專利名稱：：一種利用茶枯溶液進(jìn)行蚯蚓采集的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種蚯蚓釆集的方法，具體來(lái)說(shuō)涉及一種利用茶枯溶液進(jìn)行野外蚯蚓采集的方法。技術(shù)背景-蚯蟲引是陸地生態(tài)系統(tǒng)中最為重要的大型土壤動(dòng)物，對(duì)土壤有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化和土壤結(jié)構(gòu)的建立有著十分積極的影響。同時(shí)，蚯蚓對(duì)土壤環(huán)境的反應(yīng)極為敏感，其群落分布、種類組成及密度多寡可作為一個(gè)地區(qū)土壤條件狀況的重要指示。因此蚯蚓的群落調(diào)查在土壤生態(tài)系統(tǒng)效應(yīng)評(píng)估中得到了廣泛應(yīng)用。然而，蚯蚓的野外采樣方法尚并沒有建立起統(tǒng)一、完善的標(biāo)準(zhǔn)，而各種采樣方法也都存在著一定的缺點(diǎn)。目前，蚯蚓采樣所釆用的方法有物理方法如手挖法(hand—sorting)、電擊法、化學(xué)驅(qū)趕方法如福爾馬林(formaldehyde)法、芥末(mustardpowder)法、異硫氰酸丙烯酯(allylisothiocyanate)法及各種家用清潔劑驅(qū)趕法等。手挖法是對(duì)內(nèi)棲類(endogeic)蚯蚓有效的采樣方法，但手挖法耗時(shí)、勞動(dòng)強(qiáng)度大，在有著巖石、多根等地難以操作；對(duì)土壤造成嚴(yán)重破壞，在土壤可持續(xù)利用地區(qū)不能廣泛應(yīng)用；手挖法對(duì)容易逃到土壤深層的大型深棲類(anecic)蚯蚓也難以采樣。電擊法可以減少對(duì)土壤的破壞，但操作費(fèi)時(shí)，采樣效率容易受到土壤類型、含水量等外界因素制約。化學(xué)驅(qū)趕是目前應(yīng)用最為廣泛蚯蚓采樣方法。將化學(xué)溶液潑灑土樣，使蚯蚓逃逸出地表進(jìn)行收集。此法對(duì)洞穴為垂直方向的深棲類蚯蚓采樣效率高，但對(duì)洞穴為水平方向的內(nèi)棲類蚯蚓采樣效率不是很理想。福爾馬林是蚯蚓采樣最常用的化學(xué)劑，采樣效率高且方法容易標(biāo)準(zhǔn)化，但近年來(lái)的研究表明福爾馬林對(duì)土壤生物、地表植有著持久的毒害，因此不應(yīng)該在生態(tài)農(nóng)場(chǎng)、保護(hù)區(qū)、或有可能滲入到地下水的土壤區(qū)使用。對(duì)利用芥末進(jìn)行蚯蚓采樣的研究應(yīng)用也很多，曾有著替代福爾馬林法的建議，但芥末法采樣效率不夠穩(wěn)定，且商業(yè)上的芥末組分和配比并不清楚，因此也難以標(biāo)準(zhǔn)化。近年來(lái)，利用異硫氰酸丙烯酯(AITC)進(jìn)行蚯蚓采樣有一些報(bào)道，異硫氰酸丙烯酯是很多十字花科植物中可提取的芥子油苷，有刺激的芥子氣味，微溶于水，見光易分解，在土壤中半衰期為80—120h，其采樣效率和福爾馬林法采樣效率相近，但異硫氰酸丙烯酯即使保存在避光的丙酮(acetone)溶液中,也會(huì)快速?gòu)娜芤航缑嬲舭l(fā)，其準(zhǔn)確劑量難以確定。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供了一種無(wú)殘留污染、對(duì)環(huán)境友好、采樣效果好、采樣效率穩(wěn)定的蚯3蚓采集方法，即利用茶枯溶液進(jìn)行蚯蚓采集的方法。茶枯是將油茶(Ca附e〃/"o/e^ra)油茶籽榨油后剩余的茶枯粉(或茶籽餅)。茶枯粉中含有茶皂素(TeaSaponin)、粗纖維、茶多酚、氨基酸、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)等，其中茶皂素是一種五環(huán)三萜皂苷類化合物，具有一定的抗病菌、殺蟲作用。本發(fā)明人根據(jù)茶枯粉具有一定的抗菌、殺蟲作用，通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)茶枯溶液濃度進(jìn)行選擇，選取到了一定濃度的茶枯溶液，發(fā)現(xiàn)該濃度的茶枯溶液能刺激驅(qū)趕土壤中的蚯蚓爬出地面，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明。