一種新型微生態(tài)肥的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種新型微生態(tài)肥，屬于農(nóng)用肥料【技術領域】,所述微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為：微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為：枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物20-28，黑曲霉培養(yǎng)物15-25，植物乳桿菌劑8-15份。本發(fā)明的肥料營養(yǎng)豐富，有機質(zhì)含量高，能夠滿足有機食品的生產(chǎn)需要；本發(fā)明的肥料由復合微生物發(fā)酵而成，能夠改善土壤的微生態(tài)環(huán)境，為農(nóng)作物的生長提供有益條件，還能夠增強作物的抗病蟲害能力。
【專利說明】—種新型微生態(tài)肥
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種微生態(tài)肥，屬于農(nóng)用肥料【技術領域】。
【背景技術】
[0002]微生物肥料中有益微生物的種類、生命活動是否旺盛是其有效性的基礎，而不像其它肥料是以氮、磷、鉀等主要元素的形式和多少為基礎。正因為微生物肥料是活制劑，所以其肥效與活菌數(shù)量、強度及周圍環(huán)境條件密切相關，包括溫度、水分、酸堿度、營養(yǎng)條件及原生活在土壤中土著微生物排斥作用都有一定影響。
[0003]中國專利一種黑曲霉菌株及其在果膠酶固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)中的應用，申請?zhí)?200410006199.5，該發(fā)明涉及一種黑曲霉菌株及其在固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)中的應用，其黑曲霉菌株在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC.N0.1100;本發(fā)明的微生物菌株可用于果膠酶的固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)中培養(yǎng)本發(fā)明黑曲霉H)2菌株(Aspergillus niger F02)的營養(yǎng)源有碳源、氮源、無機鹽和微量營養(yǎng)物；采用本發(fā)明菌株生產(chǎn)原料主要是麥麩、米糠和面粉等農(nóng)副產(chǎn)品，故投資少、操作方便；以單位體積計算，固態(tài)發(fā)酵果膠酶的活力要比液態(tài)發(fā)酵高5-6倍。
[0004]微生物肥體水平不高、技術創(chuàng)新不足、產(chǎn)品質(zhì)量與應用效果表現(xiàn)欠穩(wěn)定的問題。在農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展已成為 人類共識的今天，這些問題成了微生物肥行業(yè)函待打通的“瓶頸”。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術問題提供一種新型微生態(tài)肥:
[0006]微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物20-28，黑曲霉培養(yǎng)物15-25，植物乳桿菌劑8-15份。
[0007]所述枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物制備:從斜面轉(zhuǎn)接培養(yǎng)枯草芽孢桿菌，逐級擴培后的種子液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵罐中，發(fā)酵完畢發(fā)酵液經(jīng)過板框過濾、干燥后獲得含有枯草芽孢桿菌菌劑和酶制劑的培養(yǎng)物。
[0008]植物乳桿菌劑的制備方法:從斜面轉(zhuǎn)接培養(yǎng)植物乳桿菌，逐級擴培后的種子液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵罐中，發(fā)酵完畢發(fā)酵液經(jīng)低溫負壓真空濃縮到原體積的45%，得到菌濃縮液。添加載體:向濃縮液中添加混合好的載體，混合均勻；濃縮液與載體的重量比為0.5:1，載體組成為:CaC0320-23份，糊精10-12份。流化床干燥，干燥溫度50°C。
[0009]黑曲霉培養(yǎng)物制備:菌種培養(yǎng)，固體發(fā)酵培養(yǎng):孢子液接種到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)料中，26-33°C培養(yǎng)至菌絲長滿培養(yǎng)料，低溫流化床干燥，粉碎干燥物；采用常見固態(tài)發(fā)酵法制備獲得。
[0010]本產(chǎn)品使用方法簡單，每畝地使用量0.3-1公斤，成本僅為80-100元/畝，拌種或生長期灌水前地表噴灑。
[0011]有益效果
