專利名稱：家蠶與野桑蠶雜交選育家蠶長(zhǎng)期蛹新材料的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于特殊基因資源利用領(lǐng)域，具體是一種將野桑蠶長(zhǎng)期蛹基因?qū)爰倚Q常規(guī)品種，快速在家蠶品種中固定、表達(dá)，選育家蠶長(zhǎng)期蛹新品系的方法。
背景技術(shù)：
中國是世界蠶業(yè)的發(fā)祥地和產(chǎn)業(yè)中心，蠶絲業(yè)是中華民族對(duì)人類的杰出貢獻(xiàn)。家蠶是鱗翅目中最重要的一種經(jīng)濟(jì)昆蟲。家蠶由野桑蠶馴化而來，長(zhǎng)期的人工選擇極大地提高了家蠶的某些經(jīng)濟(jì)性狀，但同時(shí)造成了嚴(yán)重的基因漂移，丟失了許多重要的基因資源。我國幅員遼闊，氣候多樣，野桑蠶種類繁多，蘊(yùn)含著寶貴的基因資源，對(duì)家蠶遺傳育種、特殊性狀基因庫的建立與應(yīng)用具有重要意義。傳統(tǒng)蠶業(yè)以栽桑養(yǎng)蠶、繅絲織綢為主，產(chǎn)品單一、比較效益低，不能滿足人們多樣化的消費(fèi)需求，難以抵御社會(huì)經(jīng)濟(jì)收入多元化和其它行業(yè)高收益的沖擊，同時(shí)寶貴的蠶業(yè)資源遠(yuǎn)未充分利用，巨大的潛在財(cái)富被白白浪費(fèi)?，F(xiàn)代蠶業(yè)以科技進(jìn)步為基礎(chǔ)，培育具有特殊性狀和特殊利用價(jià)值的新品種，開發(fā)蠶業(yè)新產(chǎn)品，拓展蠶業(yè)消費(fèi)新領(lǐng)域，對(duì)蠶業(yè)資源進(jìn)行深度開發(fā)、綜合利用，延伸產(chǎn)業(yè)鏈條，獲取高額附加值。通常由熟蠶抽絲作繭形成蠶蛹后，過12-15天形成蠶蛾，咬破蠶繭鉆出繭殼外，那么這一顆繭子就算報(bào)廢了，因此必須在12-15天內(nèi)用烘繭的方法高溫殺死蠶蛹，或者直接繅成絲，但這么短的時(shí)間內(nèi)完成零星蠶繭的收集，運(yùn)輸、貯存、并在工廠內(nèi)繅成絲是不可能的。但高溫烘繭的同時(shí)，一方面造成蠶繭的解舒率下降，絲質(zhì)變差，另一方面使寶貴的蠶蛹食品工業(yè)失去新鮮的原料。選育推廣家蠶長(zhǎng)期蛹品種，在繭絲生產(chǎn)中可以不烘炕蠶繭，直接進(jìn)行鮮繭繅絲，既避免蠶繭收烘過程造成的解舒下降，絲質(zhì)變差，又可以節(jié)省烘炕蠶繭的人力、物力和財(cái)力支出，同時(shí)節(jié)省煤、電消耗，節(jié)能減排。育成長(zhǎng)期蛹品種，可以實(shí)現(xiàn)新鮮蠶蛹的周年長(zhǎng)期供應(yīng)，開發(fā)蠶蛹食品、藥品、保健品和化妝品等，拓展蠶蛹新用途。在基礎(chǔ)研究和基因工程領(lǐng)域，蠶蛹是重要的研究對(duì)象和工程載體，蛹期經(jīng)過的延長(zhǎng)對(duì)生命奧秘的探索和工程操作影響深遠(yuǎn)。因此，培育家蠶長(zhǎng)期蛹新品種意義重大。一些特殊類群野桑蠶中還保留著長(zhǎng)期蛹基因拷貝，但農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中大量化肥、農(nóng)藥的使用以及棲息地的減少，野桑蠶的生存正受到嚴(yán)重威脅，一些寶貴的基因資源瀕臨滅絕， 搶救性保護(hù)珍稀野桑蠶基因資源刻不容緩，將其導(dǎo)入家蠶基因組進(jìn)行生物保護(hù)是重要手段之一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種家蠶與野桑蠶遠(yuǎn)緣雜交，快速選育家蠶長(zhǎng)期蛹新品系的方法。