專利名稱：：聚陽(yáng)離子類消毒劑在奶牛乳頭皮膚消毒中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及聚六亞甲基胍等聚陽(yáng)離子類消毒劑在擠奶前后對(duì)奶牛乳頭皮膚進(jìn)行消毒的新用途。
背景技術(shù)：
：乳房炎是引起奶牛養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟(jì)損失最嚴(yán)重的疾病之一。引起乳房炎的病原微生物大多由葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌等引起，這些病原微生物主要存在于奶牛體表和環(huán)境中，奶牛乳房表面污染的病原微生物可通過擠奶機(jī)、擠奶員的手或擦洗乳房的毛巾等感染乳腺，引起隱性乳房炎或臨床型乳房炎。國(guó)內(nèi)外奶業(yè)界普遍認(rèn)為，在擠乳前后對(duì)奶牛乳頭進(jìn)行消毒劑消毒是近年來防制奶牛乳房炎的一種有效方法。乳頭藥浴消毒劑的要求為殺菌譜廣、殺菌速度快、刺激性小、藥物殘留小。為防止廣泛的而代價(jià)高的牛奶細(xì)菌污染，人們進(jìn)行了許多努力。現(xiàn)已有了許多在擠奶前處理乳房的改進(jìn)方法和防止及處理牛乳腺炎的方法(例如參見美國(guó)專利4，206，529，Neumann;No.5，124，145和5，234，684，Sordillo等人；No.4,253，420，Heofelmayr和No.5,366，732,Zighelboim)。其它人描述了改進(jìn)的抗微生物的組合物，其特別用于解決在擠奶前清潔過程中有污染性殘余物的問題(例如參見美國(guó)專利No.5，139,788，Schmidt)。Berg等人(牛奶科學(xué)雜質(zhì)(J.DairySci.)68，457-461(1985));Pankey等人(VeterinaryClinicsofNorthAmerica9,519-530，1993);McKinnon等人(J.DairyRes.50，153-162，1983);Murdough等人(J.DaiiySci.76,2033-2038，1993)和Ansari等人(Am丄Infect.Control19,243-249,1991)進(jìn)一步描述了該領(lǐng)域的目前狀況，并描述了在通用的擠奶前對(duì)乳頭消毒方面的改進(jìn)。目前，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上銷售的奶牛乳頭消毒劑品種繁多，基本上是氯己啶、碘附等傳統(tǒng)的消毒劑產(chǎn)品。盡管碘伏類消毒劑在奶牛擠奶消毒方面有一定的作用(王晶鈺，姜向陽(yáng)，羅艷，等.奶牛乳頭專用消毒劑消毒效力研究[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2005，21(1):1-17);(袁永隆，楊玉英，孟聚誠(chéng)，等.奶牛乳頭皮膚消毒劑的研制與篩選[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，1994,4:3-5)。但有實(shí)驗(yàn)表明常用的1%碘伏對(duì)奶牛擠奶前后消毒效果只與0.5%氯己啶相當(dāng)，參見L.K.Fox(J.DairySci.75:66-71,1992);J.S.HOGAN等人(J.DairySci.78:2502-2506,1995)。作為殺菌力更強(qiáng)，刺激性更小、無毒、不著色的聚六亞甲基胍在奶牛擠奶消毒中的應(yīng)用卻未見報(bào)道。本發(fā)明人通過大量的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)明了將聚六亞甲基胍用于奶牛乳頭皮膚消毒的新用途。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)提提供了含量為0.1-1%的聚六亞甲基胍等聚陽(yáng)離子類消毒劑水溶液在奶牛乳頭皮膚消毒中的應(yīng)用。