一種腦血栓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種腦血栓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在腦血栓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，增加了丹參、川芎和赤芍的定性鑒別，建立了高效液相色譜法測(cè)定赤芍、丹參有效成分含量測(cè)定方法,力圖摸索出簡(jiǎn)便、去除干擾效果好的測(cè)定方法。通過(guò)摸索樣品的預(yù)處理和分離條件,建立高效液相色譜法測(cè)定腦血栓片中芍藥苷、丹參酮IIA的含量測(cè)定方法，去除干擾效果好，方法專屬性強(qiáng)，可用于控制本制劑的質(zhì)量。
【專利說(shuō)明】一種腦血栓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明公開(kāi)一種腦血栓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，涉及一種質(zhì)量控制方法，屬于中醫(yī)制藥【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]腦血栓片由紅花、當(dāng)歸、水蛭、赤芍、桃仁、川芎、丹參、土鱉蟲(chóng)、羚羊角、牛黃10味組成，腦血栓片具有活血化瘀，醒腦通絡(luò)，潛陽(yáng)熄風(fēng)。用于因淤血、肝陽(yáng)上亢出現(xiàn)之中風(fēng)先兆，如肢體麻木、頭暈?zāi)垦５群湍X血栓形成出現(xiàn)的中風(fēng)不語(yǔ)、口眼歪斜、半身不遂等癥，具有預(yù)防和治療作用。原標(biāo)準(zhǔn)中[鑒別]項(xiàng)只有I個(gè)薄層色譜鑒別，較簡(jiǎn)單，不足以控制藥品質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明目的在于公開(kāi)一種腦血栓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，用于腦血栓片的質(zhì)量控制。
[0004]本發(fā)明提供的一種腦血栓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)質(zhì)量控制:
采用薄層色譜法對(duì)丹參、川芎和赤芍的定性鑒別，通過(guò)摸索樣品的預(yù)處理和分離條件，建立高效液相色譜法測(cè)定腦血栓片中芍藥苷、丹參酮IIA的含量測(cè)定方法，具體步驟如下:
丹參鑒別:取腦血栓片，研磨精密稱取l_5g，加入乙酸乙酯10-30mL，水浴回流30min，濾過(guò)，濾液揮干加入0.5-3mL乙酸乙酯復(fù)溶，制成供試品溶液；取丹參藥材同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于硅膠G板上，以甲苯-乙酸乙酯(9:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0005]川芎鑒別:取腦血栓片，研磨精密稱取l_5g，加入乙酸乙酯10_30mL，水浴回流30min，濾過(guò)，濾液揮干加入0.5_3mL乙酸乙酯復(fù)溶，制成供試品溶液；取川芎藥材同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于硅膠G板上，以正己烷-乙酸乙酯(9:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0006]赤茍鑒別:取腦血栓片，研磨精密稱取l_5g,加入甲醇20-40mL,超生30min,濾過(guò)，濾液加入l_5mL去離子水復(fù)溶，通過(guò)DlOl大孔樹(shù)脂，以20_40mL去離子水洗脫，棄掉洗脫液，繼續(xù)用3-5%氨液l_5mL洗脫，再用水50_80mL洗脫，水液棄去，最后用40%乙醇30_50mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)铀柡驼〈糏OmL溶解，取上清液，蒸干，殘?jiān)蛹状糽-3mL使溶解，作為供試品溶液，另取芍藥苷對(duì)照品，同法制得對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5uL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一醋酸乙醋一甲醇一甲酸(40:5:10:0.2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0007]含量測(cè)定 赤芍丹參含量共同測(cè)定:取本品研細(xì)精，密稱取本品0.l-1g，置于具塞容量瓶中，精密加入50%甲醇10-35mL，超聲處理lOmin，吸取濾液作為供試品溶液，其特征在于芍藥苷、丹參酮IIA含量共同測(cè)定方法:用十八烷基鍵合硅膠為填充劑:0.05mol/L磷酸二氫鉀-甲醇(30-50:50-70)作為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)250nm。理論塔板數(shù)不低于3000。進(jìn)樣量10uL，以丹參酮含量計(jì)不低于0.lmg/Ig,以茍藥苷計(jì)不低于10mg/g。
