高選擇性檢測肼濃度的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及高選擇性檢測阱濃度的方法。具體而言，本發(fā)明設(shè)及使用4-漠下酸醋 Ξ氯基巧喃苯乙締類化合物作為阱高選擇長波長比色巧光探針的方法及對阱高選擇性識 別的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 阱(N也N也)因其具有較強(qiáng)的還原性而廣泛的應(yīng)用于有機(jī)合成等工業(yè)領(lǐng)域中。此外， 阱作為抗菌藥物在醫(yī)藥領(lǐng)域也得到了應(yīng)用。但是，研究表明阱具有強(qiáng)毒性，能夠增強(qiáng)肺癌、 鼻炎癌W及肝癌的發(fā)病率?，F(xiàn)在阱已被美國環(huán)保署和世界衛(wèi)生組織列為人類一個潛在的致 癌物質(zhì)。眾所周知，阱具有較強(qiáng)的揮發(fā)性，易于引起包括大氣和水在內(nèi)的環(huán)境污染。因此，開 發(fā)高選擇靈敏檢測阱的方法是非常必要的。
[0003]目前，檢測阱的傳統(tǒng)分析方法主要包括氣相色譜法、液相色譜法和電化學(xué)方法等。 最近，巧光探針由于其靈敏度高、操作方便等優(yōu)點而得到了快速發(fā)展，但是目前報道的阱巧 光探針仍存在一些不足，例如選擇性差、靈敏度低、響應(yīng)速度慢、合成復(fù)雜W及激發(fā)和發(fā)射 波長相對較短等。另外，比色探針由于不需要借助先進(jìn)的昂貴儀器僅用"裸眼"觀察即可達(dá) 到定量和定性分析的目的而受到廣泛關(guān)注。因此，發(fā)展高選擇性、高靈敏度、合成簡單的長 波長阱比色巧光探針是本領(lǐng)域技術(shù)人員研究的熱點。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本領(lǐng)域急需一種高選擇性檢測阱濃度的方法。具體而言，本發(fā)明的發(fā)明人制備一 種高選擇高靈敏長波長阱比色巧光探針，從而能夠有效檢測阱。為此，本發(fā)明合成了一類新 穎的長波長阱比色巧光探針，其合成簡單、穩(wěn)定性高、和/或選擇性高，和/或能夠識別阱。
[0005]具體而言，本發(fā)明提供了一種長波長阱比色巧光探針，其為4-漠下酸醋Ξ氯基巧 喃苯乙締類化合物。
[0006]本發(fā)明還提供了阱比率巧光探針的制備方法，其是通過將相應(yīng)的4-徑基Ξ氯基巧 喃苯乙締類化合物與4-漠下酸反應(yīng)制得。
[0007]在本發(fā)明的長波長阱比色巧光探針的制備方法中，反應(yīng)溫度是20~150°C;反應(yīng)時 間是化~2地;4-徑基Ξ氯基巧喃苯乙締類化合物與4-漠下酸的摩爾比為約1:1至1:8。
[000引本發(fā)明的長波長阱比色巧光探針可與阱進(jìn)行作用，引起巧光和吸收光譜的變化 (同時伴隨著顏色的變化），從而實現(xiàn)對阱的定性和定量檢測。
[0009]具體而言，本發(fā)明的長波長阱比色巧光探針分別與其他分析物進(jìn)行作用均不能導(dǎo) 致巧光光譜的明顯改變，從而實現(xiàn)對阱的選擇性識別，進(jìn)而可任選地用于排除其他分析物 的存在對阱的定性和定量測定的干擾。
[0010] 可選擇地，本發(fā)明的長波長阱比色巧光探針的穩(wěn)定性好，進(jìn)而能夠長期保存使用。
[0011] 進(jìn)一步的，本發(fā)明的長波長阱比色巧光探針是高選擇阱比色長波長巧光探針，且 合成簡單，有利于商業(yè)化的推廣應(yīng)用。
【附圖說明】
[0012]圖1是不同濃度阱(0~500μΜ)對探針(20μΜ)吸收和巧光光譜的影響。
[0013]圖2是不同濃度阱引起探針(40μΜ)溶液顏色的變化圖
[0014]圖3是不同分析物(200μΜ)對探針(2化Μ)巧光光譜W及探針利用巧光光譜法定量 分析阱(200μΜ)的影響。
【具體實施方式】：
[0015]本發(fā)明提出了上述高選擇性長波長阱比色巧光探針的合成路線、方法及其光譜性 能。
