEGFlltl蛋白質(zhì)水平是通過測量VEGF121和VEGFlltl血漿蛋白質(zhì)水平而測定的。在一些實施方案中，血漿VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平指示該患者會受益于該抗癌療法，更有可能響應該抗癌療法，或具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第二抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，該方法進一步包括施用有效量的選自下組的第三抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。在一些實施方案中，所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。在一些實施方案中，所述VEGF-A拮抗劑是抗體。在一些實施方案中，所述抗體是貝伐單抗。在一些實施方案中，所述抗體是貝伐單抗。在一些實施方案中，所述癌癥是乳腺癌(包括例如局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性ffiR-2陰性乳腺癌)且所述第二抗癌療法是多西他賽。在一些實施方案中，所述癌癥是胰腺癌(包括例如轉(zhuǎn)移性胰腺癌)，所述第二抗癌療法是吉西他濱，且所述第二抗癌療法是厄洛替尼。在一些實施方案中，所述癌癥是胃癌，所述第二抗癌療法是卡培他濱，且所述第三抗癌療法是順鉬。在一些實施方案中，所述癌癥是肺癌，所述第二抗癌療法是吉西他濱，且所述第二抗癌療法是順鉬。本發(fā)明的另一個實施方案提供用于確定患者是否會受益于包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法治療的試劑盒，該試劑盒包含用于測定至少一種生物標志物水平的化合物套組來預測患者對包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法治療的響應性，其中VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平(例如參照樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平)指示該患者會受益于包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法的治療。在一些實施方案中，所述化合物是蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，所述蛋白質(zhì)是抗體。本發(fā)明的又一個實施方案提供用于檢測選自VEGF121和VEGFlltl的至少一種生物標志物的水平的化合物套組，該套組包含至少一種能夠特異性結(jié)合選自VEGF121和VEGFlltl的至少一種生物標志物的化合物。優(yōu)選地,所述化合物套組用于預測患者對包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法的治療的響應性。在一些實施方案中，所述化合物是蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，所述蛋白質(zhì)是抗體。通過下面的詳述來進一步描述這些和其它實施方案。附圖簡述

圖1:在正在為局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌接受治療的患者中，對貝伐單抗(低或高劑量)加多西他賽療法較之安慰劑加多西他賽療法，總體生物標志物群的無進展存活的Kaplan Meier曲線。短虛線代表安慰劑加多西他賽。實線代表低劑量貝伐單抗(每3周7.5mg/kg)加多西他賽。長虛線代表高劑量貝伐單抗(每3周15mg/kg)加多西他賽。圖2:正在為局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌接受治療的患者中，對貝伐單抗(低劑量)加多西他賽療法較之安慰劑加多西他賽療法，生物標志物在后續(xù)抗瘤療法開始之前無進展存活的危害比Forest圖(安慰劑和低劑量貝伐單抗)，一項兩分分析。圖3:正在為局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌接受治療的患者中，對貝伐單抗(高劑量)加多西他賽療法較之安慰劑加多西他賽療法，生物標志物在后續(xù)抗瘤療法開始之前無進展存活的危害比Forest圖(安慰劑和高劑量貝伐單抗)，一項兩分分析。圖4:正在為局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌接受治療的患者中，對貝伐單抗(低或高劑量)加多西他賽療法較之安慰劑加多西他賽療法，低VEGFA表達水平(<125pg/ml)(圖4A)和高VEGFA表達水平(彡125pg/ml)(圖4B)在后續(xù)抗瘤療法開始之前無進展存活的Kaplan Meier曲線。短虛線代表安慰劑加多西他賽。實線代表低劑量貝伐單抗(7.5mg/kg每3周)加多西他賽。長虛線代表高劑量貝伐單抗(15mg/kg每3周)加多西他賽。圖5:正在為局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌接受治療的患者中，對貝伐單抗(低或高劑量)加多西他賽療法較之安慰劑加多西他賽療法，低VEGFR2表達水平(〈llng/ml)(圖5A)和高VEGFR2表達水平(彡llng/ml)(圖5B)在后續(xù)抗瘤療法開始之前無進展存活的Kaplan Meier曲線。短虛線代表安慰劑加多西他賽。實線代表低劑量貝伐單抗(7.5mg/kg每3周)加多西他賽。長虛線代表高劑量貝伐單抗(15mg/kg每3周)加多西他賽。圖6:正在為局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌接受治療的患者中，對貝伐單抗(低或高劑量)加多西他賽療法較之安慰劑加多西他賽療法，VEGFA和VEGFR2的低組合表達水平(公式1〈-0.132)和高組合表達水平(公式I > -0.132)在后續(xù)抗瘤療法開始之前無進展存活的Kaplan Meier曲線。實線代表安慰劑加多西他賽。長虛線代表低劑量貝伐單抗(7.5mg/kg每3周)加多西他賽。短虛線代表高劑量貝伐單抗(15mg/kg每3周)加多西他賽。圖7:正在 為局部晚期、復發(fā)性或轉(zhuǎn)移性HER-2陰性乳腺癌接受治療的患者中，對貝伐單抗(低或高劑量)加多西他賽療法較之安慰劑加多西他賽療法，VEGFA和PLGF的低組合表達水平(公式2〈-0.006)和高組合表達水平(公式2 ^ -0.006)在后續(xù)抗瘤療法開始之前無進展存活的Kaplan Meier曲線。實線代表安慰劑加多西他賽。長虛線代表低劑量貝伐單抗(7.5mg/kg每3周)加多西他賽。短虛線代表高劑量貝伐單抗(15mg/kg每3周)加多西他賽。圖8:SEQ ID NO:1, VEGFA的示例性氨基酸序列。圖9:SEQ ID NO:2，VEGFR2的示例性氨基酸序列。圖10:SEQ ID NO:3, PLGF的示例性氨基酸序列。圖11:提高VEGFm、VEGF121, VEGF165和VEGF189濃度的測量，如在MPACT芯片上測量的。圖12:提高vegf11q、VEGF121和VEGF165濃度的測量，如在自動化Elecsys :分析儀上使用Elecsys 測定法測量的。圖13:正在為不能手術(shù)的局部晚期/轉(zhuǎn)移性胃/胃-食道腺癌接受治療的患者中，對貝伐單抗加卡培他濱/順鉬療法較之對照安慰劑加卡培他濱/順鉬療法，標志物VEGFA高(>lllpg/ml)和低(彡lllpg/ml)表達水平的總體存活(圖13A)無進展存活(圖13B)的Kaplan Meier 曲線。