獲取潔凈的久置魚耳石的方法
【專利摘要】獲取潔凈的久置魚耳石的方法，它涉及獲取魚耳石的方法。本發(fā)明是要解決現(xiàn)有技術(shù)對于久存魚采集出的耳石會或多或少帶上部分組織和粘液，很快干燥后耳石會呈現(xiàn)出一團(tuán)毛絨狀態(tài)，為后續(xù)檢測帶來極大干擾，對腐魚采集出的耳石甚至?xí)в写罅课酃?，而且難以去除的問題。方法：將魚預(yù)處理，并將頭部截下，在解剖鏡下，將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液，滴加鹽酸胍溶液，并用蒸餾水清洗，使用透明指甲油或環(huán)氧樹脂將耳石封存并固定，得到潔凈的久置魚耳石；制備方法：將魚預(yù)處理，然后將耳石取出，置于鹽酸胍溶液中浸泡，然后置于蒸餾水中浸泡保存，得到潔凈的久置魚耳石。本發(fā)明用于獲取潔凈的久置魚耳石的方法。
【專利說明】獲取潔凈的久置魚耳石的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及獲取魚耳石的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]魚類耳石存在于魚體內(nèi)耳膜迷路中，共有三對，主要由碳酸鹽類礦物質(zhì)和少量有機(jī)質(zhì)和微量元素構(gòu)成，生理學(xué)上起著聽覺和平衡的作用。耳石很早就得到了魚類研究者的關(guān)注，最早是作為年齡鑒定的有效途徑，比鱗片上的年輪更加準(zhǔn)確易讀。自1971年P(guān)annella首次發(fā)現(xiàn)日輪以來，利用日輪進(jìn)行的各種相關(guān)研究已有大量報道，耳石一度成為研究的熱點。
[0003]耳石作為生命礦物，兼具生命體和礦物質(zhì)的優(yōu)良特性。它不僅記錄著魚類生長及生活史中的相關(guān)信息，而且還標(biāo)示著其生活水環(huán)境的現(xiàn)狀和變遷，耳石一旦形成便呈現(xiàn)出生物惰性，通過其上的微結(jié)構(gòu)和微化學(xué)形式將這些數(shù)據(jù)永久保存下來。將耳石中微量元素的特性與日輪結(jié)合起來研究，可以有效解決很多魚類生態(tài)學(xué)問題。目前，以耳石為媒介進(jìn)行信息分析的應(yīng)用涵蓋了魚類生態(tài)學(xué)研究的諸多方面，如魚類的孵化和早期發(fā)育生長、產(chǎn)卵場和產(chǎn)卵期判定、年齡鑒定與種群鑒定、個體遷移等。且隨著相關(guān)理論和技術(shù)的發(fā)展，成為一種揭示魚類生活史以及水體環(huán)境域變的關(guān)鍵技術(shù)。
[0004]因此，耳石的摘取特別是獲得潔凈易讀的樣本在分析中顯得尤其重要。而對耳石的采集卻并未形成系統(tǒng)和特定的模式，多為研究者在實踐中自己總結(jié)的一套方法，如對成魚的直接剖顱結(jié)合位置尋找方法和對仔稚魚的壓片法等。對于活體或鮮魚的解剖這些方式固然有效:將挖出的耳石周圍的膠狀生物膜剝離，并置于95%乙醇和蒸餾水中浸泡數(shù)日，取出晾干(或烘干)即可。然而，實際工作中不可能在短期內(nèi)就能將采集的全部活魚的耳石及時取出，野外工作尤其如此，不得不將樣本低溫保存并逐量處理。而對于久存的樣品，耳石采集中會存在一系列的問題，如耳石所在的周圍組織和腔液由透明變成乳白色而影響解剖視線，周邊組織也會因為變性而粘連在耳石上難以剝離，大量油狀物分散也會極大阻礙解剖。取出的耳石通常都會或多或少帶上部分組織和粘液，很快干燥后耳石會呈現(xiàn)出一團(tuán)毛絨狀態(tài)，為后續(xù)檢測帶來極大干擾。對腐魚則更甚，其采集出的耳石都會帶有大量污垢，且這些耳石都極脆，為去污帶來極大困難。通常方法是將耳石放入70%?95%乙醇和蒸餾水中浸泡，試圖將這些雜質(zhì)溶解，但實際上這種方法會加重耳石周邊污垢的不透明化，很難達(dá)到除污目的，效率極低。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明是要解決現(xiàn)有技術(shù)對于久存魚采集出的耳石會或多或少帶上部分組織和粘液，很快干燥后耳石會呈現(xiàn)出一團(tuán)毛絨狀態(tài)，為后續(xù)檢測帶來極大干擾，對腐魚采集出的耳石甚至?xí)в写罅课酃?，而且難以去除的問題，而提供獲取潔凈的久置魚耳石的方法。
[0006]本發(fā)明獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行:
[0007]—、將魚預(yù)處理，然后用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭；
[0008]所述的魚為低溫保存的仔幼魚、腐臭的仔幼魚或干枯的仔幼魚；