[0016] 本發(fā)明的長波長阱比色巧光探針是一類4-漠下酸醋Ξ氯基巧喃苯乙締類化合物， 其具有W下結(jié)構(gòu)通式
[0017]
[0018] 上式中：扣，1?2，1?3，1?4為氨原子，直鏈或支鏈烷基，直鏈或支鏈烷氧基，橫酸基，醋 基，簇基;Ri，R2，R3和R河W相同或不同。
[0019] 該類長波長阱比色巧光探針的合成路線和方法如下：
[0020]
[0021] 本發(fā)明的方法所采用的上述高選擇性識別阱長波長比色巧光探針的顯著特征是 能夠在長波長處高選擇性地識別阱，和/或在其他高濃度分析物的存在下能夠準(zhǔn)確對阱進(jìn) 行定性和定量分析。重要的是，本發(fā)明的方法中所采用的長波長阱比色巧光探針還能夠用 "裸暇'觀察的方法進(jìn)行定性和定量分析。
[0022] 下面將通過借助W下實施例來更詳細(xì)地說明本發(fā)明。W下實施例僅是說明性的， 應(yīng)該明白，本發(fā)明并不受下述實施例的限制。
[0023] 實施例1
[0024]
[002引（方案1)將4-?基苯乙締^氯基巧喃（303mg，l.0mmol)、4-漠下酸（166mg， 1.Ommol)、4-二甲氨基R比晚（122mg，1.Ommol)和二環(huán)己基碳二亞胺（412mg，2.Ommol)溶于 20mL干燥的二氯甲燒中，50°C下反應(yīng)4h后，減壓蒸發(fā)得到粗產(chǎn)品，然后使用二氯甲燒進(jìn)行柱 色譜分離，得到淺黃色純凈產(chǎn)品140mg，產(chǎn)率為31 %。
[0026] (方案2)將4-徑基苯乙締^氯基巧喃（303mg，l.〇111111〇1)、4-漠下酸（166111邑， 1.Ommol)、4-二甲氨基R比晚（122mg，1.Ommol)和二環(huán)己基碳二亞胺（412mg，2.Ommol)溶于 20mL干燥的二氯甲燒中，50°C下反應(yīng)lOh后，減壓蒸發(fā)得到粗產(chǎn)品，然后使用二氯甲燒進(jìn)行 柱色譜分離，得到淺黃色純凈產(chǎn)品293mg，產(chǎn)率為65 %。
[0027] (方案3)將4-徑基苯乙締^氯基巧喃（303mg，l.〇111111〇1)、4-漠下酸（166111邑， 1.Ommol)、4-二甲氨基R比晚（122mg，1.Ommol)和二環(huán)己基碳二亞胺（412mg，2.Ommol)溶于 20mL干燥的二氯甲燒中，50°C下反應(yīng)15h后，減壓蒸發(fā)得到粗產(chǎn)品，然后使用二氯甲燒進(jìn)行 柱色譜分離，得到淺黃色純凈產(chǎn)品320mg，產(chǎn)率為71 %。
[002引（方案4)將4-徑基苯乙締立氯基巧喃（303mg，l.011111101)、4-漠下酸（332111邑， 2.0mmol)、4-二甲氨基R比晚（224111旨，2.01]11]1〇1)和二環(huán)己基碳二亞胺（824111旨，4.〇1]11]1〇1)溶于 20mL干燥的二氯甲燒中，50°C下反應(yīng)15h后，減壓蒸發(fā)得到粗產(chǎn)品，然后使用二氯甲燒進(jìn)行 柱色譜分離，得到淺黃色純凈產(chǎn)品401mg，產(chǎn)率為89%。
[0029] 1h-NMR(400MHz，CDC13)δ(* 10-6): 1.81 (S，細(xì)），2.28-2.34(m，2H)，2.82(tJ=細(xì)Z， 2H) ,3.56(t，J=細(xì)z，2H), 7.00(dJ=16Hz, 2H) ,7.24(s，lH) ,7.63-7.70(m，3H).i3c-醒R (100MHz，CDCl3)S(*l〇-6):26.44,27.39,32.36,32.55,58.16,97.77,100.35,110.12， 110.78,111. 52,115.03,122.83,130.32,131.45,146.03,153.87,170.56,173.57， 175.15.ESI-MScalcdforC22H1泌rN3〇3[M+H]+452，found452.
