專利名稱：混合植物蛋白魚飼料及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及魚飼料，尤其涉及由雜柏和多種微生物菌株混合發(fā)酵制成的混合植物蛋白魚飼料及其制備方法，本發(fā)明還涉及該混合植物蛋白魚飼料作為魚飼料的應(yīng)用，屬于水產(chǎn)飼料原料領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
全球?qū)λa(chǎn)品的消費(fèi)逐年増加，膳食結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。而全球海洋捕撈受限，水產(chǎn)品的供給以養(yǎng)殖水產(chǎn)品為主。中國是全球最大的水產(chǎn)養(yǎng)殖大國，水產(chǎn)品總產(chǎn)量占全球的35%，其中養(yǎng)殖水產(chǎn)品產(chǎn)量約占全球的70%。在水產(chǎn)品消費(fèi)需求快速增長的同吋，中國的養(yǎng)殖水資源卻呈下降趨勢。而要滿足水產(chǎn)品需求的增長，必然以人工養(yǎng)殖為主，從而更有效地對現(xiàn)有養(yǎng)殖水資源加以利用。人工養(yǎng)殖依賴于飼料，則加大了對水產(chǎn)飼料的質(zhì)與量的需求。
水產(chǎn)飼料原料主要有動物蛋白原料、植物蛋白原料、淀粉類原料、油脂類原料及礦物質(zhì)類原料等六大模塊。保障飼料質(zhì)量的關(guān)鍵在飼料配方中這六大模塊都能得到保障，尤其是動物蛋白原料模塊得到保障，且各模塊之間的比例協(xié)調(diào)，將飼料質(zhì)量建立在優(yōu)質(zhì)飼料原料的組合上，而不單純關(guān)注飼料中營養(yǎng)指標(biāo)是否達(dá)到飼料標(biāo)準(zhǔn)的要求，更加關(guān)注優(yōu)質(zhì)飼料原料的組合效果。動物蛋白質(zhì)原料氨基酸平衡性好、可消化利用率高，具有良好的養(yǎng)殖效果，是決定水產(chǎn)配合飼料內(nèi)在質(zhì)量的核心因素，所以在配合飼料中要保持一定種類和數(shù)量的動物蛋白質(zhì)原料。在不同動物蛋白原料中，從動物蛋白原料自身的營養(yǎng)價值和對魚類的養(yǎng)殖效果綜合評價，魚粉是最好的動物蛋白質(zhì)原料。魚粉作為優(yōu)質(zhì)蛋白原料的質(zhì)量優(yōu)勢，主要表現(xiàn)在氨基酸平衡性好、消化利用率高、油脂中含有豐富的高不飽和脂肪酸、含有豐富的微量元素和常量元素、對養(yǎng)殖動物適ロ性好且有一定的誘食作用、對養(yǎng)殖動物的健康有良好的維護(hù)作用、含有未知促生長因子等。然而，魚粉屬于資源性產(chǎn)品，其價格受自然資源、市場供求關(guān)系及資本炒作等影響經(jīng)常出現(xiàn)大幅度波動，因而魚粉的使用原則是“在飼料成本可接受的范圍內(nèi)最大限度地使用魚粉”。在水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料的基礎(chǔ)研究、應(yīng)用技術(shù)研究中，魚粉的替代問題是永恒的課題。在實(shí)際飼料配制時，從蛋白質(zhì)原料內(nèi)在質(zhì)量需要方面考慮用什么原料對魚粉進(jìn)行替代(天然植物蛋白來源最豐富也最廉價，但由于營養(yǎng)不夠均衡且存在ー些抗?fàn)I養(yǎng)因子，所以目前研究也只是部分替代)？不同養(yǎng)殖動物對魚粉的剛性需求是多少(這個種類差異太大)以及可以用不同的替代原料替代多少比例的魚粉(不同種類有不同替代比例，實(shí)際上目前的飼料配方中已基本上最大額度上使用各種蛋白和油脂等來替代魚粉，只是未經(jīng)生物發(fā)酵處理的這些原料替代額度有效)？替代魚粉后會出現(xiàn)哪些質(zhì)量問題及其如何避免？從價值體系角度考慮，不同原料對魚粉的性價比如何計算？如何利用性價比確認(rèn)對魚粉的替代實(shí)際和替代比例？魚粉是綜合養(yǎng)殖效果最好的動物蛋白質(zhì)原料，単一原料、単一方面的替代難以達(dá)到理想的效果，需采用多角度、不同方面、系統(tǒng)性的綜合替代方案，針對以上這些問題進(jìn)行長期的、多角度的研究和分析。植物蛋白質(zhì)原料是水產(chǎn)飼料的主要原料，其使用量占配合飼料總量的50%左右。