[0009]二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰；
[0010]三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石；
[0011]四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液；
[0012]五、向耳石上滴加濃度為3mol/L?7.5mol/L的鹽酸胍溶液，并浸潰于鹽酸胍溶液中至周邊組織溶解，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)；
[0013]六、用濾紙吸除耳石上剩余鹽酸胍溶液，并用蒸餾水清洗；
[0014]七、用濾紙吸除耳石上蒸餾水，待耳石干燥后，使用透明指甲油或環(huán)氧樹脂將耳石封存并固定，得到潔凈的久置魚耳石。
[0015]本發(fā)明獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行:
[0016]一、將魚預(yù)處理，然后使魚呈直立狀且頭部向上；
[0017]所述的魚為低溫保存的中型魚、低溫保存的小型魚、腐臭的中型魚、腐臭的小型魚、干枯的中型魚或干枯的小型魚；
[0018]二、用解剖剪自吻端延魚體中軸線將顱骨整體剪開至脊椎骨，頭顱分為兩邊，直至可見兩邊聽囊內(nèi)的耳石；
[0019]三、用小鑷子將耳石夾出，置于裝有濃度為3mol/L?7.5mol/L的鹽酸胍溶液的離心管中，浸泡Imin?2min，然后取出耳石，并置于裝有蒸餾水的離心管中浸泡保存，得到潔凈的久置魚耳石。
[0020]本發(fā)明的有益效果是:使用鹽酸胍溶液能迅速溶解耳石周圍組織和腔液中的蛋白質(zhì)，使組織變得透明松散易去除，而且能起到一定的透明作用，可避免毒性極大的透明劑二甲苯在耳石采集中的使用，并且還對解剖過程也起到了極大的輔助作用，特別適用于耳石未除垢便干枯的情況，對腐魚的解剖效果尤其明顯。將鹽酸胍引入耳石的采集過程為獲取優(yōu)質(zhì)的耳石樣本提供了極大便利，對耳石的后續(xù)分析意義重大。并且本發(fā)明的解剖方法也能方便快速地達(dá)到獲取耳石的目的，極大的提高了工作效率。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0021]圖1為實施例一低溫保存的大麻哈魚仔魚步驟五所得耳石的照片；
[0022]圖2為實施例一低溫保存的大麻哈魚仔魚步驟七所得潔凈的久置魚耳石的照片；
[0023]圖3為實施例二低溫保存的大麻哈魚仔魚步驟五所得耳石的照片；
[0024]圖4為實施例二低溫保存的大麻哈魚仔魚步驟六所得魚耳石的照片；
[0025]圖5為實施例三腐臭的大麻哈魚仔魚所得潔凈的久置魚耳石的照片；
[0026]圖6為實施例四腐臭的大麻哈魚仔魚步驟六所得魚耳石的照片；
[0027]圖7為實施例五腐臭的大麻哈魚仔魚步驟六所得魚耳石的照片；
[0028]圖8為實施例六干枯的大麻哈魚仔魚所得潔凈的久置魚耳石的照片；
[0029]圖9為實施例七干枯的大麻哈魚仔魚步驟六所得魚耳石的照片；
[0030]圖10為實施例八低溫保存的瓦氏雅羅魚成魚所得潔凈的久置魚耳石的照片；
[0031]圖11為實施例九低溫保存的瓦氏雅羅魚成魚步驟三所得魚耳石的照片。

【具體實施方式】
[0032]【具體實施方式】一:本實施方式獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行:
[0033]一、將魚預(yù)處理，然后用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭；
[0034]所述的魚為低溫保存的仔幼魚、腐臭的仔幼魚或干枯的仔幼魚；
[0035]二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰；
[0036]三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石；
[0037]四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液；
[0038]五、向耳石上滴加濃度為3mol/L?7.5mol/L的鹽酸胍溶液，并浸潰于鹽酸胍溶液中至周邊組織溶解，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)；
[0039]六、用濾紙吸除耳石上剩余鹽酸胍溶液，并用蒸餾水清洗；
[0040]七、用濾紙吸除耳石上蒸餾水，待耳石干燥后，使用透明指甲油或環(huán)氧樹脂將耳石封存并固定，得到潔凈的久置魚耳石。
[0041]本實施方式步驟五中向耳石上滴加濃度為3mol/L?7.5mol/L的鹽酸胍溶液，周邊組織即刻變透明和松軟；
