本發(fā)明屬于臨床醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域，特別涉及一種定量檢測(cè)血清淀粉樣蛋白A的乳膠增強(qiáng)免疫比濁試劑盒及其制備方法。
背景技術(shù)：
：血清淀粉樣蛋白A(serumamyloidA，SAA)是組織淀粉樣蛋白A的前體物質(zhì)，屬于急性時(shí)相蛋白，在組織損傷和炎癥反應(yīng)時(shí)升高，影響細(xì)胞的黏附、遷移、增殖和聚集。SAA是淀粉樣變中主要組成成分淀粉樣A蛋白的血清前體，是由肝細(xì)胞產(chǎn)生后被分泌到血清中的一種急性時(shí)相蛋白，雖然隨處可見，但是在正常情況下，在體中表達(dá)依然很低，然而機(jī)體一旦發(fā)生炎癥、感染或組織損傷時(shí)，SAA水平可在5～6h內(nèi)迅速升高約1000倍。CRP是研究較多且臨床應(yīng)用較廣泛的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，但CRP對(duì)病毒感染不敏感、不升高，除非病毒感染后期并發(fā)細(xì)菌感染時(shí)，CRP才升高。因此SAA用于鑒定細(xì)菌感染和病毒感染。近年來認(rèn)為炎癥過程參與動(dòng)脈粥樣硬化的形成，研究發(fā)現(xiàn)急性心肌梗死(AMI)后3dSAA顯著升高，可達(dá)正常值的5000倍，而同時(shí)CRP升高為正常值的100倍，認(rèn)為SAA作為AMI的輔助診斷指標(biāo)優(yōu)于CRP。Johnson等人針對(duì)705名懷疑有心肌缺血的女性患者進(jìn)行了多中心研究，發(fā)現(xiàn)SAA水平與冠脈造影證實(shí)的冠狀動(dòng)脈疾病存在相關(guān)性，認(rèn)為SAA可以作為預(yù)測(cè)心血管事件的一個(gè)獨(dú)立指標(biāo)。最近研究發(fā)現(xiàn)SAA/LDL復(fù)合物作為監(jiān)測(cè)穩(wěn)定型冠狀動(dòng)脈疾病預(yù)后的指標(biāo)，比CRP或單獨(dú)的SAA更為敏感。Hogarth等人對(duì)平均年齡為83歲的66名女性和平均年齡為84歲的33名男性進(jìn)行了前瞻性調(diào)查研究，比較了SAA和CRP在診斷和監(jiān)測(cè)感染性疾病預(yù)后中的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)CRP和SAA均可預(yù)示較差的預(yù)后，比如復(fù)發(fā)或死亡，而監(jiān)測(cè)感染急性期反應(yīng)，SAA是比CRP更敏感的指標(biāo)，有7％的CRP正常的感染性疾病患者可通過SAA檢測(cè)出。CRP和SAA是兩種不同的蛋白質(zhì)，兩者聯(lián)合檢測(cè)有助于指導(dǎo)急性期反應(yīng)的臨床治療和監(jiān)測(cè)預(yù)后。在小兒感染性疾病早期，很難鑒別是細(xì)菌感染還是病毒感染。CRP對(duì)病毒感染缺乏敏感性，而SAA在細(xì)菌和病毒感染早期均可升高。研究發(fā)現(xiàn)SAA和CRP的比值與小兒感染性疾病的嚴(yán)重程度存在相關(guān)性，監(jiān)測(cè)SAA/CRP比值比單獨(dú)檢測(cè)SAA或CRP更有應(yīng)用價(jià)值。移植排斥反應(yīng)是器官移植失敗的主要原因，如果能及時(shí)檢測(cè)出早期的移植排異反應(yīng)，立即進(jìn)行抗排異治療，有助于逆轉(zhuǎn)移植物的排斥。腎移植后3月內(nèi)亞臨床排斥反應(yīng)的發(fā)生率大概是30％左右，研究認(rèn)為是否用皮質(zhì)甾類藥物治療亞臨床排斥反應(yīng)會(huì)影響移植術(shù)后的結(jié)果。早期治療亞臨床排斥反應(yīng)，有助于減低急性排斥反應(yīng)的發(fā)生率，維持較低的血清肌酐濃度，改善移植后器官功能。Hartmann等研究發(fā)現(xiàn)在器官移植排異反應(yīng)早期SAA即顯著升高，而CRP在急性和超急性排異反應(yīng)前后變化不明顯，而且SAA會(huì)在最短的時(shí)問內(nèi)對(duì)成功的抗排異治療作出反應(yīng)，認(rèn)為在診斷移植排異和評(píng)估抗排異療效時(shí)，SAA優(yōu)于CRP。