所以，植物蛋白質(zhì)原料的質(zhì)量是決定飼料質(zhì)量的主要因素。豆柏在植物蛋白質(zhì)原料中是品質(zhì)最好的，但近期的研究發(fā)現(xiàn)，在魚類飼料中過量使用豆柏對魚腸道粘膜具有損傷作用，包括對腸道粘膜的結(jié)構(gòu)性和功能性損傷；由于腸道與肝胰臟之間有生理性“腸-肝軸”的存在，當(dāng)腸道過度損傷后，腸道的生理性和結(jié)構(gòu)性屏障破壞，腸道的通透性顯著增加，腸道產(chǎn)生細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)(如腫瘤壞死因子、白細(xì)胞介素)等顯著增加并進(jìn)入血液，腸道細(xì)菌和內(nèi)毒素易位導(dǎo)致魚類肝胰臟及其他器官組織損傷，影響到養(yǎng)殖效果。所以，豆柏在水產(chǎn)飼料中的使用量需控制，在有效使用量下豆柏具有良好的生長和防止效果。在上世紀(jì)90年代，中國使用的是高魚粉、高豆柏的飼料方案，豆柏雖然在植物蛋白原料中是營養(yǎng)水平、營養(yǎng)素平衡方面最好的，但也是價格最高的。在使用棉柏、菜柏組合實(shí)現(xiàn)營養(yǎng)素互補(bǔ)的情況下，降低豆柏的使用量，增加棉柏、菜柏的使用量，騰出飼料配方成本空間，使用一定量的魚粉，采用魚粉+高棉柏高菜柏的飼料配方方案。
小肽也稱寡肽、微肽、短肽，一般由2 3個氨基酸組成。蛋白質(zhì)在消化道中的最終消化產(chǎn)物大部分是小肽而非游離氨基酸，小肽能完整地被吸收并以ニ、三肽形式進(jìn)人液循環(huán)，它們在蛋白質(zhì)營養(yǎng)中有著重要的作用。目前，已有部分小肽類化合物被應(yīng)用于醫(yī)藥、化妝品、保健品、調(diào)味品、動物飼料添加劑等領(lǐng)域，而且其需求量也越來越大。為滿足社會需求、降低產(chǎn)品成本，通過化學(xué)法生產(chǎn)小肽的研究日益增多目前，除了部分小肽本身有其醫(yī)藥、食品等功效外，其他小肽也可作為ー些藥物的修飾結(jié)構(gòu)，從而可以減小毒副作用，提高藥物吸收和藥效利用率雖然活性小肽具有多種生物活性，且高效、安全，但由于純品功能性短肽的生產(chǎn)成本過高，無法廣泛地應(yīng)用到食品及醫(yī)藥領(lǐng)域。因此通過化學(xué)合成和生物轉(zhuǎn)化等手段開發(fā)出新的、高效的產(chǎn)品路線已經(jīng)勢在必行?，F(xiàn)有雜柏發(fā)酵技術(shù)所制備的植物蛋白飼料多采用單菌或兩個菌種混合發(fā)酵處理雜柏，酶系比較單一，發(fā)酵速度慢，豆柏原料成本較高，發(fā)酵后受成本制約，并且，単一的菜柏和棉柏氨基酸不平衡，不利于推廣應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之ー是提供一種由雜柏和多種微生物菌株混合發(fā)酵制成的植物蛋白魚詞料；本發(fā)明的目的之ニ是提供ー種制備所述植物蛋白魚飼料的制備方法；本發(fā)明目的之三是將所述的植物蛋白魚飼料應(yīng)用于魚類養(yǎng)殖。本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的ー種混合植物蛋白魚飼料，包括以下原料發(fā)酵制成菜柏和棉柏的混合物、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtil is)發(fā)酵液、糞腸球菌(E. faecal is)發(fā)酵液、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)發(fā)酵液和無機(jī)鹽。為了達(dá)到更好的效果，按質(zhì)量百分比計，各原料的用量優(yōu)選為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液 8% 12%、幾腸球菌(E. faecalis)發(fā)酵液 12% 18%、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液 8% 12%、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)發(fā)酵液3% 7%、無機(jī)鹽O. 1_1%，余量為菜柏和棉柏的混合物。