專利名稱：天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法
技術領域：
本發(fā)明屬于臟器提取技術領域，具體涉及臟器提取中采用天然澄清抑菌劑對料液進行澄清抑菌處理，繼后分離純化制得有效成分。
背景技術：
臟器提取是指從動物的組織、器官、腺體、體液、以及胎盤、骨、毛、皮、角中提取、分離、純化獲得如氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶類、脂類、激素、核酸等有效成分的過程。這些有效成分具有毒性低、副作用小、容易被人體吸收的特點。作為藥物、生物試劑、醫(yī)用材料、食品添加劑、日化產(chǎn)品可廣泛用于藥品、食品、保健品和化妝品中。
目前多數(shù)臟器提取廠家，在臟器提取(水解)步驟后，為了保證下一步分離、純化步驟的高效，首先要進行固體-液體的分離，一般采用自然沉降、自然過濾、離心、化學試劑沉淀等手段來達到固液分離的目的，并且對于分離出的料液還需加入抑菌劑以達到防腐的目的。這些方法在不同方面或程度上存在著缺陷工藝周期長、分離效果差、設備成本高、分離液易被染菌、加入的化學沉淀試劑和化學抑菌劑有的對人體有毒有害。
例如毛發(fā)水解提取胱氨酸的工藝，是將毛發(fā)經(jīng)酸水解后，直接加堿液調(diào)整料液PH值至胱氨酸的等電點(PH值4.8)，利用胱氨酸在等電點PH值時溶解度最低的原理，沉淀結晶出胱氨酸。但由于在水解液中膠體、蛋白質(zhì)、色素等雜質(zhì)影響，使胱氨酸沉淀結晶的純度不高，一般為60～70％，收率也僅為8％左右，并且料液在沉淀結晶過程中易被染菌，影響胱氨酸結晶的品質(zhì)。
再如動物眼提取物(眼氨肽注射液、眼氨肽滴眼液的中間體)的制備工藝，是用豬、牛、羊眼球經(jīng)提取、除蛋白質(zhì)后制備而成的一種生物制劑。在工藝中為使料液澄清，采用濾紙自然過濾；為了除掉蛋白質(zhì)，采用磺基水揚酸沉淀；為了防止中間體料液染菌，加入苯甲酸鈉、氯仿作為抑菌劑。其工藝缺陷是自然過濾時間長，效果不佳，并且磺基水揚酸、苯甲酸鈉等是對人體存在有毒有害隱患的物質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述缺陷，本發(fā)明提供天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法。采用天然澄清抑菌劑對臟器提取過程中的料液進行澄清抑菌處理，繼后分離純化制得有效成分。具體地講，就是在臟器提取中的料液中加入10～1500ppm的一種或多種天然澄清抑菌劑，經(jīng)過攪拌，靜置沉淀，固液分離，純化制得有效成分。所述的天然澄清抑菌劑是從天然動植物中提取的一種或多種多糖類物質(zhì)。如卡拉膠、海藻酸、殼聚糖、陽離子淀粉。配成0.2～2％濃度的液體后使用，其中殼聚糖采用氨基酸溶解。在料液中的加入量最好為50～1000ppm。臟器提取過程中的料液是指提取液、水解液、離心液、過濾液或濃縮液。
本發(fā)明所述的天然澄清抑菌劑是一類聚陽離子或聚陰離子的大分子物質(zhì)，具有分子吸附、“架橋”以及干擾細菌細胞質(zhì)膜的代謝作用，可使料液中的大分子雜質(zhì)尤其是細菌快速絮凝沉淀。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比優(yōu)點在于(1)澄清抑菌效率高，處理后的澄清料液消光值(OD值)可從0.9左右降到0.01～0.1之間。再有，以往臟器提取的固液分離方法所獲得的料液極易被染菌，使料液變渾濁，需加抑菌劑。而本發(fā)明在澄清過程中就具有除菌的作用，以達到抑菌的目的，處理后的料液自然放置至少90天仍為澄清，經(jīng)測定，料液的細菌總數(shù)在0～10個/ml，抑菌效果極佳，從而保證了下一步的分離純化的高效。(2)安全無毒，本發(fā)明澄清抑菌劑的使用方法，不存在對人體有毒有害的隱患。(3)本發(fā)明由于可使料液中的大分子雜質(zhì)尤其是細菌快速絮凝沉淀，可縮短生產(chǎn)周期。(4)本發(fā)明應用簡便經(jīng)濟，設備投資小，適于各種規(guī)模的臟器提取。
實施方式通過下面將要敘述的非限定實施例對本發(fā)明作進一步描述。
實施例1胱氨酸。取1000L以豬毛發(fā)為原料的酸水解液，在水解液中加入30～40％氫氧化鈉調(diào)整料液PH值2.5～3.0。再加入預先配制0.2％濃度的卡拉膠水溶液，加入量為10ppm，稍加攪拌后，可見絮凝現(xiàn)象發(fā)生，靜置1小時，板框過濾獲得澄清料液。再用30～40％氫氧化鈉調(diào)整料液PH至4.8沉淀結晶。本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比分離純化效果好，收得胱氨酸40kg，純度75％，收率9％，純度和收率分別提高15％和12％。
