專利名稱:人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及人工培育昆蟲(chóng)的工藝,尤其是人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝。
背景技術(shù):
水蛭為水蛭科動(dòng)物螞蟥、柳葉螞蟥及水蛭的全體,水蛭辛、咸、苦、平、有毒、入肝經(jīng)。水蛭的藥用品種即有不吸哺乳動(dòng)物血液的寬體金線蛭和尖細(xì)金線蛭,也包括吸食哺乳動(dòng)物血液的日本醫(yī)蛭、湖北牛蛭及菲牛蛭等多個(gè)品種。目前國(guó)際上將吸食吸哺乳動(dòng)物血液、其唾液腺分泌物中含有水蛭素等多種生物活性物質(zhì),并且在醫(yī)藥上具有廣闊應(yīng)用前景的蛭類動(dòng)物統(tǒng)稱為醫(yī)學(xué)蛭類。 目前蛭類藥物已用于抗血小板聚集、抗半乳糖白內(nèi)障、抗腦血栓、高血壓、冠心病、治療靜脈曲張、愈合皮膚等方面。CN1844911公開(kāi)了一種水蛭指紋圖譜的建立方法和水蛭藥材的鑒別方法,用液相色譜儀檢測(cè)并建立標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。CN101245110公開(kāi)了重組白細(xì)胞抑制因子和水蛭原嵌合蛋白及其藥物組合物,其cDNA基因含有該cDNA基因的重組載體,用該載體轉(zhuǎn)化的微生物,以及含有該重組白細(xì)胞抑制因子和水蛭原嵌合蛋白的藥物組合物。CN101204402公開(kāi)了一種水蛭的真空冷凍干燥工藝,將水蛭預(yù)凍、切割、真空冷凍干燥。CN1883510公開(kāi)了一種以吸血水蛭為原料制備水蛭素的方法與應(yīng)用,該方法包括水蛭制漿,配制懸浮液和干燥三個(gè)步驟。水蛭作為藥材應(yīng)用范圍越來(lái)越廣,水蛭中除水蛭素外,還有水蛭透明質(zhì)酸酶、前列腺素等藥用成份,但水蛭中含量較少,提取和純化過(guò)程非常困難,重組水蛭素及轉(zhuǎn)基因水蛭素技術(shù)成本較高,制約了水蛭的應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種人工培育水蛭蛆蟲(chóng)工藝,以吸食哺乳動(dòng)物血液和不吸食哺乳動(dòng)物血液的水蛭為原料,通過(guò)溫和的生物處理方法,提高了水蛭應(yīng)用效率和應(yīng)用范圍。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案解決的(I)水蛭粉碎至粉末狀;(2)與水混合攪拌成水蛭糊狀物;(3)水蛭糊狀物高溫殺菌;(4)谷物糠及水蛭糊狀物用中藥處理,并生成蛆卵;(5)配制幼蛆培養(yǎng)液進(jìn)行幼蛆培殖;(6)配制蛆蟲(chóng)培養(yǎng)液進(jìn)行蛆蟲(chóng)培育;(7)蛆蟲(chóng)分離、清洗、滅活;(8)蛆蟲(chóng)干燥;(9)蛆蟲(chóng)包裝。具體步驟如下
(1)水蛭粉碎至粉末狀,
(2)與水混合攪拌成水蛭糊狀物;
(3)水蛭糊狀物高溫殺菌;
(4)谷物糠麩及水蛭糊狀物用中藥處理形成蟲(chóng)卵培養(yǎng)液,所述蟲(chóng)卵培養(yǎng)液由IOOg谷物糠麩、水蛭糊狀物O. 2-50g、丁香粉0-10g、蒼術(shù)粉0_5g、藿香0-8g、0-20g木香粉和0-5. Og草烏粉混合而成,保持溫度30-55°C、時(shí)間48-240h,生成蟲(chóng)卵;(5)幼蛆培殖配制幼蛆培養(yǎng)液,所述幼蛆培養(yǎng)液由I-IOOg水蛭糊狀物、0-200g蛋白腺、5_10g酵母抽提粉、O-IOg木香粉、O-IOg霍香、0_30g蒼術(shù)粉、0_20g中藥丁香粉、2-10gNaCl或KCl、0-100g大豆分離蛋白、O. 5-1. OL純凈水混合而成,分裝于三角燒瓶中,滅菌后分別裝入前面培殖的蟲(chóng)卵,搖床l-100r/min,培養(yǎng)12_48h,生成含水蛭幼蛆的培養(yǎng)液;
