黃精根莖的組織培養(yǎng)基及離體再生方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種黃精根莖的組織培養(yǎng)基及離體再生方法；該黃精根莖的組織培養(yǎng)基包括誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基；使用所述黃精根莖的組織培養(yǎng)基進(jìn)行黃精根莖離體再生的方法，包括芽的誘導(dǎo)、芽的增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)三個步驟。本發(fā)明利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)建立了黃精離體再生體系，并對涉及的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基進(jìn)行了選擇優(yōu)化，具有芽誘導(dǎo)率高、增殖系數(shù)高、生根率高、芽苗健壯、葉形葉色正常等優(yōu)點，能夠滿足市場對優(yōu)質(zhì)黃精種苗的需要。
【專利說明】黃精根莖的組織培養(yǎng)基及離體再生方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種黃精根莖的組織培養(yǎng)基及離體再生方法。
【背景技術(shù)】
[0002]黃精(Polygonatumsibiricum Red.)是百合科黃精屬(Polygonatum Mill.)多種植物根莖的總稱，為多年生宿根性草本藥用植物，其根莖是傳統(tǒng)中藥。《中華人民共和國藥典》2005 年版(一部)規(guī)定黃精(Polygonatum sibiricum Delar.ex Redoute)、多花黃精(P.cyrtonema Hua)及滇黃精(P.kingianum Coll.et Hemsl.) 3 種植物為其原生藥來源。黃精含多糖、氨基酸、蒽醌類化合物等成分，具有抗菌、降壓、抗衰老及治療風(fēng)濕痛等作用。
[0003]隨著黃精的藥用價值和保健價值越來越被人們所認(rèn)識，黃精原料的需求量也越來越大，價格不斷上揚，從而導(dǎo)致山區(qū)農(nóng)民加劇對野生黃精的大量掠奪性采集，使黃精自然資源迅速枯竭，給黃精植物的開發(fā)利用和可持續(xù)發(fā)展帶來不利影響。因此，對保證黃精原料來源、實行產(chǎn)業(yè)化種植的呼聲越來越高。李世等人對黃精的野生變家種栽培進(jìn)行了研究，而且有些地方也開始人工種植黃精，但由于生產(chǎn)上多采用分根繁殖，其繁殖系數(shù)低，種根莖用量大，既不經(jīng)濟(jì)，又限制了黃精的產(chǎn)量潛力，不便栽植管理與推廣，而且長期的分根無性繁殖很容易引起黃精品種退化，故黃精種苗問題成了人工大面積種植的瓶頸。而利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)建立黃精離體再生體系是生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)黃精種苗的有效途徑，但是通過組織培養(yǎng)實現(xiàn)黃精離體再生的未見相關(guān) 報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種黃精根莖的組織培養(yǎng)基及離體再生方法，可以實現(xiàn)黃精根莖的高效離體再生，生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)黃精種苗。
[0005]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
[0006]本發(fā)明公開了一種黃精根莖的組織培養(yǎng)基，包括誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基；所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有蔗糖30g/L、瓊脂4g/L、6-芐氨基嘌呤4.0mg/L和萘乙酸0.2mg/L ;所述增殖培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有6-節(jié)氨基嘌呤2.0mg/L、噻二唑苯基脲1.0mg/L和Π引哚_3_ 丁酸0.lmg/L ;所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有白糖20g/L、卡拉膠5g/L、萘乙酸
0.5mg/L、吲哚-3- 丁酸 0.5mg/L 和活性炭 50mg/L。
[0007]本發(fā)明還公開了一種使用上述黃精根莖的組織培養(yǎng)基進(jìn)行黃精根莖離體再生的方法，包括以下步驟:
[0008]I)芽的誘導(dǎo):將黃精根莖的初生芽清洗消毒滅菌后，接種于所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行芽的誘導(dǎo)；
[0009]2)芽的增殖培養(yǎng):將誘導(dǎo)出來的芽接種到所述增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行芽的增殖培養(yǎng)；
[0010]3)生根培養(yǎng):將增殖培養(yǎng)的黃精根莖芽切割下來，接種到所述生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)。
[0011]進(jìn)一步，所述步驟I)中，進(jìn)行芽的誘導(dǎo)時，前7天為暗培養(yǎng)，然后進(jìn)行光照培養(yǎng)，光照時間為12h/d，光照強度為15001x，控制溫度25±2°C。
[0012]本發(fā)明中所述的MS培養(yǎng)基和1/2MS培養(yǎng)基為植物組織培養(yǎng)中常用的基本培養(yǎng)基，其具體配方如下表所示:
【權(quán)利要求】
1.黃精根莖的組織培養(yǎng)基，其特征在于:包括誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基；所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有蔗糖30g/L、瓊脂4g/L、6-芐氨基嘌呤4.0mg/L和萘乙酸0.2mg/L ;所述增殖培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有6-節(jié)氨基嘌呤2.0mg/L、噻二唑苯基脲1.0mg/L和Π引哚-3- 丁酸0.lmg/L ;所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有白糖20g/L、卡拉膠5g/L、萘乙酸0.5mg/L、吲哚-3- 丁酸0.5mg/L和活性炭50mg/L。
2.使用權(quán)利要求1所述的黃精根莖的組織培養(yǎng)基進(jìn)行黃精根莖離體再生的方法，其特征在于:包括以下步驟: O芽的誘導(dǎo):將黃精根莖的初生芽清洗消毒滅菌后，接種于所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行芽的誘導(dǎo)； 2)芽的增殖培養(yǎng):將誘導(dǎo)出來的芽接種到所述增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行芽的增殖培養(yǎng)； 3)生根培養(yǎng):將增殖培養(yǎng)的黃精根莖芽切割下來，接種到所述生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃精根莖離體再生的方法，其特征在于:所述步驟I)中，進(jìn)行芽的誘導(dǎo)時，前7天為暗培養(yǎng)，然后進(jìn)行光照培養(yǎng)，光照時間為12h/d，光照強度為15001x，控制溫度25±2°C。
【文檔編號】A01H4/00GK103535281SQ201310532853
【公開日】2014年1月29日 申請日期:2013年11月1日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月1日
【發(fā)明者】陳澤雄, 劉奕清, 黃登艷 申請人:重慶文理學(xué)院