專利名稱：一種血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)療評價、檢測技術領域，具體涉及一種血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型及其制備方法。
背景技術：
高血壓是最常見的慢性病，也是心腦血管病最主要的危險因素，其腦卒中、心肌梗死、心力衰竭及慢性腎臟病等主要并發(fā)癥，不僅致殘、致死率高，而且嚴重消耗醫(yī)療和社會資源，給家庭和國家造成沉重負擔。過去50年，我國曾進行過四次大規(guī)模高血壓患病率的人群抽樣調(diào)查。根據(jù)2002年調(diào)查數(shù)據(jù)，我國18歲以上成人高血壓患病率為18. 8%按2010 年我國人口的數(shù)量與結構，估計目前我國約有2億高血壓患者，每10個成年人中就有2人患有高血壓，約占全球高血壓總?cè)藬?shù)的1/5。
通過建立合適的動物模型模仿高血壓癥，有助于人們了解高血壓癥的病理發(fā)生和發(fā)展進程，幫助理解與高血壓有關的病因?qū)W因素，建立臨床上的診斷指標，為高血壓的治療提供實驗依據(jù)，對治療高血壓藥物的篩選具有重大意義。
陽亢、血瘀、痰濁常相兼為患，是大多高血壓患者的共同表現(xiàn)，是高血壓胰島素抵抗和左室重構共有的重要因素。現(xiàn)有技術中已報道過陽亢高血壓動物模型以及痰濁-血瘀動物模型，用于探討高血壓發(fā)病機理、設計開發(fā)抗高血壓藥物。
現(xiàn)有技術的不足在于高血壓病中“血瘀、陽亢、痰濁”為大多數(shù)患者的共同表現(xiàn)和共同發(fā)病環(huán)節(jié)，因此雖然“陽亢”、“痰濁、血瘀”的動物模型分別已有報道，但尚缺乏將“血瘀、陽亢、痰濁”等癥候整合的高血壓動物模型，給高血壓病中醫(yī)治療的進一步研究帶來困難。因此，目前急需建立一種有效、穩(wěn)定、制備方法簡單的血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型，以便開展高血壓病中醫(yī)治療的進一步研究。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型及其制備方法。
本發(fā)明一方面公開了一種制備血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型的方法，該方法為以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)SHR大鼠(自發(fā)性高血壓大鼠)6 16周，并且前4 6周每日還要以附子湯喂食SHR大鼠。
較優(yōu)的，制備血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型的方法為以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)SHR 大鼠12周，并且前4周每日還要以附子湯喂食SHR大鼠。
本發(fā)明所述的附子湯喂食SHR大鼠可采用對SHR大鼠附子湯灌胃的方法。
較優(yōu)的，所述高脂飲食配方如下(質(zhì)量百分比)
普通鼠飼料50- 82%膽固醇1 ^2.5%豬油5 ^14%牛膽酸鈉0.1 0.5%蛋黃粉5 ^25%蔗糖5 ^20%
更優(yōu)的，所述高脂飲食配方為(質(zhì)量百分比)普通鼠飼料72.9%、膽固醇2%、豬油10%、牛膽酸鈉0. 1<%、蛋黃粉10%及蔗糖5(%。
較優(yōu)的，所述附子湯的制備方法為取附子浸泡后，煎煮兩次，將兩次藥液混合后濃縮，制得附子湯。
更優(yōu)的，所述附子湯的制備方法為取附子20g，浸泡30min后，煎煮兩次，將兩次藥液混合后濃縮，制得附子湯的生藥濃度為0. 05 0. 15g/ml。
最優(yōu)的，制得附子湯的生藥濃度為0. lg/ml。
較優(yōu)的，每日喂食的附子湯的用量為20 30ml/kg。
更優(yōu)的，每日喂食的附子湯的用量為20ml/kg。
較優(yōu)的，每日附子湯喂食SHR大鼠的每日生藥量為1 4. 5g/kg。最優(yōu)的，每日附子湯喂食SHR大鼠的每日生藥量為2g/kgQg/kg是指每kg重量的SHR大鼠所喂食的附子湯的生藥量為2g)。
較優(yōu)的，所述SHR大鼠為5周齡雄性SHR大鼠。
本發(fā)明第二方面公開了一種血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型，采用前述方法制備獲得。
較優(yōu)的，所述血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型的SHR大鼠為17周齡的SHR大鼠。 通過對5周齡的SHR大鼠以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)12周，并且前4周每日以附子湯對SHR大鼠灌胃一次獲得。
