專(zhuān)利名稱(chēng)：紅景天提取物中主要成分的含量測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥藥材的檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及中藥藥材紅景天的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
大花紅景天為景天科紅景天屬Rhodiola crenulata(Hook. f. et Thoms. )H. Ohba 植物的干燥根和根莖，為2010年版中國(guó)藥典明確規(guī)定的僅此一種景天屬植物的藥用資源。 我國(guó)為大花紅景天的分布中心，儲(chǔ)存量大，植物中含有紅景天苷、酪醇、大花紅天素、多酚類(lèi)及多糖類(lèi)等?，F(xiàn)代藥理研究表明紅景天具有抗衰老、抗氧化性溶血、抗輻射等活性。近年來(lái)的“紅景天熱”使得紅景天提取物被廣泛應(yīng)用，其質(zhì)量是保證藥效的前提，有較多文獻(xiàn)報(bào)道用高效液相法測(cè)定紅景天藥材中有效成分
權(quán)利要求
1.一種紅景天提取物中主要成分的含量測(cè)定方法，其特征在于，包括下述步驟1)以乙醇作為溶劑，從紅景天中制備紅景天提取物；2)分別制備沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液、紅景天苷對(duì)照品溶液、酪醇對(duì)照品溶液和對(duì)香豆酸對(duì)照品溶液以及紅景天提取物供試品溶液；3)利用高效液相色譜分析法在雙波長(zhǎng)同時(shí)檢測(cè)紅景天提取物中沒(méi)食子酸、紅景天苷、 酪醇和對(duì)香豆酸含量；色譜條件為HPLC色譜柱為Phenomenex Luna C18柱,流動(dòng)相為乙腈(A)-O.1 O. 5% 冰醋酸溶液(B)，洗脫程序?yàn)? — 5min, A從O線(xiàn)性上升至6 12%，B從100%線(xiàn)性下降至94 88% ；5 — 30min, A從6 12%線(xiàn)性上升至20 30%，B從94 88%線(xiàn)性下降至80 70% ；30 — 35min, A從20 30%線(xiàn)性上升至35 45%，B從80 70%線(xiàn)性下降至65 55% ;柱溫20 400C ;體積流量O. 5 1. 5mL .mirT1 ;檢測(cè)波長(zhǎng):275nm、308nm ； 進(jìn)樣量2 20 μ I ;4)根據(jù)高效液相色譜分析結(jié)果計(jì)算紅景天提取物中沒(méi)食子酸、紅景天苷、酪醇和對(duì)香丑酸的含量。
2.如權(quán)利要求1所述的含量測(cè)定方法，其特征在于以15-30%乙醇為溶劑制備紅景天提取物。
3.如權(quán)利要求2所述的含量測(cè)定方法，其特征在于以20%乙醇為溶劑制備紅景天提取物。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述色譜條件為HPLC 色譜柱為 Phenomenex Luna C18 柱(4. 6mmX 250mm, 5 μ m),流動(dòng)相為乙臆 (A)-O. 3%冰醋酸溶液(B)，洗脫程序?yàn)? 5min，9% A ；5 30min，9% 25% A，30 35min, 25 40% A ;柱溫40°C ;體積流量 O. 7mL · min_l ;檢測(cè)波長(zhǎng):275nm、308nm ;進(jìn)樣量 10 μ I。
5.如權(quán)利要求1所述的含量測(cè)定方法，其特征在于，從紅景天中制備紅景天提取物包括以下步驟1)取紅景天藥材用6 10倍量的水煎煮I 3h，過(guò)濾，得第一次濾液和濾渣，濾渣再加6 10倍量的水煎煮I 3h，過(guò)濾，得第二次濾液，合并兩次濾液并減壓濃縮至濾液的 1/20 1/12體積，獲得濃縮液I ;2)用大孔樹(shù)脂對(duì)濃縮液I進(jìn)行純化，以紅景天藥材與樹(shù)脂的重量比1:1 3進(jìn)行上樣；然后先以水洗脫，棄去水液，再以15 30%乙醇洗脫，收集15 30%乙醇洗脫液；3)將洗脫液濃縮至密度1.05 1. 10，得濃縮液II ；4)用75 85%乙醇醇沉濃縮液II12 36h，得上清液，棄沉淀；5)將醇沉上清液濃縮、干燥、粉碎，獲得紅景天提取物。
6.如權(quán)利要求5所述的含量測(cè)定方法，其特征在于，從紅景天中制備紅景天提取物包括以下步驟1)取紅景天藥材用8倍量的水煎煮2h，過(guò)濾，得第一次濾液和濾渣，濾渣再加8倍量的水煎煮2h，過(guò)濾，得第二次濾液，合并兩次濾液并減壓濃縮至濾液的1/16體積，獲得濃縮液 I ;2)用大孔樹(shù)脂對(duì)濃縮液I進(jìn)行純化，以紅景天藥材與樹(shù)脂的重量比1: 2進(jìn)行上樣；然后先以水洗脫，棄去水液，再以20%乙醇洗脫，收集20%乙醇洗脫液；3)將洗脫液濃縮至密度1.05 1. 10，得濃縮液II ；4)用80%乙醇醇沉濃縮液1124 32h，得上清液，棄沉淀；5)將醇沉上清液濃縮、干燥、粉碎，獲得紅景天提取物。
7.如權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液、紅景天苷對(duì)照品溶液、酪醇對(duì)照品溶液和對(duì)香豆酸對(duì)照品溶液的制備方法包括分別稱(chēng)取適量沒(méi)食子酸對(duì)照品、紅景天苷對(duì)照品、酪醇對(duì)照品和對(duì)香豆酸對(duì)照品，用甲醇溶解并稀釋成濃度為391. 2μ g · mL—1的沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液、1460. O μ g · mL—1的紅景天苷對(duì)照品溶液、 1000. 8 μ g · ml/1的酪醇對(duì)照品溶液和517. 6 μ g · ml/1的對(duì)香豆酸對(duì)照品溶液。
8.如權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述紅景天提取物供試品溶液的制備方法包括稱(chēng)取紅景天提取物50重量份，加入10 30%乙醇溶解并定溶至25體積份，搖勻，即得。
9.如權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述紅景天提取物由大花紅景天或大株紅景天藥材制備而得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種紅景天提取物中沒(méi)食子酸、紅景天苷、酪醇和對(duì)香豆酸含量測(cè)定方法，包括分別制備沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液、紅景天苷對(duì)照品溶液、酪醇對(duì)照品溶液、對(duì)香豆酸對(duì)照品溶液和制備紅景天提取物供試品溶液；以Phenomenex Luna C18(4.6mm×250mm，5μm)色譜柱、乙腈-0.3％冰醋酸溶液流動(dòng)相、柱溫40℃、體積流量0.7mL·min-1，分別在波長(zhǎng)275nm和308nm下測(cè)定對(duì)照品溶液和的供試品溶液并記錄色譜圖并計(jì)算紅景天提取物供試品溶液中沒(méi)食子酸、紅景天苷、酪醇和對(duì)香豆酸的含量。
文檔編號(hào)G01N30/08GK102998383SQ20121045083
公開(kāi)日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2012年11月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月12日
發(fā)明者蕭偉, 王振中, 畢宇安, 李家春, 林夏, 胡軍華, 秦建平 申請(qǐng)人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司