[0008]本發(fā)明的積極效果在于:
本質(zhì)量控制方法能對(duì)腦血栓片進(jìn)行有效控制，之前的中藥部頒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅對(duì)制劑中原料牛黃進(jìn)行薄層色譜定性鑒別，本發(fā)明增加了赤芍、丹參和川芎的薄層色譜鑒別并且進(jìn)一步增加了赤芍丹參含量高效液相色譜的共同測(cè)定。去除干擾效果好，方法專屬性強(qiáng)，可用于控制本制劑的質(zhì)量。
【具體實(shí)施方式】
[0009]通過(guò)以下實(shí)施例進(jìn)一步舉例描述本發(fā)明，并不以任何方式限制本發(fā)明，在不背離本發(fā)明的技術(shù)解決方案的前提下，對(duì)本發(fā)明所作的本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易實(shí)現(xiàn)的任何改動(dòng)或改變都將落入本發(fā)明的權(quán)利要求范圍之內(nèi)。
[0010]以下為具體實(shí)施例 實(shí)施例1
取腦血栓片，研磨精密稱取lg，加入乙酸乙酯10mL，水浴回流30min，濾過(guò)，濾液揮干加入0.5mL乙酸乙酯復(fù)溶，制成供試品溶液；取丹參藥材同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于硅膠G板上，以甲苯-乙酸乙酯(9:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0011]實(shí)施例2
取腦血栓片，研磨精密稱取5g,加入乙酸乙酯30mL,水浴回流30min,濾過(guò),濾液揮干加入3mL乙酸乙酯復(fù)溶，制成供試品溶液；取川芎藥材同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于硅膠G板上，以正己烷-乙酸乙酯(9:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0012]實(shí)施例3
取腦血栓片，研磨精密稱取3g,加入甲醇30mL,超生30min,濾過(guò),濾液加入l_5mL去離子水復(fù)溶，通過(guò)DlOl大孔樹(shù)脂，以30mL去離子水洗脫，棄掉洗脫液，繼續(xù)用3_5%氨液5mL洗脫，再用水80mL洗脫，水液棄去，最后用40%乙醇40mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)铀柡驼〈糏OmL溶解，取上清液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏mL使溶解，作為供試品溶液，另取芍藥苷對(duì)照品，同法制得對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5uL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一醋酸乙醋一甲醇一甲酸(40:5:10:0.2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0013]實(shí)施例4
取本品研細(xì)精，密稱取本品0.5g，置于具塞容量瓶中，精密加入50%甲醇20mL，超聲處理lOmin，吸取濾液作為供試品溶液，其特征在于芍藥苷、丹參酮IIA含量共同測(cè)定方法:用十八烷基鍵合硅膠為填充劑:0.05mol/L磷酸二氫鉀-甲醇(30: 70)作為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)250nm。理論塔板數(shù)不低于3000。進(jìn)樣量10uL，以丹參酮含量計(jì)不低于0.15mg/lg，以芍藥苷計(jì)不低于13.4mg/g。
[0014]實(shí)施例5
取腦血栓片，研磨精密稱取5g,加入乙酸乙酯30mL,水浴回流30min,濾過(guò),濾液揮干加入3mL乙酸乙酯復(fù)溶，制成供試品溶液；取丹參藥材同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于硅膠G板上，以甲苯-乙酸乙酯(9:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0015]實(shí)施例6
取腦血栓片，研磨精密稱取lg，加入乙酸乙酯10mL，水浴回流30min，濾過(guò)，濾液揮干加入0.5mL乙酸乙酯復(fù)溶，制成供試品溶液；取川芎藥材同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于硅膠G板上，以正己烷-乙酸乙酯(9:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0016]實(shí)施例7
