一種edta-檸檬酸抗原修復(fù)液的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及免疫組織化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種EDTA?檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA?檸檬酸抗原修復(fù)液中包括：Tris?Base 1.20?1.25g，EDTA 0.35?0.40g，一水合檸檬酸0.35?0.40g，二水合檸檬酸鈉2.40?2.42g，吐溫?20 400?600微升，三乙醇胺或乙二醇或三元醇50?500mL和余量的單蒸水。本發(fā)明的EDTA?檸檬酸抗原修復(fù)液浸潤、修復(fù)效果好，能夠在較少的用量下對組織切片進(jìn)行修復(fù)，修復(fù)后組織切片容易染色，染色效果好。并且修復(fù)液不易揮發(fā)，能夠配合全自動免疫組化儀使用。
【專利說明】
一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及免疫組織化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種m)TA-檸檬酸抗原修復(fù)液?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]免疫組織化學(xué)技術(shù)是近年來病理診斷迅速發(fā)展的檢測技術(shù)，作為一種重要的病理輔助診斷方法，在臨床的應(yīng)用中日益受到重視。隨著全自動免疫組化染色儀的應(yīng)用推廣，對于染色質(zhì)量的要求也日益提高。其中，抗原修復(fù)在整個免疫組化染色過程中有著極其重要的作用，修復(fù)條件的好壞直接決定著最終染色結(jié)果的質(zhì)量。全自動染色儀因為其自身的結(jié)構(gòu)特點，其用于盛放修復(fù)液的容器體積較小，不能像手工修復(fù)那樣把組織切片完全浸泡在修復(fù)液中的條件，并且全自動免疫組化染色儀在抗原修復(fù)時需要在較高的溫度(100°c左右)下進(jìn)行，因此修復(fù)液容易揮發(fā)，進(jìn)一步減少了修復(fù)液的體積。因而，如何在全自動免疫組化染色儀上完成正常的抗原修復(fù)是全自動免疫組化染色儀必須解決的一個難題。
[0003]但是由于目前全自動免疫組化染色儀國內(nèi)還不普及，很少有人使用，因此沒有人注意到上述技術(shù)問題。目前國外解決上述技術(shù)問題的方法通常是控制抗原修復(fù)的環(huán)境，如控制大氣壓、環(huán)境溫度等等，這些解決方法條件復(fù)雜，很難實際應(yīng)用。目前還未發(fā)現(xiàn)通過改進(jìn)抗原修復(fù)液來解決上述技術(shù)問題的報道。
[0004]目前的抗原修復(fù)液有很多品種，如EDTA抗原修復(fù)液、檸檬酸抗原修復(fù)液以及EDTA-檸檬酸復(fù)配抗原修復(fù)液等等。申請?zhí)枮?01180024136.0的中國專利公開了一種抗原修復(fù)液和抗原修復(fù)方法，用于免疫組織和細(xì)胞的化學(xué)染色過程中的抗原修復(fù)。所述抗原修復(fù)液為衣康酸、衣康酸酐或檸康酸水溶液。所述抗原修復(fù)方法為采用上述抗原修復(fù)液對組織切片進(jìn)行高溫或高溫高壓修復(fù)。提供的抗原修復(fù)液和抗原修復(fù)方法具有染色質(zhì)量高，可重現(xiàn)性、 安全性、穩(wěn)定性好的優(yōu)點。
[0005]上述抗原修復(fù)液的溶劑為水，如果應(yīng)用于全自動免疫組化染色儀上，一方面，該抗原修復(fù)液需要在用量大的情況下修復(fù)效果才好，無法在較少用量無法將組織切片完全浸漬的情況下完成較好的修復(fù)；另一方面，其沸點低，在較高溫度下容易揮發(fā)，容易導(dǎo)致組織切片發(fā)生干化情況，而一旦發(fā)生干化，組織切片的抗原就會變?yōu)椴豢赡孓D(zhuǎn)的破壞而無法修復(fù)。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液。本發(fā)明的 EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液浸潤、修復(fù)效果好，能夠在較少的用量下對組織切片進(jìn)行修復(fù)，修復(fù)后組織切片容易染色，染色效果好。并且修復(fù)液不易揮發(fā)，能夠配合全自動免疫組化儀使用。
[0007]本發(fā)明的具體技術(shù)方案為:一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tri s-Base 1.20-1.25g，EDTA 0.35-0.40g，一水合檸檬酸0.35-0.40g，二水合檸檬酸鈉2.40-2.42g，吐溫-20 400-600微升，三乙醇胺或乙二醇或三元醇 50-500mL和余量的單蒸水。
[0008]在本發(fā)明的抗原修復(fù)液中，以m)TA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉作為主要的修復(fù)活性成分，并且以三乙醇胺或乙二醇或三元醇與單蒸水作為混合溶劑。其中，三乙醇胺或乙二醇或三元醇的加入，能夠提高抗原修復(fù)液的沸點，防止其過度揮發(fā)。并且三乙醇胺或乙二醇或三元醇與其他高點的溶劑相比，其優(yōu)勢是對抗原修復(fù)液中的活性成分的影響較小， 且與組織切片的親和性較好，毒性低，不會對組織切片的修復(fù)造成過多影響，其中三元醇、 三乙胺醇的效果優(yōu)于乙二醇。吐溫-20起到乳化作用，能夠提高抗原修復(fù)液中各物質(zhì)的相容性。