更優(yōu)的，所述以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)的SHR大鼠為5周齡的SHR大鼠。
本發(fā)明通過對血瘀、陽亢、痰濁等相關指標的試驗，檢驗本發(fā)明制備方法制備的血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型與未進行處理的空白對照相比是否具有有用性，可用于高血壓病中醫(yī)治療的研究。所述血瘀的相關指標為血粘度，所述陽亢相關指標包括血管緊張素II含量和易激惹程度，所述痰濁相關指標為血脂和糖代謝。
由于“陽亢”可表現(xiàn)為代謝亢進，高血壓也多伴隨有代謝亢進及糖代謝紊亂，兩者共同作用可能導致“痰濁、血瘀”模型效果的抵消或削弱；因此本發(fā)明的創(chuàng)新點在于得到了 “陽亢、痰濁、血瘀”三種綜合癥狀的高血壓大鼠模型。
本發(fā)明的有益效果為本發(fā)明動物模型的制備方法工序簡化、控制方便，能夠制備得到具有有用性能的血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型。該動物模型表現(xiàn)出較明顯的“血瘀、陽亢、痰濁”中醫(yī)癥候特征，使高血壓病中醫(yī)治療的研究更有針對性，體現(xiàn)出中醫(yī)“辨證施治”的特點。
具體實施方式
下面結合實施例進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明，而非限制本發(fā)明的范圍。
實施例1血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型的制備
方法1
(1)制備高脂飲食，其配方為普通鼠飼料82%、膽固醇1.5%、豬油5%、牛膽酸鈉 0. 5%、蛋黃粉6%及蔗糖5%。
(2)制備附子湯取附子20g，浸泡30min后，煎煮兩次，將兩次藥液混合后濃縮，制得附子湯的藥液含生藥0. 15g/ml。
(3)取5周齡雄性SHR大鼠，以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)SHR大鼠16周，并且，前5周每日還要以附子湯喂食SHR大鼠，每日附子湯用量為30ml/kg，相當于每日生藥4. 5g/kg，培養(yǎng)結束后，獲得21周齡的血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型。
方法2
(1)制備高脂飲食，其配方為普通鼠飼料50%、膽固醇2.5%、豬油14%、牛膽酸鈉0. 3%、蛋黃粉25%及蔗糖8. 2%。
(2)制備附子湯取附子20g，浸泡30min后，煎煮兩次，將兩次藥液混合后濃縮，制得附子湯的藥液含生藥0. 05g/ml。
(3)取5周齡雄性SHR大鼠，以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)SHR大鼠7周，并且，前4周每日還要以附子湯對SHR大鼠灌胃一次，每日附子湯灌胃量為20ml/kg，相當于每日生藥lg/kg， 培養(yǎng)結束后，獲得12周齡的血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型。
方法3
(1)制備高脂飲食，其配方為普通鼠飼料72.9%、膽固醇2%、豬油10%、牛膽酸鈉0. 1<%、蛋黃粉10%及蔗糖5(%。
(2)制備附子湯取附子20g，浸泡30min后，煎煮兩次，將兩次藥液混合后濃縮，制得附子湯的藥液含生藥0. lg/ml。
(3)取5周齡雄性SHR大鼠，以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)SHR大鼠12周，并且，前4周每日還要以附子湯對SHR大鼠灌胃一次，每日附子湯灌胃量為20ml/kg，相當于每日生藥2g/ kg,培養(yǎng)結束后，獲得17周齡的血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型。
方法4
(1)制備高脂飲食，其配方為普通鼠飼料60%、膽固醇1%、豬油13.9%、牛膽酸鈉0. 1%、蛋黃粉5%及蔗糖20%。
(2)制備附子湯取附子20g，浸泡30min后，煎煮兩次，將兩次藥液混合后濃縮，制得附子湯的藥液含生藥0. lg/ml。
(3)取5周齡雄性SHR大鼠，以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)SHR大鼠6周，并且6周內(nèi)每日還要以附子湯喂食SHR大鼠，每日附子湯用量為20ml/kg，相當于每日生藥2g/kg，培養(yǎng)結束后，獲得11周齡的血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型。
實施例2血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型效果的驗證
