一種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及血清領(lǐng)域，具體涉及一種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸 的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原氨酸(T3)是由甲狀腺分泌的兩種含碘激素，負責(zé)調(diào) 節(jié)人體物質(zhì)與能量代謝，促進人體生長和發(fā)育過程。正常人血液中，T3、T4以游離型和蛋白 結(jié)合型存在，兩種形式呈動態(tài)平衡。血液中99.6%以上的總Τ3、總Τ4以蛋白結(jié)合型存在，僅 有0.2%-0.4%的總Τ3、總Τ4作為未結(jié)合型或游離型存在于血液中。
[0003] 目前在國內(nèi)外的體外診斷試劑盒中，Τ3、Τ4配制的標準品和質(zhì)控品由于穩(wěn)定性和 基質(zhì)效應(yīng)問題，絕大多數(shù)試劑廠商采用去甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸人血清作為基質(zhì)配 制其校準品和質(zhì)控品。而現(xiàn)有去甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸人血清制備工藝，由于工藝 復(fù)雜，材料損耗過多等諸多原因造成生產(chǎn)成本過高。因此，為了提高生產(chǎn)效率、減少資源浪 費，設(shè)計一種簡單高效去除甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸人血清的工藝是亟需解決的難 題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了有效的解決上述提出的技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種去除人血清中甲狀腺素 和三碘甲狀腺原氨酸的方法，該方法具有操作簡單，生產(chǎn)成本低等優(yōu)點。
[0005] -種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征在于包括向人血 清中加入活性炭，攪拌，去除活性炭;然后加入高嶺土，攪拌，去除高嶺土。
[0006] 優(yōu)選地，所述人血清為離體人血清。
[0007] 優(yōu)選地，所述方法包括如下步驟：
[0008] (1)取人血清，12000~16000g離心0 · 2~1 · Oh，取上清液；
[0009] (2)加入0.05~0.08%人血清重量的疊氮化鈉和8~15 %人血清重量的活性炭，室 溫下柔和攪拌5~16h后，12000~16000g離心0.5~2h，去除沉淀；
[0010] (3)加入10~20%人血清重量的高嶺土，攪拌15~30h后12000~16000g離心0.5~ 2h，獲取上清液。
[0011] 優(yōu)選地，將上述步驟(3)所獲取的上清液依次經(jīng)過0 · 8μπι、0 · 45μπι與0 · 22μπι濾膜進 行過濾，收集濾液。
[0012]優(yōu)選地，所述活性炭粒度為180~220目。
[0013] 優(yōu)選地，所述高嶺土粒度為150~200目。
[0014]優(yōu)選地，所述方法包括如下步驟：
[0015] (1)取人血清，15000g離心0 · 5h，取上清液；
[0016] (2)加入0.05%人血清重量的疊氮化鈉和10%人血清重量的粒度為220目的活性 炭，室溫下柔和攪拌12h后，16000g離心lh，去除沉淀；
[0017] (3)加入10%人血清重量的粒度為160目的高嶺土，攪拌24h后16000g離心lh，去 除沉淀，獲取上清液；
[0018] (4)將步驟⑶獲取的上清液依次經(jīng)過0 ·8μπι、0 ·45μπι與0 · 22μπι濾膜進行過濾，收集 濾液。
[0019] 相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明所述的去除人血清中甲狀腺素和 三碘甲狀腺原氨酸的方法具有操作簡單，生產(chǎn)成本低，甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸清除 率高等優(yōu)點。
【具體實施方式】
[0020] 下面，結(jié)合【具體實施方式】，對發(fā)明做進一步描述：
[0021] 實施例一
[0022] 一種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，包括如下步驟：
[0023] (1)取人血清，12000g離心0 · 2h，取上清液；
[0024] (2)加入0.05%人血清重量的疊氮化鈉和8%人血清重量的活性炭，室溫下柔和攪 拌5h后，12000g離心0.5h，去除沉淀；
[0025] (3)加入10%人血清重量的高嶺土，攪拌15h后12000g離心0.5h，獲取上清液。
[0026] 實施例二
[0027] 一種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，包括如下步驟：
[0028] (1)取離體人血清，12000g離心0.2h，取上清液；
[0029] (2)加入0.05%人血清重量的疊氮化鈉和8%人血清重量的粒度為220目的活性 炭，室溫下柔和攪拌5h后，12000g離心0.5h，去除沉淀；
[0030] (3)加入10%人血清重量的粒度為200目的高嶺土，攪拌15h后12000g離心0.5h，獲 取上清液。
[0031] (4)將步驟⑶獲取的上清液依次經(jīng)過0 ·8μπι、0 ·45μπι與0 · 22μπι濾膜進行過濾，收獲 濾液。
[0032] 實施例三
[0033] -種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征在于包括如下步 驟：
[0034] (1)取人血清，16000g離心1 · Oh，取上清液；
[0035] (2)加入0.08%人血清重量的疊氮化鈉和15%人血清重量的粒度為180目的活性 炭，室溫下柔和攪拌16h后，16000g離心2h，去除沉淀；
[0036] (3)加入20 %人血清重量的粒度為150目的高嶺土，攪拌30h后16000g離心2h，獲取 上清液。
[0037] (4)將步驟⑶獲取的上清液依次經(jīng)過0 ·8μπι、0 ·45μπι與0 · 22μπι濾膜進行過濾，收獲 濾液。
[0038] 實施例四
