一種生理結晶體外模擬及驗證方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，所述體外模擬及驗證方法包括步驟：在體外模擬出生理結晶；將生理結晶過濾至瓶子中，瓶子的瓶口用封口膜封好，在封口膜點出細孔；然后將瓶子置于冰箱內靜置25?35天后，觀察體外模擬的生理結晶析出情況，并與臨床樣本的形態(tài)進行對比得到驗證結果。通過本發(fā)明上述方法，所模擬的生理結晶形態(tài)與臨床觀看到的生理結晶完全一致，解決了生理結晶難以尋找到替代物或者難以收集的弊端，從而為臨床診斷儀器提供質控品，為尿沉渣形態(tài)學識別領域做出進一步深化的研究提供依據(jù)。
【專利說明】
一種生理結晶體外模擬及驗證方法
技術領域
[0001]本發(fā)明涉及泌尿系結石領域，尤其涉及一種生理結晶體外模擬及驗證方法?！颈尘凹夹g】
[0002]人體內尿結石癥是在輸尿管和尿道中形成足夠大的固體結晶，以至造成阻塞、感染等癥狀的病理礦化過程。人體內環(huán)境非常復雜，很難在原位觀測;且生理結晶的形態(tài)既難以找到替代物，又難在尿液中收集足夠的生理結晶。
[0003]因此，現(xiàn)有技術還有待于改進和發(fā)展。
【發(fā)明內容】

[0004]鑒于上述現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種生理結晶體外模擬及驗證方法，旨在解決生理結晶的形態(tài)既難以找到替代物，又難在尿液中收集足夠的生理結晶的問題。
[0005]本發(fā)明的技術方案如下:一種生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，包括步驟:A、在體外模擬出生理結晶；B、將生理結晶過濾至瓶子中，瓶子的瓶口用封口膜封好，在封口膜點出細孔；C、然后將瓶子置于冰箱內靜置25-35天后，觀察體外模擬的生理結晶析出情況，并與臨床樣本的形態(tài)進行對比得到驗證結果。
[0006]所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，所述生理結晶包括尿酸鈉結晶、尿酸結晶、草酸鈣結晶、磷酸鈣結晶、磷酸銨鎂結晶中的一種或多種。
[0007]所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，所述生理結晶為尿酸鈉結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將尿酸和尿素溶解在氯化鈉的水溶液中，用NaOH的堿性尿液調節(jié)酸堿度至堿性，待尿酸全部溶解，再用鹽酸調節(jié)至pH為6?7，得到尿酸鈉結晶。
[0008]所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，所述生理結晶為尿酸結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將尿酸溶解在新鮮尿液中，用1M NaOH的堿性尿液調節(jié)酸堿度至堿性，待尿酸全部溶解，再用鹽酸調節(jié)酸堿度，使得pH為不同的酸堿度，得到尿酸結晶。
[0009]所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，所述生理結晶為草酸鈣結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將草酸鈉溶解在水中，加入配制好的氯化鈣新鮮尿液溶液， 使[Ca2+] = [C20，]，得到草酸鈣結晶。
[0010]所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，所述生理結晶為磷酸鈣結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將氯化鈣溶解在新鮮尿液中，加入磷酸一氫鉀和磷酸二氫鉀尿溶液混合，得到磷酸鈣結晶。