更優(yōu)選的，各原料的用量為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液10%、糞腸球菌(E. faecalis)發(fā)酵液15%、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液10%、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)發(fā)酵液5%、無機(jī)鹽O. 2%,余量為菜柏和棉柏的混合物?？莶菅挎邨U菌(Bacillus subtilis)能自身合成消化性酶類,如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶等，在消化道中與內(nèi)源酶共同發(fā)揮作用，提高飼料消化率；枯草芽孢桿菌能合成多種維生素，提高動物體內(nèi)干擾素和巨噬細(xì)胞的活性；枯草芽孢桿菌能刺激動物免疫器官的生長發(fā)育，激活淋巴細(xì)胞，提高免疫球蛋白和抗體水平，增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫功能，提高群體免疫力。黑曲霉(Aspergillus niger)具有多種活性較強(qiáng)的酶系,如CX酶、淀粉酶、酸性蛋白酶等，可將原料中的纖維素等大分子化合物降解轉(zhuǎn)化為動物易消化利用的養(yǎng)分，并為白地霉、酵母菌提供必需的糖、氨基酸等。釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)含有豐富的蛋白質(zhì)、B族維生素、氨基酸等物質(zhì)，用作魚類飼料的蛋白質(zhì)補(bǔ)充物，它能促進(jìn)魚類的生長發(fā)育，縮短飼養(yǎng)期，井能增強(qiáng)魚類的抗病能力。其中，所述的無機(jī)鹽優(yōu)選為磷酸ニ氫鉀；所述菜柏和棉柏的混合物中菜柏和棉柏的質(zhì)量比優(yōu)選為4-6 4-6 ;更優(yōu)選為5:5。本發(fā)明中所用到的枯草芽孢桿菌、糞腸球菌、黑曲霉和釀酒酵母都可通過商業(yè)途徑購買得到。本領(lǐng)域技術(shù)人員可按照菌種供應(yīng)商所提供的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件(也按照各種文獻(xiàn)中所公開的制備方法)，制備得到枯草芽孢桿菌發(fā)酵液、糞腸球菌發(fā)酵液、黑曲霉發(fā)酵液和釀酒酵母發(fā)酵液；例如，采用三級培養(yǎng)方法，即種子培養(yǎng)、ニ級液體擴(kuò)大培養(yǎng)和液體發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到相應(yīng)的發(fā)酵液；其中，在液體發(fā)酵培養(yǎng)時，可以采用發(fā)酵罐發(fā)酵或采用搖瓶培養(yǎng)的方式進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)。三級培養(yǎng)所用到的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)條件均已在文獻(xiàn)中公開，作為參考，其中，所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基的組成成分包括碳源和氮源；所述的碳源包括但不限于葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、可溶性淀粉或玉米粉中的任ー種或多種；所述的氮源包括但不限于硝酸鈉、硫酸銨、蛋白胨或黃豆粉中的任ー種或多種。本發(fā)明的另ー個目的是提供ー種制備所述混合植物蛋白魚飼料的方法，包括以下步驟各原料混合均勻得到發(fā)酵物料；將發(fā)酵物料堆積發(fā)酵，即得。為了獲得更好的發(fā)酵效果，所述發(fā)酵方法中，發(fā)酵物料的堆高優(yōu)選為40-60cm，更優(yōu)選為50cm ;將4種發(fā)酵液接種菜柏和棉柏的混合物后每6小時翻動一次；所述的發(fā)酵時間優(yōu)選為48-82小時，更優(yōu)選為72小時?，F(xiàn)有雜柏發(fā)酵技術(shù)多采用單菌或兩個菌種混合發(fā)酵處理單ー的柏類，酶系比較單一，發(fā)酵速度慢，豆柏原料成本較高，發(fā)酵后受成本制約，推廣較難，而單一的菜柏和棉柏氨基酸不平衡，不利于推廣，本發(fā)明用枯草芽孢桿菌、糞腸球菌、黑曲霉、釀酒酵母四種菌混合發(fā)酵，酶系全面，發(fā)酵效率和轉(zhuǎn)化高，抗雜菌能力強(qiáng)。將菜柏與豆柏混合后進(jìn)行發(fā)酵處理，物料氨基酸更為平衡，原料成本也低于豆柏成本。本發(fā)明混合植物蛋白魚飼料的小肽和游離氨基酸得率分別可達(dá)到15. 5%和
