一種耐煙堿黑色指突水虻品種的強(qiáng)化方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種耐煙堿黑色指突水虻品種的強(qiáng)化方法。本發(fā)明利用初始培養(yǎng)料將篩選的野生耐煙堿黑色指突水虻卵培養(yǎng)至成蟲，將成蟲產(chǎn)出的卵利用強(qiáng)化培養(yǎng)料進(jìn)行N次強(qiáng)化培養(yǎng)至成蟲，每次強(qiáng)化培養(yǎng)循環(huán)中煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度在上一次強(qiáng)化培養(yǎng)料的基礎(chǔ)上提高0.1～0.5個點(diǎn)，直至煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度達(dá)到3‰。本發(fā)明直接采用適宜濃度的煙堿水溶液與麩皮和進(jìn)口魚粉科學(xué)配伍，成功強(qiáng)化培養(yǎng)黑色指突水虻，可以循序漸進(jìn)地增強(qiáng)野生黑色指突水虻種對煙堿的耐受能力，獲得更為穩(wěn)定的培育效果。
【專利說明】一種耐煙堿黑色指突水虻品種的強(qiáng)化方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及動物品種篩選【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種耐煙堿黑色指突水虻品種的強(qiáng) 化方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 不適用鮮煙葉指不適合用于烤煙生產(chǎn)的新鮮煙葉(含水量80?90%)，與文獻(xiàn)中大 量提及的烤煙生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的廢次煙葉或低次煙葉(含水量約15%)不同。不適用煙葉通 常是指煙株正常封頂并清除2?3片奶腳葉后，卷煙工業(yè)不適用的、需在田間清除處理的下 部葉和上部葉，主要包括煙株底部因光照不足、發(fā)育不良、內(nèi)含物不足、預(yù)計(jì)烤后品質(zhì)較差、 不具備烘烤價(jià)值的2片下部葉，以及煙株頂部開片不良、長度不足、結(jié)構(gòu)僵硬、烤后品質(zhì)較 差的2片頂葉。
[0003] 這些不適用煙葉若隨意丟棄田間地頭，極易造成環(huán)境污染和煙草病毒的重復(fù)感 染，若采用現(xiàn)有技術(shù)的集中銷毀或填埋的處理方式則需花費(fèi)大量的費(fèi)用，目前行業(yè)每噸不 適用煙葉的處理費(fèi)用平均高達(dá)200元，各煙葉產(chǎn)區(qū)往往需要在當(dāng)?shù)攸h委政府的組織領(lǐng)導(dǎo) 下，進(jìn)行政策宣傳、造冊登記、建設(shè)處理設(shè)施、統(tǒng)一清除、記錄存檔、公示、兌現(xiàn)補(bǔ)貼等措施督 促進(jìn)行不適用煙葉的處理，費(fèi)時(shí)費(fèi)力費(fèi)成本。
[0004] 采用耐煙堿的昆蟲對不適用煙葉進(jìn)行生物處理是一種較好的替代處理方法，環(huán) 保，經(jīng)濟(jì)效益高。為了利用昆蟲實(shí)現(xiàn)生物處理不適用鮮煙葉，首先需篩選出耐煙堿的昆蟲品 種。
[0005] 本 申請人:基于對家蠅和不適用鮮煙葉處理技術(shù)的長期研究，總結(jié)出利用不適用鮮 煙葉對家蠅進(jìn)行耐煙堿品系的篩選、強(qiáng)化和培育的方法。所述強(qiáng)化是將篩選出的耐煙堿家 蠅的卵接種于不適用鮮煙葉培養(yǎng)料培養(yǎng)至成蟲，再將成蟲產(chǎn)出的卵利用不適用鮮煙葉強(qiáng)化 培養(yǎng)料進(jìn)行N次強(qiáng)化培養(yǎng)至成蟲，每次強(qiáng)化培養(yǎng)循環(huán)中不適用鮮煙葉占培養(yǎng)料的比例都會 在上一次強(qiáng)化培養(yǎng)料的基礎(chǔ)上提高5?15個點(diǎn)，直至不適用鮮煙葉在強(qiáng)化培養(yǎng)料中的比例 達(dá)到85%，此階段培養(yǎng)出的家蠅種即對煙堿具有較高耐受能力。所述不適用鮮煙葉培養(yǎng)料含 有如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分：不適用鮮煙葉30%、麩皮60%、進(jìn)口魚粉5%、豆柏5%。