圖14:正在為不能手術(shù)的局部晚期/轉(zhuǎn)移性胃/胃-食道腺癌接受治療的來自亞太地區(qū)的患者中，對貝伐單抗加卡培他濱/順鉬療法較之對照安慰劑加卡培他濱/順鉬療法，標志物PVEGFA高(>lllpg/ml)和低(< lllpg/ml)表達水平與總體存活(圖14A)和無進展存活(圖14B)方面治療效果的關聯(lián)的Kaplan Meier曲線。圖15:正在為不能手術(shù)的局部晚期/轉(zhuǎn)移性胃/胃-食道腺癌接受治療的來自非亞太地區(qū)的患者中，對貝伐單抗加卡培他濱/順鉬療法較之對照安慰劑加卡培他濱/順鉬療法，標志物VEGFA高(>lllpg/ml)和低(彡lllpg/ml)表達水平與總體存活(圖15A)無進展存活(圖15B)方面治療效果的關聯(lián)的Kaplan Meier曲線。圖16:正在為轉(zhuǎn)移性胰腺癌接受治療的患者中，貝伐單抗加吉西他濱/厄洛替尼療法較之對照安慰劑加吉西他濱/厄洛替尼療法的總體存活(圖16A)無進展存活(圖16B)的Kaplan Meier曲線。在圖中，實線代表貝伐單抗/吉西他濱-厄洛替尼治療，而虛線代表安慰劑/吉西他濱-厄洛替尼治療。圖17:對正在為轉(zhuǎn)移性胰腺癌接受治療的患者，關于貝伐單抗加吉西他濱-厄洛替尼療法對對照安慰劑加吉西他濱-厄洛替尼療法，對于高VEGFA表達水平(> 152.9pg/ml)和低VEGFA表達水平(〈152.9pg/ml)，標志物VEGFA (圖17A)與總體存活方面治療效果的關聯(lián)及標志物VEGFA (圖17B)與無進展存活方面治療效果的關聯(lián)的Kaplan Meier曲線。在圖中，實線代表貝伐單抗/吉西他濱-厄洛替尼治療，而虛線代表安慰劑/吉西他濱-厄洛替尼治療。圖18:對正在為轉(zhuǎn)移性胰腺癌接受治療的患者，關于貝伐單抗加吉西他濱-厄洛替尼療法對對照安慰劑加吉西他濱-厄洛替尼療法，標志物VEGFA和VEGFR2的組合表達水平高(公式I彡-0.1)和低(公式1<-0.1)表達水平(圖18A)及VEGFA和PLGF的組合表達水平高(公式2 ^ -0.042)和低(公式2〈-0.042)表達水平(圖18B)與總體存活方面治療效果的關聯(lián)的Kaplan Meier曲線。在圖中，實線代表貝伐單抗/吉西他濱-厄洛替尼治療，而虛線代表安慰劑/吉西他濱-厄洛替尼治療。圖19:對正在為轉(zhuǎn)移性胰腺癌 接受治療的患者，關于貝伐單抗加吉西他濱-厄洛替尼療法對對照安慰劑加吉西他濱-厄洛替尼療法，標志物VEGFA和VEGFR2的組合表達水平高(公式I彡-0.1)和低(公式1〈-0.1)表達水平(圖19A)及VEGFA和PLGF的組合表達水平高(公式2 ^ -0.042)和低(公式2〈-0.042)表達水平(圖19B)與無進展存活方面治療效果的關聯(lián)的Kaplan Meier曲線。在圖中，實線代表貝伐單抗/吉西他濱-厄洛替尼治療，而虛線代表安慰劑/吉西他濱-厄洛替尼治療。圖20:對正在為轉(zhuǎn)移性胰腺癌接受治療的患者，關于貝伐單抗加吉西他濱-厄洛替尼療法對對照安慰劑加吉西他濱-厄洛替尼療法，標志物VEGFA、VEGFR2和PLGF的組合表達水平高(公式3 3 0.837)和低(公式3〈0.837)表達水平與總體存活(圖20A)方面治療效果的關聯(lián)及標志物VEGFA、VEGFR2和PLGF的組合表達水平高(公式3彡0.837)和低(公式3〈0.837)表達水平與無進展存活(圖20B)方面治療效果的關聯(lián)的Kaplan Meier曲線。在圖中，實線代表貝伐單抗/吉西他濱-厄洛替尼治療，而虛線代表安慰劑/吉西他濱-厄洛替尼治療。圖21:來自相同患者的EDTA和檸檬酸鹽樣品、用MPACT測定法測量兩次的數(shù)據(jù)。EDTA血漿的VEGFA濃度比檸檬酸鹽要高約40%，其中EDTA-檸檬酸鹽方法比較的Spearman相關性為約0.8。發(fā)明詳述1.導言本發(fā)明提供用于鑒定響應包含VEGF拮抗劑的抗癌療法的可能性升高或經(jīng)歷轉(zhuǎn)移的可能性升高的患者的方法。I1.定義在某些實施方案中，術(shù)語“升高”或“高于”指高于參照水平的水平或通過本文所述方法檢測的，血漿VEGF121和VEGFlltl水平與來自參照樣品的VEGF121和VEGFlltl水平相比5%、10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、85%、90%、95%、100% 或更大的總體升高。

在某些實施方案中，術(shù)語“升高”指血漿VEGF121和VEGFlltl水平的升高，其中升高是與例如自參照樣品預先測定的血漿VEGF121和VEGFlltl水平相比高至少約1.5、1.75、2、3、
4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、40、50、60、70、75、80、90、或 100 倍。在一個優(yōu)選的實施方案中，術(shù)語“升高的水平”指處于或高于參照水平的值。在某些實施方案中，術(shù)語“降低”或“低于”在本文中指低于參照水平的水平或通過本文所述方法檢測的，VEGF121和VEGFlltl水平與來自參照樣品的VEGF121和VEGFlltl水平相比5%、10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或更大的總體降低。在某些實施方案中，術(shù)語“降低”指通過本文所述方法檢測的，VEGF121和VEGFlltl水平的降低，其中“降低的水平”是來自參照樣品的VEGF121和VEGFlltl水平的至多約0.9,0.8、0.7,0.6,0.5,0.4,0.3,0.2,0.1,0.05、或 0.01 倍或更低。在某些實施方案中，術(shù)語“處于參照水平”指與參照樣品中通過本文所述方法檢測的VEGF121和VEGFlltl水平相同的水平。在某些實施方案中，術(shù)語“參照水平”在本文中指預定值。如技術(shù)人員會領會的，參照水平預定和設置為在例如特異性和/或靈敏度方面達到要求。這些要求可以變化，例如在不同管理機構(gòu)之間。它可以是例如測定法靈敏度或特異性分別要設置成某些限制，例如80%、90%或95%。這些要求也可以在陽性或陰性預測值方面限定。無論如何，基于本發(fā)明中給出的教導，總是會有可能到達達到那些要求的參照水平。在一個實施方案中，參照水平是在健康個體中確定的。在一個實施方案中，參照水平是在患者所屬疾病實體中預定的。在某些實施方案中，參照值可以例如設置為自調(diào)查的疾病實體中的值的總體分布的25%和75%之間的任何百分位。在其它實施方案中，參照水平可以例如設置為自調(diào)查的疾病實體中的值的總體分布確定的中值、三分位或四分位。在一個實施方案中，參照水平設置為自調(diào)查的疾病實體中的值的總體分布確定的中值。在本發(fā)明的語境中，“VEGF”、“VEGFA”、或“VEGF-A”指血管內(nèi)皮生長因子蛋白A，以 SEQ ID NO:1 例示，在圖 8 中顯示(Swiss Prot 登錄號 P15692，Gene ID (NCBI):7422)。術(shù)語“VEGFA”涵蓋具有氨基酸序列SEQID NO:1的蛋白質(zhì)及其同源物和同等型。術(shù)語“VEGF-A”還涵蓋VEGF-A的已知的同等型，例如剪接同等型，例如VEGF121、VEGF145, VEGF165,VEGF189和VEGF2tl6，及其天然發(fā)生等位和加工形式，包括纖溶酶切割VEGF165生成的110個氨基酸的人血管內(nèi)皮細胞生長因子，如記載于Ferrara, Mol.Biol.Cel 121:687 (2010) ; Leunget al.，Science246:1306 (1989);及 Houck et al.，Mol.Endocrin.5:1806 (1991)。在本發(fā)明的語境中，術(shù)語“VEGF-A”還涵蓋其變體和/或同源物，以及VEGF-A的片段，前提是變體蛋白質(zhì)(包括同等型)、同源物蛋白質(zhì)和/或片段受到一種或多種VEGF-A特異性抗體識別,諸如抗體克隆3C5和26503 (它們分別可得自Bender Relia Tech和R&D Systems)和A4.6.1 (如記載于 Kim et al., Growth Factors7 (I): 53-64 (1992))。