O.94%，植酸、單寧和棉酚去除率分別能達(dá)到87%，78. 2%和100%。魚飼喂試驗(yàn)結(jié)果表明，用本發(fā)明混合植物蛋白魚飼料部分替代飼料中魚粉或菜柏后，能夠明顯促進(jìn)魚的生長。 本發(fā)明混合植物蛋白能夠作為魚飼料中的蛋白原料，部分或全部替換魚飼料中的動物蛋白飼料或植物蛋白飼料。


圖I本發(fā)明混合植物蛋白魚飼料的制備エ藝流程圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)ー步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會隨著描述而更為清楚。但這些實(shí)施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。微生物菌種I、黑曲霉、糞腸球菌和釀酒酵母購于中國微生物菌種保藏管理委員會農(nóng)業(yè)微生物中心，黑曲霉編號為ACCC 31494，釀酒酵母編號為ACCC 20064，糞腸球菌編號為ACCC10180 ；
·
2、枯草芽孢桿菌購于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，商業(yè)編號為1. 2180。預(yù)備實(shí)施例I枯草芽孢桿菌發(fā)酵液的制備I、種子培養(yǎng)將枯草芽孢桿菌菌種活化后，進(jìn)行搖瓶種子培養(yǎng)；搖瓶種子培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成(按質(zhì)量百分比計)20% 土豆+2%蔗糖PDA培養(yǎng)基；培養(yǎng)條件150r/min，37°C搖床培養(yǎng)18小時。2、ニ級液體擴(kuò)大培養(yǎng)液體發(fā)酵培養(yǎng)基3%玉米粉，2%氨基酸粉、O. 5%磷酸ニ氫鉀、1%氯化鈣、1%蔗糖；將上述液體培養(yǎng)基發(fā)酵罐中在位滅菌；液體擴(kuò)大培養(yǎng)條件發(fā)酵溫度為37°C，其通氧量可以是100_300L/h，起始pH 7. 0-7.5 ;轉(zhuǎn)速150-200r/min ;罐壓0. 6-0. 8Mpa，發(fā)酵培養(yǎng)24小時，一般有效活菌數(shù)達(dá)109CFU/ML 即可。3、液體發(fā)酵培養(yǎng)液體發(fā)酵培養(yǎng)基3%玉米粉，2%氨基酸粉、O. 5%磷酸ニ氫鉀、1%氯化鈣、1%蔗糖；將上述液體培養(yǎng)基發(fā)酵罐中在位滅菌；液體發(fā)酵條件發(fā)酵溫度為37°C，其通氧量可以是100_300L/h，起始pH :7. 0-7. 5 ；轉(zhuǎn)速150-200r/min ;罐壓0. 6-0. 8Mpa，發(fā)酵培養(yǎng)24小時，一般有效活菌數(shù)達(dá)109CFU/ML即可。預(yù)備實(shí)施例2糞腸球菌發(fā)酵液的制備I、種子培養(yǎng)將糞腸球菌菌種活化后，進(jìn)行搖瓶種子培養(yǎng)；搖瓶種子培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成(按質(zhì)量百分比計)培養(yǎng)基組成葡萄糖2%，蛋白胨I %，酵母膏O. 5% ;培養(yǎng)條件150r/min，32°C搖床培養(yǎng)18小時。
2、ニ級液體擴(kuò)大培養(yǎng)液體發(fā)酵培養(yǎng)基3%豆柏粉、3%氨基酸粉、O. 5%磷酸氫ニ鉀、2%氧化鈣；將上述液體培養(yǎng)基發(fā)酵罐中在位滅菌；液體擴(kuò)大培養(yǎng)條件發(fā)酵溫度為32°C，其通氧量可以是50_100L/h，起始pH: 7.5-8. O ;轉(zhuǎn)速150-200r/min ;罐壓0. 1-0. 3Mpa，發(fā)酵培養(yǎng)24小時，一般有效活菌數(shù)達(dá)109CFU/ML 即可。3、液體發(fā)酵培養(yǎng)液體發(fā)酵培養(yǎng)基3%豆柏粉、3%氨基酸粉、O. 5%磷酸氫ニ鉀、2%氧化鈣；將上述液體培養(yǎng)基發(fā)酵罐中在位滅菌；液體發(fā)酵條件發(fā)酵溫度為32°C，其通氧量可以是50_100L/h，起始pH :7. 