SAA作為診斷移植排異反應(yīng)的指標(biāo)，在肝、腎、骨髓、胰腺等器官移植排異反應(yīng)中的應(yīng)用均有報(bào)道。SAA是判斷RA和SLE病情活動(dòng)度的敏感指標(biāo)，病情活躍時(shí)SAA水平顯著、高于穩(wěn)定期，監(jiān)測(cè)SAA水平變化有助于指導(dǎo)臨床用藥。SAA可以作為預(yù)測(cè)急性胰腺炎嚴(yán)重程度的早期指標(biāo)，且預(yù)測(cè)作用優(yōu)于CRP。SAA還可以作為膀胱炎和腎盂腎炎的血清標(biāo)志物。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種定量檢測(cè)血清淀粉樣蛋白A的乳膠增強(qiáng)免疫比濁試劑盒，該試劑盒能具有檢測(cè)簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速的特點(diǎn)，并可直接在全自動(dòng)分析儀上批量分析實(shí)現(xiàn)高通量。本發(fā)明還提供了定量檢測(cè)血清淀粉樣蛋白A的乳膠增強(qiáng)免疫比濁試劑盒的制備方法。本發(fā)明還提供了SAA的檢測(cè)方法。為了實(shí)現(xiàn)以上技術(shù)效果，本發(fā)明是通過如下步驟實(shí)現(xiàn)：一種定量檢測(cè)血清淀粉樣蛋白A的乳膠增強(qiáng)免疫比濁試劑盒，其特征在于：該試劑盒包括R1試劑、R2試劑、血清淀粉樣蛋白A質(zhì)控品、血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品。所述R1試劑包括緩沖液、電解質(zhì)、穩(wěn)定劑、表面活性劑、防腐劑；所述的R2試劑包括偶聯(lián)有抗SAA抗體的乳膠微球、緩沖液、穩(wěn)定劑、電解質(zhì)、防腐劑；所述的血清淀粉樣蛋白A質(zhì)控品包括血清淀粉樣蛋白A質(zhì)控品蛋白和質(zhì)控品稀釋液。所述的血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品包括血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品蛋白和校準(zhǔn)品稀釋液。所述微球是含有聚苯乙烯的多聚物，表面含有羧基基團(tuán)，粒徑在70-200nm之間，所述抗SAA抗體是通過化學(xué)交聯(lián)的方法偶聯(lián)到乳膠微球表面的，所述化學(xué)交聯(lián)的方法是通過化學(xué)交聯(lián)劑在交聯(lián)緩沖液中進(jìn)行的；所述的血清淀粉樣蛋白A質(zhì)控品用于對(duì)所述的血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品曲線的校準(zhǔn)；所述化學(xué)交聯(lián)劑選自1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基硫代琥珀酰亞胺、碳化亞胺、酰肼、異氰酸鉀一種或兩種以上的混合物；所述交聯(lián)緩沖液選自不含氨基的緩沖液，為2-(N-嗎啉代)乙磺酸(MES)、PB、HEPES、MOPSO緩沖液其中的一種，pH在6.0-8.0。所述的血清淀粉樣蛋白A質(zhì)控品稀釋液包括緩沖液、穩(wěn)定劑、電解質(zhì)、防腐劑；所述的血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品稀釋液包括緩沖液、穩(wěn)定劑、電解質(zhì)、防腐劑。所述血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品可以是高濃度單點(diǎn)校準(zhǔn)品，也可以使用時(shí)用校準(zhǔn)品稀釋液梯度稀釋，直接制備出不同濃度的校準(zhǔn)品，濃度為0-200mg/L。所述血清淀粉樣蛋白A質(zhì)控品可以是高濃度單點(diǎn)質(zhì)控品，也可以使用時(shí)用質(zhì)控品稀釋液梯度稀釋，直接制備出不同濃度的質(zhì)控品，濃度為10-100mg/L。