[0009]作為優(yōu)選，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1.2114g，EDTA 0.37224g，一水合檸檬酸0.378252g，二水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺或乙二醇或三元醇150mL和余量的單蒸水。[0〇1〇] 作為優(yōu)選，每lOOOmL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1.2114g，EDTA 0.37224g，一水合檸檬酸0.378252g，二水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺150mL和余量的單蒸水。[〇〇11] 作為優(yōu)選，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tri s-Base 1.20-1.25g， EDTA 0 ? 35-0 ? 40g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二水合檸檬酸鈉2 ? 411784g，吐溫-20 400-600 微升，三乙醇胺或乙二醇或三元醇50-500mL，海藻提取物0.5-1.5g和余量的單蒸水。[0〇12] 作為優(yōu)選，每lOOOmL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1.2114g，EDTA 0.37224g，一水合檸檬酸0.378252g，二水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺或乙二醇或三元醇150mL，海藻提取物lg和余量的單蒸水。[0〇13] 作為優(yōu)選，每lOOOmL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1.2114g，EDTA 0.37224g，一水合檸檬酸0.378252g，二水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺150mL，海藻提取物lg和余量的單蒸水。[〇〇14]作為優(yōu)選，所述EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液的制備方法如下:按配比稱取Tris-Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉，用單蒸水溶解Tris-Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉后，加入配方量的三乙醇胺或乙二醇或三元醇， 完全溶解后添加吐溫-20,最后用單蒸水定容至額定容量。
[0015]作為優(yōu)選，所述EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液的制備方法也可如下:按配比稱取Tris-Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉，用單蒸水溶解TriS-Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉后，加入配方量的三乙醇胺或乙二醇或三元醇，完全溶解后添加海藻提取物以及吐溫-20,最后用單蒸水定容至額定容量。
[0016]作為優(yōu)選，所述海藻提取物的制備方法為:將洗凈后的海藻與水按質(zhì)量比2-4:10 混合，并用打漿機(jī)制成海藻漿料;將海藻漿料與pH值為3-5的鹽酸溶液按體積比1:1-2混合， 得到混合漿料，對混合漿料進(jìn)行微波輔助提取，提取后過濾除去固態(tài)物得到海藻提取液，對海藻提取液在l〇〇-ll〇°C，4-8MPa的環(huán)境下熟化滅菌0.5-1.5h，在熟化過程中能夠使部分多糖降解;對熟化滅菌后的海藻提取液進(jìn)行過濾去除已變性的粗蛋白；將過濾后的海藻提取液pH調(diào)節(jié)至中性，最后冷凍干燥后制得海藻提取物。
[0017]為了進(jìn)一步的優(yōu)化，本發(fā)明的抗原修復(fù)液中也加入海藻提取物。本發(fā)明中制得的海藻提取物含有天然的海藻酸鹽以及天然多糖等物質(zhì)，生物溫和性好，與組織切片親和性好。少量的海藻提取物溶于水中能夠使液體一定的粘度，鎖水效果好，能夠進(jìn)一步防止抗原修復(fù)液中溶劑揮發(fā)。此外，海藻提取物對抗原修復(fù)液中的修復(fù)活性成分能夠物理結(jié)合，海藻提取物與組織切片接觸后，能夠在組織切片表面形成一層薄的黏膜，從而使得與其結(jié)合的修復(fù)活性成分能夠充分與組織切片接觸，在較少用量抗原修復(fù)液的情況下，提高修復(fù)效果。 但是海藻提取物的用量需要嚴(yán)格把控，如果用量過多，會導(dǎo)致抗原修復(fù)液粘度過高，流動性太差，且與組織切片結(jié)合過度，不易后續(xù)的清洗。