[0042]本實施方式步驟七中使用透明指甲油為化妝品中使用的普通透明指甲油，或使用環(huán)氧樹脂將耳石封存并固定能使耳石充分透明化。
[0043]本實施方式步驟一所述的魚為低溫保存的仔幼魚是在0°C?4°C下保存的仔幼魚；
[0044]本實施方式步驟一所述的魚為腐臭的仔幼魚為魚體已腐爛，耳石被腐肉包埋；
[0045]本實施方式步驟一所述的魚為干枯的仔幼魚為魚體已脫水且已變形，耳石不易摘取。
[0046]本實施方式的有益效果是:使用鹽酸胍溶液能迅速溶解耳石周圍組織和腔液中的蛋白質(zhì)，使組織變得透明松散易去除，而且能起到一定的透明作用，可避免毒性極大的透明劑二甲苯在耳石采集中的使用，并且還對解剖過程也起到了極大的輔助作用，特別適用于耳石未除垢便干枯的情況，對腐魚的解剖效果尤其明顯。將鹽酸胍引入耳石的采集過程為獲取優(yōu)質(zhì)的耳石樣本提供了極大便利，對耳石的后續(xù)分析意義重大。并且實施方式的解剖方法也能方便快速地達(dá)到獲取耳石的目的，極大的提高了工作效率。
[0047]【具體實施方式】二:本實施方式與【具體實施方式】一不同的是:當(dāng)步驟一中所述的魚為低溫保存的仔幼魚時，具體操作如下:將低溫保存的仔幼魚取出，常溫解凍，得到解凍仔幼魚，然后用解剖剪將解凍仔幼魚的頭部截下，得到魚頭。其他與【具體實施方式】一相同。
[0048]【具體實施方式】三:本實施方式與【具體實施方式】一或二之一不同的是:當(dāng)步驟一中所述的魚為腐臭的仔幼魚時，具體操作如下:用解剖剪將腐臭的仔幼魚的頭部截下，得到魚頭。其他與【具體實施方式】一或二相同。
[0049]【具體實施方式】四:本實施方式與【具體實施方式】一至三之一不同的是:當(dāng)步驟一中所述的魚為干枯的仔幼魚時，具體操作如下:將干枯的仔幼魚浸泡在3mol/L?7.5mol/L鹽酸胍溶液中，浸泡1min?20min,得到浸泡后仔幼魚,然后用解剖剪將浸泡后仔幼魚的頭部截下，得到魚頭。其他與【具體實施方式】一至三相同。
[0050]【具體實施方式】五:本實施方式與【具體實施方式】一至四之一不同的是:步驟五中向耳石上滴加濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液，并浸潰于鹽酸胍溶液中至周邊組織溶解，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)。其他與【具體實施方式】一至四相同。
[0051]【具體實施方式】六:本實施方式獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行:
[0052]一、將魚預(yù)處理,然后使魚呈直立狀且頭部向上；
[0053]所述的魚為低溫保存的中型魚、低溫保存的小型魚、腐臭的中型魚、腐臭的小型魚、干枯的中型魚或干枯的小型魚；
[0054]二、用解剖剪自吻端延魚體中軸線將顱骨整體剪開至脊椎骨，頭顱分為兩邊，直至可見兩邊聽囊內(nèi)的耳石；
[0055]三、用小鑷子將耳石夾出，置于裝有濃度為3mol/L?7.5mol/L的鹽酸胍溶液的離心管中，浸泡Imin?2min，然后取出耳石，并置于裝有蒸餾水的離心管中浸泡保存，得到潔凈的久置魚耳石。
[0056]本實施方式所述的魚為低溫保存的中型魚、腐臭的中型魚或干枯的中型魚為長度為 5cm ?15cm。
[0057]本實施方式所述的魚為腐臭的小型魚、低溫保存的小型魚或干枯的小型魚為長度為 0.8cm ?5cm ；
[0058]本實施方式步驟一所述的魚為低溫保存的中型魚或低溫保存的小型魚是在0°C?4°C下保存的中型魚或小型魚；
[0059]本實施方式步驟一所述的魚為腐臭的中型魚或腐臭的小型魚為魚體已腐爛呈肉糜狀或者已經(jīng)無完整魚形的中型魚或小型魚；
[0060]本實施方式步驟一所述的魚為干枯的中型魚或干枯的小型魚為魚體脫水發(fā)硬，干癟狀的中型魚或小型魚；
[0061]本實施方式步驟三中向耳石上滴加濃度為3mol/L?7.5mol/L的鹽酸胍溶液，周邊組織即刻變透明和松軟；
[0062]本實施方式的有益效果是:使用鹽酸胍溶液能迅速溶解耳石周圍組織和腔液中的蛋白質(zhì)，使組織變得透明松散易去除，而且能起到一定的透明作用，可避免毒性極大的透明劑二甲苯在耳石采集中的使用，并且還對解剖過程也起到了極大的輔助作用，特別適用于耳石未除垢便干枯的情況，對腐魚的解剖效果尤其明顯。將鹽酸胍引入耳石的采集過程為獲取優(yōu)質(zhì)的耳石樣本提供了極大便利，對耳石的后續(xù)分析意義重大。并且實施方式的解剖方法也能方便快速地達(dá)到獲取耳石的目的，極大的提高了工作效率。
[0063]【具體實施方式】七:本實施方式與【具體實施方式】六不同的是:當(dāng)步驟一中所述的魚為低溫保存的仔幼魚時，具體操作如下:將低溫保存的仔幼魚取出，常溫解凍，得到解凍仔幼魚，然后用解剖剪將解凍仔幼魚的頭部截下，得到魚頭。其他與【具體實施方式】六相同。