在本發(fā)明的語境中，VEGF、VEGFA、或VEGF-A的術(shù)語“同等型”(isoform)指剪接同等型和通過酶促切割(例如通過纖溶酶)生成的形式二者。在本發(fā)明的語境中，“VEGFR2”指血管內(nèi)皮生長因子受體2，以SEQ ID NO:2例示，在圖 9 中顯示(Swiss Prot 登錄號 P35968，Gene ID (NCBI):3791)。術(shù)語“VEGFR2”涵蓋具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的蛋白質(zhì)及其同源物和同等型。在本發(fā)明的語境中，術(shù)語“VEGFR2”還涵蓋與氨基酸序列SEQ ID NO:2，或與其變體和/或同源物的氨基酸序列，以及該序列的片段具有至少85%、至少90%或至少95%同源性的蛋白質(zhì)，前提是變體蛋白質(zhì)(包括同等型)、同源物蛋白質(zhì)和/或片段受到一種或多種VEGFR2特異性抗體識別，諸如抗體克隆89115 和 89109，它們可得自 R&D Systems。在本發(fā)明的語境中，“PLGF”指胎盤生長因子，以SEQ ID NO:3例示，在圖10中顯示(Swiss Prot登錄號P49763，Gene ID (NCBI):5228)。術(shù)語“PLGF”涵蓋具有氨基酸序列SEQ ID NO:3的蛋白質(zhì)及其同源物和同等型。在本發(fā)明的語境中，術(shù)語“PLGF”還涵蓋與氨基酸序列SEQ ID NO:3，或與其變體和/或同源物的氨基酸序列，以及該序列的片段具有至少85%、至少90%或至少95%同源性的蛋白質(zhì)，前提是變體蛋白質(zhì)(包括同等型)、同源物蛋白質(zhì)和/或片段受到一種或多種PLGF特異性抗體識別，諸如抗體克隆2D6D5和6A11D2，它們可得自 Roche Diagnostics GmbH。術(shù)語“VEGF”還指來自非人物種諸如小鼠、大鼠或靈長類動物的VEGF。有時，來自特定物種的VEGF表示如下，hVEGF表示人VEGF，mVEGF表示小鼠VEGF，等等。術(shù)語“VEGF”還用于指包含165個氨基酸的人血管內(nèi)皮細胞生長因子的氨基酸8至109或I至109的截短形式多肽。本申請中可能通過例如“VEGF(8-109) ”、“VEGF(1-109) ”或“VEGF165”來鑒別任何此類形式VEGF的提及。截短的”天然VEGF的氨基酸位置如天然VEGF序列中所示編號。例如，截短的天然VEGF中的第17位氨基酸(甲硫氨酸)也是天然VEGF中的第17位(甲硫氨酸)。截短的天然VEGF具有與天然VEGF相當?shù)膶DR和Flt-1受體的結(jié)合親和力。依照一個優(yōu)選的實施方案，VEGF是人VEGF。
“ VEGF生物學活性”包括對任何VEGF受體的結(jié)合或任何VEGF信號傳導活性，調(diào)節(jié)諸如對正常的和異常的血管發(fā)生(angiogenesis)和脈管發(fā)生(vasculogenesis)(Ferrara and Davis-Smyth(1997)Endocrine Rev.18:4-25;Ferrara(1999)J.Mol.Med.77:527-543);促進胚胎脈管發(fā)生和血管發(fā)生(Carmeliet et al.(1996)Nature380:435-439;Ferrara et al.(1996)Nature380:439-442);及調(diào)控雌性生殖道中的和為了骨生長和軟骨形成的周期性血管增殖(Ferrara et al.(1998)NatureMed.4:336-340; Gerber et al.(1999) Nature Med.5:623-628)。在作為血管發(fā)生和脈管發(fā)生中的血管發(fā)生因子之外，VEGF，作為多效生長因子，在生理過程諸如內(nèi)皮細胞存活、血管通透性和血管舒張、單核細胞趨化性和鈣內(nèi)流中展現(xiàn)出多種生物學效應(Ferrara and Davis-Smyth(1997), supra,及 Cebe-Suarez et al., Cell.Mol.LifeSc1.63:601-615(2006)) 0此外，最近的研究報道了 VEGF對少數(shù)非內(nèi)皮細胞類型諸如視網(wǎng)膜色素上皮細胞、胰導管細胞、和許旺(Schwann)細胞的促有絲分裂效應(Guerrinet al.(1995)J.Cell Physiol.164:385-394;Oberg-Welsh et al.(1997)Mol.Cell.Endocrinol.126:125-132;Sondell et al.(1999)J.Neurosc1.19:5731-5740)?！癡EGF拮抗劑”或“VEGF特異性拮抗劑”指能夠結(jié)合VEGF，降低VEGF表達水平，或者中和、阻斷、抑制、消除、降低或干擾VEGF生物學活性(包括但不限于VEGF與一種或多種VEGF受體的結(jié)合及由VEGF介導的血管發(fā)生和內(nèi)皮細胞存活或增殖)的分子。在本發(fā)明的方法中有用的VEGF特異性拮抗劑包括特異性結(jié)合VEGF的多肽、特異性結(jié)合VEGF受體的多肽、抗VEGF抗體及其抗原結(jié)合片段、特異性結(jié)合VEGF由此使其隔絕與一種或多種受體結(jié)合的受體分子和衍生物、融合蛋白(例如VEGF-Trap(Regeneron))、和VEGF121-白樹毒素(Peregrine)。VEGF特異性拮抗劑還包括VEGF多肽的拮抗性變體、針對VEGF的反義核堿基寡聚物、針對VEGF的小RNA分子、RNA適體、肽體、和針對VEGF的核酶、在嚴格條件下與編碼VEGF或VEGF受體的核酸序列雜交的核酸(例如RNAi )、免疫粘附素、抗VEGF受體抗體和VEGF受體拮抗劑諸如VEGFR酪氨酸激酶的小分子抑制劑。依照一個優(yōu)選的實施方案，所述VEGF拮抗劑結(jié)合VEGF并抑制VEGF誘導的體外內(nèi)皮細胞增殖。依照一個優(yōu)選的實施方案，所述VEGF拮抗劑以大于非VEGF或非VEGF受體的親和力結(jié)合VEGF或VEGF受體。依照一個優(yōu)選的實施方案，所述VEGF拮抗劑以介于IuM和IpM之間的Kd結(jié)合VEGF或VEGF受體。依照另一個優(yōu)選的實施方案，所述VEGF拮抗劑以介于500nM和IpM之間的Kd結(jié)合VEGF或VEGF受體。VEGF特異性拮抗劑還包括結(jié)合VEGF且能夠阻斷、抑制、消除、降低、或干擾VEGF生物學活性的非肽小分子。如此，術(shù)語“ VEGF活性”明確包括VEGF介導的VEGF生物學活性。在某些實施方案中，VEGF拮抗劑將VEGF的表達水平或生物學活性降低或抑制了至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90% 或更多。依照一個優(yōu)選的實施方案，所述VEGF拮抗劑選自:多肽諸如抗體、肽體、免疫粘附素、小分子或適體。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述抗體是抗VEGF抗體諸如貝伐單抗( AVASTIN )或抗VEGF受體抗體諸如抗VEGFR2或抗VEGFR3抗體。VEGF拮抗劑的其它例子包括:VEGF-Trap、Mucagen, PTK787、SUl 1248、AG-013736, Bay439006 (sorafenib)、ZD-6474、CP632、CP-547632、AZD-2171、CDP-171、SU-14813、CHIR-258、AEE-788、SB786034、BAY579352、CDP-791、EG-3306、GW-786034、RWJ-417975/CT6758 和 KRN-633?！翱筕EGF抗體”指以足夠親和力和特異性結(jié)合VEGF的抗體。