[0012]本發(fā)明的肥料營養(yǎng)豐富，有機質(zhì)含量高。能夠滿足有機食品的生產(chǎn)需要。[0013]本發(fā)明的肥料由復合微生物發(fā)酵而成，能夠改善土壤的微生態(tài)環(huán)境，為農(nóng)作物的生長提供有益條件。
[0014]本發(fā)明的肥料能夠增強作物的抗病蟲害能力。
[0015]本發(fā)明的肥料能夠改良土壤。肥料中有益微生物能產(chǎn)生糖類物質(zhì)，占土壤有機質(zhì)的0.1%，與植物粘液，礦物胚體和有機膠體結(jié)合在一起，可以改善土壤團粒結(jié)構(gòu)，增強土壤的物理性能和減少土壤顆粒的損失，在一定的條件下，還能參與腐殖質(zhì)形成。所以施用微生物肥料能改善土壤物理性狀，有利于提高土壤肥力。
【具體實施方式】:
[0016]除非特別說明，本發(fā)明中所用的技術手段均為本領域技術人員所公知的方法。另外，實施方案應理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的實質(zhì)和范圍僅由權利要求書所限定。對于本領域技術人員而言，在不背離本發(fā)明實質(zhì)和范圍的前提下，對這些實施方案中的反應條件、分離提取條件進行的各種改變或改動也屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0017]下面的實施例可以使本專業(yè)技術人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
[0018]本發(fā)明提供的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)L1-2013_02。該菌株已于2013年7月15日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為:中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號)，保藏號為CGMCCN0.7926。
[0019]所述菌株特點如下:
[0020]所述菌株在固體平板上菌落顏色為乳白色，表面干燥不透明，邊緣整齊，為具有運動性的好氧菌。鏡檢為長桿狀，革蘭氏染色呈陽性。該菌可利用檸檬酸鹽，硝酸還原、V-P實驗成陽性。
[0021]所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)L1-2013_02由一株保藏于天津工業(yè)大學實驗室的產(chǎn)耐高溫α -淀粉酶的枯草芽孢桿菌L1-2013經(jīng)紫外線-氯化鋰-硫酸二乙酯復合誘變篩選獲得，具體篩選步驟如下:
[0022](1)菌懸液的制備
[0023]將在平板劃線分離后長出的L1-2013單菌落接入種子培養(yǎng)基中，100r/min，40°C培養(yǎng)12h后，取lmL培養(yǎng)液離心后用生理鹽水洗漆兩次,并重懸與9mL生理鹽水中。
[0024](2)紫外線-氯化鋰-硫酸二乙酯復合誘變
[0025]將菌懸液置于無菌平板中，在距離為30cm，功率15w的紫外燈下攪拌照射100s。將經(jīng)過照射的菌液經(jīng)梯度稀釋后涂布于氯化鋰平板，并以未經(jīng)紫外照射的菌液稀釋涂平板做對照。將上述涂布均勻的平板，用黑色的布或報紙包好，置40°C培養(yǎng)48h，在長出菌落的平板上篩選出水解圈與菌落直徑比值最大者挑至斜面保存，純化后配制成菌懸液，經(jīng)梯度稀釋后與硫酸二乙酯原液充分混合，并于40°C震蕩處理40min，將處理過的菌液經(jīng)梯度稀釋后涂布于氯化鋰平板。
[0026](3)高產(chǎn)菌種的初篩
[0027]將上述涂布均勻的平板，置40°C培養(yǎng)48h，在長出菌落的平板上初篩出水解圈與菌落直徑比值較大者挑至斜面保存，純化后獲得三株菌L1-2013-01，L1-2013-02，L1-2013-03
[0028](4)搖瓶發(fā)酵 復篩[0029]將獲得的三株菌L1-2013-01，L1-2013-02, L1-2013-03在含有30mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL搖瓶中進行搖瓶發(fā)酵，種子接種量10% (V/V)，40°C、100r/min培養(yǎng)72h，離心取發(fā)酵上清液制得粗酶液。
[0030](5)酶活測定
[0031]酶活單位的定義:lmL粗酶液，于105°C、pH4.2條件下，lmin液化lmg可溶性淀粉，
[0032]即為1個酶活力單位，以U/mL表示。
[0033]經(jīng)測定，菌株L1-2013-02，為穩(wěn)定的最高產(chǎn)菌株，且酶活達到30000U/mL，比原始菌株酶活提高1.6倍。
[0034]所述氯化鋰平板:淀粉1%，蛋白胨 1%，(NH)2S040.4%,K2HP040.8%,CaCl20.2%，氯化鋰0.9%，瓊脂2%。
[0035]所述的種子培養(yǎng)基:酵母粉0.5%，蛋白胨1 %，可溶性淀粉1 %，NaCll%。
[0036]所述的發(fā)酵培養(yǎng)基:玉米粉5%~15%，豆餅粉4%~10%，(NH) 2S040.4 %,K2HP040.8%, CaC120.2%?