[0064]【具體實施方式】八:本實施方式與【具體實施方式】六或七之一不同的是:當(dāng)步驟一中所述的魚為腐臭的仔幼魚時，具體操作如下:用解剖剪將腐臭的仔幼魚的頭部截下，得到魚頭。其他與【具體實施方式】六或七相同。
[0065]【具體實施方式】九:本實施方式與【具體實施方式】六至八之一不同的是:當(dāng)步驟一中所述的魚為干枯的仔幼魚時，具體操作如下:將干枯的仔幼魚浸泡在3mol/L?7.5mol/L鹽酸胍溶液中，浸泡1min?20min,得到浸泡后仔幼魚,然后用解剖剪將浸泡后仔幼魚的頭部截下，得到魚頭。其他與【具體實施方式】六至八相同。
[0066]【具體實施方式】十:本實施方式與【具體實施方式】六至九之一不同的是:步驟三中用小鑷子將耳石輕輕夾出，置于裝有濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液的離心管中。其他與【具體實施方式】六至九相同。
[0067]通過以下實施例驗證有益效果:
[0068]實施例一:獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行:
[0069]一、將低溫保存的魚取出，常溫解凍，用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭；
[0070]二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰；
[0071]三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石；
[0072]四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液；
[0073]五、向耳石上滴加濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液，并浸潰于鹽酸胍溶液中至周邊組織溶解，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)；
[0074]六、用濾紙吸除耳石上剩余鹽酸胍溶液，并用蒸餾水清洗；
[0075]七、用濾紙吸除耳石上蒸餾水，待耳石干燥后，使用透明指甲油將耳石封存并固定，得到潔凈的久置魚耳石。
[0076]步驟一中所述的魚為在溫度為_20°C下保存兩個月以上的大麻哈魚仔魚；
[0077]步驟五中向耳石上滴加濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液后，周圍組織迅速透明化；
[0078]圖1為本實施例低溫保存的大麻哈魚仔魚步驟五所得耳石的照片，由圖可知，耳石清潔無有機(jī)質(zhì)粘連，形態(tài)完整易分析。
[0079]圖2為本實施例低溫保存的大麻哈魚仔魚步驟七所得潔凈的久置魚耳石的照片，由圖可知，耳石潔凈透明，其內(nèi)部輪紋結(jié)構(gòu)清晰易讀，無干擾因素。
[0080]實施例二:實施例一的對比試驗是按以下步驟進(jìn)行:
[0081]一、將低溫保存的魚取出，常溫解凍，用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭；
[0082]二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰；
[0083]三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石；
[0084]四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液；
[0085]五、向耳石上滴加蒸餾水清洗，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)；
[0086]六、用濾紙吸除耳石上蒸餾水，待耳石干燥后，使用透明指甲油將耳石封存并固定，得到耳石。
[0087]步驟一中所述的魚為在溫度為_20°C下保存兩個月以上的大麻哈魚仔魚；
[0088]圖3為本實施例低溫保存的大麻哈魚仔魚步驟五所得耳石的照片，由圖可知，耳石周圍有大量有機(jī)物粘連，整體發(fā)黑，甚至難以觀察其形態(tài)。
[0089]圖4為本實施例低溫保存的大麻哈魚仔魚步驟六所得魚耳石的照片，由圖可知，周邊組織難以剝離干凈，耳石連同組織稍透明，但雜質(zhì)任很明顯。
[0090]實施例三:獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行:
[0091]一、用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭；
[0092]二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰；
