一種煙草腺毛及腺毛分泌物的染色液和染色方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種煙草腺毛及腺毛分泌物的染色液，其特征在于每100ml染色液含1mg固體碘和3mg固體碘化鉀。本發(fā)明可以在顯微鏡下可非常明顯直觀地看到煙草腺毛的形態(tài)結構和其分泌物情況，簡單快速且非常清晰，同時也能對腺毛密度進行準確計數(shù)。本發(fā)明成本低，方法簡單，耗時短，可以短時間內(nèi)檢測大量樣本，獲得可靠結果。
【專利說明】一種煙草腺毛及腺毛分泌物的染色液和染色方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于檢測或測定領域，具體涉及煙草腺毛及腺毛分泌物的染色。
技術背景
[0002]煙草腺毛是煙草表皮毛的一種，占表皮毛的85%左右，有分泌功能，是煙草葉片表面的重要器官。煙草腺毛由表皮細胞特化而來，分為基部、柄部和頭部?；康腎個細胞與表皮相連，柄部由I 一 6個柱形細胞組成，頭部由分泌細胞構成。根據(jù)柄部細胞的數(shù)量和形態(tài)特點可把煙草腺毛分為長柄腺毛和短柄腺毛。長柄腺毛柄部一般有幾個比較明顯的長柱形細胞。短柄腺毛柄部由I?2個較短的柱形細胞構成。腺毛頭部由分泌細胞構成，長柄腺毛頭部較小，而短柄腺毛頭部明顯膨大，四周呈皺褶狀，有凹陷和突起。一般認為腺毛腺頭細胞具有分泌功能，而柄和基細胞不具分泌功能。腺毛能分泌精油、樹脂、蠟質(zhì)(生產(chǎn)上將這些混合物稱為“煙油”)等物質(zhì)，這些物質(zhì)的化學成份主要是烷烴、萜醇、脂肪醇、樹脂、高級脂肪酸及揮發(fā)性醛、酮、酸等的混合物。腺毛分泌物與煙草的香氣和吃味密切相關，是煙葉香氣和吃味的重要前體物質(zhì)，同時對煙草的抗蟲性抗微生物侵染也有重要作用。一般說來，煙草葉片腺毛密度大、分泌物多，香味比較濃，品質(zhì)優(yōu)；煙葉在去除表面分泌物后，香味明顯減弱。因此，煙草腺毛的形態(tài)結構、密度和分泌活動對煙葉香氣品質(zhì)以及煙葉質(zhì)量有重要影響，對煙草腺毛的深入研究在煙草工業(yè)加工和良種選育方面具有重要意義。
[0003]目前對煙草腺毛的形態(tài)結構觀察主要通過掃描電鏡進行。將煙草葉片固定，切片，染色后在電鏡下觀察，可以看到煙草腺毛的細微結構。但通過電鏡觀察煙草腺毛對技術和設備要求較高，費用昂貴，花費時間長，觀察結果受樣品前期處理的影響較大，而且觀察范圍較小，在對煙草葉片腺毛進行大范圍、多樣品研究時有極大困難。另一種觀察煙草腺毛的方法是將煙草葉片做成水玻片直接在顯微鏡下進行觀察。該方法雖然簡單，但觀察結果較差，無法滿足煙草腺毛深入研究的需要。如何對煙草腺毛的形態(tài)結構和分泌活動進行清晰直觀的觀察是一直以來困擾煙草科研工作者的一個難題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種直觀、快捷、方便的煙草腺毛及腺毛分泌物的染色液和染色方法。
[0005]本發(fā)明的目的是通過以下措施實現(xiàn)的:
一種煙草腺毛及腺毛分泌物的染色液，其特征在于每IOOml染色液含Img固體碘和3mg固體碘化鉀。煙草腺毛分泌物可以與碘溶液反應呈現(xiàn)棕褐色，在顯微鏡下可以清楚地觀察到每個腺毛頂部呈棕褐色的腺毛分泌物，從而實現(xiàn)對腺毛的精確觀察。