取腦血栓片，研磨精密稱取lg，加入甲醇30mL，超生30min，濾過(guò)，濾液加入ImL去離子水復(fù)溶，通過(guò)DlOl大孔樹(shù)脂，以20-40mL去離子水洗脫，棄掉洗脫液，繼續(xù)用3_5%氨液4mL洗脫，再用水50-80mL洗脫，水液棄去，最后用40%乙醇40mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)铀柡驼〈糏OmL溶解，取上清液，蒸干，殘?jiān)蛹状糽_3mL使溶解，作為供試品溶液，另取芍藥苷對(duì)照品，同法制得對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5uL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一醋酸乙醋一甲醇一甲酸(40:5:10:0.2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0017]實(shí)施例8
取本品研細(xì)精，密稱取本品lg，置于具塞容量瓶中，精密加入50%甲醇35mL，超聲處理IOmin,吸取濾液作為供試品溶液，其特征在于芍藥苷、丹參酮IIA含量共同測(cè)定方法:用十八烷基鍵合硅膠為填充劑:0.05mol/L磷酸二氫鉀-甲醇(30-50:50-70)作為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)250nm。理論塔板數(shù)不低于3000。進(jìn)樣量10uL，以丹參酮含量計(jì)不低于0.16mg/lg,以茍藥苷計(jì)不低于14.2mg/g0
[0018]本發(fā)明在腦血栓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，將增加丹參、川芎和赤芍的定性鑒別，建立了高效液相色譜法測(cè)定赤芍、丹參有效成分含量測(cè)定方法，力圖摸索出簡(jiǎn)便、去除干擾效果好的測(cè)定方法。通過(guò)摸索樣品的預(yù)處理和分離條件，建立高效液相色譜法測(cè)定腦血栓片中芍藥苷、丹參酮IIA的含量測(cè)定方法，去除干擾效果好，方法專屬性強(qiáng)，可用于控制本制劑的質(zhì)量。
【權(quán)利要求】
1.一種腦血栓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括以下步驟: 1)取腦血栓片，研磨精密稱取l-5g，加入乙酸乙酯10-30mL，水浴回流30min，濾過(guò)，濾液揮干加入0.5-3mL乙酸乙酯復(fù)溶，制成供試品溶液；取丹參藥材同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于硅膠G板上，以甲苯-乙酸乙酯(9:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 2)取腦血栓片，研磨精密稱取l_5g，加入乙酸乙酯10-30mL，水浴回流30min，濾過(guò)，濾液揮干加入0.5-3mL乙酸乙酯復(fù)溶，制成供試品溶液；取川芎藥材同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于硅膠G板上，以正己烷-乙酸乙酯(9:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干；置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 3)取腦血栓片，研磨精密稱取l_5g,加入甲醇20-40mL,超生30min,濾過(guò)，濾液加入l-5mL去離子水復(fù)溶，通過(guò)DlOl大孔樹(shù)脂，以20_40mL去離子水洗脫，棄掉洗脫液，繼續(xù)用3-5%氨液l-5mL洗脫，再用水50_80mL洗脫，水液棄去，最后用40%乙醇30_50mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)铀柡驼〈糏OmL溶解，取上清液，蒸干，殘?jiān)蛹状糽_3mL使溶解，作為供試品溶液，另取芍藥苷對(duì)照品，同法制得對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5uL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一醋酸乙醋一甲醇一甲酸(40:5:10:0.2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 4)取本品研細(xì)精，密稱取本品0.Ι-lg，置于具塞容量瓶中，精密加入50%甲醇10-35mL，超聲處理lOmin，吸取濾液作為供試品溶液，其特征在于芍藥苷、丹參酮IIA含量共同測(cè)定方法:用十八烷基鍵合硅膠為填充劑:0.05mol/L磷酸二氫鉀-甲醇(30-50:50-70)作為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)250nm ;理論塔板數(shù)不低于3000 ;進(jìn)樣量10uL，以丹參酮含量計(jì)不低于.0.lmg/Ig,以茍藥苷計(jì)不低于10mg/g。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK103698464SQ201410013835
【公開(kāi)日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2014年1月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月13日
【發(fā)明者】董守光 申請(qǐng)人:吉林省通化博祥藥業(yè)股份有限公司