專利名稱：地錢的無性繁育方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種地錢的繁育方法，特別涉及一種地錢的無性繁育方法。
背景技術：
地錢屬于苔蘚類植物，從植物分類學的角度屬于苔蘚植物門，苔綱，地錢目，地錢科，地錢屬。地錢整體入藥，味淡性涼，入脾肺經(jīng)。有祛熱、收斂、益氣、清補、明目等功效?？梢灾委熁鹧垡姑?、燙傷燒傷、肺熱咳嗽和久痢脫肛。以色列魏茨曼研究的科學家研究發(fā)現(xiàn)，地錢所含的一種成分可以抑制人大腦中的乙酰膽堿酯酶的活性，從而能對老年癡呆癥產(chǎn)生療效。作為食物時，其又具有顯著的食療作用1.降脂明目。地耳是一種很好的低脂肪營養(yǎng)保健菜，能降脂減肥，同時，對目赤、夜盲、脫肛等病癥也有一定療效。2.清熱降火。地錢性寒而滑，具有清熱解毒的功效，內(nèi)服外用，可輔助治療燒傷、燙傷及瘡瘍腫毒。3.補充營養(yǎng)。地錢含有豐富的蛋白質(zhì)、鈣、磷、鐵等，可為人體提供多種營養(yǎng)成分， 具有補虛益氣，滋養(yǎng)肝腎的作用。因此地錢具有良好的市場價值。目前的地錢繁育技術多采用花盆土壤組織塊培養(yǎng)方法。這種方法由于需要準備花盆、土壤等，一方面占用空間大，移動起來比較麻煩，另一方面繁育效率不高。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于背景技術中提到的目前地錢繁育技術的缺點，本發(fā)明提供了一種新的地錢繁
育方法。眾所周知，地錢屬于苔類植物，其整個生命周期中包含孢子體和配子體兩大階段， 而具有經(jīng)濟價值的是配子體(又稱葉狀體)。地錢的配子體具有莖、葉結構，但是不具備植物學意義上的根。配子體的莖在成長過程中慢慢形成類似根狀結構，該結構被稱為假根。配子體就是通過假根來吸收生長所需的養(yǎng)分。由于配子體的莖葉均無法在水中呼吸，因此到目前為止對地錢的繁育均使用土壤栽培或者固體培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法。本發(fā)明所述的方法則是利用液體培養(yǎng)基對地錢進行繁育。具體的繁育方法如下(1)配制MS或B5液體培養(yǎng)基。具體配方如下MS液體培養(yǎng)基硝酸鉀1900mg/l，硝酸銨1650mg/l，磷酸二氫鉀170mg/l，硫酸鎂 370mg/l，氯化鈣 440mg/l，碘化鉀 0. 83mg/l，硼酸 6. 2mg/l，硫酸錳 22. 3mg/l，硫酸鋅 8. 6mg/ 1，鉬酸鈉0. 25mg/l，硫酸銅0. 025mg/l，氯化鈷0. 025mg/l,乙二胺四乙酸二鈉37. 3mg/l，硫酸亞鐵27. 8mg/l，肌醇100mg/l，甘氨酸aiig/Ι，鹽酸硫胺素0. lmg/1，鹽酸吡哆醇0. 5mg/l, 煙酸 0. 5mg/l。B5液體培養(yǎng)基硝酸鉀2500mg/l，硫酸鎂250mg/l，氯化鈣150mg/l，硫酸銨13%ig/l，碘化鉀 0. 75mg/l，硼酸 3. Omg/1，硫酸猛 10mg/l，硫酸鋅 2. Omg/1，鉬酸鈉 0. 25mg/ 1，氯化鈷0. 025mg/l，硫酸銅0. 025mg/l，乙二胺四乙酸二鈉37. 3mg/l，硫酸亞鐵27. 