[0011]所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，所述生理結晶為磷酸銨鎂結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將氯化鎂、氯化銨和磷酸一氫鈉溶解在新鮮尿液中，然后用氫氧化鈉的尿溶液調節(jié)酸堿度使pH為8.0，得到磷酸銨鎂結晶。
[0012]所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，步驟B中，所述細孔的個數(shù)為1個。 [〇〇13]所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其中，步驟C中，冰箱內靜置30天。[〇〇14]有益效果:通過本發(fā)明上述方法，所模擬的生理結晶形態(tài)與臨床觀看到的生理結晶完全一致，解決了生理結晶難以尋找到替代物或者難以收集的弊端，從而為臨床診斷儀器提供質控品，為尿沉渣形態(tài)學識別領域做出進一步深化的研究提供依據(jù)。【具體實施方式】
[0015]本發(fā)明提供一種生理結晶體外模擬及驗證方法，為使本發(fā)明的目的、技術方案及效果更加清楚、明確，以下對本發(fā)明進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0016]本發(fā)明提供一種生理結晶體外模擬及驗證方法較佳實施例，其中，包括步驟:A、在體外模擬出生理結晶；B、將生理結晶過濾至瓶子中，瓶子的瓶口用封口膜封好，在封口膜點出細孔;優(yōu)選地， 所述細孔的個數(shù)為1個，所述細孔的直徑為1.〇?l〇mm(如2mm、3mm或5mm)。[0〇17] C、然后將瓶子置于冰箱內靜置25-35天(如，30天)后，觀察體外模擬的生理結晶析出情況，并與臨床樣本的形態(tài)進行對比得到驗證結果。
[0018]本發(fā)明所述生理結晶包括尿酸鈉結晶、尿酸結晶、草酸鈣結晶、磷酸鈣結晶、磷酸銨鎂結晶中的一種或多種。本發(fā)明采用體外模擬的方法模擬出上述生理結晶，以解決現(xiàn)有生理結晶的形態(tài)既難以找到替代物，又難以在尿液中收集的問題。
[0019]具體地，所述生理結晶為尿酸鈉結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將尿酸和尿素溶解在氯化鈉的尿溶液中，用1M NaOH調節(jié)酸堿度至堿性，尿酸全部溶解，再用鹽酸調節(jié)至pH為6?7,得到尿酸鈉結晶。通過本發(fā)明上述體外模擬方法，可得到與臨床觀看到的生理結晶完全一致的尿酸鈉結晶。
[0020]具體地，所述生理結晶為尿酸結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將尿酸溶解在健康人新鮮尿液中，用1M NaOH的堿性尿液調節(jié)酸堿度至堿性，待尿酸全部溶解，再用鹽酸調節(jié)酸堿度，使得pH為不同的酸堿度，得到尿酸結晶。通過本發(fā)明上述體外模擬方法，可得到與臨床觀看到的生理結晶完全一致的尿酸結晶。本發(fā)明中的新鮮尿液為正常人新鮮尿液，采用正常人新鮮尿液可進一步提高所模擬的生理結晶形態(tài)與臨床觀看到的生理結晶的一致性。
[0021]具體地，所述生理結晶為草酸鈣結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將草酸鈉溶解在尿中，加入配制好的氯化鈣尿液，使[Ca2+] = [C2〇A]，得到草酸鈣結晶。通過本發(fā)明上述體外模擬方法，可得到與臨床觀看到的生理結晶完全一致的草酸鈣結晶。
[0022]具體地，所述生理結晶為磷酸鈣結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將氯化鈣溶解在健康人新鮮尿液中，加入磷酸一氫鉀和磷酸二氫鉀尿液混合，得到磷酸鈣結晶。 通過本發(fā)明上述體外模擬方法，可得到與臨床觀看到的生理結晶完全一致的磷酸鈣結晶。