[0018]作為優(yōu)選，所述微波輔助提取的條件為:溫度70-90°C，時間5-10min，微波功率 800-1000W，微波頻率2450MHZ。[〇〇19]作為優(yōu)選，所述三元醇可以為甘油。
[0020]與現(xiàn)有技術(shù)對比，本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液浸潤、修復(fù)效果好，能夠在較少的用量下對組織切片進(jìn)行修復(fù)。平均每張組織切片所需的修復(fù)液只需100-150UL。
[0021]修復(fù)后組織切片容易染色，染色效果好。
[0022]并且修復(fù)液不易揮發(fā)，能夠配合全自動免疫組化儀使用?！揪唧w實施方式】[〇〇23]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。[〇〇24] 一水合檸檬酸0 ? 35-0 ? 40g，二水合檸檬酸鈉2 ? 40-2 ? 42g，一水合檸檬酸〇.378252g，二水合檸檬酸鈉2.411784g，實施例1一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:1>18_ Base 1 ? 2114g，EDTA 0 ? 37224g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二水合檸檬酸鈉2 ? 411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺150mL和余量的單蒸水。[〇〇25]制備方法如下:按配比稱取Tris_Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉，用單蒸水溶解Tris-Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉后，加入配方量的三乙醇胺， 完全溶解后添加吐溫-20,最后用單蒸水定容至額定容量。
[0026] 實施例2一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:1>18_ Base 1 ? 2114g，EDTA 0 ? 37224g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二水合檸檬酸鈉2 ? 411784g，吐溫-20 500微升，乙二醇325mL和余量的單蒸水。[〇〇27]制備方法如下:按配比稱取Tris_Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉，用單蒸水溶解Tri s-Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉后，加入配方量的乙二醇，完全溶解后添加吐溫-20,最后用單蒸水定容至額定容量。[〇〇28] 實施例3一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1.20g，EDTA 0.35g，一水合檸檬酸0.35g，二水合檸檬酸鈉2.40g，吐溫-20 400微升，三乙醇胺50mL和余量的單蒸水。
[0029] 實施例4一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1.25g，EDTA 0.40g，一水合檸檬酸0.40g，二水合檸檬酸鈉2.42g，吐溫-20 600微升，三乙醇胺500mL和余量的單蒸水。
[0030]實施例5一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:1>18_ Base 1 ? 2114g，EDTA 0 ? 37224g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二水合檸檬酸鈉2 ? 411784g，吐溫-20 500微升，甘油300mL和余量的單蒸水。
[0031]實施例6一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:1>18_ Base 1 ? 2114g，EDTA 0 ? 37224g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二水合檸檬酸鈉2 ? 411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺150mL，海藻提取物lg和余量的單蒸水。[〇〇32]制備方法如下:按配比稱取Tris_Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉，用單蒸水溶解Tris-Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉后，加入配方量的三乙醇胺， 完全溶解后添加海藻提取物以及吐溫-20,最后用單蒸水定容至額定容量。