[0039] -種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征在于包括如下步 驟：
[0040] (1)取人血清，15000g離心0 · 5h，取上清液；
[0041 ] (2)加入0.05%人血清重量的疊氮化鈉和10%人血清重量的粒度為220目的活性 炭，室溫下柔和攪拌12h后，16000g離心lh，去除沉淀；
[0042] (3)加入10%人血清重量的粒度為160目的高嶺土，攪拌24h后16000g離心lh，去除 沉淀，獲取上清液；
[0043] (4)將步驟⑶獲取的上清液依次經(jīng)過0 ·8μπι、0 ·45μπι與0 · 22μπι濾膜進行過濾，收獲 濾液。
[0044] 實施例五
[0045] -種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征在于包括如下步 驟：
[0046] (1)取人血清，15000g離心0 · 5h，取上清液；
[0047] (2)加入0.05%人血清重量的疊氮化鈉和10%人血清重量的粒度為220目的活性 炭，室溫下柔和攪拌12h后，16000g離心lh，去除沉淀；
[0048] (3)加入10%人血清重量的粒度為160目的高嶺土，攪拌15h后16000g離心lh，去除 沉淀，獲取上清液；
[0049] (4)將步驟(3)獲取的上清液依次經(jīng)過0.8μπι、0.45μπι與0.22μπι濾膜進行過濾，獲 得濾液。
[0050] 實施例六
[0051] 一種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征在于包括如下步 驟：
[0052] (1)取人血清，15000g離心0 · 5h，取上清液；
[0053] (2)加入0.06%人血清重量的疊氮化鈉和13%人血清重量的粒度為220目的活性 炭，室溫下柔和攪拌5h后，16000g離心lh，去除沉淀；
[0054] (3)加入15%人血清重量的粒度為160目的高嶺土，攪拌15h后16000g離心lh，去除 沉淀，獲取上清液；
[0055] (4)將步驟⑶獲取的上清液依次經(jīng)過0 ·8μπι、0 ·45μπι與0 · 22μπι濾膜進行過濾，收獲 濾液。
[0056] 實施例七
[0057]取等量的實施例一至六所獲得的無甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的人血清，取等 量的沒有去除無甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的人血清作為對照組，利用化學(xué)發(fā)光試劑盒 檢測血清中的Τ4、Τ3、游離T4(FT4)，游離T3(FT3)的含量。具體結(jié)果參見表1。
[0058]表1:利用化學(xué)發(fā)光試劑盒檢測血清中的T4、T3、FT4、FT3的含量結(jié)果
[0059]
[0060] 上述實施方式僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，不能以此來限定本發(fā)明保護的范圍， 本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明的基礎(chǔ)上所做的任何非實質(zhì)性的變化及替換均屬于本發(fā)明所 要求。
【主權(quán)項】
1. 一種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征在于包括向人血清 中加入活性炭，攪拌，去除活性炭;然后加入高嶺土，攪拌，去除高嶺土。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征 在于所述人血清為離體人血清。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征 在于包括如下步驟： (1) 取人血清，12000~16000g離心0 · 2~1 · Oh，取上清液； (2) 加入0.05~0.08 %人血清重量的疊氮化鈉和8~15 %人血清重量的活性炭，室溫下 柔和攪拌5~16h后，12000~16000g離心0.5~2h，去除沉淀； (3) 加入10~20 %人血清重量的高嶺土，攪拌15~30h后12000~16000g離心0.5~2h， 獲取上清液。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征 在于：權(quán)利要求3中步驟(3)所獲取的上清液依次經(jīng)過0.8以 111、0.45以111與0.22以111濾膜進行過 濾，收集濾液。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征 在于:所述活性炭粒度為180~220目。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征 在于:所述高嶺土粒度為150~200目。7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征 在于包括如下步驟： (1) 取人血清，15000g離心0 · 5h，取上清液； (2) 加入0.05%人血清重量的疊氮化鈉和10%人血清重量的粒度為220目的活性炭，室 溫下柔和攪拌12h后，16000g離心lh，去除沉淀； (3) 加入10%人血清重量的粒度為160目的高嶺土，攪拌2411后1600(^離心111，去除沉 淀，獲取上清液； (4) 將步驟（3)獲取的上清液依次經(jīng)過0.8μπι、0.45μπι與0.22μπι濾膜進行過濾，收集濾 液。
【專利摘要】一種去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法，其特征在于包括向人血清中加入活性炭，攪拌，去除活性炭；然后加入高嶺土，攪拌，去除高嶺土。本發(fā)明所述的去除人血清中甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的方法具有操作簡單，生產(chǎn)成本低，甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸清除率高等優(yōu)點。
【IPC分類】G01N1/34
【公開號】CN105651583
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】陸建斌
【申請人】廣州科方生物技術(shù)有限公司
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年2月25日