1.實驗方法
選取11只5周齡雄性SHR大鼠按照實施例1的方法3制作“血瘀-陽亢-痰濁” 高血壓動物模型，另選取11只5周齡雄性SHR大鼠進行空白對照，于17周齡時觀察動物激惹程度并行腹主動脈取血測定相關指標。
其中，以血粘度評價“血瘀”表現(xiàn)；以血脂、胰島素抵抗指數(shù)(H0MA-II )評價“痰濁” 表現(xiàn)；以血管緊張素II、易激惹程度評價“陽亢”表現(xiàn)。
各組數(shù)據(jù)以5 士s表示，采用SPSS 19. 0版軟件進行統(tǒng)計分析，兩組間比較用獨立樣本T檢驗，激惹程度比較采用Ridit分析，P < 0. 05為差異有統(tǒng)計學意義。
2.實驗數(shù)據(jù)
2. 1 “血瘀”相關指標-血粘度
表1血粘度實驗結果
權利要求
1.一種制備血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型的方法，該方法為以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)SHR大鼠6 16周，并且前4 6周每日還要以附子湯喂食SHR大鼠。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，該方法為以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)SHR大鼠12 周，并且前4周每日還要以附子湯喂食SHR大鼠。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述高脂飲食的配方及各組分的質(zhì)量百分比為普通鼠飼料50 82% ；膽固醇1 2. 5% ；豬油5 14% ；牛膽酸鈉0. 1 0. 5% ； 蛋黃粉5 25% ；蔗糖5 20%。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述高脂飲食的配方及各組分的質(zhì)量百分比為普通鼠飼料72.9%、膽固醇2%、豬油10%、牛膽酸鈉0. 1<%、蛋黃粉10%及蔗糖5(%。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述附子湯的制備方法為取附子浸泡后， 煎煮兩次，將兩次藥液混合后濃縮，制得附子湯。
6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述附子湯的制備方法為取附子20g，浸泡 30min后，煎煮兩次，將兩次藥液混合后濃縮，制得附子湯的生藥濃度為0. 05 0. 15g/ml。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述附子湯的生藥濃度為0.lg/ml。
8.如權利要求1所述的方法，其特征在于，每日喂食的附子湯的用量為20 30ml/kg。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，每日喂食的附子湯的用量為20ml/kg。
10.如權利要求1所述的方法，其特征在于，每日附子湯喂食SHR大鼠的每日生藥量為 1 4. 5g/kg0
11.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述SHR大鼠為5周齡的SHR大鼠。
12.—種血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型，通過權利要求1-11任一權利要求所述方法制備。
13.如權利要求12所述的動物模型，其特征在于，所述血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型的SHR大鼠為17周齡的SHR大鼠。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)療評價、檢測技術領域，公開了一種血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型及其制備方法，該方法為以高脂飲食持續(xù)喂養(yǎng)SHR大鼠6～16周，并且前4～6周每日還要以附子湯喂食SHR大鼠，制備得到同時體現(xiàn)血瘀、陽亢、痰濁三種中醫(yī)癥候特征的高血壓動物模型。本發(fā)明制備方法工序簡化、控制方便，能夠制備得到具有有用性能的血瘀-陽亢-痰濁高血壓動物模型，使中醫(yī)藥防治高血壓病的研究更有針對性。
文檔編號A23K1/14GK102511447SQ20121000109
公開日2012年6月27日 申請日期2012年1月4日 優(yōu)先權日2012年1月4日
發(fā)明者周訓杰, 姚磊, 徐邦杰, 戴健, 李建華, 桂明泰, 符德玉, 譚圓圓 申請人:上海中醫(yī)藥大學附屬岳陽中西醫(yī)結合醫(yī)院