所述電解質(zhì)選自氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、硫酸鎂中一種或兩種以上的混合物，濃度在0.5％-5％之間；所述穩(wěn)定劑選自酪蛋白、甘露醇、殼聚糖、牛血清白蛋白中一種或兩種以上的混合物，濃度在1‰-5‰；所述表面活性劑選自吐溫、脂肪醇聚乙二醇醚、辛基苯基聚氧乙烯醚中一種或兩種以上的混合物，濃度在0.5‰-3‰；所述防腐劑選自疊氮鈉、對(duì)羥基苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、Proclin系列其中的一種，濃度在0.5‰-4‰。優(yōu)選的，所述電解質(zhì)為氯化鈉，濃度為1％-4％；優(yōu)選的，所述穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白；優(yōu)選的，所述表面活性劑為辛基苯基聚氧乙烯醚。所述試劑盒的制備：(1)R1試劑的制備：R1試劑包括，pH為6.4-8.0的100mmol/LPB、1％-4％氯化鈉或者氯化鉀、0-5％PEG6000、0.5‰-3‰表面活性劑、0.5‰-2‰防腐劑。優(yōu)選的，R1試劑包括：pH為7.2的100mmol/LPB、1％-4％氯化鈉、0-5％PEG6000、0.5‰-3‰辛基苯基聚氧乙烯醚、0.5‰-2‰對(duì)羥基苯甲酸。(2)R2試劑的制備：將100mg含有羧基的乳膠微球放入pH5.0-6.0100mmol/L的MES溶液中，羧基的乳膠微球的終濃度為0.5％-2％。加入EDC和NHS，EDC的終濃度為0.05％-0.1％，NHS的終濃度為0.1％-0.2％。室溫?cái)嚢?5min-30min，離心取上清，用50mmol/L的PB溶液復(fù)溶，復(fù)溶后乳膠微球的終濃度在0.2％-0.4％。取10mg抗SAA抗體，用50-100mmol/L的PB進(jìn)行稀釋，SAA抗體終濃度在0.5-2mg/ml。將取100mg復(fù)溶的乳膠微球和稀釋SAA抗體充分混合，乳膠微球和SAA抗體質(zhì)量比為10mg：1mg，室溫?cái)嚢?h，離心，獲得偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球。取偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球，加入50-100mmol/L的甘氨酸溶液(偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球的終濃度為1％-3.5％)、1％-4％的氯化鈉、0.5‰-2‰防腐劑充分混合獲得R2試劑。優(yōu)選的，所述防腐劑選為對(duì)羥基苯甲酸。(3)稀釋液的制備：取1％-4％電解質(zhì)、1‰-5‰穩(wěn)定劑、0.5‰-4‰對(duì)羥基苯甲酸、剩余為50mmol/L緩沖液充分混合獲得稀釋液。(4)校準(zhǔn)品的制備：從國(guó)內(nèi)知名生物公司購(gòu)買血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品抗原，用校準(zhǔn)品稀釋液配制不同濃度梯度校準(zhǔn)品。校準(zhǔn)品：0mg/L、10mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、250mg/L。(5)質(zhì)控品的制備從國(guó)內(nèi)知名生物公司購(gòu)買血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品抗原，用稀釋液配制10mg/L、50mg/L、100mg/L濃度的樣品。本發(fā)明的有益效果是：(1)本發(fā)明公布的專利為乳膠增強(qiáng)免疫比濁法，該方法使用的樣本量較少。與其他檢測(cè)方法相比具有簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速的特點(diǎn)，并可直接在全自動(dòng)分析儀上批量分析實(shí)現(xiàn)高通量。