專利名稱：快速聯(lián)檢血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型屬于臨床體外診斷試劑技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種快速聯(lián)檢血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血試劑盒，應(yīng)用免疫學(xué)原理，通過檢測人糞便中的血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血，發(fā)現(xiàn)下消化道出血癥狀，早期診斷直腸癌或結(jié)腸癌等下消化道腫瘤。
背景技術(shù)：
幾便中的血紅蛋白(Hb,Hemoglobin)又叫大便潛血(FecalOccult Blood,FOB),目前在臨床被看作是直腸癌、結(jié)腸癌的腫瘤標(biāo)志物之一。血紅蛋白容易與結(jié)合珠蛋白
(Hp, Haptoglobin,又譯為觸珠蛋白、珠球蛋白)結(jié)合形成穩(wěn)定不可逆的復(fù)合物-血紅蛋
白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物(Hb-Hp Complex)。檢驗大便潛血大致可分為化學(xué)檢測法(Gumac test)及免疫檢測法。化學(xué)法較煩瑣且整個過程患者很受罪，目前普遍采用免疫檢測法，即通過抗人血紅素球蛋白特異性抗體采用免疫夾心來檢測人類血紅素球蛋白，此法因系針對人類血紅素球蛋白反應(yīng)，故特異性高。但潛血反應(yīng)測的是有無潛血，而不是有無有腫瘤標(biāo)志，潛血反應(yīng)呈陽性必須用其它方法確認(rèn)，例腸鏡等，這是因為可能由其它因素引起的偶爾出血陽性，同樣潛血反應(yīng)陰性也有可能是假陰性，這是由于早期腫瘤少量出血和便中結(jié)合珠蛋白形成復(fù)合物，而這種復(fù)合物抗血紅蛋白抗體不能對之識別，檢測結(jié)果呈陰性。日本的目黑高志(Takashi Meguix)，北海道醫(yī)誌69(4)，1994)對48例結(jié)腸癌或直腸癌患者的糞便，用放射免疫法檢測其血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物(Hb-Hp)及血紅蛋白(Hb)，結(jié)果陽性分別為44例及35例，這里至少有9例便潛血者為假陰性，也就是說測定大便潛血診斷直腸癌或結(jié)腸癌的陽性符合率僅在70%左右，而測定血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白的復(fù)合物對直腸癌或結(jié)腸癌的陽性符合率在90%以上，造成測定大便潛血對直腸癌或結(jié)腸癌20% -30%假陰性主要原因由消化道少量出血，釋出的血紅蛋白(Hb)在經(jīng)過較長的腸道時與糞便內(nèi)的Hp結(jié)合成復(fù)合物引起潛血假陰性，顯然檢糞便中的血紅蛋白來診斷是否患直腸癌或結(jié)腸癌的腫瘤標(biāo)志物有嚴(yán)重漏檢?？焖俾?lián)檢血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血試劑盒針對這些缺陷采用免疫層析膠體金技術(shù)，快速、簡便同時檢測大便中的血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物(Hb-Hp)和大便潛血的人血紅蛋白(Hb)可以消除上述弊端，準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)消化道癌變引起的少量出血，提高早期直腸癌或結(jié)腸癌診斷準(zhǔn)確率，也為早期診斷此病提供快速、簡便的手段和及時治療。本診斷試劑盒的特點快速簡便、不需要任何儀器設(shè)備，又由于采用特異性抗體的免疫反應(yīng)所以準(zhǔn)確性高。檢測結(jié)果大便潛血和血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物(Hb-Hp)都是陽性或血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物(Hb-Hp)陽性者，則高度懷疑是下消化道出血，很可能患直腸癌或結(jié)腸癌等下消化道腫瘤，建議進一步診斷加以確認(rèn)，例腸鏡；如果血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物(Hb-Hp)陰性而血紅蛋白(Hb)陽性可能由突發(fā)性炎癥引起的；大便潛血和血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物(Hb-Hp)都是陰性者，說明下消化道沒有出血。發(fā)明內(nèi)容快速聯(lián)檢血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血試劑盒，由一根試條同時檢測血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物(Hb-Hp)和血紅蛋白(Hb)組成的試劑盒。