9和/或群體感應相關目標分子10在檢測分子8上的定性結合，也可以提供關于樣品中的目標分子9，10的數(shù)量的定量信息。
[0086]在下文中，將參照圖5和6說明根據(jù)第四實施方案的根據(jù)本發(fā)明的裝置I。對于功能和/或結構與前圖中的部件相同或相似的部件，將在圖5和圖6中使用相同的附圖標記。在第四實施方案中，導管23和/或套管24是根據(jù)本發(fā)明的裝置I的載體2。
[0087]圖5示出了導管23和/或套管24如何放置在以示例性方式示出并可以是例如血管的管腔25中。附圖僅僅總體上示意地示出了導管1、管腔3以及裝置I的尺寸顯示而不是真正的按比例繪制。
[0088]來自圖5的裝置I，其截面A在圖6中詳細地顯示，其包括作為信號導體26的電導體，涂覆有聚合物19的信號轉換器20以及包括作為檢測分子8的抗體的檢測區(qū)域7?？贵w13不直接結合到聚合物19，而是通過連接分子13偶聯(lián)。連接子13是具有例如兩個相同的(同雙官能)或兩個不同的(異雙官能)的官能團的小分子。同樣地，連接子的長度與功能相關。零長度交聯(lián)劑用于無間隔的兩個分子的連接。特別是在復雜分子如酶或抗體的情況下，使用連接子可對固定的結構的生物活性具有促進效果。通過連接子，使分子的活性中心或活性結構域更遠離上面固定有分子的主體結構。由此通過固定降低了失活的風險。另一種可能性是選擇連接子，使得它僅結合目標分子中確定的結構并從而保持分子的活性區(qū)域完整。對于IgG抗體在聚合物中的羧基上的偶聯(lián)，可以使用零長度交聯(lián)劑EDC(1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二亞胺鹽酸鹽)，其催化抗體中的伯氨基和聚合物的羧基之間的肽鍵的形成。
[0089]在圖6所示的實施方案中，信號轉換器20包括電極布置27，其測量電阻的變化。電阻變化由目標分子9，10的結合過程和連接分子13相關的結構變化觸發(fā)，由信號轉換器20發(fā)出為結合信號12并通過信號導體26輸送到外部。
[0090]如果結合伴侶是電活性物質并且通過結合引起例如質量增加而改變其導電性，目標分子9，10的結合可以例如留下電信號。在群體感應相關的酶作為目標分子10的速測法的情況下，信號發(fā)射可以電位方式進行，因為電荷載體由于酶轉化而變自由，并指示電流變化為測量值。在光學方面，結合可以通過比色法而檢測，或者通過使結合改變光反射/折射性能而證明，這些性能可以通過光粒子傳感器確定。
[0091]附圖標記
[0092]I 裝置
[0093]2 載體
[0094]3測試條
[0095]4測試棒
[0096]5應用區(qū)域
[0097]6 樣品
[0098]7檢測區(qū)域
[0099]8檢測分子
[0100]9群體感應目標分子
[0101]10群體感應相關目標分子
[0102]11對照區(qū)域
[0103]12結合信號
[0104]13連接子
[0105]14生物芯片
[0106]15微陣列基板
[0107]16a，16b，16d 檢測試劑
[0108]16c 第二抗體
[0109]17微滴定板
[0110]18 孔
[0111]19聚合物基體
[0112]20信號轉換器
[0113]21測量單元
[0114]22組氨酸激酶
[0115]23 導管
[0116]24 套管
[0117]25 管腔
[0118]26信號導體
[0119]27電極排列
[0120]28標記物
[0121]A圖5中的截面。
【主權項】
1.一種用于實施敗血癥測試的裝置(I)，特別是以速測法的形式，所述裝置(I)包括具有檢測分子(8)的至少一個檢測區(qū)域(7)，所述檢測分子(8)特異性地結合群體感應目標分子(9)或群體感應相關目標分子(10)。2.根據(jù)權利要求1的裝置(I)，其特征在于，至少一種所述檢測分子(8)是抗體、抗體的特異性結合片段、抗原、肽、蛋白質、核酸、適體、配體、受體、半抗原、酶、酶抑制劑、酶底物或酶的輔因子。3.根據(jù)權利要求1或2的裝置(I)，其特征在于，所述至少一個檢測區(qū)域(7)中的所述檢測分子(8)特異性地結合下列群體感應相關目標分子(9)中的一種: -高絲氨酸內酯，優(yōu)選N-酰基高絲氨酸內酯I，N-?；呓z氨酸內酯2，N-?；呓z氨酸內酯3或N-?；呓z氨酸內酯4，或 -自體誘導肽，優(yōu)選呋喃酮酰硼酸二酯， 或特異性地結合下列群體感應相關目標分子(10)中的一種: -β-半乳糖苷酶 -β-氨基己糖苷酶， -芳基硫酸酯酶A，或 -對氧磷酶I。