[0023]具體地，所述生理結晶為磷酸銨鎂結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將氯化鎂、氯化銨和磷酸一氫鈉溶解在健康人新鮮尿液中，然后用1M氫氧化鈉的尿溶液調節(jié)酸堿度使pH為8.0,得到磷酸銨鎂結晶。通過本發(fā)明上述體外模擬方法，可得到與臨床觀看到的生理結晶完全一致的磷酸銨鎂結晶。
[0024]下面通過具體實施例對本發(fā)明進行詳細說明。[〇〇25] 實施例1尿酸鈉晶體的模擬方法:在室溫條件下，將尿酸和尿素溶解在氯化鈉的水溶液中，用1M NaOH的堿性尿液調節(jié)酸堿度使pH=7.4，待尿酸全部溶解，再用1M的鹽酸調節(jié)使pH=6.75，過濾至50mL小瓶中。瓶口用封口膜封好，在封口膜點出一個細孔，有利于溶劑揮發(fā)。然后將瓶子置于室溫靜置30天，觀察尿酸鈉晶體析出情況。通過體外模擬，得到了尿酸鈉晶體的針狀和聚集態(tài)的針狀形態(tài)，與臨床樣本常見的形態(tài)相比，完全一致，且工藝穩(wěn)定，具有可重復性。 用健康人新鮮尿液做培養(yǎng)基時尿酸鈉的針狀晶體形態(tài)很難得到，即使在堿性條件下，也很難生成針狀結晶，所以尿酸鈉培養(yǎng)基可用生理鹽水或者尿液替代。
[0026] 實施例2尿酸晶體的模擬方法:在室溫條件下，將尿酸溶解在健康人新鮮尿液中，用1M NaOH的堿性尿液調節(jié)酸堿度至堿性，待尿酸全部溶解，再用1M鹽酸的健康人新鮮尿液調節(jié)酸堿度， 使得pH為不同的酸堿度，分別過濾至三個50mL小瓶中。瓶口用封口膜封好，在封口膜點出一個細孔，有利于溶劑揮發(fā)。置于冰箱靜置30天，觀察尿酸晶體析出情況。通過體外模擬，得到了多種尿酸結晶形態(tài)，包括腰鼓形、六邊形、橄欖形、以及聚集態(tài)花瓣形等，與臨床觀察到的尿酸結晶形態(tài)一致，且工藝皆有可重復性;在pH=4.3時，得到尿酸腰鼓狀的尿酸結晶，在pH= 4.8時，得到尿酸橄欖形和六邊形的尿酸結晶，在pH=5.3時，得到尿酸六邊形的尿酸結晶，并且偶爾可聚集成花瓣形。[〇〇27] 實施例3草酸鈣晶體的模擬方法:在室溫條件下，將草酸鈉溶解在水中，加入配制好的氯化鈣健康人新鮮尿液，使[Ca2+ ] = [C2〇42_]，過濾至50mL小瓶中。瓶口用封口膜封好，在封口膜點出一個細孔，有利于溶劑揮發(fā)。置于冰箱靜置30天，觀察草酸鈣晶體析出情況。通過草體外模擬， 得到了八面體的草酸鈣結晶形態(tài)。該形態(tài)利用健康人新鮮尿液為培養(yǎng)體系，得到了八面體晶體結構，該形態(tài)與臨床樣本一致，并且工藝可重復。
[0028] 實施例4磷酸鈣晶體的模擬方法:在室溫條件下，將氯化鈣溶解在健康人新鮮尿液中，加入1M磷酸一氫鉀和1M磷酸二氫鉀尿溶液(按照磷酸一氫鉀:磷酸二氫鉀=1:1體積比混合)，過濾至 50mL小瓶中。瓶口用封口膜封好，在封口膜點出一個細孔，有利于溶劑揮發(fā)。置于冰箱靜置 30天，觀察磷酸鈣晶體析出情況。通過體外模擬，得到類似于輻射狀的磷酸鈣結晶形態(tài)，與臨床常見的磷酸鈣結晶形態(tài)一致，并且工藝穩(wěn)定，具有可重復性。[〇〇29] 實施例5磷酸銨鎂晶體的模擬方法:在室溫條件下，將氯化鎂:氯化銨:磷酸一氫鈉以摩爾比2: 1:1的比例溶解在健康人新鮮尿液中，然后用1M氫氧化鈉的液溶液調節(jié)酸堿度使pH為堿性， 過濾至50mL小瓶中。瓶口用封口膜封好，在封口膜點出一個細孔，有利于溶劑揮發(fā)。置于冰箱靜置1天，觀察磷酸銨鎂晶體析出情況。通過體外模擬，得到了金條型、三棱柱形等相關形態(tài)，與臨床常見的晶體形態(tài)一致，具有可重復性，工藝穩(wěn)定;在制備磷酸銨鎂時，使用磷酸一氫鈉的健康人新鮮尿液調節(jié)酸堿度，使得體系磷酸根離子大大過量，改變了磷酸銨鎂前驅體的配比，而使用氫氧化鈉調節(jié)體系的酸堿度，得到了與臨床一致的三棱柱形態(tài)結晶，并且工藝可重復。