在某些實施方案中，所選擇的抗體通常會具有足夠的對VEGF的結(jié)合親和力，例如，該抗體可以以介于IOOnM-1pM之間的Kd值結(jié)合hVEGF?？贵w親和力可通過例如基于表面等離振子共振的測定法(諸如PCT申請公開文本N0.W02005/012359中所記載的BIAcore測定法)；酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA);和競爭測定法(例如RIA)來測定。優(yōu)選地，本發(fā)明的抗VEGF抗體可用作治療劑，用于靶向和干擾其中牽涉VEGF活性的疾病或疾患?？筕EGF抗體通常不會結(jié)合其它VEGF同系物，諸如VEGF-B或VEGF-C，也不會結(jié)合其它生長因子，諸如P1GF、PDGF或bFGF。一種優(yōu)選的抗VEGF抗體是與雜交瘤ATCCHB10709所生成的單克隆抗VEGF抗體A4.6.1結(jié)合相同表位的單克隆抗體。更優(yōu)選地,抗VEGF抗體是依照Presta et al.(1997)Cancer Res.57:4593-4599生成的重組人源化抗VEGF單克隆抗體，包括但不限于稱作貝伐單抗(Bevacizumab, BV; AvastirKH1 )的抗體。依照另一個實施方案，可以使用的抗VEGF抗體包括但不限于W02005/012359中披露的抗體。依照一個實施方案，所述抗VEGF抗體包含 W02005/012359 的圖 24、25、26、27 和 29 中披露的任一抗體(例如 G6、G6-23、G6-31、G6-23.1、G6-23.2、B20、B20-4和B20.4.1)的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)。在另一個優(yōu)選的實施方案中，稱為ranibizumab的抗VEGF抗體是為了眼病諸如糖尿病神經(jīng)病變和AMD而施用的VEGF拮抗劑。在某些實施方案中，抗VEGF抗體可用作治療劑，用于靶向和干擾其中牽涉VEGF活性的疾病或疾患。還有，該抗體可進行其它生物學活性測定法，例如為了評估其作為治療劑的效力。此類測定法是本領域已知的，而且取決于抗體的靶抗原和預定用途。例子包括HUVEC抑制測定法；腫瘤細胞生長抑制測定法(如例如W089/06692中所記載的)；抗體依賴性細胞的細胞毒性(ADCC)和補體介導的細胞毒性(CDC)測定法(美國專利5，500，362)；及激動活性或造血測定法(參見W095/27062)?？筕EGF抗體通常不會結(jié)合其它VEGF同系物，諸如VEGF-B或VEGF-C，也不會結(jié)合其它生長因子，諸如P1GF、PDGF或bFGF。在一個實施方案中，抗VEGF抗體是與雜交瘤ATCC HB10709所生成的單克隆抗VEGF抗體A4.6.1結(jié)合相同表位的單克隆抗體。在另一個實施方案中，抗VEGF抗體是依照Presta et al.(1997)Cancer Res.57:4593-4599生成的重組人源化抗VEGF單克隆抗體，包括但不限于稱作貝伐單抗(Bevacizumab, BV; AVASTIN )的抗體?？筕EGF抗體“貝伐單抗(BV)”，也稱作“rhuMAb VEGF”或“AVAST丨N浪”、是一種依照Presta et al.(1997) Cancer Res.57:4593-4599生成的重組人源化抗VEGF單克隆抗體。它涵蓋突變的人IgGl框架區(qū)和來自鼠抗hVEGF單克隆抗體A.4.6.1 (其阻斷人VEGF對其受體的結(jié)合)的抗原結(jié)合互補決定區(qū)。貝伐單抗大約93%的氨基酸序列，包括大部分框架區(qū)，衍生自人IgGl，而大約7%的序列衍生自小鼠抗體A4.6.1。貝伐單抗具有約149，000道爾頓的分子量，而且是糖基化的。貝伐單抗和其它人源化抗VEGF抗體進一步記載于美國專利 N0.6，884，879 及 W02005/044853?？筕EGF 抗體 Ranibizumab 或 LUC 1: N TIS .抗體或 rhuFab V2 是人源化的、親和力成熟的抗人VEGF Fab片段。Ranibizumab是通過標準重組技術(shù)在大腸桿菌表達載體和細菌發(fā)酵中生成的。Ranibizumab是未糖基化的且分子量為約48，000道爾頓。參見W098/45331 和 US2003/0190317。兩種表征最全面的VEGF受體是VEGFRl (也稱作Flt-1)和VEGFR2 (鼠同系物也稱作KDR和FLK-1 )。每一種受體對每一種VEGF家族成員的特異性有所不同，但是VEGF-A結(jié)合Flt-1和KDR 二者。全長Flt-1受體包括具有七個Ig結(jié)構(gòu)域的胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域、和具有酪氨酸激酶活性的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。胞外結(jié)構(gòu)域涉及VEGF結(jié)合，而胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域涉及信號轉(zhuǎn)導。特異性結(jié)合VEGF的VEGF受體分子或其片段可以在本發(fā)明的方法中用作結(jié)合和隔絕VEGF蛋白，由此阻止它發(fā)信號的VEGF抑制劑。在某些實施方案中，VEGF受體分子或其VEGF結(jié)合片段是可溶性形式，諸如sFlt-1。受體的可溶性形式發(fā)揮對VEGF蛋白生物學活性的抑制效應，其通過結(jié)合VEGF，由此阻止它結(jié)合其在靶細胞表面上存在的天然受體來實現(xiàn)。還包括VEGF受體融合蛋白，下文描述了它們的例子。嵌合VEGF受體蛋白指具有自至少兩種不同蛋白質(zhì)(其中至少一種是VEGF受體蛋白，例如flt-1或KDR受體)衍生的氨基酸序列且能夠結(jié)合并抑制VEGF生物學活性的受體分子。在某些實施方案中，本發(fā)明的嵌合VEGF受體蛋白由自只有兩種不同VEGF受體分子衍生的氨基酸序列組成；然而，可以將包含一個、兩個、三個、四個、五個、六個、或所有七個來自flt-1和/或KDR受體胞外配體結(jié)合區(qū)的Ig樣結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列連接至來自其它無關蛋白質(zhì)的氨基酸序列，例如免疫球蛋白序列。與Ig樣結(jié)構(gòu)域組合的其它氨基酸序列對于本領域普通技術(shù)人員會是顯而易見的。嵌合VEGF受體蛋白的例子包括但不限于可溶性Flt-l/Fc、KDR/Fc、或Flt-1/KDR/Fc (也稱作VEGF Trap)(參見例如PCT申請公開文本N0.W097/44453)?？扇苄訴EGF受體蛋白或嵌合VEGF受體蛋白包括沒有經(jīng)跨膜結(jié)構(gòu)域而固定至細胞表面的VEGF受體蛋白。因此，VEGF受體(包括嵌合受體蛋白)的可溶性形式，雖然能夠結(jié)合并滅活VEGF，但是不包含跨膜結(jié)構(gòu)域，并如此一般不會變成與該分子在其中表達的細胞的細胞膜相結(jié)合。別的VEGF 抑制劑記載于例如 W099/24440, PCT 國際申請 PCT/IB99/00797, W095/21613, W099/61422,美國專利 N0.6，534，524，美國專利 N0.5，834，504，TO98/50356,美國專利 N0.5，883，113，美國專利 N0.5，886，020，美國專利 N0.5，792，783，美國專利 N0.6，653，308，W099/10349, W097/32856, W097/22596, W098/54093, W098/02438, W099/16755,及W098/02437，通過述及將它們都完整收入本文。如本文中使用的，術(shù)語“B20系列多肽”指包括結(jié)合VEGF的抗體的多肽。B20系列多肽包括但不限于自B20抗體的序列衍生的抗體或美國公開文本N0.2006/0280747,美國公開文本N0.2007/0141065和/或美國公開文本N0.2007/0020267中記載的B20衍生抗體，通過述及明確將這些專利申請的內(nèi)容收入本文。在一個實施方案中，B20系列多肽是美國公開文本N0.2006/0280747,美國公開文本N0.2007/0141065和/或美國公開文本N0.2007/0020267中記載的B20-4.1。在另一個實施方案中，B20系列多肽是美國專利申請60/991，302中記載的B20-4.1.1，通過述及將其完整公開內(nèi)容收入本文。如本文中使用的，術(shù)語“G6系列多肽”指包括結(jié)合VEGF的抗體的多肽。G6系列多肽包括但不限于自G6抗體的序列衍生的抗體或美國公開文本N0.2006/0280747,美國公開文本N0.2007/0141065和/或美國公開文本N0.2007/0020267中記載的G6衍生抗體。美國公開文本N0.2006/0280747,美國公開文本N0.2007/0141065和/或美國公開文本N0.2007/0020267中記載的G6系列多肽包括但不限于G6_8, G6-23和G6-31。
