一種取淚液的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
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[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種取淚液的方法。
【背景技術(shù)】
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[0002]淚液是生物體眼表分泌的一種體液，由脂質(zhì)、多糖、核酸、蛋白質(zhì)、電解質(zhì)等等組成。淚液在眼表免疫防御系統(tǒng)中起著重要的作用。隨著科技的進步及蛋白質(zhì)組學(xué)的熱門，不少重要科研成果發(fā)現(xiàn)淚液蛋白質(zhì)的異常與疾病的發(fā)生密切相關(guān)，但將淚液分析應(yīng)用于診治臨床疾病尚有限。究其原因，如何針對微量淚液，采用標準有效方法獲得淚液樣本是阻礙其應(yīng)用的關(guān)鍵因素之一。

【發(fā)明內(nèi)容】

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[0003]本發(fā)明的目的針對眼球表面，提供一種舒適感好，能夠使淚液成份得到最大程度保留的獲得淚液的方法。
[0004]本發(fā)明的取淚液的方法，其特征在于，形狀大小適于放置于眼表結(jié)膜囊內(nèi)的聚醚砜膜(PESm)，將此聚醚砜膜放入眼表結(jié)膜囊內(nèi)取淚液，然后再取出聚醚砜膜，通過離心分離而獲得淚液。
[0005]優(yōu)選，所述的聚醚砜膜為卵圓形，米用孔徑0.45?2.0 ym，厚度為0.05?0.5mm的聚醚砜膜，卵圓形的聚醚砜膜長軸和短軸分別為1.0cm和0.5cm。
[0006]所述的將此聚醚砜膜放入眼表結(jié)膜囊內(nèi)取淚液，放置時間不少于lOmin。
[0007]本發(fā)明采用合適的聚醚砜膜按照本發(fā)明的方法取淚液，其生物體舒適感好，并且能夠使吸取出來的淚液成份得到最大程度的保留，從而保證各種低豐度或差異蛋白多肽的最大回收。因此本發(fā)明為將淚液分析用于眼表疾病的診斷和治療提供了材料基礎(chǔ)。
【附圖說明】
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[0008]圖1是本發(fā)明使用的孔徑為0.65 μ m的聚醚砜膜(PESm65)的3維示意圖，；
[0009]圖2是實施例1中所使用的PESm65，其表面在放大10000倍后的掃描電鏡圖，呈網(wǎng)孔狀；
[0010]圖3是變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)圖與相似性系數(shù)圖。其中圖3A是分別以PESm65與取樣濾紙(STP)作采樣獲得的蛋白電泳圖，SDS-PAGE的條帶分布代表淚液蛋白的組成；圖3B是相似性系數(shù)圖，數(shù)據(jù)顯示PESm65較STP有優(yōu)勢，即對蛋白成分影響小。
【具體實施方式】
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[0011]以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，而不是對本發(fā)明的限制。
[0012]實施例1:
[0013]取厚度為0.07mm的0.65 μ m孔徑的卵圓形聚醚砜膜(短軸x長軸=0.5x1.0cm)，其3維形狀如圖1所示，表面放大10000倍的電鏡圖如圖2所示。將此聚醚砜膜放入新西蘭兔的兔眼結(jié)膜囊內(nèi)，10分鐘后取出，置于離心管中，于8000rpm，4°C下離心15min，取出聚醚砜膜，留于離心管中的液體即為聚醚砜膜取樣所得的淚液樣本，用于后續(xù)分析。
[0014]以厚度為0.15mm的取樣濾紙作為對照(大小相同)，按照上述聚醚砜膜相同的方法取淚液，由此獲得用取樣濾紙取得的淚液。
[0015]比較用聚醚砜膜取得的淚液和用取樣濾紙取得的淚液蛋白的差異，具體結(jié)果如圖3A所示，從圖3A的SDS-PAGE圖中蛋白條帶相似。進一步將二者的條帶用軟件進行相似性比較，其結(jié)果如圖3B所示。從圖3B的相似性系數(shù)可以看出，用聚醚砜膜取淚液較取樣濾紙能更好地保留淚液成分。
【主權(quán)項】
1.一種取淚液的方法，其特征在于，形狀大小適于放置于眼表結(jié)膜囊內(nèi)的聚醚砜膜(PESm)，將此聚醚砜膜放入眼表結(jié)膜囊內(nèi)取淚液，然后再取出聚醚砜膜，通過離心分離而獲得淚液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的聚醚砜膜為卵圓形，采用孔徑0.45 ?2.0 μ m，厚度為 0.05 ?0.5mm。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述的卵圓形聚醚砜膜，其卵圓形的長軸為1.0cm,短軸為0.5cm。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，將所述的聚醚砜膜放入眼表結(jié)膜囊內(nèi)取淚液，放置時間不少于lOmin。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種取淚液的方法。形狀大小適于放置于眼表結(jié)膜囊內(nèi)的聚醚砜膜(PESm)，將此聚醚砜膜放入眼表結(jié)膜囊內(nèi)取淚液，然后再取出聚醚砜膜，通過離心分離而獲得淚液。本發(fā)明采用合適的聚醚砜膜按照本發(fā)明的方法取淚液，其生物體舒適感好，并且能夠使吸取出來的淚液成份得到最大程度的保留，從而保證各種低豐度蛋白或多肽的最大回收。因此本發(fā)明為將淚液分析用于眼表疾病的診斷和治療提供了材料基礎(chǔ)。
【IPC分類】G01N1/10
【公開號】CN105223040
【申請?zhí)枴緾N201510644429
【發(fā)明人】吳開力, 楊倩, 劉秀平
【申請人】中山大學(xué)中山眼科中心
【公開日】2016年1月6日
【申請日】2015年9月30日