(6)蛆蟲(chóng)培育配制蛆蟲(chóng)培育液,所述蛆蟲(chóng)培育液由500-3000g水蛭粉、IO-SOg酵母抽提粉、O. 01-0. lgNaCl、0-l. OgKCl、0-0· 8gMgCl2、0. 01-0. 08gCaCl2、0-0. 5gMgS04、20-100gNa2HP04、0-5. OgK2SO4,0-5. Og尿素混合均勻并加入10-15L純凈水而成,加入含幼蛆培養(yǎng)液進(jìn)行培育,培育參數(shù)pH= 5. 5-8,攪拌速度l-30r/min,溫度25-55°C,通氣量5. 0-20L/min,時(shí)間72_168h,水蛭蛆蟲(chóng)由乳白色變?yōu)槿辄S色,培育過(guò)程完成;
(7)將培育液和培育出的水蛭蛆蟲(chóng)放入分離機(jī)中進(jìn)行蟲(chóng)液分離,用純凈水洗滌水蛭蛆蟲(chóng),并用熱水噴淋滅活;
(8)滅活的水蛭蛆蟲(chóng)干燥,得成品;
(9)蛆蟲(chóng)包裝。水蛭蛆蟲(chóng)為乳白色,干燥后含蛋白質(zhì)59-61%、脂肪3. 5-3. 9%、灰分6_7%、碳水化合物11-12%。本發(fā)明培育的水蛭蛆蟲(chóng)成分明確并且一致性好,工藝過(guò)程簡(jiǎn)練,易于控制,節(jié)省能源,適應(yīng)工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述。實(shí)施例I :
(1)IOOOg水蛭用粉碎機(jī)以250-1250r/min粉碎至O. 5-0. 05mm,并用O. 2-0. 05mm孔徑篩子篩選,收集粉末狀物料;
(2)粉末狀物料加入1-50L純凈水?dāng)嚢杈鶆虺珊隣钗铮?br>
(3)糊狀物在80至120°C殺菌10-30min,然后降溫至30°C備用;
(4)取IOOg小米糠、O.2-0. 5g水蛭糊狀物,加入中藥10-20g木香粉和I. 0-5. Og草烏粉混合均勻,噴灑10-50ml純凈水,保持溫度30至55°C、時(shí)間48_240h,生出蟲(chóng)卵;
(5)用孔徑O.1-2. Omm篩子篩出蟲(chóng)卵備用;
(6)取10-200g蛋白胨、l-5g水蛭糊狀物、5-10g酵母抽提粉、2-10g中藥木香粉、2-10gNaCl,加O. 5-1. OL純凈水混合成為幼蛆培養(yǎng)液,分裝于16-20個(gè)三角燒瓶中,80-120 °C滅菌10-30min,冷卻到20-40 V,分別裝入O. 2-1. Og前面培植的蟲(chóng)卵,搖床
l-100r/min,培養(yǎng) 12_48h,生成幼蛆;
(7)配制培育液,取500-3000g水蛭粉、10-80g酵母抽提粉、O.1-1. OgKCl,O. 01-0. lgNaCl、20-100gNa2HP04、0. 01-0. 05gCaCl2、0. lg-0. 5gMgS04,攪拌均勻并加入10-15L純凈水成為蛆蟲(chóng)培養(yǎng)液,加熱80-100°C,時(shí)間10_60min,冷卻至25_35°C,加入單獨(dú)100-120°C滅菌10-20min的葡萄糖50_100g,加入含幼蛆培養(yǎng)液1500-2500ml進(jìn)行培育;培育水蛭蛆蟲(chóng)由乳白色變?yōu)槿辄S色,培育過(guò)程完成;
培育參數(shù)PH=5. 5-7,攪拌速度l-20r/min,溫度25-55°C,通氣量7. 0-20L/min,時(shí)間72-168h ;
(8)將培育液及培育出的水蛭蛆蟲(chóng)一起放入分離機(jī)中以轉(zhuǎn)速550-1250r/min蟲(chóng)液分離;
(9)用50-100L純凈水洗滌水蛭蛆蟲(chóng)2-3次,并用80-100°C熱水噴淋滅活I(lǐng)-IOmin;
(10)滅活的水蛭蛆蟲(chóng)用真空冷凍干燥機(jī)在溫度-30至30°C、真空度100-500kPa、時(shí)間5-24h干燥至含水分5-8%得到成品;
(11)包裝。實(shí)施例2:
(1)IOOOg水蛭用粉碎機(jī)以250-1250r/min粉碎至O. 05-0. 5mm并用O. 05-0. 2mm孔徑篩子篩選,收集粉末狀物料;