[0030] 實施例2
[0031] 本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)行了如下測試：（a)不同濃度阱(0~500μΜ)對探針(20μΜ)吸收 光譜的影響，插入圖是595nm處吸光度與410nm處吸光度的比值與加入的阱濃度之間的線性 關(guān)系。（b)不同濃度阱(0~500μΜ)對探針（20μΜ)巧光光譜的影響；插入圖是610皿處巧光強(qiáng) 度與加入的阱濃度之間的線性關(guān)系。上述測定是在乙醇和水(5:5，V/V)含有5mM憐酸鹽緩沖 溶液(PBS)，pH值7.4的體系中，且所有光譜測試都是在25°0下阱加入作用2〇111山后測得的。 結(jié)果參見圖1。
[0032] 從圖la可W看出，伴隨著探針溶液中阱濃度的增加，410nm處的吸收峰逐漸降低， 同時595nm處產(chǎn)生新的吸收峰并逐漸升高，且在120~250ιχΜ阱濃度范圍內(nèi)和595nm處吸光度 與410nm處吸光度的比值成良好的線性關(guān)系。從圖lb可W看出，伴隨著探針溶液中阱濃度的 增加，610皿處巧光發(fā)射峰逐漸升高，且在50~500μΜ阱濃度范圍內(nèi)和610皿處巧光強(qiáng)度成良 好的線性關(guān)系。因此，本發(fā)明的探針能較精確地確定待測樣本中阱的含量。
[0033] 實施例3
[0034] 由圖2可W清晰的看出：不同濃度阱(從左至右:0,0.2,0.4,0.6,0.8，1.0mM)存在 下探針溶液(40μΜ)的顏色由黃色逐漸變成藍(lán)色。因此，本發(fā)明的探針僅用"裸眼"觀察即可 完成樣本中阱的定性和定量分析檢測。
[0035] 實施例4
[0036] 不同分析物(200μΜ)對探針(20μΜ)巧光光譜的影響。分析物包括：乙二胺邸Α、二乙 胺DEA、Ξ乙胺TEA、正下胺ηΒΑ、氯離子Cr、硫酸根離子S042\硝酸根離子Ν03\亞硝酸根離子 Ν02^日阱，它們的濃度均為200μΜ。所有測試條件是在乙醇和水(5:5，V/V)含有5mM憐酸鹽緩 沖溶液(PBS)，pH值7.4的體系中完成，且所有光譜都是在25°0下分析物加入作用2〇111111后測 得的。移取10化的探針儲備液（lOmM)放進(jìn)5mL比色管中，然后加入2.5mL乙醇，250化lOOmM PBS，再移取10化上述分析物儲備液（lOOmM)加入比色管內(nèi)，然后用超純水定容至5mL。搖勻， 靜置20min，即可測定。結(jié)果如圖3灰色柱狀圖所示。
[0037] 從圖3灰色柱狀圖可W看出，探針對阱具有很高的選擇性，能夠?qū)Ｒ恍缘睾挖暹M(jìn)行 反應(yīng)。其原因可能是臘首先與漠原子發(fā)生分子間的親核取代反應(yīng)，然后阱上的另外一個氮 原子又發(fā)生了分子內(nèi)親核取代反應(yīng)胺解掉了醋基導(dǎo)致的。
[0038] 不同分析物(200μΜ)對探針(20μΜ)巧光光譜法定量分析阱(200μΜ)的影響。分析物 包括：乙二胺抓Α、二乙胺DEA、S乙胺TEA、正下胺ηΒΑ、氯離子Cr、硫酸根離子S〇42-、硝酸根 離子N03\亞硝酸根離子N02啼阱，它們的濃度均為200μΜ。所有測試條件是在乙醇和水(3: 7，V/V)含有5mM憐酸鹽緩沖溶液(PBS)，ρΗ值7.4的體系中完成，且所有光譜都是在25°C下分 析物加入作用20min后測得的。結(jié)果如圖3黑色柱狀圖所示。
[0039] 從圖3黑色柱狀圖可W看出，環(huán)境中存在的其他常見分析物不會明顯干擾探針對 阱的定性與定量檢測。
【主權(quán)項】
1. 檢測樣品中肼含量的方法，其包括使具有如下結(jié)構(gòu)的化合物與樣品接觸的步驟：其中：為獨立地選自由氫原子、直鏈或支鏈烷基、直鏈或支鏈烷氧基、磺酸 基、酯基和羥基組成的組;且其中的和R4可以相同或不同。2. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述的化合物為如下結(jié)構(gòu)的化合物：3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其還包括在化合物與樣品接觸后檢測熒光強(qiáng)度的步驟。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述的樣品為血液或食品。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所屬的樣品為血液。6. 權(quán)利要求1或2中所定義的化合物在檢測樣品中肼濃度中的用途。7. 根據(jù)權(quán)利要求6的用途，其中所述的樣品為血液或食品。
【專利摘要】本發(fā)明涉及高選擇性檢測肼濃度的方法。具體而言，本發(fā)明使用一類4-溴丁酸酯三氰基呋喃苯乙烯類化合物作為長波長肼比色熒光探針來在樣品中檢測肼含量。這類探針不僅能夠高選擇性地識別肼而且能夠在長波長處用熒光法對肼進(jìn)行靈敏的定量和定性分析。這類探針可以快速對肼實現(xiàn)響應(yīng)，可以實現(xiàn)對肼的即時檢測，可以僅用“裸眼”觀察實現(xiàn)對肼的定性和定量分析。這類探針性質(zhì)穩(wěn)定，可以長期保存使用。此外，這類探針還具有較強(qiáng)的抗干擾能力。
【IPC分類】C09K11/06, G01N21/64, C07D307/68
【公開號】CN105445241
【申請?zhí)枴緾N201510755303
【發(fā)明人】葉龍武, 張艷
【申請人】晉江尚京富本環(huán)?？萍加邢薰?br>【公開日】2016年3月30日
【申請日】2015年11月9日