[0093]三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石；
[0094]四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液；
[0095]五、向耳石上滴加濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液，并浸潰于鹽酸胍溶液中至周邊組織溶解，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)；
[0096]六、用濾紙吸除耳石上剩余鹽酸胍溶液，并用蒸餾水清洗；
[0097]七、用濾紙吸除耳石上蒸餾水，待耳石干燥后，使用透明指甲油將耳石封存并固定，得到潔凈的久置魚耳石。
[0098]步驟一中所述的魚為離心管內(nèi)常溫放置一周以上腐臭的大麻哈魚仔魚；
[0099]步驟五中向耳石上滴加濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液后，周圍組織迅速透明化；
[0100]圖5為本實施例腐臭的大麻哈魚仔魚所得潔凈的久置魚耳石的照片，由圖可知，耳石清潔透亮，無雜質(zhì)粘連，表明光滑易分析。
[0101]實施例四:實施例三的對比試驗是按以下步驟進(jìn)行:
[0102]一、用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭；
[0103]二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰；
[0104]三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石；
[0105]四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液；
[0106]五、向耳石上滴加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%乙醇清洗，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)；
[0107]六、用濾紙吸除耳石上質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%乙醇，待耳石干燥后，使用透明指甲油將耳石封存并固定，得到魚耳石。
[0108]步驟一中所述的魚為離心管內(nèi)常溫放置一周以上腐臭的大麻哈魚仔魚；
[0109]常溫放置一周以上腐臭的大麻哈魚仔魚耳石周圍蛋白和脂質(zhì)大量變性呈乳白色絮狀，取出的耳石帶有大量的雜質(zhì)，粘附在耳石上，并且這種耳石非常易碎，通常的除雜方法會有極大的概率破壞耳石完整性。
[0110]圖6為本實施例腐臭的大麻哈魚仔魚步驟六所得魚耳石的照片，由圖可知，乙醇將耳石周圍變性組織部分透明，但任有很多雜質(zhì)，耳石表面形態(tài)難以觀察。
[0111]實施例五:實施例三的對比試驗是按以下步驟進(jìn)行:
[0112]一、用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭；
[0113]二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰；
[0114]三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石；
[0115]四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液；
[0116]五、向耳石上滴加蒸餾水清洗，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)；
[0117]六、用濾紙吸除耳石上蒸餾水，待耳石干燥后，使用透明指甲油將耳石封存并固定，得到魚耳石。
[0118]步驟一中所述的魚為離心管內(nèi)常溫放置一周以上腐臭的大麻哈魚仔魚；
[0119]常溫放置一周以上腐臭的大麻哈魚仔魚耳石周圍蛋白和脂質(zhì)大量變性呈乳白色絮狀，取出的耳石帶有大量的雜質(zhì)，粘附在耳石上，并且這種耳石非常易碎，通常的除雜方法會有極大的概率破壞耳石完整性。
[0120]圖7為本實施例腐臭的大麻哈魚仔魚步驟六所得魚耳石的照片，由圖可知，耳石周圍大量組織包裹，呈絮狀，極難剝離，嚴(yán)重影響后續(xù)分析。
[0121]實施例六:獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行:
[0122]一、將魚浸泡在6mol/L鹽酸胍溶液中，浸泡15 min，然后用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭；