4.根據(jù)權利要求1至3中任何一項的裝置(I)，其特征在于，所述裝置(I)包括至少兩個檢測區(qū)域(7)，其中所述檢測分子(8)在每個檢測區(qū)域(7)中特異性地結合不同的群體感應目標分子(9)和/或群體感應相關目標分子(10)。5.根據(jù)權利要求1至4中的任何一項的裝置(I)，其特征在于，所述檢測分子(8)直接地固定在載體(2)上或間接地通過連接分子(13)和/或聚合物基體(19)固定在載體(2)上。6.根據(jù)權利要求5的裝置(I)，其特征在于，所述載體(2)是測試條(3)、測試棒(4)、微滴定板(17)、生物芯片(14)、微陣列基板(15)、導管(23)，套管(24)或信號轉換器(20)。7.根據(jù)權利要求1至6中的任一項的裝置(I)，其特征在于用于檢測的測量單元(21)，優(yōu)選用于在至少一個，優(yōu)選每個檢測區(qū)域(7)中檢測和定量檢測分子(8)和目標分子(9，10)之間的結合的測量單元(21)。8.—種用于實施敗血癥測試的試劑盒，特別是以速測法的形式，其包括特異性地結合群體感應目標分子(9)和/或群體感應相關目標分子(10)的至少一種檢測分子(8)以及下列要素中的至少一種: -緩沖劑， -清洗劑， -發(fā)出可測量信號的檢測試劑， 其中，所述試劑盒中的檢測分子(8)優(yōu)選如根據(jù)權利要求1至7中的任一項的裝置(I)所提供。9.一種用于檢測病原體物質，特別是用于支持敗血癥診斷的速測法，其包括以下步驟: -在使目標分子(9，10)能夠與至少一種檢測分子(8)結合的條件下使樣品(6)與特異性結合群體感應目標分子(9)和/或群體感應相關目標分子(10)的所述至少一種檢測分子(8)接觸；以及 -驗證目標分子(9，10)是否已經(jīng)與所述至少一種檢測分子(8)結合。10.根據(jù)權利要求9的速測法，其特征在于，使所述樣品(6)與根據(jù)權利要求1至7中的任一項的裝置(I)接觸。11.根據(jù)權利要求9或10的速測法，其特征在于，所述樣品(6)是血樣、尿樣、痰樣、淋巴液樣品或其它體液樣品。12.根據(jù)權利要求9至11中的任一項的速測法，其特征在于，加入發(fā)出可測量的結合信號(12)的檢測試劑(16a，16b，16d)用于驗證結合過程。13.根據(jù)權利要求12的速測法，其特征在于，量化可測量的結合信號(12)。14.根據(jù)權利要求9至13中的任一項的速測法，其特征在于，所述目標分子(10)是群體感應相關的酶，特別是β-半乳糖苷酶、β-氨基己糖苷酶、芳基硫酸酯酶A和/或對氧磷酶I，其酶活性是確定的。15.根據(jù)權利要求9至14中的任一項的速測法，其特征在于，根據(jù)特異性結合檢測分子(8)的目標分子(9，10)表征敗血癥病原體，優(yōu)選確定所述敗血癥病原體的革蘭氏狀態(tài)。
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于檢測病原體物質，特別是用于支持敗血癥的診斷的速測法，以及用于實施敗血癥測試的試劑盒和裝置。為了提供實現(xiàn)敗血癥的早期識別，敗血癥病原體的檢測和它們的致病性狀態(tài)的確定和/或致病細菌的進一步表征的速測法和裝置(1)，根據(jù)本發(fā)明的裝置(1)包括實施敗血癥測試的至少一個裝置(1)，特別是以速測法的形式，所述裝置(1)包括具有檢測分子(8)的至少一個檢測區(qū)域(7)，所述檢測分子(8)特異性地結合群體感應目標分子(9)或群體感應相關目標分子(10)。根據(jù)本發(fā)明的速測法包括在使目標分子(9,10)能夠與至少一種檢測分子(8)結合的條件下使樣品(6)與特異性結合群體感應目標分子(9)和/或群體感應相關目標分子(10)的所述至少一種檢測分子(8)接觸；以及驗證目標分子(9,10)是否已經(jīng)與所述至少一種檢測分子(8)結合的步驟。
【IPC分類】G01N33/569
【公開號】CN105579850
【申請?zhí)枴緾N201480045895
【發(fā)明人】安德里亞斯·博爾曼, 羅伯特·尼斯特羅伊, 克勞斯·呂克, 佐爾法伊格·克魯澤科普夫
【申請人】吉盧比有限公司
【公開日】2016年5月11日
【申請日】2014年6月23日
【公告號】DE102013211850A1, EP3011338A2, US20160139114, WO2014202785A2, WO2014202785A3