(2)粉末狀物料加入10-50L純凈水?dāng)嚢杈鶆虺珊隣钗铮?3)糊狀物在80-120°C殺菌10-30min然后降溫至25_30°C備用;
(4)取IOOg麥麩、30-50g水蛭糊狀物,加入中藥藿香2-8g、蒼術(shù)2_5g混合均勻、噴灑10-50ml純凈水,保持溫度25-55°C,時(shí)間48_240h,生成蟲(chóng)卵;
(5)用孔徑O.1-2. Omm篩子篩出蟲(chóng)卵備用;
(6)取50-100g水蛭糊狀物、5-10g酵母抽提粉、2-10g中藥藿香、2-5g中藥蒼術(shù)、2-10gKCl,加入O. 5-1. OL純凈水混合成為幼蛆培養(yǎng)液,分裝于16-20個(gè)三角燒瓶中,80-120°C滅菌10-30min,冷卻至20_40°C,每瓶分別裝入O. 2-1. Og前面培植的蟲(chóng)卵,搖床10-100次/min,培育18_48h,生成幼蛆;
(7)10-15L去離子水中加入1500g-2000g水蛭粉,20g-80g酵母抽提粉、2.0-5. OgK2SO4,O. 01-0. 05gNaCl、20-100gNa2HP04、0. 01-0. 08gCaCl2、0. 1-0. 8gMgCl2,攪拌均勻成為蛆蟲(chóng)培育液,用10000-15000高斯磁感強(qiáng)度處理培養(yǎng)液3-5min,處理3_5次加入含幼蛆培養(yǎng)液1500-2500ml進(jìn)行培育;
培育參數(shù)PH=5. 5-8,攪拌速度l_30r/min,溫度25-35 °C,通氣量5. 0_20L/min,時(shí)間72-168h ;
培育水蛭蛆蟲(chóng)由乳白色變?yōu)槿辄S色,培育過(guò)程完成;
(8)將培育液和培育出的水蛭蛆蟲(chóng)一起放入分離機(jī)中以轉(zhuǎn)速550-1250r/min蟲(chóng)液分
離;
(9)用50-100L純凈水洗滌水蛭蛆蟲(chóng)2-3次,并用80-100°C熱水噴淋滅活2.O-IOmin ;
(10)滅活的水蛭蛆蟲(chóng)用真空冷凍干燥機(jī)在溫度-30-30°C、真空度100-500kPa、時(shí)間5-24h干燥至含水分5-8%得到成品;
(11)蛆蟲(chóng)包裝。實(shí)施例3:
(1)IOOOg水蛭用粉碎機(jī)以250-1250r/min粉碎至O. 05-0. 5mm并且用O. 05-0. 2mm孔徑篩子篩選,收集粉末狀物料;
(2)粉末狀物料加入1-50L純凈水?dāng)嚢杈鶆虺珊隣钗铮?br>
(3)糊狀物在80-120°C殺菌10-30min,然后降溫至25_30°C備用;
(4)取IOOg蕎麥麩皮加入水蛭糊狀物5-10g、中藥丁香粉5-10g、蒼術(shù)粉2-5g混合均勻,噴灑10-50ml純凈水,保持溫度25-55°C,時(shí)間48_240h,生成蟲(chóng)卵;
(5)用孔徑O.1-2. Omm篩子篩出蟲(chóng)卵備用;
(6)取50-100g大豆分離蛋白、5-10g酵母抽提粉、20-50g水蛭糊狀物、15-20g中藥丁香粉、20-30g蒼術(shù)粉、2-10gNaCl,加入O. 5-1. OL純凈水混合成為幼蛆培養(yǎng)液,分裝于16-20個(gè)三角燒瓶中,80-120°C滅菌10-30min,冷卻至20_40°C,每瓶分別裝入O. 2-1. Og前面培養(yǎng)的蟲(chóng)卵,搖床10-100次/min,培養(yǎng)12_48h,生成幼蛆;
(7)取1500-2000g 水蛭粉、10-80g 酵母抽提粉、2. 0-5. Og 尿素、O. 01-0. 05gNaCl、20-100gNaH2P04、0. 01-0. 08gCaCl2、0. 1-0. 8gMgCl2 攪拌均勻并加入 10-15L 純凈水成為蛆蟲(chóng)培育液,用超聲波2450-5000kHZ、l-10kw、處理培養(yǎng)液10_30min,然后加入含幼蛆培養(yǎng)液1500-2500ml進(jìn)行培育,培育水蛭蛆蟲(chóng)由乳白色變?yōu)槿辄S色,培育過(guò)程完成;