(2)本發(fā)明公布的專利與現(xiàn)有的乳膠增強(qiáng)免疫比濁法試劑盒相比有如下優(yōu)點(diǎn)：穩(wěn)定性好、靈敏度高、線性范圍寬、使用樣本量少、可檢測(cè)全血、并可與配套儀器使用實(shí)現(xiàn)高通量。且價(jià)格低廉，可廣泛應(yīng)用大、中、小醫(yī)院，用于門診臨床快速診斷感染及其感染預(yù)后的評(píng)估。附圖說明圖1是(實(shí)施例4)SAA檢測(cè)的定標(biāo)曲線。圖2是(實(shí)施例5)SAA檢測(cè)的定標(biāo)曲線。圖3是(實(shí)施例6)SAA檢測(cè)的定標(biāo)曲線。圖4是國(guó)外某知名廠家SSA試劑與本發(fā)明的相關(guān)性測(cè)試圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明：使用本發(fā)明試劑，采用上海奧普生物醫(yī)藥有限公司的Ottoman全自動(dòng)特定蛋白即時(shí)檢測(cè)分析儀，考核相關(guān)性能指標(biāo)，并對(duì)27份血清(包括正常樣本和異常樣本)。對(duì)照試劑為西門子公司的SAA免疫比濁試劑和BNII全自動(dòng)蛋白分析儀。按照各自的參數(shù)進(jìn)行測(cè)試，對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。實(shí)施例1(1)R1試劑的制備：稱取95mlpH7.2100mmol/LPB、1％氯化鈉、4％PEG6000、2‰辛基苯基聚氧乙烯醚，1‰對(duì)羥基苯甲酸,充分混合。(2)R2試劑的制備：將100mg含有羧基的乳膠微球放入pH5.0100mmol/L的MES溶液中，羧基的乳膠微球的終濃度為2％。加入EDC和NHS，EDC的終濃度為0.05％，NHS的終濃度為0.1％。室溫?cái)嚢?5min，離心取上清，用50mmol/L的PB溶液復(fù)溶，復(fù)溶后乳膠微球的終濃度在0.2％。取10mg抗SAA抗體，用50mmol/L的PB進(jìn)行稀釋，SAA抗體終濃度在0.5mg/ml。將取100mg復(fù)溶的乳膠微球和稀釋SAA抗體充分混合，乳膠微球和SAA抗體質(zhì)量比為10mg：1mg，室溫?cái)嚢?h，離心，獲得偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球。取偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球，加入100mmol/L的甘氨酸溶液(偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球的終濃度為1％)、3％的氯化鈉、1‰對(duì)羥基苯甲酸充分混合獲得R2試劑。(3)稀釋液的制備：取99ml50mmol/LPB緩沖液加入1％氯化鈉、5‰牛血清蛋白、4‰對(duì)羥基苯甲酸、1‰對(duì)羥基苯甲酸充分混合獲得稀釋液。(4)校準(zhǔn)品的制備：從國(guó)內(nèi)知名生物公司購(gòu)買血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品抗原，用稀釋液配制不同濃度梯度校準(zhǔn)品10ml。校準(zhǔn)品：0mg/L、10mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、250mg/L。(5)質(zhì)控品的制備:從國(guó)內(nèi)知名生物公司購(gòu)買血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品抗原，用稀釋液配制10mg/L、50mg/L、100mg/L濃度的樣品。實(shí)施例2(1)R1試劑的制備：稱取95mlpH7.2100mmol/LPB、3％氯化鈉、2％PEG6000、1‰辛基苯基聚氧乙烯醚，1‰對(duì)羥基苯甲酸,充分混合。(2)R2試劑的制備：將100mg含有羧基的乳膠微球放入100mmol/L的MES溶液(PH5.0-6.0)中，羧基的乳膠微球的終濃度為1％。加入EDC和NHS，EDC的終濃度為0.1％，NHS的終濃度為0.1％。