對于別的抗體，參見美國專利N0.7，060，269，6，582，959，6，703，020; 6, 054，297;W098/45332; W096/30046; W094/10202;EP0666868B1;美國專利申請公開 N0.2006009360，20050186208，20030206899，20030190317，20030203409，和 20050112126;及 Popkov etal., Journal of Immunological Methods288:149-164 (2004)。在某些實施方案中，其它抗體包括那些結(jié)合人 VEGF 上包含殘基 F17, M18, D19, Y21, Y25, Q89, 191，K101, E103,和 C104或者包含殘基F17，Y21, Q22, Y25, D63, 183和Q89的功能性表位的。還知道其它抗VEGF抗體，而且記載于例如Liang et al., J BiolChem281, 951-961(2006)o患者對抗癌劑治療的“有效響應"(effective response)或患者對VEGF拮抗劑治療的“響應性”(responsiveness)或“敏感性”(sensitivity)指源自用抗癌劑(諸如例如抗VEGF-A抗體)進行的治療或作為該治療的結(jié)果,給予患者(有癌癥風險或患有癌癥)的臨床或治療受益。此類受益包括細胞或生物學應答、完全響應、部分響應、穩(wěn)定的病情(沒有進展或復發(fā))、或源自用該拮抗劑進行的治療或作為該治療的結(jié)果的患者響應及稍后復發(fā)。例如，有效響應可以是縮小的腫瘤尺寸、延長的無進展存活、或總體存活。如本文中使用的，“拮抗劑”指抑制或降低它們所結(jié)合的分子的生物學活性的化合物或藥劑。拮抗劑包括結(jié)合VEGF的抗體、合成或天然序列肽、免疫粘附素、和小分子拮抗齊U，任選偶聯(lián)有或融合至另一分子?！白钄嘈浴笨贵w或“拮抗性”抗體指抑制或降低它所結(jié)合的抗原的生物學活性的抗體。如本文中使用的，“激動性抗體”指部分或完全模擬感興趣多肽的至少一種功能活性的抗體。術(shù)語“抗體”在本文中以最廣義使用，明確覆蓋單克隆抗體、多克隆抗體、由至少兩種完整抗體形成的多特異性抗體(例如雙特異性抗體)、及抗體片段，只要它們展現(xiàn)出期望的生物學活性。在某些實施方案中，在本文提供的方法中作為VEGF拮抗劑使用的抗體是多特異性抗體，例如雙特異性抗體。多特異性抗體是對至少兩個不同位點具有結(jié)合特異性的單克隆抗體。在某些實施方案中，結(jié)合特異性之一針對VEGF，而另一種針對任何其它抗原。在某些實施方案中，雙特異性抗體可結(jié)合VEGF的兩個不同表位。也可以使用雙特異性抗體來將細胞毒劑定位于表達VEGF的細胞。雙特異性抗體可以以全長抗體或抗體片段制備。用于生成多特異性抗體的技術(shù)包括但不限于具有不同特異性的兩對免疫球蛋白重鏈-輕鏈對的重組共表達(Milstein, C.and Cuello, A.C., Nature305 (1983) 537-540,W093/08829,及 Traunecker, A.et al., EMBO J.10(1991)3655-3659)和“結(jié)-入-穴” (knob-1n-hole)工程化(見例如美國專利N0.5，731，168)。也可以通過用于生成抗體Fe-異二聚體分子的工程化靜電操縱效應(W02009/089004)；交聯(lián)兩個或更多個抗體或片段(見例如美國專利N0.4，676，980,及Brennan, M.etal.，Science229 (1985) 81-83);使用亮氨酸拉鏈來生成雙特異性抗體(見例如Kostelny，S.A.et al.，J.1mmunol.148(1992) 1547-1553);使用用于生成雙特異性抗體片段的“雙抗體”技術(shù)(見例如 Holliger, P.et al., Proc.Natl.Acad.Sc1.USA90 (1993) 6444-6448);及使用單鏈 Fv(sFv) 二聚體(見例如 Gruber, M et al., J.1mmunol.152 (1994) 5368-5374);及如例如Tutt，A.et al.，J.1mmunol.147 (1991) 60-69中所描述的，制備三特異性抗體來生成多特異性抗體。本文中還包括具有三個或更多個功能性抗原結(jié)合位點的工程化改造抗體，包括“章魚抗體”(見例如US2006/0025576)。本文中的抗體或片段還包括包含結(jié)合VEGF及另一種不同抗原的抗原結(jié)合位點的“雙重作用 FAb” 或“DAF”(見例如 US2008/0069820)。在本文提供的方法中作為VEGF拮抗劑使用的抗體或抗體片段還包括多特異性抗體，如記載于 W02009/080251, W02009/080252, W02009/080253, W02009/080254, W02010/112193, W02010/115589, W02010/136172, W02010/145792,及 W02010/145793。雙特異性 VEGF抗體的例子記載于例如 W02010/040508 (VEGF-ANG2)，PCT/EP2011/054504 (VEGF-ANG2)，W02005/087812 (VEGF-PDGF)，W02009120922(VEGF-PDGFR ^)，W02011/039370(VEGF-DII4)。“分離的”抗體指已經(jīng)鑒定且自其天然環(huán)境的成分分開和/或回收的抗體。其天然環(huán)境的污染性成分指將會干擾該抗體的研究、診斷或治療用途的物質(zhì)，可包括酶、激素、和其它蛋白質(zhì)性質(zhì)或非蛋白質(zhì)性質(zhì)的溶質(zhì)。在有些實施方案中，將抗體純化至(I)根據(jù)例如Lowry法的測定，抗體重量超過95%，而在有些實施方案中，重量超過99%，(2)足以通過使用例如轉(zhuǎn)杯式測序儀獲得至少15個殘基的N-末端或內(nèi)部氨基酸序列的程度，或(3)根據(jù)還原性或非還原性條件下的SDS-PAGE及使用例如考馬斯藍或銀染色，達到同質(zhì)。既然抗體天然環(huán)境的至少一種成分不會存在，那么分離的抗體包括重組細胞內(nèi)的原位抗體。然而，分離的抗體通常將通過至少一個純化步驟來制備?！疤烊豢贵w”指通常由兩條相同的輕(L)鏈和兩條相同的重⑶鏈構(gòu)成的約150，000道爾頓的異四聚體糖蛋白。每條輕鏈通過一個共價二硫鍵與重鏈連接，而二硫鍵的數(shù)目在不同免疫球蛋白同種型的重鏈間有變化。每條重鏈和輕鏈還具有間隔規(guī)律的鏈內(nèi)二硫鍵。每條重鏈在一端具 有一個可變域(Vh)，接著是多個恒定域。每條輕鏈在一端具有一個可變域(')，而另一端是一個恒定域。輕鏈的恒定域與重鏈的第一恒定域排列在一起，而輕鏈的可變域與重鏈的可變域排列在一起。認為特定的氨基酸殘基在輕鏈與重鏈可變域之間形成界面?？