培育參數(shù)PH=5. 5-8,攪拌速度l_30r/min,溫度25-35°C,通氣量5. 0_20L/min,時(shí)間72-168h ; (8)將培育液及培育出的水蛭蛆蟲(chóng)一起放入分離機(jī)中,以轉(zhuǎn)速550-1250r/min蟲(chóng)液分
離;
(9)用50-100L純凈水洗滌水蛭蛆蟲(chóng)2-3次,并用80-100°C熱水噴淋滅活2.O-IOmin ;
(10)滅活的水蛭蛆蟲(chóng)用真空冷凍干燥機(jī)在溫度-30-30°C、真空度100-500kPa、時(shí)間5-24h干燥至含水分5-8%得到成品;
(11)蛆蟲(chóng)包裝。實(shí)施例4:
(1)IOOOg水蛭用粉碎機(jī)以250-1250r/min粉碎至O. 05-0. 5mm并用O. 05-0. 2mm孔徑篩子篩選,收集粉末狀物料;
(2)粉末狀物料加入1-50L純凈水?dāng)嚢杈鶆虺珊隣钗铮?br>
(3)糊狀物在80-120°C殺菌10-30min,然后降溫至25_30°C備用;
(4)取IOOg瓊脂加入水蛭糊狀物5-10g、中藥藿香粉2-8g、木香粉2-6g混合均勻,噴灑10-50ml純凈水,保持溫度25-55°C,時(shí)間48_240h,生成蟲(chóng)卵;
(5)用孔徑O.1-2. Omm篩子篩出蟲(chóng)卵備用;
(6)取50-100g蛋白胨、5-10g酵母抽提粉、20-50g水蛭糊狀物、2-10gNaCl,加O.5-1. OL純凈水混合成為幼蛆培養(yǎng)液,分裝于16-20個(gè)三角燒瓶中,80-120°C滅菌10_30min,冷卻到20-40°C,分別裝入O. 2-1. Og前面培養(yǎng)的蟲(chóng)卵,搖床1-10次/min,培養(yǎng)12_48h,生成幼蛆;
(7)配制培育液,取500-3000g水蛭粉、10-80g酵母抽提粉、O.1-1. OgKCl,O. 01-0. lgNaCl、20-100gNaH2P04、0. 01-0. 05gCaCl2、0. 1-0. 5gMgS04 攪拌均勻并加入 10-15L純凈水成為蛆蟲(chóng)培育液,用微波頻率2450-915MHZ、功率O. 5-2. 5kw處理培育液2_10min,加入含幼蛆培養(yǎng)液1500-2500ml進(jìn)行培育,
培育參數(shù)PH=5. 5-8、攪拌速度l_30r/min、溫度25-35 °C、通氣量5_20L/min、時(shí)間72-168h ;
培育水蛭蛆蟲(chóng)由乳白色變?yōu)槿辄S色培育過(guò)程完成;
(8)將培育液及培育出的水蛭蛆蟲(chóng)一起放入分離機(jī)中以轉(zhuǎn)速550-1250r/min蟲(chóng)液分
離;
(9)用50-100L純凈水洗滌水蛭蛆蟲(chóng)2-3次,并用80-100°C熱水噴淋滅活2.O-IOmin ;
(10)滅活的水蛭蛆蟲(chóng)用真空冷凍干燥機(jī)在溫度-30-30°C、真空度100-500kpa、時(shí)間5-24h干燥至水蛭蛆蟲(chóng)含水分5-8%得成品;
(11)蛆蟲(chóng)包裝。
權(quán)利要求
1.人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝,其特征在于所述工藝包括如下步驟 (1)水蛭粉碎至粉末狀, (2)與水混合攪拌成水蛭糊狀物; (3)水蛭糊狀物高溫殺菌; (4)谷物糠麩及水蛭糊狀物用中藥處理形成蟲(chóng)卵培養(yǎng)液,所述蟲(chóng)卵培養(yǎng)液由IOOg谷物糠麩、水蛭糊狀物0. 2-50g、丁香粉0-10g、蒼術(shù)粉0_5g、藿香0-8g、0-20g木香粉和0_5. Og草烏粉混合而成,保持溫度30-55°C、時(shí)間48-240h,生成蟲(chóng)卵; (5)幼蛆培殖配制幼蛆培養(yǎng)液,所述幼蛆培養(yǎng)液由I-IOOg水蛭糊狀物、0-200g蛋白腺、5-10g酵母抽提粉、O-IOg木香粉、O-IOg霍香、0_30g蒼術(shù)粉、0_20g中藥丁香粉、2-10gNaCl或KCl、0-100g大豆分離蛋白、0. 