一種檢測(cè)雌三醇的絲網(wǎng)印刷電極免疫傳感器的制造方法
【專利摘要】本實(shí)用新型涉及一種測(cè)定雌三醇的絲網(wǎng)印刷電極免疫傳感器。其特征在于，采用印刷板印制工作電極、輔助電極、參比電極，通過引出線與測(cè)試儀器連接，檢測(cè)雌三醇。工作電極、輔助電極、參比電極分別采用碳、碳、Ag/AgCl摻雜的油墨印刷而成，引出線為導(dǎo)電銀漿，引出線部分被絕緣層遮覆，在工作電極表面依次設(shè)置銀雜化石墨烯層和雌三醇抗體層，本實(shí)用新型傳感器制作成本低、產(chǎn)品能一次性可拋使用、檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定、檢測(cè)操作方便，適用于雌三醇的一次性、快速、高靈敏測(cè)定。
【專利說明】—種檢測(cè)雌三醇的絲網(wǎng)印刷電極免疫傳感器
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及一種檢測(cè)雌三醇的絲網(wǎng)印刷電極免疫傳感器。具體是將銀雜化石墨烯用于制作印刷電極，實(shí)現(xiàn)雌三醇的測(cè)定。屬于新型功能材料、生物傳感和環(huán)境監(jiān)測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]雌三醇屬于環(huán)境雌激素。所謂環(huán)境雌激素，是指環(huán)境中存在的一些能夠像激素一樣影響生物體內(nèi)分泌功能的化學(xué)物質(zhì)，即“外因型內(nèi)分泌擾亂化學(xué)物質(zhì)”。它們并不直接作為有毒物質(zhì)給生物體帶來異常的影響，而是具有類似激素的作用，即便數(shù)量極少，也會(huì)使生物體的內(nèi)分泌失衡，而出現(xiàn)異常。人類可通過消化道、呼吸道、皮膚等途徑接觸環(huán)境雌激素。當(dāng)體內(nèi)蓄積的環(huán)境雌激素在應(yīng)激(包括某些疾病)、妊娠及營養(yǎng)不良時(shí)，就從脂肪組織中釋放出來進(jìn)入血液，并可能引起相應(yīng)的生物學(xué)效應(yīng)。環(huán)境雌激素的生物學(xué)效應(yīng)包括對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響、對(duì)生殖與發(fā)育的影響、致癌作用、神經(jīng)系統(tǒng)毒效應(yīng)和對(duì)免疫系統(tǒng)的影響等。
[0003]現(xiàn)有雌三醇的分析監(jiān)測(cè)方法主要有氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)、液相色譜-質(zhì)譜(LS-MS)等，這些方法為環(huán)境污染物的分析提供了準(zhǔn)確、可靠的分析檢測(cè)手段。然而色譜分析方法，不但儀器昂貴，而且須進(jìn)行繁雜的前處理，如加標(biāo)、萃取、凈化、濃縮等，一般分析一組試樣要花費(fèi)較長(zhǎng)的時(shí)間，且分析的費(fèi)用也較高，不便于推廣應(yīng)用。因此發(fā)展快速、簡(jiǎn)便、靈敏的雌三醇檢測(cè)手段顯得十分必要。
[0004]本實(shí)用新型使用印刷電極構(gòu)建的免疫傳感器測(cè)定雌三醇，與其它檢測(cè)方法相比，具有靈敏度高，特異性好，成本低廉、快速方便等優(yōu)勢(shì)，可實(shí)現(xiàn)雌三醇的高靈敏檢測(cè)。
實(shí)用新型內(nèi)容
[0005]本實(shí)用新型的技術(shù)方案是:
[0006]該傳感器的印刷電極是，在聚對(duì)苯二甲酸二乙酯(PET)基底上依次印刷導(dǎo)電銀漿，制成電極條和電極觸點(diǎn)；印刷導(dǎo)電碳漿，制成輔助電極；印刷導(dǎo)電碳油墨，制成工作電極；印刷銀/氯化銀混合油墨，制成參比電極；印刷絕緣油墨覆蓋中間導(dǎo)電部分，制成絕緣層；在工作電極區(qū)域，制成一個(gè)電解池凹槽；制得絲網(wǎng)印刷電極；在所述絲網(wǎng)印刷電極的工作電極表面上，設(shè)置有銀雜化石墨烯層和雌三醇抗體層，引出線端與電化學(xué)工作站連接。
[0007]所述納米材料為銀雜化石墨烯，其作用是用來提高抗體固載量，增強(qiáng)電子傳遞能力。
[0008]所述電解池凹槽，放置含有硫堇的PBS緩沖溶液。
[0009]所述絲網(wǎng)印刷電極免疫傳感器用于雌三醇的檢測(cè)。
[0010]本實(shí)用新型具備以下優(yōu)勢(shì):
[0011](I)本實(shí)用新型采用銀雜化石墨烯作為印刷電極制作材料，可增大工作電極的表面積，提高抗體固載量，增強(qiáng)電子傳遞的作用，提高了傳感器的靈敏度。
