一種喜樹種子發(fā)芽方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種喜樹種子發(fā)芽方法，其操作步驟是：(1)制備南方紅豆杉枝葉的甲醇提取液，提取液濃縮至干得到固形物；(2)將固形物制備成水懸液；(3)用水懸液浸泡喜樹種子；(4)喜樹種子置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)芽，在發(fā)芽的一定天數(shù)，終止發(fā)芽。本發(fā)明提供的方法獲得的發(fā)芽喜樹種子用于喜樹苗木的培育，可提高種子的利用率，同時有利于培育壯苗。
【專利說明】一種喜樹種子發(fā)芽方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物生理生態(tài)學(xué)和植物化學(xué)研究領(lǐng)域，具體涉及一種喜樹種子發(fā)芽方法。
【背景技術(shù)】
[0002]喜域iCamptotheca acuminata Dence)為國家II級重點(diǎn)保護(hù)野生植物,其全株均含有一種吲哚類生物堿一喜樹堿，而以果實(shí)和葉片含量為高。喜樹堿具有顯著抗腫瘤活性，全球?qū)ο矘鋲A類抗腫瘤藥品的需求逐年增加，目前市場份額已超過10億美元。由于目前尚無人工合成產(chǎn)品可取代喜樹堿，喜樹堿必須從喜樹中分離、純化獲得，因而野生喜樹資源面臨巨大壓力。自從喜樹成為抗癌藥的原料植物以來，其野生資源分布呈明顯遞減趨勢。
[0003]為了緩解喜樹資源危機(jī)，亟需開展喜樹人工林培育。在培育喜樹苗木時，通常要先進(jìn)行發(fā)芽后，再進(jìn)行播種。植物種子的發(fā)芽率高、發(fā)芽勢強(qiáng)，預(yù)示著出苗快而整齊，苗壯；若發(fā)芽率高、發(fā)芽勢弱，預(yù)示著出苗不齊、弱苗多。因此，在喜樹種子相同的情況下，通過簡單的方法提高喜樹種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢將是獲得喜樹壯苗途徑之一。同時，提高喜樹種子發(fā)芽率也可以減少育苗用種量，降低成本。本發(fā)明旨在提供一種提高喜樹種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢的方法。
[0004]目前，促進(jìn)植物種子發(fā)芽的方法包括溫水浸種、有機(jī)溶劑滲透法、滲透調(diào)節(jié)法、機(jī)械處理、層積處理、物理場處理(電場、磁場、超聲波、紅外線)等。南方紅豆杉拉丁學(xué)名Taxuschinensis (Pilger) Rehd.,系紅豆屬一種針葉樹種。本發(fā)明提供的方法系利用南方紅豆杉枝葉提取物浸泡喜樹種子以提高其發(fā)芽率和發(fā)芽勢，因此與上述方法均不同。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供的喜樹種子發(fā)芽的方法，其特征在于，按如下步驟操作:
(1)將南方紅豆杉樹葉干燥、粉碎得到粉末I，甲醇與粉末I按質(zhì)量比5:1~10:1混合、回流提取1~3小時，過濾提取液，濾液濃縮至干，得到固形物II ；
(2)將步驟(1)得到的固形物II與水按質(zhì)量比1:100~1:1000混合，超聲處理5~10分鐘，得到固形物II懸濁液；
(3)用步驟(2)得到的固形物II懸濁液浸泡喜樹種子，浸泡溫度25~35°C，浸泡時間12~36小時；
(4)在培養(yǎng)皿內(nèi)鋪四層用水潤濕的濾紙，將按步驟(3)處理后的喜樹種子放在濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，培養(yǎng)皿置入培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)芽，至培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱后的第9~12天，終止發(fā)芽。
[0006]用本發(fā)明提供的方法進(jìn)行喜樹種子發(fā)芽，其發(fā)芽率和發(fā)芽勢均明顯增加，同時，發(fā)芽高峰日也會提前。
【具體實(shí)施方式】[0007]下面通過實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述。
[0008]實(shí)施例1
本實(shí)施例中喜樹種子采自四川。喜樹種子發(fā)芽的操作步驟如下:
(1)取南方紅豆杉枝葉干燥、粉碎得到490克粉末I，甲醇與粉末I按質(zhì)量比5:1混合、回流提取2小時，過濾提取液，濾液濃縮至干，得到82克固形物II ；
(2)將步驟(1)得到的82克固形物II與水按質(zhì)量比1:500混合，超聲處理8分鐘，得到固形物II懸濁液；
(3)用步驟(2)得到的固形物II懸濁液浸泡喜樹種子，浸泡溫度25°C，浸泡時間24小
時； (4)在培養(yǎng)皿內(nèi)鋪四層用水潤濕的濾紙，將按步驟(3)處理后的喜樹種子放在濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，培養(yǎng)皿置入培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)芽，至培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱后的第9天，終止發(fā)芽。
[0009]用蒸餾水代替固形物II懸濁液，只進(jìn)行本實(shí)施例操作步驟中的步驟(3)和步驟