8mg/l， 肌醇100mg/l，煙酸1. Omg/1，鹽酸吡哆醇1. Omg/1，鹽酸硫銨1 Omg/1,(2)獲取培養(yǎng)組織塊取材可以是地錢(M. polymorpha)，裂托地錢(M. cuneiloba)和風兜地錢 (M. diptera)等。將地錢的葉狀體剪碎，剪碎的葉狀體組織塊的大小控制在2X2mm_3X3mm。 利用粗眼的土壤篩可以將過小的組織塊篩選掉。(3)組織塊的消毒首先用自來水將剪碎的組織塊洗干凈，然后在超凈臺上用70%的酒精浸泡1分鐘，再用0. 的升汞溶液殺菌5分鐘，然后使用無菌水沖洗5次，然后用無菌吸水紙洗干。(4)假根的誘導將步驟(1)中所配置的液體培養(yǎng)基倒入大培養(yǎng)皿，將塑料支架的高度調(diào)節(jié)至與培養(yǎng)基高度相同，然后將塑料支架放置于培養(yǎng)皿中。將步驟(3)中所獲得的無菌組織塊放置于塑料支架上，讓組織塊的底部能接觸到培養(yǎng)基。并且保證組織塊沒有被浸沒在培養(yǎng)基中。 溫度控制在20 22°C左右，培養(yǎng)4 6天。所培養(yǎng)的組織塊從碎片邊緣一方面長出葉狀體帶有生長點的頂端部分，另一方面長出假根組織。(5)葉狀體的增殖當?shù)劐X的組織塊長出假根組織后，將塑料支架略微調(diào)高，使假根浸沒在培養(yǎng)基中， 使葉狀體的其他部分不接觸培養(yǎng)基。這樣能使葉狀體的莖和葉更好地呼吸，更有效率地利用假根從培養(yǎng)基中吸收的養(yǎng)分。更重要的是，這樣能避免葉狀體發(fā)生腐爛死亡的現(xiàn)象。將溫度控制在20 25°C，培養(yǎng)8 10天，待葉狀體的寬度達到1厘米，即可收獲。其中步驟(3)中所述的塑料支架的作用在于解決待培養(yǎng)的組織塊不能浸沒在液體中這一問題。所使用的塑料支架的平面上密集地設置孔洞，孔洞的大小以直徑0.5毫米到1毫米為宜。優(yōu)選地，所述的塑料支架的支撐腿具有內(nèi)外兩層結構，內(nèi)層與外層可以相對活動， 內(nèi)外層依靠相互之間的摩擦力定位。這樣就可以方便地調(diào)節(jié)塑料支架的高度，以滿足實際生產(chǎn)的需要。本發(fā)明所述的方法為地錢的無性繁育提供了一種新的方法。利用液體培養(yǎng)基對地錢進行繁育，能夠節(jié)省空間，節(jié)約成本。而且由于沒有接觸土壤，通過這種方法獲得的地錢非常干凈，在作為食材進行加工時特別省時省力。另外，由于植物從液體培養(yǎng)基中吸收養(yǎng)分的效率要高于從土壤或固體培養(yǎng)基中吸收養(yǎng)分，因此使用本發(fā)明所述的方法繁育地錢，其成熟周期比使用土壤或固體培養(yǎng)基進行培育要快。根據(jù)實驗數(shù)據(jù)，本發(fā)明所述的方法繁育的地錢大約15天成熟，而土壤或固體培養(yǎng)基培育的地錢大約20天成熟，這樣一來縮短了繁育周期，從另一方面提高了產(chǎn)量。


圖1是本發(fā)明所述的方法中將塑料支架放置于培養(yǎng)皿的示意圖。圖2是本發(fā)明所述的方法中的塑料支架的結構示意圖。其中1是培養(yǎng)皿，2是塑料支架，3是塑料支架的支撐腿。具體實施例實施例1(1)配制MS液體培養(yǎng)基。具體配方如下硝酸鉀1900mg/l，硝酸銨1650mg/l，磷酸二氫鉀170mg/l，硫酸鎂370mg/l，氯化鈣440mg/l,碘化鉀0. 83mg/l,硼酸6. 2mg/l,硫酸錳22. 3mg/l,硫酸鋅8. 6mg/l,鉬酸鈉 0. 