贵w的“可變區(qū)”或“可變域”指抗體重鏈或輕鏈的氨基末端結(jié)構(gòu)域。重鏈的可變域可以稱為“VH”。輕鏈的可變域可以稱為“VL”。這些結(jié)構(gòu)域一般是抗體的最易變部分且包含抗原結(jié)合位點。術(shù)語“可變的”指可變域中的某些部分在抗體間序列差異廣泛且用于每種特定抗體對其特定抗原的結(jié)合和特異性的實情。然而，變異性并非均勻分布于抗體的整個可變域。它集中于輕鏈和重鏈可變域中稱作高變區(qū)(HVR)的三個區(qū)段。可變域中更加高度保守的部分稱作框架區(qū)(FR)。天然重鏈和輕鏈的可變域各自包含四個FR區(qū)，它們大多采取￠-折疊片構(gòu)象，通過形成環(huán)狀連接且在有些情況中形成￠-折疊片結(jié)構(gòu)一部分的三個HVR連接。每條鏈中的HVR通過FR區(qū)非常接近的保持在一起，并與另一條鏈的HVR —起促成抗體的抗原結(jié)合位點的形成(參見 Kabat et al., Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest,第 5 版，National Institute of Health, Bethesda, MD.(1991))。恒定域不直接參與抗體與抗原的結(jié)合，但展現(xiàn)出多種效應器功能，諸如抗體在抗體依賴性細胞的細胞毒性中的參與。根據(jù)其恒定域的氨基酸序列，來自任何脊椎動物物種的抗體(免疫球蛋白)的“輕鏈”可歸入兩種截然不同的型中的一種，稱作卡帕(K)和拉姆達(入)。根據(jù)其重鏈恒定域的氨基酸序列，抗體(免疫球蛋白)可歸入不同的類。免疫球蛋白有五大類:IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中有些可進一步分為亞類(同種型)，例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl和IgA2。將與不同類的免疫球蛋白對應的重鏈恒定域分別稱作a、
S、e、Y和ii。不同類別免疫球蛋白的亞基結(jié)構(gòu)和三維構(gòu)造是眾所周知的，一般性描述于例如 Abbas et al.Cellular and Mol.1mmunology, 4th ed.(ff.B.Saunders, C0., 2000)。抗體可以是抗體與一種或多種其它蛋白質(zhì)或肽共價或非共價關聯(lián)而形成的更大融合分子的一部分。術(shù)語“全長抗體”和“完整抗體”在本文中可互換使用，指基本上完整形式的抗體而非如下文所定義的抗體片段。該術(shù)語具體指重鏈包含F(xiàn)e區(qū)的抗體?！奥憧贵w(裸露的抗體)”為本發(fā)明目的指未偶聯(lián)細胞毒性模塊或放射性標記物的抗體?！翱贵w片段”包含完整抗體的一部分，優(yōu)選包含其抗原結(jié)合區(qū)?？贵w片段的例子包括Fab、Fab’、F(ab，)2和Fv片段；雙抗體(diabody);線性抗體；單鏈抗體分子；及由抗體片段形成的多特異性抗體。用木瓜蛋白酶消化抗體產(chǎn)生兩個相同的抗原結(jié)合片段，稱為“Fab”片段，各自具有一個抗原結(jié)合位點，及一個剩余的“Fe”片段，其名稱反映了它易于結(jié)晶的能力。胃蛋白酶處理產(chǎn)生一個F (ab’)2片段，它具有兩個抗原結(jié)合位點且仍能夠交聯(lián)抗原?！癋v”是包含完整抗原結(jié)合位點的最小抗體片段。在一個實施方案中，雙鏈Fv種類由緊密、非共價結(jié)合的一個重鏈可變域和一個輕鏈可變域的二聚體組成。在單鏈Fv(scFv)種類中，一個重鏈可變域和一個輕鏈可變域可以通過柔性肽接頭共價相連接，使得輕鏈和重鏈可以在與雙鏈Fv種類類似的“二聚體”結(jié)構(gòu)中相結(jié)合。正是在這種構(gòu)造中，每個可變域的三個HVR相互作用而在Vh-' 二聚體表面上限定了一個抗原結(jié)合位點。六個HVR —起賦予抗體以抗原結(jié)合特異性。然而，即使是單個可變域(或是只包含對抗原特異性的三個HVR的半個Fv)也具有識別和結(jié)合抗原的能力，只是親和力低于完整結(jié)合位點。Fab片段包含重鏈和輕鏈可變域，而且還包含輕鏈的恒定域和重鏈的第一恒定域(CHl)。Fab’片段與Fab片段的不同之處在于重鏈CHl結(jié)構(gòu)域的羧基末端增加了少數(shù)殘基，包括來自抗體鉸鏈區(qū)的一個或多個半胱氨酸。Fab’ -SH是本文中對其中恒定域半胱氨酸殘基攜帶游離硫醇基的Fab’的稱謂。？(&13’)2抗體片段最初是作為在Fab’片段之間有鉸鏈半胱氨酸的成對Fab’片段生成的。還知道抗體片段的其它化學偶聯(lián)?！皢捂淔v”或“scFv”抗體片段包含抗體的Vh和\結(jié)構(gòu)域，其中這些結(jié)構(gòu)域存在于一條多肽鏈上。一般而言，scFv多肽在Vh與'結(jié)構(gòu)域之間進一步包含多肽接頭，其使得scFv能夠形成結(jié)合抗原的期望結(jié)構(gòu)。關于scFv的綜述參見例如Pluckthiin,于《The Pharmacology of Monoclonal Antibodies》，第 113 卷，Rosenburg 和 Moore 編，Springer-Verlag, New York, 1994,第 269-315 頁。術(shù)語“雙抗體”指具有兩個抗原結(jié)合位點的抗體片段，該片段在同一條多肽鏈(Vh-Vl)中包含相連的重鏈可變域(Vh)和輕鏈可變域(')。通過使用過短的接頭使得同一條鏈上的兩個結(jié)構(gòu)域之間不能配對，迫使這些結(jié)構(gòu)域與另一條鏈的互補結(jié)構(gòu)域配對，從而產(chǎn)生兩個抗原結(jié)合位點。雙抗體可以是二價的或雙特異性的。雙抗體更完整的記載于例如EP404, 097;W01993/01161;Hudson et al.，Nat.Med.9:129-134(2003);及 Hollinger etal., PNAS USA90:6444-6448 (1993)。三抗體(Triabody)和四抗體(tetrabody)也記載于Hudson et al.，Nat.Med.9:129-134 (2003)。術(shù)語“單克隆抗體”在用于本文時指從一群基本上同質(zhì)的抗體獲得的抗體，即構(gòu)成群體的各個抗體相同，除了可能以極小量存在的可能的突變，例如天然存在的突變。如此，修飾語“單克隆”表明抗體不是分立的抗體的混合物的特征。在某些實施方案中，此類單克隆抗體典型的包括包含結(jié)合靶物的多肽序列的抗體，其中靶物結(jié)合多肽序列是通過包括從眾多多肽序列中選擇單一靶物結(jié)合多肽序列在內(nèi)的過程得到的。例如，選擇過程可以是從眾多克隆諸如雜交瘤克隆、噬菌體克隆或重組DNA克隆的集合中選擇獨特克隆。應當理解，所選擇的靶物結(jié)合序列可進一步改變，例如為了提高對靶物的親和力、將靶物結(jié)合序列人源化、提高其在細胞培養(yǎng)物中的產(chǎn)量、降低其在體內(nèi)的免疫原性、創(chuàng)建多特異性抗體等，而且包含改變后的靶物結(jié)合序列的抗體也是本發(fā)明的單克隆抗體。與典型的包含針對不同決定簇(表位)的不同抗體的多克隆抗體制備物不同，單克隆抗體制備物的每個單克隆抗體針對抗原上的單一決定簇。在它們的特異性外，單克隆抗體制備物的優(yōu)勢在于它們通常未受到其它免疫球蛋白的污染。修飾語“單克隆”表明抗體從基本上同質(zhì)的抗體群獲得的特征，不應解釋為要求通過任何特定方法來生產(chǎn)抗體。例如，將依照本發(fā)明使用的單克隆抗體可通過多種技術(shù)來生成，包括例如雜交瘤法(例如Kohler and Milstein, Nature, 256:495-497 (1975) ;Hongo et al.，Hybridoma, 14(3):253-260 (1995) ;Harlow et al., Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor LaboratoryPress,second ed.