本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明所述的利用茶枯溶液進(jìn)行蚯蚓采集的方法，包括以下步驟.-(a):茶枯溶液的制備將茶枯粉按照質(zhì)量比l:3加入到水中，加熱回流0.5-2h，然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液，將此茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比1:5-9加入到水中，配制成茶枯溶液；(b):將茶枯溶液噴灑于土壤樣方上，每0.25平方米均勻噴灑5-9升茶枯溶液，收集爬出的蚯頓；本發(fā)明優(yōu)選將茶枯粉按質(zhì)量比1:3加入到水中，加熱回流lh，然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液，將此茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比l:8加入到水中，配制成茶枯溶液，將茶枯溶液均勻噴灑于土壤樣方上，每0.25平方米噴灑5升茶枯溶液。本發(fā)明中將茶枯溶液噴灑于樣方上，以不溢出樣方為準(zhǔn)，具體是指等噴灑的茶枯溶液滲進(jìn)土里后繼續(xù)噴灑，使樣方中的茶枯溶液不要溢出樣方外，邊噴灑茶枯溶液邊收集爬出的蚯頓，一般等待蚯蚓爬出并同時(shí)進(jìn)行采集的時(shí)間為1個(gè)小時(shí)左右，時(shí)間從開始噴灑茶枯溶液的時(shí)候開始計(jì)算。本發(fā)明所述的利用茶枯溶液進(jìn)行蚯蚓采集的方法，由于釆用了合適濃度的茶枯溶液噴灑于樣方上，刺激驅(qū)趕蚯蟲引爬出地面，只需采集爬出的蚯蚓即可，不但采樣效果好，此方法在廣東省昆蟲研究所所內(nèi)草叢中，其驅(qū)趕采樣效率為90%以上，其在鶴山人工林區(qū)的樣地里面，本方法的驅(qū)趕采樣效率為79.5%，而0.4%福爾馬林在此林區(qū)的驅(qū)趕采樣效率為73.9%，而且由于的茶枯溶液容易降解，無(wú)殘留污染、對(duì)環(huán)境友好，對(duì)土壤生物、地表植物沒有持久的毒害，因此是一種非常安全、環(huán)保的蚯蚓采集方法，本方法克服了現(xiàn)有采樣方法的一些缺點(diǎn)，如福爾馬林采樣法的毒性和長(zhǎng)期殘留等問(wèn)題。因此本發(fā)明特別適于生態(tài)農(nóng)場(chǎng)、保護(hù)區(qū)、或有可能滲入到地下水的土壤區(qū)的蚯蚓采集。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述實(shí)施例1:2007年5月份，在廣東省昆蟲研究所所內(nèi)草叢內(nèi)進(jìn)行選樣，選用茶枯粉按照質(zhì)量比1:3的比例加入到水中，加熱回流lh，然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液。按照質(zhì)量比l:8的比例將茶枯過(guò)濾液加入到水中稀釋，配制成茶枯溶液，將此茶枯溶液不斷噴灑于選好的土壤樣方上。共選3個(gè)樣地，各有6個(gè)小樣方，共有18個(gè)1/4nf的樣方，各樣地采集面積1.5nf。每個(gè)1/4m'的樣方噴灑茶枯溶液5000ml，噴灑過(guò)程中有蚯蚓爬出，收集爬出的蚯蚓，直到?jīng)]有蚯蚓爬出，等待蚯蚓爬出時(shí)間約1個(gè)小時(shí)，1小時(shí)后，對(duì)樣方進(jìn)行手挖，統(tǒng)計(jì)未驅(qū)趕出蚯蚓數(shù)量，計(jì)算茶枯溶液的驅(qū)趕、采集效率，其結(jié)果如表1所示。表l茶枯溶液對(duì)蚯蚓的驅(qū)趕、采集效率<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實(shí)施例2:2007年5月份，在廣東省昆蟲研究所所內(nèi)草叢內(nèi)進(jìn)行選樣，選用茶枯粉按照質(zhì)量比l:3的比例加入到水中，加熱回流0.5h,然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液。將茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比1:5的比例加入到水中稀釋，配制成茶枯溶液，將此茶枯溶液不斷噴灑于選好的土壤樣方上。共選3個(gè)樣地，各有6個(gè)小樣方，有18個(gè)1/4nf的樣方，各樣地采集面積1.5m2。