25mg/l，硫酸銅0. 025mg/l,氯化鈷0. 025mg/l,乙二胺四乙酸二鈉37. 3mg/l，硫酸亞鐵 27. 8mg/l，肌醇100mg/l,甘氨酸2mg/l,鹽酸硫胺素0. lmg/1,鹽酸吡哆醇0. 5mg/l，煙酸 0. 5mg/lο(2)獲取培養(yǎng)組織塊取材地錢(M. polymorpha)。將地錢的葉狀體剪碎為2X 2mm的組織塊。利用粗眼的土壤篩可以將過小的組織塊篩選掉。(3)組織塊的消毒首先用自來水將剪碎的組織塊洗干凈，然后在超凈臺上用70%的酒精浸泡1分鐘，再用0. 的升汞溶液殺菌5分鐘，然后使用無菌水沖洗5次，然后用無菌吸水紙洗干。(4)假根的誘導將步驟(1)中所配置的液體培養(yǎng)基倒入大培養(yǎng)皿，將塑料支架的高度調(diào)節(jié)至與培養(yǎng)基高度相同，然后將塑料支架放置于培養(yǎng)皿中。將步驟(3)中所獲得的無菌組織塊放置于塑料支架上，讓組織塊的底部能接觸到培養(yǎng)基。并且保證組織塊沒有被浸沒在培養(yǎng)基中。 溫度控制在20°C左右，培養(yǎng)6天。所培養(yǎng)的組織塊從碎片邊緣一方面長出葉狀體帶有生長點的頂端部分，另一方面長出假根組織。(5)葉狀體的增殖當?shù)劐X的組織塊長出假根組織后，將塑料支架略微調(diào)高，使假根浸沒在培養(yǎng)基中， 使葉狀體的其他部分不接觸培養(yǎng)基。這樣能使葉狀體的莖和葉更好地呼吸，更有效率地利用假根從培養(yǎng)基中吸收的養(yǎng)分。更重要的是，這樣能避免葉狀體發(fā)生腐爛死亡的現(xiàn)象。將溫度控制在25°C，培養(yǎng)8天，葉狀體的寬度達到1厘米，進行收獲。實施例2(1)配制B5液體培養(yǎng)基。具體配方如下硝酸鉀2500mg/l，硫酸鎂250mg/l，氯化鈣150mg/l，硫酸銨i;34mg/l，碘化鉀0. 75mg/l,硼酸3. Omg/1,硫酸錳10mg/l,硫酸鋅2. Omg/1,鉬酸鈉0. 25mg/l,氯化鈷 0. 025mg/l,硫酸銅0. 025mg/l,乙二胺四乙酸二鈉37. 3mg/l,硫酸亞鐵27. 8mg/l,肌醇 100mg/l，煙酸1. Omg/1，鹽酸吡哆醇1. Omg/1，鹽酸硫銨IOmg/L·(2)獲取培養(yǎng)組織塊取材裂托地錢(M. cuneiloba)。將地錢的葉狀體剪碎為2X 2mm的組織塊。利用粗眼的土壤篩可以將過小的組織塊篩選掉。(3)組織塊的消毒首先用自來水將剪碎的組織塊洗干凈，然后在超凈臺上用70%的酒精浸泡1分鐘，再用0. 的升汞溶液殺菌5分鐘，然后使用無菌水沖洗5次，然后用無菌吸水紙洗干。(4)假根的誘導
將步驟(1)中所配置的液體培養(yǎng)基倒入大培養(yǎng)皿，將塑料支架的高度調(diào)節(jié)至與培養(yǎng)基高度相同，然后將塑料支架放置于培養(yǎng)皿中。將步驟(3)中所獲得的無菌組織塊放置于塑料支架上，讓組織塊的底部能接觸到培養(yǎng)基。并且保證組織塊沒有被浸沒在培養(yǎng)基中。 溫度控制在22°C左右，培養(yǎng)6天。所培養(yǎng)的組織塊從碎片邊緣一方面長出葉狀體帶有生長點的頂端部分，另一方面長出假根組織。(5)葉狀體的增殖當?shù)劐X的組織塊長出假根組織后，將塑料支架略微調(diào)高，使假根浸沒在培養(yǎng)基中， 使葉狀體的其他部分不接觸培養(yǎng)基。