[0123]二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰；
[0124]三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石；
[0125]四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液；
[0126]五、向耳石上滴加濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液，并浸潰于鹽酸胍溶液中至周邊組織溶解，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)；
[0127]六、用濾紙吸除耳石上剩余鹽酸胍溶液，并用蒸餾水清洗；
[0128]七、用濾紙吸除耳石上蒸餾水，待耳石干燥后，使用透明指甲油將耳石封存并固定，得到潔凈的久置魚耳石。
[0129]步驟一中所述的魚為常溫放置干枯的大麻哈魚幼魚；
[0130]步驟五中向耳石上滴加濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液后，周圍組織迅速透明化；
[0131]圖8為本實施例干枯的大麻哈魚仔魚所得潔凈的久置魚耳石的照片，由圖可知，所獲取耳石潔凈透亮，輪廓分明，便于后續(xù)分析。
[0132]實施例七:實施例六的對比試驗是按以下步驟進(jìn)行:
[0133]一、將魚浸泡在蒸餾水中，浸泡15 min，然后用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭;
[0134]二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰；
[0135]三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石；
[0136]四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液；
[0137]五、向耳石上先滴加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%乙醇清洗，然后滴加蒸餾水清洗，再用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)；
[0138]六、用濾紙吸除耳石上質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%乙醇和蒸餾水，待耳石干燥后，使用透明指甲油將耳石封存并固定，得到魚耳石。
[0139]步驟一中所述的魚為常溫放置干枯的大麻哈魚幼魚；
[0140]圖9為本實施例常溫放置干枯的大麻哈魚幼魚步驟六所得魚耳石的照片，由圖可知，耳石表面任有部分變性組織，難以清除干凈，透明后任然較暗，難于觀察內(nèi)部結(jié)構(gòu)。
[0141]實施例八:獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行:
[0142]一、將低溫保存的魚取出，常溫解凍，然后使魚呈直立狀且頭部向上；
[0143]二、用解剖剪自吻端延魚體中軸線將顱骨整體剪開至脊椎骨，頭顱分為兩邊，直至可見兩邊聽囊內(nèi)的耳石；
[0144]三、用小鑷子將耳石夾出，置于裝有濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液的離心管中，浸泡24 h，然后取出耳石，并置于裝有蒸餾水的離心管中清洗，得到潔凈的久置魚耳石。
[0145]步驟一中所述的魚為低溫保存的瓦氏雅羅魚成魚；
[0146]圖10為本實施例低溫保存的瓦氏雅羅魚成魚所得潔凈的久置魚耳石的照片，由圖可知，獲取耳石潔凈透明，形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，非常容易進(jìn)行后續(xù)分析。
[0147]實施例九:實施例八的對比試驗是按以下步驟進(jìn)行:
[0148]一、將低溫保存的魚取出，常溫解凍，然后使魚呈直立狀且頭部向上；
[0149]二、用解剖剪自吻端延魚體中軸線將顱骨整體剪開至脊椎骨，頭顱分為兩邊，直至可見兩邊聽囊內(nèi)的耳石；
[0150]三、用小鑷子將耳石輕輕夾出，剔除周圍組織，置于裝有蒸餾水的離心管中浸泡2天，得到魚耳石。
[0151]步驟一中所述的魚為低溫保存的瓦氏雅羅魚成魚；
[0152]圖11為本實施例低溫保存的瓦氏雅羅魚成魚步驟三所得魚耳石的照片，由圖可知，所得耳石較干凈，表面任有部分變性雜質(zhì)粘結(jié)，發(fā)黑，耳石不透亮。
【權(quán)利要求】