[0006] 該技術(shù)方案可以成功培育出耐煙堿的家蠅品種，但是不同批次培育獲得的老熟預(yù) 蛹的耐煙堿能力也有所區(qū)別，存在效果的不確定性。主要原因在于不適用煙葉的應(yīng)用方面， 雖然經(jīng)過創(chuàng)造性的研究和大量實(shí)驗(yàn)總結(jié)出配方料中添加合理范圍的不適用煙葉可降低煙 堿對家蠅幼蟲的毒害作用，但影響不適用鮮煙葉煙堿含量的因素非常繁多，機(jī)理復(fù)雜，較難 實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確控制。影響煙葉中煙堿含量的因素主要包括：（1)不同生長期，煙葉中所含煙堿 含量不同：煙草種子中煙堿含量為〇,育苗過程中起開始在根部形成，后隨著根系的發(fā)展壯 大，煙堿的合成和積累能力逐漸增強(qiáng)，所以不同生長期，煙葉中所含煙堿含量不同；（2)煙 株不同部位，煙堿含量顯著不同，煙堿含量還受葉位和葉數(shù)較大的影響；（3)不同品種煙葉 所含煙堿量不同；（4) 土壤干濕的氣候條件等均對煙堿含量有不同積蓄的影響；（5)農(nóng)藝 措施的不同顯著影響煙葉煙堿含量，包括施肥種類、栽培密度、打頂抹杈施肥、環(huán)割和切根 施肥、采收方式等等因素都顯著影響煙葉中的煙堿含量，以施肥種類為例，三種形態(tài)的氮肥 中，施用尿素后，煙堿積累最高，硝銨次之，硝酸鉀處理的煙堿積累最低，比施用尿素低27% ; 以打頂時(shí)期為例，張丹等研究發(fā)現(xiàn)，隨打頂時(shí)期推遲煙堿積累強(qiáng)度高峰依次下降，煙堿含量 也依次減低，每推遲一天打頂，煙堿含量就下降〇. 0504% ;再以切根施肥為例，切根1/8與不 切根相比，上部葉煙堿下降1. 9個百分點(diǎn)降幅31. 33%，中部葉煙堿下降2. 13個百分點(diǎn)，降幅 51. 4%。
[0007] 如何避免采用不同批次培養(yǎng)料培育獲得的老熟預(yù)蛹效果的不確定性是本領(lǐng)域亟 待解決的技術(shù)難題。而采用穩(wěn)定可行的技術(shù)方案培育出更多品種的耐煙堿昆蟲品系并進(jìn)行 有效地強(qiáng)化培育，是本領(lǐng)域同時(shí)需要解決的重要技術(shù)問題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中缺乏對煙堿的耐受能力強(qiáng)的耐 煙堿黑色指突水虻種的缺陷，提供一種耐煙堿黑色指突水虻種的強(qiáng)化方法。
[0009] 本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)： 黑色指突水虻是不同于家蠅的另一種昆蟲，其是一種重要的經(jīng)濟(jì)昆蟲和環(huán)保昆蟲，可 利用黑色指突水虻幼蟲處理各種腐敗有機(jī)廢棄物，如啤酒渣、豆渣、雞糞、豬糞和餐廚垃圾 等?，F(xiàn)有黑色指突水虻種對無毒的有機(jī)廢棄物均有較好的生物處理能力，但對不適用鮮煙 葉的處理效果不佳。主要原因是因?yàn)椴贿m用鮮煙葉中含有一定量的煙堿等毒性物質(zhì)，對黑 色指突水虻幼蟲(黑色指突水虻預(yù)蛹)具有一定的毒害和抑制生長的作用。為了利用黑色指 突水虻生物處理不適用鮮煙葉，首先需從野生黑色指突水虻種中篩選出耐煙堿的黑色指突 水虻品種，提高黑色指突水虻對鮮煙葉的耐受能力。
[0010] 本發(fā)明提供一種耐煙堿黑色指突水虻品種的強(qiáng)化方法，包括如下步驟： 初始階段：將耐煙堿黑色指突水虻品種的卵接種在初始培養(yǎng)料中，所述初始培養(yǎng)料含 有如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分：麩皮70?90%、進(jìn)口魚粉10?30%，用質(zhì)量百分比濃度1%〇的 煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70% ;在室內(nèi)條件下，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化 蛹、羽化后，利用水喂養(yǎng)其成蟲； 第1次強(qiáng)化階段：待初始階段的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)生的卵采用第1次強(qiáng)化培養(yǎng)料進(jìn)行 強(qiáng)化培養(yǎng)；所述第1次強(qiáng)化培養(yǎng)料含有如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分：麩皮80%、進(jìn)口魚粉20%， 用質(zhì)量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%，S選自0. 1? 0. 5 ;在室內(nèi)條件下，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲； 第N+1次強(qiáng)化階段：對第N次強(qiáng)化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)，并且第 N+1次強(qiáng)化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度=(第 N次強(qiáng)化培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的自然數(shù)，重復(fù) 強(qiáng)化，直至最后一次強(qiáng)化階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度達(dá)3%。為止。此階 段培養(yǎng)出的黑色指突水虻種即對煙堿具有較高耐受能力。