5-8. O ；轉(zhuǎn)速150-200r/min ;罐壓0. 1-0. 3Mpa，發(fā)酵培養(yǎng)24小時，一般有效活菌數(shù)達(dá)109CFU/ML即可。預(yù)備實(shí)施例3黑曲霉發(fā)酵液的制備I、種子培養(yǎng)將黑曲霉菌種活化后，進(jìn)行搖瓶種子培養(yǎng)；搖瓶種子培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成(按質(zhì)量百分比計)20% 土豆+2%蔗糖PDA培養(yǎng)基；培養(yǎng)條件150r/min，28°C搖床培養(yǎng)18小時。2、ニ級液體擴(kuò)大培養(yǎng)液體發(fā)酵培養(yǎng)基10%馬鈴薯、O. 5%檸檬酸ニ銨、O. 2%氯化鎂、2%蔗糖；將上述液體培養(yǎng)基發(fā)酵罐中在位滅菌；ニ級液體擴(kuò)大條件發(fā)酵溫度為28°C，其通氧量可以是100_300L/h，起始pH 7. 0-7. 5 ;轉(zhuǎn)速150-200r/min ;罐壓0. 6-0. 8Mpa，發(fā)酵培養(yǎng) 36 小時，一般鏡檢孢子濃度達(dá)到IO6個/ml以上即可。3、液體發(fā)酵培養(yǎng)液體發(fā)酵培養(yǎng)基10%馬鈴薯、O. 5%檸檬酸ニ銨、O. 2%氯化鎂、2%蔗糖；將上述液體培養(yǎng)基發(fā)酵罐中在位滅菌；液體發(fā)酵條件發(fā)酵溫度為28°C，其通氧量可以是100_300L/h，起始pH :7. 0-7. 5 ；轉(zhuǎn)速150-200r/min ;罐壓0. 6-0. 8Mpa，發(fā)酵培養(yǎng)36小時，一般鏡檢孢子濃度達(dá)到IO6個/ml以上即可。預(yù)備實(shí)施例4釀酒酵母發(fā)酵液的制備I、種子培養(yǎng)將釀酒酵母菌種活化后，進(jìn)行搖瓶種子培養(yǎng)；搖瓶種子培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成(按質(zhì)量百分比計)20% 土豆+2%蔗糖PDA培養(yǎng)基；培養(yǎng)條件150r/min，32°C搖床培養(yǎng)18小時。2、ニ級液體擴(kuò)大培養(yǎng)液體發(fā)酵培養(yǎng)基10%馬鈴薯、2%氨基酸粉、2%葡萄糖；將上述液體培養(yǎng)基發(fā)酵罐中在位滅菌；
ニ級液體擴(kuò)大條件發(fā)酵溫度為32°C，其通氧量可以是100_300L/h，起始pH
6.5-7. O ;轉(zhuǎn)速150-200r/min ;罐壓0. 6-0. 8Mpa，發(fā)酵培養(yǎng)36小時，一般有效活菌數(shù)達(dá)2X108CFU/ML 即可。3、液體發(fā)酵培養(yǎng) 液體發(fā)酵培養(yǎng)基10%馬鈴薯、2%氨基酸粉、2%葡萄糖；將上述液體培養(yǎng)基發(fā)酵罐中在位滅囷；液體發(fā)酵條件發(fā)酵溫度為32°C，其通氧量可以是100_300L/h，起始pH :6. 5-7. O ；轉(zhuǎn)速150-200r/min ;罐壓0· 6-0. 8Mpa，發(fā)酵培養(yǎng)36小時，一般有效活菌數(shù)達(dá)2 X IO8CFU/ML即可。。實(shí)施例I混合植物蛋白魚飼料的制備及檢測(I)按以下重量稱取各原料(単位Kg):枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液100、糞腸球菌(E. faecalis)發(fā)酵液150、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液100、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)發(fā)酵液50、無機(jī)鹽2,菜柏和棉柏的混合物598 (菜柏棉柏=5 5)；( 2 )將4種發(fā)酵液接種菜柏和棉柏的混合物后，各原料混合均勻，將發(fā)酵物料堆積發(fā)酵，堆高為50cm ;接種后每6小時翻動一次；發(fā)酵72小時，將發(fā)酵產(chǎn)物干燥，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備混合植物蛋白魚飼料產(chǎn)物的小肽得率為15. 