用于檢測(cè)氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種用于檢測(cè)氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于：采用活潑硫酯法，將氯霉素半抗原與載體蛋白進(jìn)行偶聯(lián)，制備氯霉素免疫抗原和包被抗原；所述氯霉素半抗原通過(guò)縮醛法為氯霉素引入間隔臂制備而成。本發(fā)明通過(guò)優(yōu)化偶聯(lián)技術(shù)路線，以達(dá)到結(jié)構(gòu)優(yōu)化，提高抗體質(zhì)量，從而進(jìn)一步增加氯霉素免疫膠體金快速檢測(cè)的靈敏度和特異性的免疫抗原和包被抗原。
【專利說(shuō)明】用于檢測(cè)氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食品、化妝品中氯霉素檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是指用于檢測(cè)氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備。
【背景技術(shù)】
[0002]氯霉素是一種廣譜抗生素，其抗菌效果好，價(jià)格低廉，曾廣泛應(yīng)用于預(yù)防和治療動(dòng)物疾病。然而氯霉素具有嚴(yán)重的毒副作用，會(huì)引起動(dòng)物機(jī)體正常菌群失調(diào)，同時(shí)可能引起人的再生障礙性貧血，粒狀白細(xì)胞缺乏癥等疾病。
[0003]歐盟2377/90/EEC法規(guī)、美國(guó)FDA等均規(guī)定氯霉素不能任何動(dòng)物制食品，以及動(dòng)物的飼料和生長(zhǎng)環(huán)境中使用。2002年我國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布235號(hào)公告《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留量》，規(guī)定氯霉素及其鹽、酯(包括:琥珀氯霉素)在所有食品動(dòng)物、所有可食組織中不得檢出。
[0004]氯霉素因其抗菌消炎作用，對(duì)皮膚炎癥有一定療效，因此常被添加在祛痘除螨類化妝品中。但由于人體臉部皮膚柔嫩，黏膜血管豐富，對(duì)藥物吸收非?？欤让顾貢?huì)被迅速吸收，從而破壞皮膚表面的正常菌群，導(dǎo)致皮疹、速發(fā)性過(guò)敏等不良反應(yīng)。如果長(zhǎng)期使用含有氯霉素的化妝品，還有可能導(dǎo)致內(nèi)臟損傷。因此歐盟化妝品法規(guī)(EC) 1223/2009和我國(guó)衛(wèi)生部頒布的《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》均將包括氯霉素在內(nèi)的抗生素類化合物列在“禁用清單”中。
[0005]對(duì)氯霉素的檢測(cè)方法有微生物檢測(cè)法、色譜分析法、免疫檢測(cè)法。微生物檢測(cè)法靈敏度低；色譜分析法樣品前處理麻煩，費(fèi)用高；免疫分析法具有快速、靈敏度高、高通量的特點(diǎn)。其中免疫分析方法有酶聯(lián)免疫法、膠體金免疫層析技術(shù)等。其中酶聯(lián)免疫分析法操作相對(duì)繁瑣，對(duì)操作人員的專業(yè)知識(shí)要求較高，相比之下，膠體金免疫層析技術(shù)基于肉眼水平的檢測(cè)，不需任何儀器設(shè)備和試劑，比酶聯(lián)免疫法省略了加顯色劑和終止液的步驟，更簡(jiǎn)化的操作，體積小，易攜帶，幾分鐘就可用肉眼觀察到顏色鮮明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并可保存實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
[0006]現(xiàn)有膠體金免疫層析技術(shù)在氯霉素檢測(cè)的靈敏度和特異性還是存在缺陷，因而，有必要在現(xiàn)有技術(shù)上，從優(yōu)化免疫抗原、包被抗原的結(jié)構(gòu)及偶聯(lián)技術(shù)角度出發(fā)，提高抗體的特異性、親和力，從而增加氯霉素免疫膠體金快速檢測(cè)的靈敏度和特異性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種通過(guò)優(yōu)化偶聯(lián)技術(shù)路線，以達(dá)到結(jié)構(gòu)優(yōu)化，提高抗體質(zhì)量，從而進(jìn)一步增加氯霉素免疫膠體金快速檢測(cè)的靈敏度和特異性的免疫抗原和包被抗原。
[0008]為解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案:一種用于檢測(cè)氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于:采用活潑硫酯法，將氯霉素半抗原與載體蛋白進(jìn)行偶聯(lián)，制備氯霉素免疫抗原和包被抗原；所述氯霉素半抗原通過(guò)縮醛法為氯霉素引入間隔臂制備而成，具有式(I)所示結(jié)構(gòu)，
[0009]
【權(quán)利要求】
1.一種用于檢測(cè)氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于:采用活潑硫酯法，將氯霉素半抗原與載體蛋白進(jìn)行偶聯(lián)，制備氯霉素免疫抗原和包被抗原；所述氯霉素半抗原通過(guò)縮醛法為氯霉素引入間隔臂制備而成，具有式(I)所示結(jié)構(gòu)，
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測(cè)氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于:所述載體蛋白是指常規(guī)的可作為免疫載體使用的可溶性蛋白質(zhì)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測(cè)氯霉素的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于:所述載體蛋白為牛血清白蛋白和/或卵清蛋白和/或血藍(lán)蛋白。
【文檔編號(hào)】G01N33/68GK103869083SQ201410114776
【公開(kāi)日】2014年6月18日 申請(qǐng)日期:2014年3月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月25日
【發(fā)明者】潘嘉慧, 田峻, 趙亮亮, 沈國(guó)權(quán), 朱海云, 楊輝 申請(qǐng)人:佛山市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測(cè)中心