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)家蠶與野桑蠶雜交選育家蠶長(zhǎng)期蛹新品系的方法，其特征在于包括以下步驟1、野桑蠶長(zhǎng)期蛹基因?qū)爰倚Q在曾發(fā)現(xiàn)蛹期經(jīng)過較長(zhǎng)的野桑蠶的野外環(huán)境中搜集野桑蠶，室內(nèi)人工試養(yǎng)，選擇蛹期經(jīng)過較長(zhǎng)的個(gè)體與家蠶交配，F(xiàn)l代發(fā)生分離，選擇蛹期經(jīng)過長(zhǎng)的個(gè)體留種，2、多種優(yōu)良性狀集成將Fl代中蛹期經(jīng)過長(zhǎng)的個(gè)體分別與經(jīng)濟(jì)性狀好的中系家蠶品種6102F (素蠶、淡綠繭)和日系家蠶品種918A(普斑蠶、白繭)雜交，使F2代中同時(shí)聚合蛹期經(jīng)過長(zhǎng)、產(chǎn)繭量高、繭絲品質(zhì)好、抗性強(qiáng)等多種優(yōu)良性狀基因，3、建立品系F2代同蛾區(qū)自交，F(xiàn)3代發(fā)生性狀分離，中系中出現(xiàn)長(zhǎng)期蛹和非長(zhǎng)期蛹，淡黃色繭、淡綠色繭和白色繭，暗色斑蠶和素蠶等性狀分化；日系中出現(xiàn)長(zhǎng)期蛹和非長(zhǎng)期蛹，淡黃色繭、淡綠色繭和白色繭等性狀分化，幼蟲全部為普通斑紋。根據(jù)選育目標(biāo)分別建立“中系暗色斑淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系素蠶淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“日系普斑蠶淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系暗色斑淡黃繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系素蠶淡黃繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“日系普斑蠶淡黃繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系暗色斑白繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系素蠶白繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“日系普斑蠶白繭長(zhǎng)期蛹選育系”9個(gè)品系，4、定向選擇建立品系后，各品系均采取單蛾育、蛾區(qū)內(nèi)自交繁種，按照各品系選育目標(biāo)，幼蟲期選擇斑紋特征明顯、蛹期選擇蛹期經(jīng)過30天以上、繭期選擇繭色純正的個(gè)體，在此基礎(chǔ)上擇優(yōu)選擇繭形純正、繭形較大、繭層較厚的個(gè)體留種繼代。如此連續(xù)多代選擇，直到目標(biāo)性狀穩(wěn)定遺傳為止，建成“遠(yuǎn)緣雜交后代長(zhǎng)期蛹育種素材基因庫”，從中培育家蠶育種骨干親本。采用上述方案，選擇綜合性狀優(yōu)良的家蠶品種，將其分批出庫催青，精心飼養(yǎng)，并施以恰當(dāng)?shù)睦洳乇Ｗo(hù)，形成在不同日期羽化的蠶蛾群體。利用野桑蠶蛹期經(jīng)過長(zhǎng)的個(gè)體與同期羽化的家蠶蛾雜交，后代群體中選擇蛹期經(jīng)過長(zhǎng)的個(gè)體進(jìn)行雌雄交配，再在下一代群體中選擇蛹期經(jīng)過長(zhǎng)的個(gè)體進(jìn)行雌雄交配，如此反復(fù)，直到蛹期經(jīng)過長(zhǎng)這一性狀固定在后代中，且不再分離，獲得長(zhǎng)期蛹新品系。在每一代的種繭選擇中，首先考慮蛹期經(jīng)過長(zhǎng)這一性狀，在此基礎(chǔ)上同時(shí)考慮生命力強(qiáng)、繭形正、全繭量重、繭層厚等綜合經(jīng)濟(jì)性狀優(yōu)良。與家蠶家交配時(shí)，同時(shí)選擇日系品種和中系品種作親本，以便以后配制中日一代雜交種。在分離世代，根據(jù)不同的蛹期經(jīng)過、斑紋和繭色分化建立不同小系。經(jīng)過多代定向選擇培優(yōu)，育成骨干親本材料，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。下面結(jié)合實(shí)施列及圖示對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說明。


圖1為家蠶與野桑蠶雜交選育家蠶長(zhǎng)期蛹新材料的方法的路線圖。