[0037]所述的搖瓶培養(yǎng)條件:該菌在含有30mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，接種量10%(V/V)，100r/min、40°C 發(fā)酵培養(yǎng) 72h。
[0038]由菌株L1-2013-02發(fā)酵獲得了一種耐高溫的α -淀粉酶，其酶學性質(zhì)如下:
[0039](1)該酶溫度適應范圍較寬，最適作用溫度在105_115°C之間，且在110°C以下保存的溫度穩(wěn)定性較好，而115°C以`上保存長時間溫度穩(wěn)定性較差。
[0040](2)該酶最適反應pH值為4.2。在pH值3.0_7.0之間均有較高酶活力，在pH值為3.0時酶活完全穩(wěn)定。
[0041](3)酶活性:由本發(fā)明所提供的突變株L1-2013-02，制備的耐高溫α -淀粉酶酶活力為 30000-35000U/ml。
[0042]1、本發(fā)明使用紫外線-氯化鋰-硫酸二乙酯復合誘變的方法獲得了一株高產(chǎn)耐高溫α -淀粉酶的枯草芽孢桿菌L1-2013-02，該菌株具有強耐酸、耐熱性，產(chǎn)酶活力高的特點。
[0043]2、有該菌株生產(chǎn)所得的耐高溫α-淀粉酶酶活力高達30000-35000u/ml，；適用溫度范圍為25-115°C，最適反應溫度110°C，在110°C酶活完全穩(wěn)定；適用反應pH值范圍為
3.0-7.0，在pH值為3.0時酶活完全穩(wěn)定，最適反應pH值為4.2，比現(xiàn)有的耐高溫α -淀粉酶酶活力高，酶作用最適pH值范圍寬泛，耐溫度高，特別適合反應溫度高、液化工藝與糖化工藝并存的工業(yè)化需求。
[0044]本發(fā)明提供的黑曲霉Aspergillus niger L1-2013-03是由天津工業(yè)大學實驗室保藏的一株產(chǎn)纖維素酶的黑曲霉Aspergillus niger L1-2010經(jīng)亞硝基胍多輪誘變篩選，然后對優(yōu)良菌株經(jīng)發(fā)酵性能測試篩選得到產(chǎn)高活力纖維素酶的黑曲霉菌株Aspergillusniger L1-2013_03o
[0045]本發(fā)明提供的產(chǎn)高活力纖維素酶的菌株具體為黑曲霉Aspergillus nigerL1-2013-03。該菌株已于2013年7月15日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為:中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，郵編100101)，保藏號為 CGMCC N0.7927。
[0046]本發(fā)明黑曲霉菌株Aspergillusniger L1-2013-03 (CGMCC N0.7927)具有以下微生物學特征:
[0047]1、形態(tài)學特征:
[0048]黑曲霉菌株CGMCC N0.7927，生物學形態(tài)為包括分生孢子、胞梗、頂囊、產(chǎn)胞結(jié)構(gòu)等幾部分。分生孢子頭球形至輻射形，直徑150-450 μ m，分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì)。胞梗莖1000-3000 (長度)X 12-20 (直徑)μ m，黃色或黃褐色，壁平滑；頂囊球形或近似球形，直徑45-75 μ m,表面全面可育；產(chǎn)胞結(jié)構(gòu)雙層，?；?0-20 (長度)X4.5-7.0 (直徑)μ m,瓶梗6-10 (長度)X 2.5-3.5 (直徑)μ m，分生孢子球形或近球形，直徑3-4.5 μ m,褐色，壁粗糙。
[0049]2、培養(yǎng)學特征:
[0050]菌株在麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基上生長迅速，28 V 4天孢子可鋪滿斜面；質(zhì)地絲絨狀或稍帶絮狀；分生孢子結(jié)構(gòu)大量，褐黑色，無滲出液；菌落反面略帶黃色。
[0051]3、生理生化特征:
[0052]黑曲霉菌株CGMCC N0.7927可在玉米秸桿、稻草、木屑、馬鈴薯、玉米粉、可溶性淀粉、糖蜜等碳源上生長，最適pH范圍5-6，最適生長溫度范圍28-33°C，最適產(chǎn)酶溫度范圍28-30。。。