[0033]所述海藻提取物的制備方法為:將洗凈后的海藻與水按質(zhì)量比3:10混合，并用打漿機(jī)制成海藻漿料;將海藻漿料與pH值為4的鹽酸溶液按體積比1:1.5混合，得到混合漿料， 對混合漿料進(jìn)行微波輔助提取，其中提取條件為:溫度80 °C，時間7.5min，微波功率900W，微波頻率2450MHZ。提取后過濾除去固態(tài)物得到海藻提取液，對海藻提取液在105°C，6MPa的環(huán)境下熟化滅菌lh;對熟化滅菌后的海藻提取液進(jìn)行過濾去除粗蛋白；將過濾后的海藻提取液pH調(diào)節(jié)至中性，最后冷凍干燥后制得海藻提取物。[〇〇34] 實施例7一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:每 1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1.2114g，EDTA 0.37224g，一水合檸檬酸0.378252g，二水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺150mL，海藻提取物〇.5g和余量的單蒸水。
[0035]所述海藻提取物的制備方法為:將洗凈后的海藻與水按質(zhì)量比2:10混合，并用打漿機(jī)制成海藻漿料;將海藻漿料與pH值為3-5的鹽酸溶液按體積比1:1混合，得到混合漿料， 對混合漿料進(jìn)行微波輔助提取，其中提取條件為:溫度70 °C，時間10min，微波功率800W，微波頻率2450MHZ。提取后過濾除去固態(tài)物得到海藻提取液，對海藻提取液在100 °C，8MPa的環(huán)境下熟化滅菌〇.5h;對熟化滅菌后的海藻提取液進(jìn)行過濾去除粗蛋白；將過濾后的海藻提取液pH調(diào)節(jié)至中性，最后冷凍干燥后制得海藻提取物。
[0036]實施例8每 1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1.2114g，EDTA 0.37224g，一水合檸檬酸〇.378252g，二水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺150mL，海藻提取物1.5g和余量的單蒸水。
[0037]所述海藻提取物的制備方法為:將洗凈后的海藻與水按質(zhì)量比4:10混合，并用打漿機(jī)制成海藻漿料;將海藻漿料與pH值為3-5的鹽酸溶液按體積比1: 2混合，得到混合漿料，對混合漿料進(jìn)行微波輔助提取，其中提取條件為:溫度90 °C，時間5min，微波功率1000W， 微波頻率2450MHZ。提取后過濾除去固態(tài)物得到海藻提取液，對海藻提取液在110°C，4MPa的環(huán)境下熟化滅菌1.5h;對熟化滅菌后的海藻提取液進(jìn)行過濾去除粗蛋白；將過濾后的海藻提取液pH調(diào)節(jié)至中性，最后冷凍干燥后制得海藻提取物。
[0038] 實施例9一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，每1000mL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中包括:1>18_ Base 1 ? 2114g，EDTA 0 ? 37224g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二水合檸檬酸鈉2 ? 411784g，吐溫-20 500微升，甘油150mL，海藻提取物lg和余量的單蒸水。[〇〇39]制備方法如下:按配比稱取Tris_Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉，用單蒸水溶解Tri s-Base、EDTA、一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉后，加入配方量的甘油，完全溶解后添加海藻提取物以及吐溫-20,最后用單蒸水定容至額定容量。
[0040]所述海藻提取物的制備方法為:將洗凈后的海藻與水按質(zhì)量比3:10混合，并用打漿機(jī)制成海藻漿料;將海藻漿料與pH值為4的鹽酸溶液按體積比1:1.5混合，得到混合漿料， 對混合漿料進(jìn)行微波輔助提取，其中提取條件為:溫度80 °C，時間7.5min，微波功率900W，微波頻率2450MHZ。提取后過濾除去固態(tài)物得到海藻提取液，對海藻提取液在105°C，6MPa的環(huán)境下熟化滅菌lh;對熟化滅菌后的海藻提取液進(jìn)行過濾去除粗蛋白；將過濾后的海藻提取液pH調(diào)節(jié)至中性，最后冷凍干燥后制得海藻提取物。本發(fā)明中所用原料、設(shè)備，若無特別說明，均為本領(lǐng)域的常用原料、設(shè)備;本發(fā)明中所用方法，若無特別說明，均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。[〇〇41]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例，并非對本發(fā)明作任何限制，凡是根據(jù)本發(fā)明技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、變更以及等效變換，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項】