具體實(shí)施例方式(1)野桑蠶長(zhǎng)期蛹基因?qū)爰倚Q四川省蓬安縣廢棄桑園內(nèi)搜集野桑蠶，在室內(nèi)模擬野外環(huán)境飼養(yǎng)，花盆中扦插帶葉桑枝，每2天更換一次，保持桑葉不凋萎，野桑蠶放在其上，外罩防蟲網(wǎng)罩，防止鼠蟲危害和野蠶逃逸。野桑蠶幼蟲體型細(xì)長(zhǎng)，體色煤灰色，不規(guī)則斑紋；繭較小，紡錘型，繭色黃色， 繭層較?。灰活^雄蛹，蛹期經(jīng)過48天后羽化，蛾體黑灰色。野桑蠶蛹期經(jīng)過長(zhǎng)，羽化時(shí)無純種家蠶與之交配，選用生產(chǎn)用種“871X872”雌蛾對(duì)交，單蛾蛋圈框罩，遮光，自然散對(duì)產(chǎn)卵； 蠶卵室溫下保護(hù)24-36小時(shí)，卵色轉(zhuǎn)為赤豆色時(shí)入冷庫低溫保護(hù)。卵色固定時(shí)為淡黃綠色，卵量486粒/蛾，良卵率98%。(2)多種優(yōu)良目標(biāo)基因聚合及品系建立遠(yuǎn)緣雜交Fl代幼蟲均為暗色斑，紡錘型繭，繭黃色，雌蛾灰色，雄蛾黑灰色；蛹期經(jīng)過性狀發(fā)生分離。選擇蛹期經(jīng)過長(zhǎng)的個(gè)體分別與經(jīng)濟(jì)性狀好的中系家蠶品種6102F(素蠶、淡綠繭)及日系家蠶品種918A (普斑蠶、白繭)交配，聚合多種目標(biāo)基因，改良F2代經(jīng)濟(jì)性狀。F2代性狀分化嚴(yán)重，出現(xiàn)長(zhǎng)期蛹和短期蛹，淡黃色繭、淡綠色繭和白色繭，暗色斑蠶、普斑蠶和素蠶等多種類型。根據(jù)選育目標(biāo)分別建立“中系暗色斑淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系”、 “中系素蠶淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“日系普斑蠶淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系暗色斑淡黃繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系素蠶淡黃繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“日系普斑蠶淡黃繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系暗色斑白繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系素蠶白繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“日系普斑蠶白繭長(zhǎng)期蛹選育系”9個(gè)品系。自F2代起，對(duì)同一世代不同發(fā)育階段的蠶，根據(jù)幼蟲體色斑紋、繭色、蛹期經(jīng)過等多種表型性狀進(jìn)行嚴(yán)格選擇。上簇結(jié)繭時(shí)采用繭袋結(jié)繭法，一頭熟蠶裝入一個(gè)繭袋， 繭袋上標(biāo)明品種名稱、上簇時(shí)間、蠶體斑紋等信息，逐一調(diào)查繭色、性別、羽化時(shí)間，嚴(yán)格選擇蛹期經(jīng)過長(zhǎng)(》30天)、斑紋和繭色符合品系標(biāo)準(zhǔn)的個(gè)體留種，建立多種優(yōu)良性狀集成、 特征明顯、類型豐富的家蠶長(zhǎng)期蛹品系。(3)定向選擇，純化選優(yōu)自F3代起，各選育系連續(xù)多代同蛾區(qū)自交采種，首先根據(jù)蟲蛹生命率指標(biāo)進(jìn)行蛾區(qū)選擇，選擇生命力強(qiáng)的蛾區(qū)留種，在留種蛾區(qū)種進(jìn)行個(gè)體選擇，嚴(yán)格選擇蛹期經(jīng)過長(zhǎng) (^ 30天)，斑紋和繭色純正、符合品系標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)濟(jì)性狀優(yōu)良的個(gè)體留種繼代，直到目標(biāo)性狀表現(xiàn)符合要求，遺傳基本穩(wěn)定為止，得到家蠶育種骨干親本材料。(4)選育結(jié)果①中系暗色斑淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系純化試驗(yàn)結(jié)果由表1可以看出，隨著世代的增加，蛹期經(jīng)過長(zhǎng)的個(gè)體及暗色斑幼蟲、淡綠色繭的比例明顯增加。