[0053]本發(fā)明黑曲霉菌株CGMCC N0.7927的篩選技術路線為:出發(fā)菌株一斜面培養(yǎng)一孢子懸液的制備一誘變處理一平板分離一初篩一復篩一遺傳穩(wěn)定性測定一擴大實驗(發(fā)酵性能測定)。
[0054]按誘變篩選方案，對突變株逐級篩選淘汰，最后對優(yōu)良菌株經(jīng)發(fā)酵性能測試篩選，得到一株高產(chǎn)酶性能菌株黑曲霉菌Aspergillus niger L1-2013-03,發(fā)酵96小時后纖維素酶的外切β -葡聚糖酶、內(nèi)切β -葡聚糖酶、β -葡萄糖苷酶和濾紙酶活力分別達到620U/mL、1289U/mL、456U/mL 和 732U/mL。
[0055]28°C發(fā)酵4天直徑75mm，發(fā)酵液纖維素酶的的外切β-葡聚糖酶、內(nèi)切β-葡聚糖酶、β -葡萄糖苷酶和濾紙酶活力分別達到620U/mL、1289U/mL、456U/mL和732U/mL，分別比出發(fā)菌株提高了 9.21倍、7.43倍、8.15倍和10.31倍。
[0056]產(chǎn)高活力纖維素酶菌株的篩選方法，包括以下步驟:
[0057]1)斜面培養(yǎng):將原始黑曲霉菌株Aspergillus niger Li_2010劃線接種斜面培養(yǎng)基，30°C培養(yǎng)2~3d，直至菌絲體成熟、產(chǎn)大量黑色孢子。所述斜面培養(yǎng)基組成如下:120Brix 麥芽汁 lOOOmL，pH 值自然，121°C滅菌 20min ；
[0058]2)孢子懸液制備(以下步驟均在無菌條件下操作):向試管斜面加入15mL無菌水，把孢子刮下，用濾紙過濾，將濾過液倒入已滅菌、并加有5-10粒無菌玻璃珠的150mL三角瓶中，將三角瓶放入搖床振蕩10-15min，使孢子分散。
[0059]3)亞硝基胍(NTG )誘變
[0060]A.用無菌水將孢子懸浮液調(diào)節(jié)為稀釋成106-107個/mL。
[0061]B.取10mL菌懸液轉(zhuǎn)移至100mL三角瓶中，加入10mg的NTG,配制成終濃度為10mg/mL的NTG溶液，并加入4-5滴丙酮，以利于NTG溶解。
[0062]C.在30°C下200rpm振蕩反應30min, 5000rpm離心lOmin收集菌體，用無菌生理
鹽水洗滌數(shù)次，中止反應。
[0063]D.適當稀釋將孢子濃度調(diào)節(jié)為103個/mL，取最后稀釋度的菌液0.2mL,稀釋涂布于纖維素-剛果紅平板篩選培養(yǎng)基上。在30°C培養(yǎng)2~3天后挑取透明圈/菌落直徑較大的菌株200支。(所述纖維素-剛果紅平板篩選培養(yǎng)基組成如下:纖維素粉10g、剛果紅
0.2g、硫酸銨5g、硫酸鎂0.25g、磷酸二氫鉀lg、氯化鈉0.lg、明膠2g、瓊脂20g、自來水定容lOOOmL, pH 值 5-6,121°C滅菌 20min)。
[0064]E.復篩:將獲得的200株菌分別用無菌牙簽接種于斜面培養(yǎng)基，30°C培養(yǎng)至孢子鋪滿斜面。分別將孢子以無菌水洗下接種于裝有50mL復篩培養(yǎng)基的250mL三角瓶中進行發(fā)酵，接種量10%( v/v)，30°C、100r/min培養(yǎng)96h，分別測定各菌株的纖維素酶活性。(所述復篩培養(yǎng)基組成如下:纖維素粉50g、硫酸銨5g、硫酸鎂0.25g、磷酸二氫鉀lg、氯化鈉0.lg、自來水定容1000mL，pH值5-6，121°C滅菌20min)。選取纖維素酶酶活力最高的菌株進行放大實驗。
[0065]4)遺傳穩(wěn)定性試驗
[0066]將L1-2013-03菌株在斜面上連續(xù)十次傳代，并用搖瓶復篩的方法檢測每次傳代后的發(fā)酵情況。實驗發(fā)現(xiàn)，在斜面上連續(xù)十次傳代，該菌種性狀沒有明顯變化，各項性能指標都正常，說明該菌種的遺傳穩(wěn)定性較強。
[0067]5)放大試驗
[0068](1)種子培養(yǎng):將纖維素酶酶活力最高的菌株Aspergillus nigerL1-2013_03接入500mL三角瓶中，種子培養(yǎng)基裝量100毫升，30°C、150rpm搖床培養(yǎng)72_96h。