聚六亞甲基胍等聚陽(yáng)離子類消毒劑可作為一種奶牛乳頭皮膚專用消毒劑的主要成分，帶正電性的胍基具有很高的活性，很容易被通常呈負(fù)電性的各類細(xì)菌、病毒所吸附，從而抑制細(xì)菌病毒的分裂功能，使細(xì)菌、病毒喪失繁殖能力，更為重要與可貴的是聚六亞甲基胍無毒、無刺激、無其它副作用、不影響奶牛產(chǎn)奶質(zhì)量，適用于奶牛擠奶前后的消毒，可有效預(yù)防奶牛隱性乳房炎或臨床型乳房炎的發(fā)生。實(shí)施例1實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)室微生物殺滅效果1)試驗(yàn)器材1、菌種金黃色葡萄球菌ATCC6538、大腸桿菌80992、恒溫水浴箱3、刻度吸管(O.lml、1.0ml、5.0ml、10.0ml)4、毛細(xì)吸管5、離心機(jī)6、電動(dòng)混合器。2)菌片的制備消毒試驗(yàn)中使用的菌片，是以菌液滴加于載體上制成，所用載體染菌前,應(yīng)進(jìn)行脫脂處理。統(tǒng)一用白平紋棉布制作。在剪開前，先將脫脂的布?jí)K按載體規(guī)定的大小，抽去邊周的經(jīng)緯紗各一根，再按抽紗痕剪開。此法制成的載體大小一致，且無毛邊；載體經(jīng)壓力蒸汽滅菌后，用滴染法時(shí)，將經(jīng)滅菌的布片平鋪于無菌平皿內(nèi)，逐片滴加菌液。加量每片為0.01-0.02ml?？捎肙.lml吸管滴加菌液，也可用l.Oml注射器接6號(hào)針頭滴加菌液。置37'C溫箱內(nèi)烤干(約30min)，或置室溫下自然陰千后再使用；菌片的染菌為5X105-5X106cfu。3)操作程序7、取無菌小平皿，標(biāo)明所注入消毒液的濃度。按每片5.0ml的量，吸取相應(yīng)濃度的消毒劑溶液注入平皿中。8、將盛有消毒劑平皿置20°C±rC水浴中5min后，用無菌鑷子分別放入預(yù)先制備的菌片4片，并使之浸透于消毒劑中。9、待菌藥相互作用至各預(yù)定時(shí)間，用無菌鑷子將菌片取出分別移入一含5.0ml中和試管中。用電動(dòng)混合器混合20s，或?qū)⒃嚬苷翊?0次，使菌片上的細(xì)菌被洗脫進(jìn)入中和液中，再放置5min以上，使中和作用充分。最終進(jìn)一步混勻后，吸取1.0ml直接接種于平皿，每管接種2個(gè)平皿，測(cè)定存活菌數(shù)。10、領(lǐng)取一平皿，注入10.0ml稀釋液代替消毒液，放入2片菌片，作為陽(yáng)性對(duì)照組。其隨后的試驗(yàn)步驟和活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)與上述試驗(yàn)組相同。11、所有試驗(yàn)樣本均在37'C溫箱中培養(yǎng)，對(duì)細(xì)菌繁殖體培養(yǎng)48h觀察最終結(jié)果；對(duì)細(xì)菌芽孢培養(yǎng)72h觀察最終結(jié)果。12、試驗(yàn)重復(fù)3次(包括對(duì)照)，計(jì)算各組的活菌量(cfu/片)，計(jì)算殺滅率。4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、對(duì)金黃色葡萄球菌的殺菌效果在2(TCirC條件下，經(jīng)三次重復(fù)試驗(yàn)證明，含有1.0%、0.8%、0.4%鹽酸聚六亞甲基胍水溶液，作用15s、30s、60s對(duì)金黃色葡萄球菌平均殺滅率分別為99.97%、98.89%、93.86%。(表l.l)表l.l鹽酸聚六亞甲基胍對(duì)金黃色葡萄球菌的殺菌效果消毒劑濃度(%)作用不同時(shí)間(S)的平均殺滅率及范圍(％)1530456099.9799.9999.99100.00(99.97~99.98)(99.99)(99.99)(100.00)98.8999.卯99.92100.00(98.8298.95)(99.90~99.91)(99.9099.95)(100.00)93.8695.4099.1099.卯(93.8093.93)(95.3095.50)(99.00-99.18)(99.90)73.8282.2088.5599.18(73.7073.89)(82.00~82.40)(88.49~88.60)(99.10~99.26)64.7668.0071,9978.76(64.65~64.83)(67.91~68.10)(71.8872,10)(78.71~78.83)1.00.80.40.20.1注陽(yáng)性對(duì)照組平均菌落數(shù)及范圍為3.51X106(2.42X106-4.10X106)cfu/片，陰性對(duì)照組為無菌生長(zhǎng)。