這樣能使葉狀體的莖和葉更好地呼吸，更有效率地利用假根從培養(yǎng)基中吸收的養(yǎng)分。更重要的是，這樣能避免葉狀體發(fā)生腐爛死亡的現(xiàn)象。將溫度控制在23°C，培養(yǎng)9天，葉狀體的寬度達到1厘米，進行收獲。本領域技術人員可以根據(jù)本發(fā)明公開的內(nèi)容和所掌握的本領域技術對本發(fā)明內(nèi)容作出替換或變型，但是這些替換或變型都不應視為脫離本發(fā)明構思的，這些替換或變型均在本發(fā)明要求保護的權利范圍內(nèi)。
權利要求
1.一種地錢的無性繁育方法，其特種在于該方法包括以下步驟(1)配制MS或B5液體培養(yǎng)基；(2)獲取培養(yǎng)組織塊將地錢的葉狀體剪碎，剪碎的葉狀體組織塊的大小控制在2 X 2mm-3 X 3mm。利用粗眼的土壤篩可以將過小的組織塊篩選掉；(3)組織塊的消毒首先用自來水將剪碎的組織塊洗干凈，然后在超凈臺上用70%的酒精浸泡1分鐘，再用0. 的升汞溶液殺菌5分鐘，然后使用無菌水沖洗5次，然后用無菌吸水紙洗干；(4)假根的誘導將步驟(1)中所配置的液體培養(yǎng)基倒入大培養(yǎng)皿，將塑料支架的高度調(diào)節(jié)至與培養(yǎng)基高度相同，然后將塑料支架放置于培養(yǎng)皿中，將步驟(3)中所獲得的無菌組織塊放置于塑料支架上，讓組織塊的底部能接觸到培養(yǎng)基，并且保證組織塊沒有被浸沒在培養(yǎng)基中，溫度控制在20 22°C左右，培養(yǎng)4 6天，所培養(yǎng)的組織塊從碎片邊緣一方面長出葉狀體帶有生長點的頂端部分，另一方面長出假根組織；(5)葉狀體的增殖當?shù)劐X的組織塊長出假根組織后，將塑料支架略微調(diào)高，使假根浸沒在培養(yǎng)基中，使葉狀體的其他部分不接觸培養(yǎng)基，這樣能使葉狀體的莖和葉更好地呼吸，更有效率地利用假根從培養(yǎng)基中吸收的養(yǎng)分，更重要的是，這樣能避免葉狀體發(fā)生腐爛死亡的現(xiàn)象，將溫度控制在20 25°C，培養(yǎng)8 10天，待葉狀體的寬度達到1厘米，即可收獲。
2.權利要求1中所述的地錢的無性繁育方法，其特種在于步驟O)中使用的地錢可以是地錢(M. polymorpha)，裂托地錢(M. cuneiloba)和風兜地錢(M. diptera)。
3.權利要求1或2中所述的地錢的無性繁育方法，其特種在于其中所述的塑料支架的平面上密集地設置孔洞，孔洞的大小為直徑0. 5毫米到1毫米。
4.權利要求1或2或3中所述的地錢的無性繁育方法，其特種在于其中所述的塑料支架的支撐腿具有內(nèi)外兩層結構，內(nèi)層與外層可以相對活動，內(nèi)外層依靠相互之間的摩擦力定位。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種新的地錢繁育方法。所述的方法是利用液體培養(yǎng)基對地錢進行繁育。在液體培養(yǎng)基中設置塑料支架，使地錢的組織塊不浸沒在培養(yǎng)基中。并且對地錢組織塊長出假根之前和之后分別管理，從而達到快速高效繁育地錢的目的。
文檔編號A01H4/00GK102550407SQ20111044250
公開日2012年7月11日 申請日期2011年12月26日 優(yōu)先權日2011年12月26日
發(fā)明者杜春林 申請人:溧陽市澳谷信息科技有限公司