每個(gè)1/4m2的樣方噴灑稀釋茶枯溶液7000ml，噴灑過(guò)程中有蚯蚓爬出，收集爬出的蚯蚓，直到?jīng)]有蚯蚓爬出，等待蚯蚓爬出時(shí)間約l個(gè)小時(shí)，l小時(shí)后，對(duì)樣方進(jìn)行手挖，統(tǒng)計(jì)未驅(qū)趕出蚯蚓數(shù)量，計(jì)算茶枯溶液的驅(qū)趕、采集效率，其結(jié)果如表2所示。表2茶枯溶液對(duì)蚯蚓的驅(qū)趕、采集效率<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實(shí)施例3:2007年5月份，在廣東省昆蟲研究所所內(nèi)草叢內(nèi)進(jìn)行選樣，選用茶枯粉按照質(zhì)量比L-3的比例加入到水中，加熱回流2h，然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液。將茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比1:9的比例加入到水中稀釋，配制成茶枯溶液，將茶枯溶液不斷噴灑于選好的土壤樣方上。共選3個(gè)樣地，各有6個(gè)小樣方，有18個(gè)1/41112的樣方，各樣地采集面積1.5m2。每個(gè)1/4nf的樣方噴灑稀釋茶枯溶液9000ml，噴灑過(guò)程中有蚯蚓爬出，收集爬出的蚯蚓，直到?jīng)]有蚯蚓爬出，等待蚯KI爬出時(shí)間約I個(gè)小時(shí)，l小時(shí)后，對(duì)樣方進(jìn)行手挖，統(tǒng)計(jì)未驅(qū)趕出蚯蚓數(shù)量，計(jì)算茶枯溶液的驅(qū)趕、采集效率，其結(jié)果如表3所示。表3茶枯溶液對(duì)蚯蚓的驅(qū)趕、采集效率樣地采集面積(m"采集時(shí)間茶枯溶液驅(qū)趕、采集的蚯蚓數(shù)量(條)茶枯溶液未采集出、手挖數(shù)量(條)總數(shù)量(條)采集效率(％)樣地l1.52007.5.152091522493.30樣地21.52007.5.162311324494.67樣地31.52007.5.17128713594.81實(shí)施例4:2007年5月份，在廣東省昆蟲研究所所內(nèi)草叢內(nèi)進(jìn)行選樣，選用茶枯粉按照質(zhì)量比l:3的比例加入到水中，加熱回流0.5h，然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液。將茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比1:9的比例加入到水中稀釋，配制成茶枯溶液，將茶枯溶液不斷噴灑于選好的土壤樣方上。共選3個(gè)樣地，各有6個(gè)小樣方，有18個(gè)1/4rtf的樣方，各樣地采集面積1.5nf。每個(gè)1/4nf的樣方噴灑稀釋茶枯溶液6000ml，噴灑過(guò)程中有蚯蚓爬出，收集爬出的蚯蚓，直到?jīng)]有蚯蚓爬出，等待蚯蚓爬出時(shí)間約l個(gè)小時(shí)，l小時(shí)后，對(duì)樣方進(jìn)行手挖，統(tǒng)計(jì)未驅(qū)趕出蚯蚓數(shù)量，計(jì)算茶枯溶液的驅(qū)趕、采集效率，其采集效率達(dá)到90%以上。實(shí)施例5:2007年5月份，在廣東省昆蟲研究所所內(nèi)草叢內(nèi)進(jìn)行選樣，選用茶枯粉按照質(zhì)量比l-3的比例加入到水中，加熱回流1.5h，然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液。將茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比1:5的比例加入到水中稀釋，配制成茶枯溶液，將茶枯溶液不斷噴灑于選好的土壤樣方上。共選3個(gè)樣地，各有6個(gè)小樣方，有18個(gè)1/4m'的樣方，各樣地采集面積1.5m2。每個(gè)1/4m2的樣方約需要噴灑稀釋茶枯溶液5500ml，噴灑過(guò)程中有蚯蚓爬出，收集爬出的蚯蚓，直到?jīng)]有蚯蚓爬出，等待蚯蚓爬出時(shí)間約1個(gè)小時(shí)，1小時(shí)后，對(duì)樣方進(jìn)行手挖，統(tǒng)計(jì)未驅(qū)趕出蚯蚓數(shù)量，計(jì)算茶枯溶液的驅(qū)趕、采集效率，其采集效率達(dá)到90%以上。實(shí)施例6:2007年5月份，在廣東省昆蟲研究所所內(nèi)草叢內(nèi)進(jìn)行選樣，選用茶枯粉按照質(zhì)量比l:3的比例加入到水中，加熱回流2h，然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液。將茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比l:5的比例加入到水中稀釋，配制成茶枯溶液，將茶枯溶液不斷噴灑于選好的土壤樣方上。共選3個(gè)樣地，各有6個(gè)小樣方，有18個(gè)1/4012的樣方，各樣地采集面積1.5m2。每個(gè)1/4nf的樣方約需要噴灑稀釋茶枯溶液9000ml，噴灑過(guò)程中有蚯蚓爬出，收集爬出的蚯頓，直到?jīng)]有蚯蚓爬出，等待蚯蚓爬出時(shí)間約1個(gè)小時(shí)，1小時(shí)后，對(duì)樣方進(jìn)行手挖，統(tǒng)計(jì)未驅(qū)趕出蚯蟲弓l數(shù)量，計(jì)算茶枯溶液的驅(qū)趕、采集效率，其采集效率達(dá)到90%以上。本發(fā)明人通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，回流時(shí)間小于0.5小時(shí)或回流后的茶枯過(guò)濾液加水稀釋比例大于l:9，將這樣條件下制備的茶枯溶液噴灑于樣方上，其采集效率顯著降低，許多蚯蚓不能被驅(qū)趕出地表，而回流時(shí)間大于2h，其采集效率并沒有提升，從節(jié)約資源和采集效率的角度考慮的話0.5-2h是最佳的，而回流后的茶枯過(guò)濾液加水稀釋比例小于1:5的話，茶枯溶液過(guò)濃使得采集效率比較低，并且過(guò)濃的茶枯溶液噴灑樣方上的話，造成資源的浪費(fèi)。實(shí)施例7:在廣東鶴山丘陵綜合試驗(yàn)站林區(qū)內(nèi)，本實(shí)施例中的茶枯溶液同實(shí)施例1的茶枯溶液，將此茶枯溶液不斷噴灑于各林區(qū)選好的樣方上。每個(gè)樣方為1/4m2，4個(gè)樣方為一重復(fù)，每林區(qū)設(shè)置三重復(fù)，合計(jì)釆集面積3m2,每個(gè)1/4r^的樣方噴灑5000ml茶枯溶液，共對(duì)鶴山中荷木林、馬占相思林、馬尾松林和桉樹林分別進(jìn)行了蚯蚓采集試驗(yàn)。其實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表4所示。表4茶枯溶液對(duì)丘陵山林蚯蚓的采集效率<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>權(quán)利要求1.一種利用茶枯溶液進(jìn)行蚯蚓采集的方法，其特征在于包括以下步驟(a)茶枯溶液的制備將茶枯粉按照質(zhì)量比1∶3加入到水中，加熱回流0.5-2h，然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液，將此茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比1∶5-9加入到水中，配制成茶枯溶液；(b)將茶枯溶液噴灑于土壤樣方上，每0.25平方米均勻噴灑5-9升茶枯溶液，收集爬出的蚯蚓。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用茶枯溶液進(jìn)行蚯蚓采集的方法，其特征在于在所述的茶枯溶液的制備中，加熱回流時(shí)間為lh，將此茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比l:8加入到水中，配制成茶枯溶液，每0.25平方米均勻噴灑茶枯溶液的量為5升。全文摘要本發(fā)明公開了一種利用茶枯溶液進(jìn)行蚯蚓采集的方法，旨在提供一種無(wú)殘留污染、對(duì)環(huán)境友好、采樣效果好、采樣效率穩(wěn)定的蚯蚓采集方法。本方法包括以下步驟(a)茶枯溶液的制備將茶枯粉按照質(zhì)量比1∶3加入到水中，用沸水熬煮0.5-2h，然后過(guò)濾，得到茶枯過(guò)濾液，將此熬煮好的茶枯過(guò)濾液按照質(zhì)量比1∶5-9加入到水中，配制成茶枯溶液；(b)將茶枯溶液噴灑于土壤樣方上，每0.25平方米均勻噴灑5-9升茶枯溶液，收集爬出的蚯蚓。本發(fā)明特別適于生態(tài)農(nóng)場(chǎng)、保護(hù)區(qū)、或有可能滲入到地下水的土壤區(qū)的蚯蚓采集。文檔編號(hào)A01M5/00GK101595863SQ20091004074公開日2009年12月9日申請(qǐng)日期2009年7月1日優(yōu)先權(quán)日2009年7月1日發(fā)明者廖崇惠,張衛(wèi)信,李建雄,龔鵬博申請(qǐng)人:廣東省昆蟲研究所