[0012](2)本實(shí)用新型采用銀雜化石墨烯具有良好的生物相容性，增強(qiáng)了傳感器的穩(wěn)定性，使檢測(cè)結(jié)果重現(xiàn)性好。
[0013](3)本實(shí)用新型傳感器利用抗原抗體的特異反應(yīng)，使傳感器特異性好。
[0014](4)本實(shí)用新型傳感器檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、快速，易于推廣。
[0015](5)本實(shí)用新型傳感器與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有制備簡(jiǎn)單、加工方便、成本低、易于商品化。
[0016](6)本實(shí)用新型制備的免疫傳感器，可實(shí)現(xiàn)對(duì)雌三醇的測(cè)定，提高了檢測(cè)靈敏度?！緦＠綀D】

【附圖說明】
[0017]圖1為印刷電極構(gòu)造圖。
[0018]圖1標(biāo)號(hào)說明:1、電極引條，2、電極觸點(diǎn)，3、輔助電極，4、工作電極，5、參比電極，
6、絕緣層，7、電解池凹槽。
[0019]圖2為免疫傳感器層層設(shè)置圖。
【具體實(shí)施方式】
[0020]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例進(jìn)一步說明本實(shí)用新型。
[0021]實(shí)施例1絲網(wǎng)印刷電極的制備
[0022]本實(shí)用新型結(jié)合圖1，進(jìn)行印刷電極的制備，整個(gè)印刷電極在厚度為0.5mm、長(zhǎng)度為40mm、寬度為IOmm的PET板。
[0023]制備步驟如下:
[0024](I)在PET基底上印刷導(dǎo)電銀漿(ED-479SS，美國埃奇森公司)制成的電極條I和電極觸點(diǎn)2，100°C熱固化12h。
[0025](2)印刷導(dǎo)電碳漿(ED-423SS，美國埃奇森公司)制成輔助電極3，100°C熱固化12h。
[0026](3)印刷導(dǎo)電碳油墨形成工作電極4，100°C熱固化12h。
[0027](4)印刷銀/氯化銀混合參比油墨(美國埃奇森公司)制成參比電極5，100°C熱固化 12h。
[0028](5)印刷絕緣油墨(ED-452SS，美國埃奇森公司)覆蓋中間導(dǎo)電部分，制成絕緣層6和電解池凹槽7，紫外光固化30s，絲網(wǎng)印刷電極制備完成。
[0029]熱固化溫度和時(shí)間由商業(yè)油墨提供的油墨固化信息要求決定。
[0030]實(shí)施例2本實(shí)用新型傳感器的制備及檢測(cè)
[0031](I)取一片實(shí)施例1制備的絲網(wǎng)印刷電極，用超純水沖洗，去掉電極表面的其他物質(zhì)；在工作電極表面滴涂銀雜化石墨烯，室溫晾干。
[0032](2)滴涂雌三醇抗體，4°C條件下晾干，用超純水清洗電極，晾干。
[0033](3)取質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的BSA溶液，滴涂在電極表面，封閉電極上非特異性的活性位點(diǎn)，保持電極濕潤(rùn)4h，在4°C條件下晾干，然后用超純水清洗電極，晾干，絲網(wǎng)印刷電極免疫傳感器制備完成，直于4 C冰箱中備用。
[0034](4)將被檢測(cè)樣品進(jìn)行預(yù)處理，分別取6PL滴涂于工作電極上，保持電極濕潤(rùn)2h。
[0035](5)在電解池凹槽內(nèi)，加入IOOPL pH為7.4的含有SmmoH1硫堇的PBS緩沖溶液，利用方波伏安法，對(duì)樣品中雌三醇進(jìn)行檢測(cè)。
【權(quán)利要求】
1.一種測(cè)定雌三醇的絲網(wǎng)印刷電極免疫傳感器，其特征在于，在聚對(duì)苯二甲酸二乙酯(PET)基底上依次印刷導(dǎo)電銀漿，制成電極條(I)和電極觸點(diǎn)(2);印刷導(dǎo)電碳漿，制成輔助電極(3);印刷導(dǎo)電碳油墨制成工作電極(4);印刷銀/氯化銀混合油墨，制成參比電極(5);印刷絕緣油墨覆蓋中間導(dǎo)電部分，制成絕緣層(6);在工作電極區(qū)域，制成一個(gè)電解池凹槽(7);制得絲網(wǎng)印刷電極；在所述絲網(wǎng)印刷電極的工作電極表面上，設(shè)置有銀雜化石墨烯層和雌三醇抗體層，引出線端與電化學(xué)工作站連接。
【文檔編號(hào)】G01N27/416GK203479746SQ201320630834
【公開日】2014年3月12日 申請(qǐng)日期:2013年10月14日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月14日
【發(fā)明者】魏琴, 李玉陽, 劉偉華, 吳丹, 張勇, 杜斌, 馬洪敏, 李燕 申請(qǐng)人:濟(jì)南大學(xué)