2、對(duì)大腸桿菌的殺菌效果在2(rc土rc條件下，經(jīng)三次重復(fù)試驗(yàn)證明，殺菌消毒劑濃度含有i.0。/。、o.8%、0.4%鹽酸聚六亞甲基胍水溶液，分別作用15s、45s、60s，對(duì)大腸桿菌平均殺滅率分別為99.97%、94.62%、93.06%。，對(duì)大腸桿菌具有消毒作用(表1.2)表1.2鹽酸聚六亞甲基胍對(duì)大腸桿菌的殺菌效果消毒劑濃度(%)作用不同時(shí)間(s)的平均殺滅率及范圍(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注陽(yáng)性對(duì)照組平均菌落數(shù)及范圍為3.90X106(3.80X106楊X106)cfu/片，陰性對(duì)照組為無菌生長(zhǎng)。實(shí)施例2實(shí)驗(yàn)?zāi)康钠つw刺激性試驗(yàn)1.實(shí)驗(yàn)方法(1)試驗(yàn)動(dòng)物每次試驗(yàn)至少需要3只皮膚完好的健康家兔(2)皮膚刺激性試驗(yàn)操作程序-A、消毒劑濃度0.5%鹽酸聚六亞甲基胍B、在試驗(yàn)前24h，用脫毛劑將家兔背部脊柱兩側(cè)的毛去掉，不得損傷皮膚。去毛范圍，左右各約3cmX3cm。C、次日將受試物(濃度一般為皮膚消毒應(yīng)用液的5倍或原液)0.5ml(g)直接滴于面積為2.5cmX2.5cm的一側(cè)完好皮膚上，或滴于同樣大小的2層_4層紗布上并敷貼在一側(cè)去毛皮膚表面，然后用一層無剌激塑料膜或油紙覆蓋，再用無刺激膠布固定。另一側(cè)去毛皮膚作為空白對(duì)照(或溶劑對(duì)照)。敷貼時(shí)間為4h。試驗(yàn)結(jié)束后，用溫水或無刺激性溶劑除去殘留受試物。D、分別于去除受試物后lh、24h和48h觀察皮膚局部反映，并進(jìn)行評(píng)分。2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果聚六亞甲基胍敷貼后lh、24h和48h各只家兔敷貼側(cè)皮膚均未出現(xiàn)紅斑及水月中，亦未出現(xiàn)中毒癥狀。結(jié)果見表1.3.表1.3聚六亞甲基胍對(duì)家兔皮膚次刺激反應(yīng)動(dòng)，i皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分物性重■(kg)-lh24h48h編別紅斑水腫紅斑水腫紅斑水腫號(hào)樣對(duì)樣對(duì)樣對(duì)樣對(duì)樣對(duì)樣對(duì)1早2.50000000000002早2.50000000000003古2.70000000000004古2.6000000000000總積分均值000000000000結(jié)論聚六亞甲基胍對(duì)家兔皮膚刺激指數(shù)為O，刺激強(qiáng)度級(jí)別為無刺激性。8權(quán)利要求1.含量為0.1-1％的聚六亞甲基胍或聚六亞甲基雙胍水溶液，在奶牛擠奶前后對(duì)其乳頭皮膚消毒的應(yīng)用。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的聚六亞甲基胍為鹽酸聚六亞甲基胍、磷酸聚六亞甲基胍或硫酸聚六亞甲基胍。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的聚六亞甲基雙胍為鹽酸聚六亞甲基雙胍、磷酸聚六亞甲基雙胍或硫酸聚六亞甲基雙胍。全文摘要本發(fā)明提供了聚六亞甲基胍、聚六亞甲基用于胍等聚陽(yáng)離子類消毒劑在擠奶前后對(duì)奶牛乳頭皮膚進(jìn)行消毒的新用途。此類消毒劑無毒、無刺激、無其它副作用、不影響奶牛產(chǎn)奶質(zhì)量，適用于奶牛擠奶前后的消毒，可有效預(yù)防奶牛隱性乳房炎或臨床型乳房炎的發(fā)生。文檔編號(hào)A01N47/40GK101590075SQ20081001660公開日2009年12月2日申請(qǐng)日期2008年5月26日優(yōu)先權(quán)日2008年5月26日發(fā)明者濱劉,劉哲林,李玉新申請(qǐng)人:煙臺(tái)綠葉動(dòng)物保健品有限公司