(4)，以此作為對照處理，進(jìn)行喜樹種子發(fā)芽。統(tǒng)計分析結(jié)果表明本實(shí)施例喜樹發(fā)芽高峰日為浸種后第6天，發(fā)芽勢為58.6%，發(fā)芽率為79.6% ;對照喜樹發(fā)芽高峰日為浸種后第8天，發(fā)芽勢為23.3%，發(fā)芽率為62.9%，說明本實(shí)施例提供的方法，喜樹種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率均明顯提高，同時發(fā)芽高峰日也提前了 2天。
[0010]實(shí)施例2
本實(shí)施例中喜樹種子采自貴州。喜樹種子發(fā)芽的操作步驟如下:
(1)取南方紅豆杉枝葉干燥、粉碎得到260克粉末I，甲醇與粉末I按質(zhì)量比8:1混合、回流提取3小時，過濾提取液，濾液濃縮至干，得到46克固形物II ；
(2)將步驟⑴得到的46克固形物II與水按質(zhì)量比1:100混合，超聲處理5分鐘，得到固形物II懸濁液；
(3)用步驟(2)得到的固形物II懸濁液浸泡喜樹種子，浸泡溫度35°C，浸泡時間12小
時；
(4)在培養(yǎng)皿內(nèi)鋪四層用水潤濕的濾紙，將按步驟(3)處理后的喜樹種子放在濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，培養(yǎng)皿置入培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)芽，至培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱后的第10天，終止發(fā)芽。
[0011]用蒸餾水代替固形物II懸濁液，只進(jìn)行本實(shí)施例操作步驟中的步驟(3)和步驟
(4)，以此作為對照處理，進(jìn)行喜樹種子發(fā)芽。統(tǒng)計分析結(jié)果表明本實(shí)施例喜樹發(fā)芽高峰日為浸種后第7天，發(fā)芽勢為59.2%，發(fā)芽率為81.3% ;對照喜樹發(fā)芽高峰日為浸種后第9天，發(fā)芽勢為22.6%，發(fā)芽率為54.2%，說明本實(shí)施例提供的方法，喜樹種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率均明顯提高，同時發(fā)芽高峰日也提前了 2天。
[0012]實(shí)施例3
本實(shí)施例中喜樹種子采自廣西。喜樹種子發(fā)芽的操作步驟如下:
(1)取南方紅豆杉枝葉干燥、粉碎得到320克粉末I，甲醇與粉末I按質(zhì)量比10:1混合、回流提取I小時，過濾提取液，濾液濃縮至干，得到61克固形物II ；
(2)將步驟(1)得到的61克固形物II與水按質(zhì)量比1:1000混合，超聲處理10分鐘，得到固形物II懸濁液；(3)用步驟(2)得到的固形物II懸濁液浸泡喜樹種子，浸泡溫度30°C，浸泡時間36小
時；
(4)在培養(yǎng)皿內(nèi)鋪四層用水潤濕的濾紙，將按步驟(3)處理后的喜樹種子放在濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，培養(yǎng)皿置入培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)芽，至培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱后的第12天，終止發(fā)芽。
[0013]用蒸餾水代替固形物II懸濁液，只進(jìn)行本實(shí)施例操作步驟中的步驟(3)和步驟
(4)，以此作為對照處理，進(jìn)行喜樹種子發(fā)芽。統(tǒng)計分析結(jié)果表明本實(shí)施例喜樹發(fā)芽高峰日為浸種后第6天，發(fā)芽勢為52.2%，發(fā)芽率為89.6% ;對照喜樹發(fā)芽高峰日為浸種后第9天，發(fā)芽勢為25.4%，發(fā)芽率為68.9%，說明本實(shí)施例提供的方法，喜樹種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率均明顯提高，同時發(fā)芽高峰日也提前了`` 3天。
【權(quán)利要求】
1.本發(fā)明涉及一種喜樹種子發(fā)芽的方法，其特征在于，按如下步驟操作: (1)將南方紅豆杉枝葉干燥、粉碎得到粉末I，甲醇與粉末I按質(zhì)量比5:1~10:1混合、回流提取1~3小時，過濾提取液，濾液濃縮至干，得到固形物II ； (2)將步驟(1)得到的固形物II與水按質(zhì)量比1:100~1:1000混合，超聲處理5~10分鐘，得到固形物II懸濁液； (3)用步驟(2)得到的固形物II懸濁液浸泡喜樹種子，浸泡溫度25~35°C，浸泡時間12~36小時； (4)在培養(yǎng)皿內(nèi)鋪四層用水潤濕的濾紙，將按步驟(3)處理后的喜樹種子放在濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，培養(yǎng)皿置入培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)芽，至培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱后的第9~12天，終止發(fā)芽。
【文檔編號】A01C1/00GK103875327SQ201410112433
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2014年3月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月25日
【發(fā)明者】不公告發(fā)明人 申請人:東北林業(yè)大學(xué), 趙春建