[0030]綜上所述，本發(fā)明提供的一種生理結晶體外模擬及驗證方法，通過本發(fā)明上述方法，所模擬的結晶形態(tài)與臨床觀看到的生理結晶完全一致，解決了生理結晶難以尋找到替代物或者難以收集的弊端，從而為臨床診斷儀器提供質控品，為尿沉渣形態(tài)學識別領域做出進一步深化的研究提供依據(jù)。
[0031]應當理解的是，本發(fā)明的應用不限于上述的舉例，對本領域普通技術人員來說，可以根據(jù)上述說明加以改進或變換，所有這些改進和變換都應屬于本發(fā)明所附權利要求的保護范圍。
【主權項】
1.一種生理結晶體外模擬及驗證方法，其特征在于，包括步驟:A、在體外模擬出生理結晶；B、將生理結晶過濾至瓶子中，瓶子的瓶口用封口膜封好，在封口膜點出細孔；C、然后將瓶子置于冰箱內靜置25-35天后，觀察體外模擬的生理結晶析出情況，并與臨 床樣本的形態(tài)進行對比得到驗證結果。2.根據(jù)權利要求1所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其特征在于，所述生理結晶包 括尿酸鈉結晶、尿酸結晶、草酸鈣結晶、磷酸鈣結晶、磷酸銨鎂結晶中的一種或多種。3.根據(jù)權利要求2所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其特征在于，所述生理結晶為 尿酸鈉結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將尿酸和尿素溶解在氯化鈉的水溶液 中，用NaOH的堿性尿液調節(jié)酸堿度至堿性，待尿酸全部溶解，再用鹽酸調節(jié)至pH為6?7，得到 尿酸鈉結晶。4.根據(jù)權利要求2所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其特征在于，所述生理結晶為 尿酸結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將尿酸溶解在新鮮尿液中，用1M NaOH的 堿性尿液調節(jié)酸堿度至堿性，待尿酸全部溶解，再用鹽酸調節(jié)酸堿度，使得pH為不同的酸堿 度，得到尿酸結晶。5.根據(jù)權利要求2所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其特征在于，所述生理結晶為 草酸鈣結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將草酸鈉溶解在水中，加入配制好的氯 化鈣新鮮尿液溶液，使[Ca2+] = [C20，]，得到草酸鈣結晶。6.根據(jù)權利要求2所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其特征在于，所述生理結晶為 磷酸鈣結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將氯化鈣溶解在新鮮尿液中，加入磷酸 一氫鉀和磷酸二氫鉀尿溶液混合，得到磷酸鈣結晶。7.根據(jù)權利要求2所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其特征在于，所述生理結晶為 磷酸銨鎂結晶時，所述步驟A具體包括:在室溫條件下，將氯化鎂、氯化銨和磷酸一氫鈉溶解 在新鮮尿液中，然后用氫氧化鈉的尿溶液調節(jié)酸堿度使pH為8.0，得到磷酸銨鎂結晶。8.根據(jù)權利要求1所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其特征在于，步驟B中，所述細 孔的個數(shù)為1個。9.根據(jù)權利要求1所述的生理結晶體外模擬及驗證方法，其特征在于，步驟C中，冰箱內靜置30天。
【文檔編號】G01N33/48GK106093364SQ201610359573
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年5月27日
【發(fā)明人】孫廷輝, 何浩會, 趙亞榮, 朱子是, 曹長征
【申請人】長春迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司