5_1. OL純凈水混合而成,分裝于三角燒瓶中,滅菌后分別裝入前面培殖的蟲(chóng)卵,搖床l-100r/min,培養(yǎng)12_48h,生成含水蛭幼蛆的培養(yǎng)液; (6)蛆蟲(chóng)培育配制蛆蟲(chóng)培育液,所述蛆蟲(chóng)培育液由500-3000g水蛭粉、IO-SOg酵母抽提粉、0. 01-0. lgNaCl、0-l. OgKCl、0-0. 8gMgCl2、0. 01-0. 08gCaCl2、0-0. 5gMgS04、20-100gNa2HP04、0-5. OgK2SO4,0-5. Og尿素混合均勻并加入10-15L純凈水而成,加入含幼蛆培養(yǎng)液進(jìn)行培育,培育參數(shù)pH=5. 5-8,攪拌速度l_30r/min,溫度25-55 °C,通氣量5. 0-20L/min,時(shí)間72_168h,水蛭蛆蟲(chóng)由乳白色變?yōu)槿辄S色,培育過(guò)程完成; (7)將培育液和培育出的水蛭蛆蟲(chóng)放入分離機(jī)中進(jìn)行蟲(chóng)液分離,用純凈水洗滌水蛭蛆蟲(chóng),并用熱水噴淋滅活; (8)滅活的水蛭蛆蟲(chóng)干燥,得成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝,其特征在于所述谷物糠麩為小米糠、麥麩或蕎麥麩皮。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝,其特征在于所述蟲(chóng)卵培養(yǎng)液由瓊脂100g、水蛭糊狀物5-10g、藿香粉2-8g、木香粉2-6g混合而成。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝,其特征在于所述步驟(3)中,糊狀物在80至120°C殺菌10-30min,然后降溫至30°C備用。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝,其特征在于所述步驟(7)中,分離機(jī)轉(zhuǎn)速為 550-1250r/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝,其特征在于所述步驟(7)中,用純凈水洗漆水蛭蛆蟲(chóng)2-3次,并用80-100°C熱水噴淋滅活l-10min。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝,其特征在于所述步驟(8)中,滅活的水蛭蛆蟲(chóng)在溫度-30-30°C、真空度100-500kKPa、時(shí)間5_24h干燥至含水分5_8%得到成品。
全文摘要
人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝,涉及人工培育昆蟲(chóng)的工藝。本發(fā)明的人工培育水蛭蛆蟲(chóng)的工藝是通過(guò)以下技術(shù)方案解決的(1)水蛭粉碎至粉末狀;(2)與水混合攪拌成糊狀;(3)糊狀物高溫殺菌;(4)谷物糠用中藥處理并生成蛆卵;(5)幼蛆培殖;(6)蛆蟲(chóng)培育;(7)蛆蟲(chóng)分離、清洗、滅活;(8)蛆蟲(chóng)干燥;(9)蛆蟲(chóng)包裝。本發(fā)明以吸食哺乳動(dòng)物血液和不吸食哺乳動(dòng)物血液的水蛭為原料,通過(guò)溫和的生物處理方法,提高了水蛭應(yīng)用效率和應(yīng)用范圍。本發(fā)明培育的水蛭蛆蟲(chóng)成分明確并且一致性好,工藝過(guò)程簡(jiǎn)練,易于控制,節(jié)省能源,適應(yīng)工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A01K67/033GK102792925SQ201210315709
公開(kāi)日2012年11月28日 申請(qǐng)日期2012年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月31日
發(fā)明者徐華民, 趙榮華, 趙艷琨, 徐萌 申請(qǐng)人:哈爾濱工業(yè)大學(xué)