[0069](2)種子罐培養(yǎng):將 種子液以10% (v/v)接種量接入裝有7.5L發(fā)酵液的10L發(fā)酵罐中，控制pH值恒定為6.0±0.2，培養(yǎng)溫度30 ±0.1°C，攪拌速度300rpm，通風量(v/v)1:0.8-1.2，培養(yǎng)時間96h，溶解氧20-30%。所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:纖維素粉100g、硫酸銨5g、硫酸鎂0.25g、磷酸二氫鉀lg、氯化鈉0.lg、自來水定容1000mL，pH值5-6，121°C滅菌20mino
[0070]發(fā)酵結(jié)束后，取發(fā)酵上清液(粗酶液)進行酶活力檢測經(jīng)測定，菌株Aspergillusniger L1-2013-03的外切β-葡聚糖酶、內(nèi)切β _葡聚糖酶、β _葡萄糖苷酶和濾紙酶活力分別達到 620U/mL、1289U/mL、456U/mL 和 732U/mL,分別比出發(fā)菌株 Aspergillus nigerL1-2010 提高了 9.21 倍、7.43 倍、8.15 倍和 10.31 倍。
[0071]實施例1
[0072]—種復合肥，重量份數(shù)組成為:微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物24，黑曲霉培養(yǎng)物18，植物乳桿菌劑12份。
[0073]枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物的制備方法:
[0074]1.發(fā)酵液的獲得:采用斜面菌種逐級擴培獲得枯草芽孢桿菌發(fā)酵液；
[0075](1) 一級種子培養(yǎng):將枯草芽孢桿菌斜面菌種接入500毫升搖瓶中，培養(yǎng)基裝量100毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床180轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度35°C，培養(yǎng)時間24小時；
[0076](2)二級種子培養(yǎng):將一級種子按照10%的接種量接入500毫升二級種子搖瓶中，培養(yǎng)條件與一級種子相同；
[0077](3)三級種子培養(yǎng):將二級種子以10%接種量接入5000毫升三級種子搖瓶中，培養(yǎng)基裝量1000毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床100轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度35°C，培養(yǎng)時間24小時；
[0078](4) 一級種子罐培養(yǎng):將三級種子以10%接種量接入總?cè)莘e為150L的一級種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量100L，培養(yǎng)溫度35°C，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風量(V/V) 1:0.5,罐壓
0.05Mpa,培養(yǎng)時間24小時；[0079](5)發(fā)酵培養(yǎng):將一級種子罐菌種以10%接種量接入總?cè)莘e為1.5噸二級種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量1噸，培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度35°C，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風量(V/V) 1:0.5，罐壓0.05Mpa,培養(yǎng)時間24小時。
[0080]培養(yǎng)基組成:葡萄糖6%，酵母提取物1%,蛋白胨0.2%，CaC031%, pH6.8。
[0081]植物乳桿菌劑的制備方法:
[0082]常規(guī)種子發(fā)酵培養(yǎng)方法獲得種子液；