5%，游離氨基酸得率為O. 94% ;植酸、單寧和棉酚的去除率分別為87%，78. 2%和100%。實(shí)施例2混合植物蛋白魚飼料的制備及檢測(I)按以下重量稱取各原料(単位Kg):枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液80、糞腸球菌(E. faecalis)發(fā)酵液120、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液80、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)發(fā)酵液30、無機(jī)鹽I,菜柏和棉柏的混合物689 (菜柏棉柏=4 6)；( 2 )將4種發(fā)酵液接種菜柏和棉柏的混合物后，各原料混合均勻，將發(fā)酵物料堆積發(fā)酵，堆高為40cm ;接種后每5小時翻動一次；發(fā)酵78小時，將發(fā)酵產(chǎn)物干燥，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備混合植物蛋白魚飼料產(chǎn)物的小肽得率為14. 6%，游離氨基酸得率為O. 91% ;植酸、單寧和棉酚的去除率分別為86%，77. 8%和98%。實(shí)施例3混合植物蛋白魚飼料的制備及檢測(I)按以下重量稱取各原料(単位Kg):枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液120、糞腸球菌(E. faecalis)發(fā)酵液180、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液120、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)發(fā)酵液70、無機(jī)鹽5,菜柏和棉柏的混合物505 (菜柏棉柏=6 4)； ( 2 )將4種發(fā)酵液接種菜柏和棉柏的混合物后，各原料混合均勻，將發(fā)酵物料堆積發(fā)酵，堆高為60cm ;接種后每7小時翻動一次；發(fā)酵68小時，將發(fā)酵產(chǎn)物干燥，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備混合植物蛋白魚飼料產(chǎn)物的小肽得率為14. 9%，游離氨基酸得率為O. 92% ;植酸、單寧和棉酚的去除率分別為86%，77. 5%和98%。實(shí)施例4混合植物蛋白魚飼料的制備及檢測(I)按以下重量稱取各原料(単位Kg):枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液80、糞腸球菌(E. faecalis)發(fā)酵液180、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液120、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)發(fā)酵液30、無機(jī)鹽2,菜柏和棉柏的混合物588 (菜柏棉柏=5 5)；( 2 )將4種發(fā)酵液接種菜柏和棉柏的混合物后，各原料混合均勻，將發(fā)酵物料堆積發(fā)酵，堆高為60cm ;接種后每8小時翻動一次；發(fā)酵80小時，將發(fā)酵產(chǎn)物干燥，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備混合植物蛋白魚飼料產(chǎn)物的小肽得率為14. 1%，游離氨基酸得率為O. 86% ;植酸、單寧和棉酚的去除率分別為86. 3%，77. 1%和98. 3%。試驗(yàn)例I本發(fā)明混合植物蛋白魚飼料飼喂草魚試驗(yàn)I、供試飼料實(shí)施例1-4所制備的混合植物蛋白魚飼料；2、試驗(yàn)方法以飼喂全菜柏組作為對照組；另設(shè)三組試驗(yàn)組試驗(yàn)I組以供試飼料30%代替菜柏，試驗(yàn)2組以供試飼料50%代替菜柏，試驗(yàn)3組以供試飼料80%代替菜柏；各組飼料配方見表I。飼料原料粉碎至80目后經(jīng)雙螺桿制粒機(jī)制成2. Omm顆粒飼料，密封保存。表I草魚飼養(yǎng)日糧配方
權(quán)利要求