(1988) ;Hammerling et al., In:Monoclonal Antibodies andT-Cell Hybridomas, 563-681(Elsevier, N.Y.，1981))、重組 DNA 法(參見例如美國專利N0.4, 816, 567)、卩遼菌體展不技術(shù)(參見例如Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991) ;Marks et al.，J.Mol.Biol.222: 581-597 (1992) ; Sidhu et al., J.Mol.Biol.338(2):299-310(2004) ; Lee et al.，J.Mol.Biol.340(5): 1073-1093(2004);Fellouse, PNAS USAlOl(34):12467-12472(2004);及 Lee et al.，J.1mmunol.Methods284 (1-2):119-132 (2004))、及用于在具有部分或整個人免疫球蛋白基因座或編碼人免疫球蛋白序列的基因的動物中生成人或人樣抗體的技術(shù)(參見例如W01998/24893;W01996/34096;W01996/33735;ff01991/10741;Jakobovits et al.，PNAS USA90:2551-2555(1993);Jakobovits et al., Nature362:255-258(1993);Bruggemann et al., Year inImmunol.7:33 (1993);美國專利 N0.5，545，807; 5，545，806; 5，569，825; 5，625，126; 5，633，425;和5，661，016;Marks et al., Bio/TechnologylO:779-783 (1992);Lonberg et al., Nature368:856-859(1994);Morrison, Nature368:812-813(1994);Fishwild et al., NatureBiotechnol.14:845-851 (1996);Neuberger, Nature Biotechnol.14:826(1996);及Lonberg and Huszar, Intern.Rev.1mmunol.13:65-93(1995))。單克隆抗體在本文中明確包括“嵌合”抗體，其中重鏈和/或輕鏈的一部分與衍生自特定物種或?qū)儆谔囟贵w類別或亞類的抗體中的相應序列相同或同源，而鏈的剩余部分與衍生自另一物種或?qū)儆诹硪豢贵w類別或亞類的抗體中的相應序列相同或同源，以及此類抗體的片段，只要它們展現(xiàn)出期望的生物學活性(例如美國專利N0.4，816，567;MorriSonet al., PNAS USA81:6851-6855 (1984))。嵌合抗體包括“靈長類化”抗體，其中抗體的抗原結(jié)合區(qū)衍生自通過例如用感興趣抗原免疫獼猴而生成的抗體。非人(例如鼠)抗體的“人源化”形式指最低限度包含衍生自非人免疫球蛋白的序列的嵌合抗體。在一個實施方案中，人源化抗體指人免疫球蛋白(受體抗體)中的HVR殘基用具有期望特異性、親和力和/或能力的非人物種(供體抗體)諸如小鼠、大鼠、家兔、或非人靈長類動物的HVR殘基替換的免疫球蛋白。在有些情況中，將人免疫球蛋白的FR殘基用相應的非人殘基替換。此外，人源化抗體可包含在受體抗體或供體抗體中沒有找到的殘基?？梢赃M行這些修飾來進一步改進抗體的性能。一般而言，人源化抗體將包含至少一個、通常兩個基本上整個如下可變域， 其中所有或基本上所有高變環(huán)對應于非人免疫球蛋白的高變環(huán)，且所有或基本上所有FR是人免疫球蛋白序列的FR。人源化抗體任選還將包含至少部分免疫球蛋白恒定區(qū)(Fe)，通常是人免疫球蛋白的恒定區(qū)。更多細節(jié)參見例如Jones et al.，Nature321:522-525 (1986) ; Riechmann et al., Nature332:323-329 (1988) ;&Presta, Curr.0p.Struct.Biol.2:593-596 (1992)。還可參見例如 Vaswani and Hamilton, Ann.Allergy,AsthmafcTmmuno1.1:105-115 (1998) ; Harris, Biochem.Soc.Transactions23:1035-1038 (1995) ;Hurle and Gross, Curr Op.Biotech.5:428-433(1994);及美國專利 N0.6，982，321 和7，087，409。“人抗體”指擁有與由人生成的抗體的氨基酸序列對應的氨基酸序列和/或使用本文所公開的用于生成人抗體的任何技術(shù)生成的抗體。人抗體的這種定義明確排除包含非人抗原結(jié)合殘基的人源化抗體。人抗體可使用本領域已知的多種技術(shù)來生成，包括曬菌體展不文庫(Hoogenboom and Winter, J.Mol.Biol., 227:381 (1991) ;Markset al.，J.Mol.Biol.,222:581-597(1991))。還可用于制備人單克隆抗體的是以下文獻中記載的方法:Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, AlanR.Liss, p.77 (1985) ;Boerner et al., J.1mmunol.147(1):86-95(1991)。還可參見 van Dijkand van de Winkel, Curr.0pin.Pharmacol.，5:368-74(2001)?？赏ㄟ^給已經(jīng)修飾以應答抗原性刺激而生成人抗體但其內(nèi)源基因組已經(jīng)失能的轉(zhuǎn)基因動物例如經(jīng)過免疫的異種小鼠(xenomice)施用抗原來制備人抗體(參見例如6，075, 181和6，150, 584，關于XEN0M0USE 技術(shù))。還可參見例如Li et al., PNAS USA，103:3557-3562 (2006)，關于經(jīng)人B-細胞雜交瘤技術(shù)生成的人抗體。術(shù)語“高變區(qū)”、“HVR”或“HV”在用于本文時指抗體可變域中序列上高度可變和/或形成結(jié)構(gòu)上定義的環(huán)的區(qū)域。通常，抗體包含六個HVR:三個在VH中(H1、H2、H3)，三個在VL中(L1、L2、L3)。在天然抗體中，H3和L3展示這六個HVR的最大多樣性，而且認為特別是H3在賦予抗體以精密特異性中發(fā)揮獨特作用。參見例如Xu et al.，Immunityl3:37-45 (2000);Johnson and Wu, In:Methods in Molecular Biology,248:1-25(Lo, ed., HumanPress, Totowa, NJ, 2003)。事實上,僅由重鏈組成的天然存在camelid抗體在缺乏輕鏈時是有功能的且穩(wěn)定的。參見例如 Hamers-Casterman et al.，Nature363:446-448 (1993)，及Sheriff et al., Nature Struct.Biol.3:733-736 (1996)。本文中使用且涵蓋許多HVR的敘述。作為Kabat互補決定區(qū)(OTR)的HVR是以序列變異性為基礎的，而且是最常用的(Kabat et al., Sequences of Proteins ofImmunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes ofHealth, Bethesda, MD (1991))。Chothia 改為指結(jié)構(gòu)環(huán)的位置(Chothia and Lesk, J.Mol.Biol.196:901-917(1987)) o AbM HVR 代表 Kabat CDR 與 Chothia 結(jié)構(gòu)環(huán)之間的折衷，而且得到Oxford Molecular的AbM抗體建模軟件的使用?！敖佑|”HVR是以對可獲得的復合物