室溫?cái)嚢?5min,離心取上清，用50mmol/L的PB溶液復(fù)溶，復(fù)溶后乳膠微球的終濃度在0.4％。取10mg抗SAA抗體，用50mmol/L的PB進(jìn)行稀釋，SAA抗體終濃度在1mg/ml。將取100mg復(fù)溶的乳膠微球和稀釋SAA抗體充分混合，乳膠微球和SAA抗體質(zhì)量比為10mg：1mg，室溫?cái)嚢?h，離心，獲得偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球。取偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球，加入100mmol/L的甘氨酸溶液(偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球的終濃度為2％)、3％的氯化鈉、1‰對(duì)羥基苯甲酸充分混合獲得R2試劑。(3)稀釋液的制備：取97ml50mmol/LPB緩沖液加入3％氯化鈉、5‰牛血清蛋白、4‰對(duì)羥基苯甲酸、1‰對(duì)羥基苯甲酸充分混合獲得稀釋液。(4)校準(zhǔn)品的制備：從國(guó)內(nèi)知名生物公司購(gòu)買血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品抗原，用稀釋液配制不同濃度梯度校準(zhǔn)品10ml。校準(zhǔn)品：0mg/L、10mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、250mg/L。(5)質(zhì)控品的制備:從國(guó)內(nèi)知名生物公司購(gòu)買血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品抗原，用稀釋液配制10mg/L、50mg/L、100mg/L濃度的樣品。實(shí)施例3(1)R1試劑的制備：稱取95mlpH7.2100mmol/LPB、4％氯化鈉、1％PEG6000、3‰辛基苯基聚氧乙烯醚，2‰對(duì)羥基苯甲酸,充分混合。(2)R2試劑的制備：將100mg含有羧基的乳膠微球放入pH6.0100mmol/L的MES溶液中，羧基的乳膠微球的終濃度為2％。加入EDC和NHS，EDC的終濃度為0.1％，NHS的終濃度為0.2％。室溫?cái)嚢?5min，離心取上清，用50mmol/L的PB溶液復(fù)溶，復(fù)溶后乳膠微球的終濃度在0.4％。取10mg抗SAA抗體，用50mmol/L的PB進(jìn)行稀釋，SAA抗體終濃度在2mg/ml。將取100mg復(fù)溶的乳膠微球和稀釋SAA抗體充分混合，乳膠微球和SAA抗體質(zhì)量比為10mg：1mg，室溫?cái)嚢?h，離心，獲得偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球。取偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球，加入100mmol/L的甘氨酸溶液(偶聯(lián)抗SAA抗體的乳膠微球的終濃度為3.5％)、4％的氯化鈉、1‰對(duì)羥基苯甲酸充分混合獲得R2試劑。(3)稀釋液的制備：取95ml50mmol/LPB緩沖液加入3％氯化鈉、5‰牛血清蛋白、4‰對(duì)羥基苯甲酸、1‰對(duì)羥基苯甲酸充分混合獲得稀釋液。(4)校準(zhǔn)品的制備：從國(guó)內(nèi)知名生物公司購(gòu)買血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品抗原，用稀釋液配制不同濃度梯度校準(zhǔn)品10ml。校準(zhǔn)品：0mg/L、10mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、250mg/L。(5)質(zhì)控品的制備:從國(guó)內(nèi)知名生物公司購(gòu)買血清淀粉樣蛋白A校準(zhǔn)品抗原，用稀釋液配制10mg/L、50mg/L、100mg/L濃度的樣品。