實施例2動物眼提取物。量取以80kg羊眼為原料經(jīng)75％乙醇提取所得的提取液200L，經(jīng)1200r/min離心過濾，先后加入預先配制0.2％濃度的卡拉膠水溶液、1％濃度的谷氨酸和殼聚糖液體，加入量分別為50和300ppm，經(jīng)過攪拌，稍后，可見絮凝物產(chǎn)生，靜置2小時，布氏漏斗過濾分離出上清液，再經(jīng)濃縮除醇、布氏漏斗過濾，即得動物眼提取物中間體溶液。經(jīng)氨基酸含量測定，符合國家標準。與現(xiàn)有技術相比可縮短濃縮前過濾分離周期70％，動物眼提取物中間體溶液在未加抑菌劑苯甲酸鈉的情況下，存放三個月無染菌，抑菌效果佳。并且本發(fā)明使用方法不存在對人體有毒有害的隱患，可備用制劑。
實施例3動物眼提取物。量取以40kg牛眼為原料經(jīng)95％乙醇提取所得的提取液80L，經(jīng)1600r/min離心過濾，減壓濃縮除醇后，攪拌下，在濃縮液中加入預先配制2％濃度的陽離子淀粉溶液，加入量為1500ppm?？梢娦跄锂a(chǎn)生，靜置1小時，濾紙漏斗過濾分離出上清液，即為動物眼提取物溶液。本發(fā)明使用方法與實施例2效果相同，在未加抑菌劑氯仿的情況下，中間體溶液存放三個月無染菌，其結果氨基酸含量符合國家標準，可用作制劑。
實施例4轉移因子。將健康豬脾去除脂肪和筋膜，稱重20kg，切碎，加入等量生理鹽水，用膠體磨進行勻漿處理兩次。勻漿物在-20℃冷凍，然后常溫融化，反復凍融三次。1600r/min離心過濾，調(diào)整料液PH值6，攪拌下加入預先配制1％濃度的谷氨酸和殼聚糖液體、1％濃度的海藻酸水溶液，加入量分別為300和200ppm。稍后，可見絮凝物產(chǎn)生，靜置2小時，布氏漏斗過濾得澄清液。將澄清液經(jīng)截留分子量5000的超濾膜超濾，超濾液中轉移因子含量以福林酚測定法測定，為2.8mg/ml。與現(xiàn)有技術相比轉移因子收率可提高10％，并且避免現(xiàn)有技術中采用高速冷凍離心機的設備投入，具有簡便經(jīng)濟，設備投資小的優(yōu)點。
實施例5轉移因子。將健康豬脾去除脂肪和筋膜，稱重18kg，切碎，用膠體磨進行勻漿處理一次，放置-20℃冷凍。冷凍物稍融化后，加入半量生理鹽水，攪均，再用膠體磨進行勻漿處理一次。放置-20℃冷凍，然后常溫融化，反復凍融兩次。1600r/min離心過濾，調(diào)整料液PH值6。攪拌下，先后加入預先配制0.2％濃度的卡拉膠液體和2％陽離子淀粉液體，加入量分別為100和900ppm，稍后，可見絮凝物產(chǎn)生，停止攪拌。靜置2小時，布氏漏斗過濾得澄清液。將澄清液裝入截留分子量6000的透析袋中，扎緊兩頭。在4℃的生理鹽水中透析，透析96小時透析。透析液中轉移因子含量以福林酚測定法測定，為2.6mg/ml?，F(xiàn)有技術中，當透析超過36小時易產(chǎn)生染菌，而本發(fā)明透析長達96小時未發(fā)現(xiàn)染菌腐敗現(xiàn)象，同時還可節(jié)省高速冷凍離心機和超濾器的投資。
權利要求
1.天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特征是，在臟器提取的料液中加入10～1500ppm的一種或多種天然澄清抑菌劑，經(jīng)過攪拌，靜置沉淀，固液分離，純化制得有效成分。
2.根據(jù)專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特征是，所述的天然澄清抑菌劑是從天然動植物中提取的一種或多種多糖類物質(zhì)。
3.根據(jù)專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特征是，所述的天然澄清抑菌劑是卡拉膠、海藻酸、殼聚糖、陽離子淀粉。
4.根據(jù)專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特征是，所述的天然澄清抑菌劑配成0.2～2％濃度的液體后使用，其中殼聚糖采用氨基酸溶解。
5.根據(jù)專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特征是，所述的天然澄清抑菌劑在料液中的加入量最好為50～1000ppm。
6.根據(jù)專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特征是，所述的臟器提取過程中的料液是提取液、水解液、離心液、過濾液或濃縮液。
全文摘要
本發(fā)明公開了天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法。其特征是，在臟器提取的料液中加入10～1500ppm的一種或多種天然澄清抑菌劑，經(jīng)過攪拌，靜置沉淀，固液分離，純化制得有效成分。本發(fā)明具有澄清抑菌效率高、生產(chǎn)周期短、安全無毒、簡便經(jīng)濟，設備投資小，適于各種規(guī)模的臟器提取。
文檔編號A01N31/00GK1669420SQ20051000759
公開日2005年9月21日 申請日期2005年2月17日 優(yōu)先權日2004年3月17日
發(fā)明者趙杰, 趙嘉偉 申請人:趙嘉偉