晶體結(jié)構(gòu)的分析為基礎的。下文記錄了這些HVR中每一個的殘基。
權(quán)利要求
1.一種鑒定會受益于包含VEGF拮抗劑的抗癌療法治療的患者的方法，該方法包括:測定自患者獲得的樣品中VEGF121和VEGFlltl的表達水平，其中自患者獲得的樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平指示該患者會受益于該抗癌療法的治療。
2.一種預測患有癌癥的患者對包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法治療的響應性的方法，該方法包括:測定自患者獲得的樣品中VEGF121和VEGFlltl的表達水平，其中自患者獲得的樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平指示該患者更有可能響應該抗癌療法的治療。
3.一種用于確定有癌癥的患者會展現(xiàn)出受益于包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法的可能性的方法，該方法包括:測定自患者獲得的樣品中VEGF121和VEGFlltl的表達水平，其中自患者獲得的樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照水平指示該患者具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。
4.一種優(yōu)化包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法的治療功效的方法，該方法包括:測定自患者獲得的樣品中VEGF121和VEGFlltl的表達水平，其中自患者獲得的樣品中的VEGF121和VEGFnc^K平處于或高于參照水平指示該患者具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。
5.一種用于治療患者中的癌癥的方法，該方法包括:確定自患者獲得的樣品具有處于或高于參照樣品中VEGF121和VEGFlltl水平的VEGF121和VEGFlltl水平，并對所述患者施用有效量的包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法，由此該癌癥得到治療。
6.權(quán)利要求1至5任一項的方法，其中所述癌癥選自下組:結(jié)腸直腸癌，成膠質(zhì)細胞瘤，腎癌，卵巢癌，乳腺癌，胰腺癌，胃癌，和肺癌。
7.權(quán)利要求1至5任一項的方法，其中所述自患者獲得的樣品選自下組:全血，血漿，血清，及其組合。
8.權(quán)利要求1至5任一項的方法，其中所述VEGF121和VEGFlltl水平是蛋白質(zhì)水平。
9.權(quán)利要求8的方法，其中所述蛋白質(zhì)水平是通過測量血漿蛋白質(zhì)水平而測定的。
10.權(quán)利要求9的方法，其中自患者獲得的樣品中VEGF121和VEGFlltl的血漿水平處于或高于參照樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平指示該患者會受益于該抗癌療法、更有可能響應該抗癌療法、或具有升高的受益于該抗癌療法的可能性。
11.權(quán)利要求1至4任一項的方法，進一步包括對所述患者施用有效量的包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法。
12.權(quán)利要求11的方法，其中所述VEGF-A拮抗劑是抗體。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述抗體是貝伐單抗。
14.權(quán)利要求11的方法，進一步包括施用有效量的選自下組的第二抗癌療法:細胞毒齊[J，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。
16.權(quán)利要求14的方法，其中所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。
17.權(quán)利要求14的方法，進一步包括施用有效量的選自下組的第三抗癌療法:細胞毒齊[J，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。
19.權(quán)利要求17的方法，其中所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。
20.權(quán)利要求5的方法，其中所述VEGF-A拮抗劑是抗體。
21.權(quán)利要求20的方法，其中所述抗體是貝伐單抗。
22.權(quán)利要求5的方法，其中所述抗癌療法進一步包括施用有效量的選自下組的第二抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。
23.權(quán)利要求19的方法，其中所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。
24.權(quán)利要求19的方法，其中所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。
25.權(quán)利要求19的方法，其中所述抗癌療法進一步包括施用有效量的選自下組的第三抗癌療法:細胞毒劑，化療劑，生長抑制劑，和抗血管發(fā)生劑，及其組合。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑并行施用。
27.權(quán)利要求25的方法，其中所述第三抗癌療法、所述第二抗癌療法和所述VEGF-A拮抗劑序貫施用。
28.一種用于確定患者是否會受益于包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法的治療的試劑盒，該試劑盒包括:能夠特異性結(jié)合選自VEGF121和VEGFlltl的至少一種生物標志物的化合物套組，和使用所述化合物來測定至少一種生物標志物的水平以預測患者對包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法的治療的響應性的說明，其中VEGF121和VEGFlltl水平處于或高于參照樣品中的VEGF121和VEGFlltl水平指示該患者會受益于包含VEGF-A拮抗劑的抗癌療法的治療。
29.權(quán)利要求28的試劑盒，其中所述化合物是蛋白質(zhì)。
30.權(quán)利要求29的試劑盒，其中所述蛋白質(zhì)是抗體。
31.一種用于檢測選自VEGF121和VEGFlltl的至少一種生物標志物的水平的化合物套組，該套組包括能夠特異性結(jié)合選自VEGF121和VEGFlltl的至少一種生物標志物的至少一種化合物。
32.權(quán)利要求31的化合物套組，其 中所述化合物是蛋白質(zhì)。
33.權(quán)利要求32的化合物套組，其中所述蛋白質(zhì)是抗體。
全文摘要
本發(fā)明提供用于鑒定會受益于包含VEGF拮抗劑的抗癌療法治療的患者的方法。本發(fā)明還提供用于監(jiān)測患者對抗癌療法的響應的方法。本發(fā)明還提供用于所述方法的試劑盒和制品。
文檔編號G01N33/574GK103180738SQ201180044999
公開日2013年6月26日 申請日期2011年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月19日
發(fā)明者H.安德烈斯, S.L.德哈斯, R.埃利奧特, J.卡爾, Y-J.G.孟, G.D.普洛曼, S.謝勒, N.懷爾德 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司