本試劑盒結(jié)構(gòu)特征試劑盒可以方便地同時檢測人糞便中的血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血，可以應(yīng)用于早期診斷直腸癌或結(jié)腸癌等下消化道腫瘤，試劑盒由樣品處理墊、膠體金結(jié)合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊和粘性底板組成，在同一個試劑盒上，同時使用抗人血紅蛋白單克隆抗體和抗人結(jié)合珠蛋白抗體，膠體金結(jié)合墊附著有經(jīng)過血紅蛋白單克隆抗體標(biāo)記的膠體金顆粒和結(jié)合珠蛋白抗體標(biāo)記的膠體金顆粒，硝酸纖維素膜的檢測線處同時包被有抗人結(jié)合珠蛋白抗體和抗人血紅蛋白單克隆抗體，控制線處包被有羊抗鼠IgG。為了證明試劑有效性和易判讀，在質(zhì)控區(qū)(C)包被羊抗鼠二抗IgG為質(zhì)控線，所以不管結(jié)果怎樣質(zhì)控線C始終出現(xiàn)。

附圖1是本試劑盒的結(jié)構(gòu)示意圖。圖中1.樣品處理墊，2.膠體金結(jié)合墊，3.硝酸纖維素膜，4.吸水墊，5.粘性底板，
6.檢測區(qū)。附圖2是本試劑盒增加塑料外殼的外部形態(tài)示意圖。圖中“C”是控制線的位置，“Hb-Hp”是血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物檢測線的位置，“Hb”是大便潛血檢測線的位置。附圖3是本試劑盒的陽性結(jié)果示意圖。圖中1.血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血均是陽性，2.大便潛血是陰性、血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物是陽性，3.大便潛血是陽性、血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物是陰性。
具體實施方式
以下結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明做進一步說明。1.樣品墊處理按下表配方(按百分比計算)配制，均勻鋪在樣品處理墊上并維持在37°C，相對濕度小于20%干燥。
權(quán)利要求1.快速聯(lián)檢血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血試劑盒，其特征是可以方便地同時檢測人糞便中的血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血，可以應(yīng)用于早期診斷直腸癌或結(jié)腸癌等下消化道腫瘤，由樣品處理墊、膠體金結(jié)合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊和粘性底板組成。
2.如權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征是，在同一個試劑盒上，同時使用抗人血紅蛋白單克隆抗體和抗人結(jié)合珠蛋白抗體。
3.如權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征是，膠體金結(jié)合墊附著有經(jīng)過血紅蛋白單克隆抗體標(biāo)記的膠體金顆粒和結(jié)合珠蛋白抗體標(biāo)記的膠體金顆粒。
4.如權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征是，硝酸纖維素膜的檢測線處同時包被有抗人結(jié)合珠蛋白抗體和抗人血紅蛋白單克隆抗體，控制線處包被有羊抗鼠IgG。
5.如權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征是，為了證明試劑有效性和易判讀，在質(zhì)控區(qū)(C)包被“羊抗鼠二抗IgG”為質(zhì)控線，所以不管結(jié)果怎樣質(zhì)控線C始終出現(xiàn)。
專利摘要一種快速聯(lián)檢血紅蛋白-結(jié)合珠蛋白復(fù)合物和大便潛血試劑盒，是應(yīng)用免疫學(xué)原理和膠體金免疫層析技術(shù)，主要由免疫試條和塑料件組成。本實用新型方法簡單，操作方便，性能穩(wěn)定，結(jié)果準(zhǔn)確，在臨床上對直腸癌或結(jié)腸癌等下消化道出血癥狀的腫瘤早期診斷和鑒別有較大參考意義，由于它快速、簡便、準(zhǔn)確性高的特點適合臨床醫(yī)檢和家庭的自檢，同時為普查此類疾病提供手段，也為醫(yī)療條件落后地方診斷此類疾病提供了手段。
文檔編號G01N33/72GK202903803SQ20122036900
公開日2013年4月24日 申請日期2012年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月27日
發(fā)明者王學(xué)生, 馮吉 申請人:王學(xué)生, 馮吉