[0083]發(fā)酵罐培養(yǎng):將一級種子罐菌種以5%接種量接入總?cè)莘e為3噸罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量2噸，培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度28°C，罐壓0.05Mpa,培養(yǎng)時間22小時。發(fā)酵完畢發(fā)酵液經(jīng)低溫負壓真空濃縮到原體積的45%，得到菌濃縮液。添加載體:向濃縮液中添加混合好的載體，混合均勻；濃縮液與載體的重量比為0.5:1，載體組成為:CaC0325份，糊精12份。流化床干燥，干燥溫度50 °C。
[0084]培養(yǎng)基組成為:酪蛋白胨1%，牛肉提取物1%，酵母提取物0.5%,葡萄糖0.5%,乙酸鈉 0.5%,檸檬酸二胺 0.2%, Tween800.1%, K2HP040.2%, MgS04.7H200.02%, MnS04.H200.005%, CaC032%,瓊脂 1.5%, ρΗ6.8。
[0085]植物乳桿菌菌種為CICC20390.
[0086]實施例2微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物20，黑曲霉培養(yǎng)物25，植物乳桿菌劑15份。
[0087]實施例3:微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物25，黑曲霉培養(yǎng)物20，植物乳桿菌劑10份。
[0088]實施例4:微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物20，黑曲霉培養(yǎng)物25，植物乳桿菌劑15份。
[0089]制備方法:按照上述比例混合或造粒即可。
[0090]產(chǎn)品效果實驗
[0091]試驗地的選擇與試驗設計:試驗于2009年3月27日一 10月30日在寧夏鹽池縣花馬池鎮(zhèn)八堡村進行。
[0092]試驗田達到田種植玉米10畝,分別在種植時使用本發(fā)明產(chǎn)品每畝0.6公斤，出苗1個月左右通過鋤地松土方式使用發(fā)明產(chǎn)品0.4公斤，對照組使用常規(guī)肥料。
[0093]發(fā)明產(chǎn)品使用玉米地玉米產(chǎn)量達到650公斤，對照組達到510公斤；該地塊在第2年種植春小麥，春小麥產(chǎn)量達到了 420公斤，比對照組單產(chǎn)提高了 20%。且試驗田土壤結(jié)構(gòu)良好，無大塊和板結(jié)。
【權利要求】
1.一種新型微生態(tài)肥，微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物20-28，黑曲霉培養(yǎng)物15-25，植物乳桿菌劑8-15份，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)L1-2013_02保藏號為 CGMCC N0.7926。
2.根據(jù)權利要求1所述的新型微生態(tài)肥，微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物20，黑曲霉培養(yǎng)物25，植物乳桿菌劑15份。
3.根據(jù)權利要求1所述的新型微生態(tài)肥，微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物25，黑曲霉培養(yǎng)物20，植物乳桿菌劑10份。
4.根據(jù)權利要求1所述的新型微生態(tài)肥，微生態(tài)肥的重量份數(shù)組成為:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物20，黑曲霉培養(yǎng)物25，植物乳桿菌劑15份。
5.根據(jù)權利要求1所述的新型微生態(tài)肥，所述黑曲霉(Aspergillusniger)L1-2013-03 保藏號 為 CGMCC N0.7927。
【文檔編號】C05F11/08GK103739320SQ201310743518
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月30日 優(yōu)先權日:2013年12月30日
【發(fā)明者】邵素英, 孔日祥 申請人:邵素英