實(shí)施例4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：取實(shí)施例1中5ul的各濃度校準(zhǔn)品溶液，R1試劑180ul，R2試劑180ul，使用上海奧普生物醫(yī)藥有限公司的Ottoman全自動(dòng)特定蛋白即時(shí)檢測(cè)分析儀在37℃、650nm波長(zhǎng)、光徑0.6cm下進(jìn)行測(cè)定制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢測(cè)結(jié)果如圖1。實(shí)施例5標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：取實(shí)施例2中5ul的各濃度校準(zhǔn)品溶液，R1試劑180ul，R2試劑180ul，使用上海奧普生物醫(yī)藥有限公司的Ottoman全自動(dòng)特定蛋白即時(shí)檢測(cè)分析儀在37℃、650nm波長(zhǎng)、光徑0.6cm下進(jìn)行測(cè)定制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢測(cè)結(jié)果如圖1。實(shí)施例6標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：取實(shí)施例3中5ul的各濃度校準(zhǔn)品溶液，R1試劑180ul，R2試劑180ul，使用上海奧普生物醫(yī)藥有限公司的Ottoman全自動(dòng)特定蛋白即時(shí)檢測(cè)分析儀在37℃、650nm波長(zhǎng)、光徑0.6cm下進(jìn)行測(cè)定制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢測(cè)結(jié)果如圖3。實(shí)施例7最低檢出限的檢測(cè)(分析靈敏度)以空白(零值企業(yè)校準(zhǔn)品)作樣品對(duì)試劑盒進(jìn)行測(cè)試，重復(fù)測(cè)試10次，計(jì)算空白響應(yīng)量的均值和空白響應(yīng)量的標(biāo)準(zhǔn)差(SD)，將(均值+2SD)代入以多點(diǎn)折線擬合方式擬合的定標(biāo)曲線中，計(jì)算濃度結(jié)果，濃度結(jié)果為0.21mg/L。因此本試劑盒在Ottman全自動(dòng)儀器上的最低檢出限為0.21mg/L。測(cè)定結(jié)果見下表測(cè)定次數(shù)實(shí)施例1(OD)實(shí)施例2(OD)實(shí)施例3(OD)15212512751742520451955068351485054511745092508752035511551045018650645178516975227521851858522051954996949565047523710504449775166平均值5128.25118.25133.3SD90.4978.6880.94CV1.76％1.54％1.58實(shí)施例8重復(fù)性的檢測(cè)用10mg/L、100mg/L的SAA企業(yè)校準(zhǔn)品，作樣品測(cè)試每個(gè)濃度的樣品，n＝10，計(jì)算CV。計(jì)算公式：說明：為測(cè)試數(shù)據(jù)的平均值。測(cè)定結(jié)果見下表實(shí)施例9批間差的考核取3個(gè)批號(hào)的試劑，分別用10mg/L的企業(yè)校準(zhǔn)品作樣品測(cè)試，n＝10，分別計(jì)算10份試劑測(cè)定均值和每個(gè)批號(hào)10份試劑的測(cè)定均值并按下列公式求出三個(gè)批號(hào)試劑測(cè)定均值的相對(duì)極差絕對(duì)值(％)，批間相對(duì)極差絕對(duì)值應(yīng)≤15％。公式：其中：中的最大值中的最小值測(cè)定結(jié)果下表由上表可得極差均小于5％，完全符合要求。實(shí)施例10對(duì)27份血清(包括正常樣本和異常樣本)。對(duì)照試劑為國(guó)外某知名廠家SAA免疫比濁試劑及其配套全自動(dòng)蛋白分析儀。按照各自的參數(shù)進(jìn)行測(cè)試，對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。分析結(jié)果見圖4。R值大于0.95，符合臨床要求。當(dāng)前第1頁1 2 3