表1中系暗色斑淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系純化試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1. 一種家蠶與野桑蠶雜交選育家蠶長(zhǎng)期蛹新材料的方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行(1)野桑蠶長(zhǎng)期蛹基因?qū)爰倚Q在曾發(fā)現(xiàn)蛹期經(jīng)過較長(zhǎng)的野桑蠶的野外環(huán)境中搜集野桑蠶，室內(nèi)人工試養(yǎng)，選擇蛹期經(jīng)過較長(zhǎng)的個(gè)體與家蠶交配，F(xiàn)l代發(fā)生分離，選擇蛹期經(jīng)過長(zhǎng)的個(gè)體留種，(2)多種優(yōu)良性狀集成將Fl代中蛹期經(jīng)過長(zhǎng)的個(gè)體分別與經(jīng)濟(jì)性狀好的中系家蠶品種6102F(素蠶、淡綠繭)和日系家蠶品種918A(普斑蠶、白繭)雜交，使F2代中同時(shí)聚合蛹期經(jīng)過長(zhǎng)、產(chǎn)繭量高、繭絲品質(zhì)好、抗性強(qiáng)等多種優(yōu)良性狀基因，(3)建立品系F2代同蛾區(qū)自交，F(xiàn)3代發(fā)生性狀分離，中系中出現(xiàn)長(zhǎng)期蛹和非長(zhǎng)期蛹， 淡黃色繭、淡綠色繭和白色繭，暗色斑蠶和素蠶等性狀分化；日系中出現(xiàn)長(zhǎng)期蛹和非長(zhǎng)期蛹，淡黃色繭、淡綠色繭和白色繭等性狀分化，幼蟲全部為普通斑紋。根據(jù)選育目標(biāo)分別建立“中系暗色斑淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系素蠶淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“日系普斑蠶淡綠繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系暗色斑淡黃繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系素蠶淡黃繭長(zhǎng)期蛹選育系”、 “日系普斑蠶淡黃繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系暗色斑白繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“中系素蠶白繭長(zhǎng)期蛹選育系”、“日系普斑蠶白繭長(zhǎng)期蛹選育系” 9個(gè)品系，(4)定向選擇建立品系后，各品系均采取單蛾育、蛾區(qū)內(nèi)自交繁種，按照各品系選育目標(biāo)，幼蟲期選擇斑紋特征明顯、蛹期選擇蛹期經(jīng)過30天以上、繭期選擇繭色純正的個(gè)體， 在此基礎(chǔ)上擇優(yōu)選擇繭形純正、繭形較大、繭層較厚的個(gè)體留種繼代。如此連續(xù)多代選擇， 直到目標(biāo)性狀穩(wěn)定遺傳為止，建成“遠(yuǎn)緣雜交后代長(zhǎng)期蛹育種素材基因庫”，從中培育家蠶育種骨干親本。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種家蠶與野桑蠶雜交選育家蠶長(zhǎng)期蛹新材料的方法，按下列步驟進(jìn)行，1、野桑蠶長(zhǎng)期蛹基因?qū)爰倚Q，2、多種優(yōu)良性狀集成，3、建立品系，4、定向選擇，本發(fā)明能培育具有特殊性狀和特殊利用價(jià)值的新品種，開發(fā)蠶業(yè)新產(chǎn)品，拓展蠶業(yè)消費(fèi)新領(lǐng)域，對(duì)蠶業(yè)資源進(jìn)行深度開發(fā)、綜合利用，延伸產(chǎn)業(yè)鏈條，獲取高額附加值。
文檔編號(hào)A01K67/04GK102405886SQ20111023546
公開日2012年4月11日 申請(qǐng)日期2011年8月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月9日
發(fā)明者劉俊鳳, 劉彬斌, 吳建梅, 左艷春, 張劍飛, 張友洪, 杜周和, 胡光榮, 陳義安 申請(qǐng)人:四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所