[0006]采用上述染色液的染色煙草腺毛及腺毛分泌物的方法，染色時間為2?5分鐘。
[0007]采用上述染色液的染色煙草腺毛及腺毛分泌物的方法，包括以下步驟:將煙草葉片浸入上述染色液里染色2?5分鐘，取出后用水沖洗，放在顯微鏡下觀察。使盡可能多的染色物質(zhì)與染料均勻、充分、有機結合，又防止了可溶性染色物質(zhì)的溶解而削弱甚至達不到染色效果。
[0008]有益效果
1.本發(fā)明可以在顯微鏡下可非常明顯直觀地看到煙草腺毛的形態(tài)結構和其分泌物情況，簡單快速且非常清晰，同時也能對腺毛密度進行準確計數(shù)。
[0009]2.本發(fā)明的染色結果以綠色和白色作為背景色，著色為棕褐色或深藍色，色彩差異大，對比強烈，極易觀察，并且可以通過腺毛染色的顏色深淺定量估測所觀察腺毛分泌物量；腺毛直立于葉片上，分泌物粘附在腺毛端部，腺毛易拉倒拉斷，分泌物的量、位置易轉(zhuǎn)移，而本發(fā)明染色后并保留維持了腺毛和分泌物本身的自然形態(tài)，還能對腺毛與分泌物加以區(qū)分，染色結果能真實可靠的反映腺毛及分泌物的生長情況，甚至可用于記錄腺毛的生長發(fā)育的動態(tài)過程，將各階段的生長分泌狀態(tài)固化下來作為研究依據(jù)。
[0010]3.本發(fā)明觀察視野開闊，能真實有效的反映煙草腺毛的生長發(fā)育情況。
[0011]4.本發(fā)明成本低，方法簡單，耗時短，可以短時間內(nèi)檢測大量樣本，獲得可靠結果O
【專利附圖】

【附圖說明】
[0012]圖1實施例1染色前的煙草腺毛圖2實施例1染色后的煙草腺毛。
【具體實施方式】
[0013]下面結合實施例對本發(fā)明的【具體實施方式】做進一步的描述，并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。
[0014]實施例1
材料:野生型煙草TN90
染色液配置:配置IOOml染色液,稱Img固體碘和3mg固體碘化鉀，蒸懼水定容至IOOmlo
[0015]染色步驟:取生長至7周左右完全展開的煙草植株TN90葉片兩片，取樣時取從上往下第五片葉片。將兩個葉片同時浸入染色液里染色2分鐘，拿出后蒸餾水沖洗2次，直接放在體式顯微鏡下觀察。
[0016]結果:未染色的野生型的煙草腺毛及其腺毛分泌物呈透明狀，不易觀察(如圖1)。在顯微鏡下可清晰地觀察到煙草的腺毛形態(tài)和其呈棕褐色的腺毛分泌物(如圖2);通過顯微觀察及計算得知，煙草的腺毛密度為350個/cm2，而且腺毛分泌物量多。
[0017]結論:野生型煙草TN90的葉面手感發(fā)澀，粘性大。經(jīng)染色，可清楚觀察葉片腺毛的密度及分泌物的分泌量。
【權利要求】
1.一種煙草腺毛及腺毛分泌物的染色液，其特征在于每IOOml染色液含Img固體碘和3mg固體碘化鉀。
2.采用權利要求1所述的染色液染色煙草腺毛及腺毛分泌物的方法，染色時間為2?5分鐘。
3.采用權利要求1所述的染色液染色煙草腺毛及腺毛分泌物的方法，包括以下步驟:將煙草葉片浸入上述染色液里染色2?5分鐘，取出后用水沖洗，放在顯微鏡下觀察。
【文檔編號】G01N1/30GK103743611SQ201410020525
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2014年1月16日 優(yōu)先權日:2014年1月16日
【發(fā)明者】張洪博, 王文靜, 劉貫山, 李加納, 馬浩然 申請人:西南大學