1.一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于:每lOOOmL的EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液中 包括:Tris-Base 1 ? 20-1 ? 25g，EDTA 0 ? 35-0 ? 40g，一水合檸檬酸0 ? 35-0 ? 40g，二水合檸檬酸 鈉2.40-2.42g，吐溫-20 400-600微升，三乙醇胺或乙二醇或三元醇50-500mL和余量的單蒸 水。2.如權(quán)利要求1所述的一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于，每lOOOmL的EDTA-檸 檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1 ? 2114g，EDTA 0 ? 37224g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二 水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺或乙二醇或三元醇150mL和余量的單蒸水。3.如權(quán)利要求2所述的一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于，每lOOOmL的EDTA-檸 檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1 ? 2114g，EDTA 0 ? 37224g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二 水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺150mL和余量的單蒸水。4.如權(quán)利要求1所述的一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于，每lOOOmL的EDTA-檸 檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1.20-1.25g，EDTA 0.35-0.40g，一水合檸檬酸0.35-0.40g，二水合檸檬酸鈉2.40-2.42g，吐溫-20 400-600微升，三乙醇胺或乙二醇或三元醇 50-500mL，海藻提取物0.5-1.5g和余量的單蒸水。5.如權(quán)利要求4所述的一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于，每lOOOmL的EDTA-檸 檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1 ? 2114g，EDTA 0 ? 37224g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二 水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺或乙二醇或三元醇150mL，海藻提取 物lg和余量的單蒸水。6.如權(quán)利要求5所述的一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于，每lOOOmL的EDTA-檸 檬酸抗原修復(fù)液中包括:Tris-Base 1 ? 2114g，EDTA 0 ? 37224g，一水合檸檬酸0 ? 378252g，二 水合檸檬酸鈉2.411784g，吐溫-20 500微升，三乙醇胺150mL，海藻提取物lg和余量的單蒸 水。7.如權(quán)利要求1-3之一所述的一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于制備方法如 下:按配比稱取Tris-Base，EDTA，一水合檸檬酸和二水合檸檬酸鈉，用單蒸水溶解Tris-Base ，EDTA，一水合檸檬酸和二水合檸檬酸鈉后 ，加入配方量的三乙醇胺或乙二醇或三元 醇，完全溶解后添加吐溫-20,最后用單蒸水定容至額定容量。8.如權(quán)利要求4-6之一所述的一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于制備方法如 下:按配比稱取Tris-Base，EDTA，一水合檸檬酸和二水合檸檬酸鈉，用單蒸水溶解Tris-Base ，EDTA，一水合檸檬酸和二水合檸檬酸鈉后 ，加入配方量的三乙醇胺或乙二醇或三元 醇，完全溶解后添加海藻提取物以及吐溫-20,最后用單蒸水定容至額定容量。9.如權(quán)利要求4-6之一所述的一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于，所述海藻提 取物的制備方法為:將洗凈后的海藻與水按質(zhì)量比2-4:10混合，并用打漿機(jī)制成海藻漿料； 將海藻漿料與pH值為3-5的鹽酸溶液按體積比1:1-2混合，得到混合漿料，對混合漿料進(jìn)行 微波輔助提取，提取后過濾除去固態(tài)物得到海藻提取液，對海藻提取液在l〇〇-ll〇°C，4-8MPa的環(huán)境下熟化滅菌0.5-1.5h;對熟化滅菌后的海藻提取液進(jìn)行過濾去除粗蛋白；將過 濾后的海藻提取液pH調(diào)節(jié)至中性，最后冷凍干燥后制得海藻提取物。10.如權(quán)利要求9所述的一種EDTA-檸檬酸抗原修復(fù)液，其特征在于，所述微波輔助提取 的條件為:溫度70_90°C，時間5-10min，微波功率800-1000W，微波頻率2450MHZ。
【文檔編號】G01N33/531GK105987839SQ201610385941
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2016年6月3日
【發(fā)明人】李思勇, 余向東
【申請人】浙江世紀(jì)康大醫(yī)療科技股份有限公司