1.獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行: 一、將魚預(yù)處理，然后用解剖剪將魚的頭部截下，得到魚頭； 所述的魚為低溫保存的仔幼魚、腐臭的仔幼魚或干枯的仔幼魚； 二、將魚頭置于解剖鏡下，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)至視野清晰； 三、用尖細(xì)的解剖針從魚頭兩腮向斜前方插入顱內(nèi)，分別向兩邊拉動撕開兩腮和表皮，直至露出枕骨和耳骨，并可見兩腮下的耳石； 四、用解剖針按壓耳石上層軟骨，擠出下方的耳石，用另一解剖針將耳石取出，剔除周圍組織和淋巴液； 五、向耳石上滴加濃度為3mol/L?7.5mol/L的鹽酸胍溶液，并浸潰于鹽酸胍溶液中至周邊組織溶解，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)； 六、用濾紙吸除耳石上剩余鹽酸胍溶液，并用蒸餾水清洗； 七、用濾紙吸除耳石上蒸餾水，待耳石干燥后，使用透明指甲油或環(huán)氧樹脂將耳石封存并固定，得到潔凈的久置魚耳石。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于當(dāng)步驟一中所述的魚為低溫保存的仔幼魚時，具體操作如下:將低溫保存的仔幼魚取出，常溫解凍，得到解凍仔幼魚，然后用解剖剪將解凍仔幼魚的頭部截下，得到魚頭。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于當(dāng)步驟一中所述的魚為腐臭的仔幼魚時，具體操作如下:用解剖剪將腐臭的仔幼魚的頭部截下，得到魚頭。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于當(dāng)步驟一中所述的魚為干枯的仔幼魚時，具體操作如下:將干枯的仔幼魚浸泡在3mol/L?7.5mol/L鹽酸胍溶液中，浸泡1min?20min，得到浸泡后仔幼魚，然后用解剖剪將浸泡后仔幼魚的頭部截下，得到魚頭。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于步驟五中向耳石上滴加濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液，并浸潰于鹽酸胍溶液中至周邊組織溶解，然后用解剖針挑開余下的粘絲狀物質(zhì)。
6.獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于獲取潔凈的久置魚耳石的方法是按以下步驟進(jìn)行: 一、將魚預(yù)處理，然后使魚呈直立狀且頭部向上； 所述的魚為低溫保存的中型魚、低溫保存的小型魚、腐臭的中型魚、腐臭的小型魚、干枯的中型魚或干枯的小型魚； 二、用解剖剪自吻端延魚體中軸線將顱骨整體剪開至脊椎骨，頭顱分為兩邊，直至可見兩邊聽囊內(nèi)的耳石； 三、用小鑷子將耳石夾出，置于裝有濃度為3mol/L?7.5mol/L的鹽酸胍溶液的離心管中，浸泡Imin?2min，然后取出耳石，并置于裝有蒸餾水的離心管中浸泡保存，得到潔凈的久置魚耳石。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于當(dāng)步驟一中所述的魚為低溫保存的中型魚或低溫保存的小型魚時，具體操作如下:將低溫保存的中型魚或低溫保存的小型魚取出，常溫解凍，得到解凍中型魚或解凍小型魚，然后使解凍中型魚或解凍小型魚呈直立狀且頭部向上。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于當(dāng)步驟一中所述的魚為腐臭的中型魚或腐臭的小型魚時，具體操作如下:使腐臭的中型魚或腐臭的小型魚呈直立狀且頭部向上。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于當(dāng)步驟一中所述的魚為干枯的中型魚或干枯的小型魚時，具體操作如下:將干枯的中型魚或干枯的小型魚浸泡在3mol/L?7.5mol/L鹽酸胍溶液中，浸泡1min?20min，得到浸泡后中型魚或浸泡后小型魚，然后使浸泡后中型魚或浸泡后小型魚呈直立狀且頭部向上。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的獲取潔凈的久置魚耳石的方法，其特征在于步驟三中用小鑷子將耳石輕輕夾出，置于裝有濃度為6mol/L的鹽酸胍溶液的離心管中。
【文檔編號】G01N1/34GK104198260SQ201410468242
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月15日
【發(fā)明者】王繼隆, 劉偉, 王臣 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所