1.ー種混合植物蛋白魚飼料，其特征在于，包括以下原料發(fā)酵制成菜柏和棉柏的混合物、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液、糞腸球菌(E. faecalis)發(fā)酵液、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)發(fā)酵液和無機(jī)鹽。
2.按照權(quán)利要求I所述的混合植物蛋白魚飼料，其特征在于，按質(zhì)量百分比計，各原料的用量為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液8% 12%、糞腸球菌(E. faecalis)發(fā)酵液 12% 18%、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液 8% 12%、釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)發(fā)酵液3% 7%、無機(jī)鹽O. 1-1%,余量為菜柏和棉柏的混合物。
3.按照權(quán)利要求I所述的混合植物蛋白魚飼料，其特征在于，按質(zhì)量百分比計，各原料的用量為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液10%、糞腸球菌(E. faecalis)發(fā)酵液15%、黑曲霉(Aspergillus niger)發(fā)酵液 10%、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)發(fā)酵液5%、無機(jī)鹽O. 2%。
4.按照權(quán)利要求1-3任何一項所述的混合植物蛋白魚飼料，其特征在于，所述的無機(jī)鹽為磷酸ニ氫鉀。
5.按照權(quán)利要求1-3任何一項所述的混合植物蛋白魚飼料，其特征在于所述菜柏和棉柏的混合物中菜柏和棉柏的質(zhì)量比為4-6 4-6;優(yōu)選為5 5。
6.ー種制備權(quán)利要求1-3任何一項所述的混合植物蛋白魚飼料的方法，其特征在干，包括各原料混合均勻得到發(fā)酵物料；將發(fā)酵物料堆積發(fā)酵，干燥，即得。
7.按照權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于將4種發(fā)酵液接種菜柏和棉柏的混合物后每5-7小時翻動一次，優(yōu)選的，將4種發(fā)酵液接種菜柏和棉柏的混合物后每6小時翻動一次。
8.按照權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于發(fā)酵物料的堆高為40-60cm，優(yōu)選為50cmo
9.按照權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述的發(fā)酵時間為48-82小吋，優(yōu)選為72小吋。
10.權(quán)利要求1-3任何一項所述的混合植物蛋白魚飼料作為魚飼料的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了混合植物蛋白魚飼料及其制備方法和應(yīng)用，包括以下原料發(fā)酵制成菜粕和棉粕的混合物、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液、糞腸球菌發(fā)酵液、黑曲霉發(fā)酵液、釀酒酵母發(fā)酵液和無機(jī)鹽。本發(fā)明用枯草芽孢桿菌、糞腸球菌、黑曲霉、釀酒酵母四種菌混合發(fā)酵，酶系全面，發(fā)酵效率和轉(zhuǎn)化高，抗雜菌能力強(qiáng)。將菜粕與豆粕混合后進(jìn)行發(fā)酵處理，物料氨基酸更為平衡，原料成本也低于豆粕成本。本發(fā)明混合植物蛋白魚飼料的小肽和游離氨基酸得率分別可達(dá)到15.5%和0.94%，植酸、單寧和棉酚去除率分別能達(dá)到87%，78.2%和100%。魚飼喂試驗(yàn)結(jié)果表明，用本發(fā)明混合植物蛋白魚飼料部分替代飼料中魚粉或菜粕后，能夠明顯促進(jìn)魚的生長。
文檔編號A23K1/18GK102669483SQ201210188468
公開日2012年9月19日 申請日期2012年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月9日
發(fā)明者凌華云, 劉全禮, 曹芬, 蔡君, 谷序文 申請人:武漢施瑞福生物技術(shù)有限公司