[0011] 優(yōu)選地，在整個強(qiáng)化階段中，煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度依次為1. 1%。、1. 2%。、 1. 3 %。、1· 4 %。、1· 5 %。、1· 6 %。、1· 7 %。、1· 8 %。、1· 9 %。、2· 0 %。、2· 1 %。、2· 2 %。、2· 3 %。、2· 4 %〇、 2. 5%。、2. 6%。、2. 7%。、2. 8%。、2. 9%。、3. 0%。；也即黑色指突水虻卵共經(jīng)歷20次強(qiáng)化培養(yǎng)。
[0012] 優(yōu)選地，在整個強(qiáng)化階段中，煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度依次為1. 2%。、1. 4%。、 1. 6%。、1· 8%。、2· 0%。、2· 2%。、2· 4%。、2· 6%。、2· 8%。、3· Ο%。；也即黒色指關(guān)水itn卵共經(jīng)歷 10 次 強(qiáng)化培養(yǎng)。
[0013] 優(yōu)選地，在整個強(qiáng)化階段中，煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度依次為1. 5%。、2. 0%。、 2. 5%。、3. 0%。；也即黑色指突水虻卵共經(jīng)歷4次強(qiáng)化培養(yǎng)。
[0014] 所述耐煙堿黑色指突水虻品種是指從野生黑色指突水虻品種中篩選出的耐煙堿 黑色指突水虻品種。
[0015] 所述從野生黑色指突水虻品種中篩選出耐煙堿黑色指突水虻品種的具體方法 為： 51. 配置誘集培養(yǎng)料，將誘集培養(yǎng)料裝入開口容器中； 所述誘集培養(yǎng)料含有如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分：麩皮70?90%、進(jìn)口魚粉10?30%，用 質(zhì)量百分比濃度1%。?2%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70% ; 52. 天氣晴好時(shí)，上午(優(yōu)選8:00)將裝有誘集培養(yǎng)料的容器分別放于生活垃圾堆、雞 場和豬場來誘集野生蟲卵，下午(優(yōu)選17:00)收回放于各處的容器； 53. 將回收的各容器放在室內(nèi)培養(yǎng)，等誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟時(shí)，利用黑色 指突水虻預(yù)蛹的離食期行為將其與配方料分離（即黑色指突水虻預(yù)蛹老熟時(shí)會自行爬離培 養(yǎng)料，尋找干燥的地方化蛹）； 54. 通過黑色指突水虻幼蟲的形態(tài)學(xué)鑒定，挑出黑色指突水虻預(yù)蛹； 55. 篩選出20?25天老熟、每條預(yù)蛹重0. 10?0. 16 g、體態(tài)豐腴、顏色烏黑的黑色指 突水虻預(yù)蛹，在室溫條件下，讓黑色指突水虻預(yù)蛹自然化蛹、羽化后即可獲得耐煙堿的黑色 指突水虻種。
[0016] 優(yōu)選地，所述的室內(nèi)條件為溫度25?30°C，濕度30?70%。
[0017] 所述初始培養(yǎng)料的配置方法為將初始培養(yǎng)料的各組分混勻后，用質(zhì)量百分比濃度 1%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%。
[0018] 優(yōu)選地，每I kg初始培養(yǎng)料中接入黑色指突水虻卵0. 5?I. 0 g ;每I kg強(qiáng)化培 養(yǎng)料中接入黑色指突水虻卵〇. 5?I. 0 g。
[0019] 所述喂養(yǎng)其成蟲均是利用水喂養(yǎng)。優(yōu)選地，所述清水可選擇純凈水、自來水、井水 或無毒的河水等；水喂養(yǎng)的方式是利用海綿吸飽水，供成蟲吮吸。
[0020] 本發(fā)明的有益效果是： 通過科學(xué)確定配伍比例，本發(fā)明創(chuàng)造性地直接采用適宜濃度的煙堿水溶液與麩皮和進(jìn) 口魚粉科學(xué)配伍，獲得的第一配方料不僅成功掩蓋煙堿的難聞和苦味，營養(yǎng)成分適當(dāng)，以及 初始培養(yǎng)料和強(qiáng)化培養(yǎng)料所含營養(yǎng)物質(zhì)和煙堿等含量前后配置的合理性，保證黑色指突水 虻幼蟲生長順利，而且因?yàn)闊焿A含量的適當(dāng)性和確定性，以及初始培養(yǎng)料和強(qiáng)化培養(yǎng)料所 含營養(yǎng)物質(zhì)和煙堿等含量前后配置的合理性，確保在同樣的培育環(huán)境中，不同批次的同樣 重量組成的配方料獲得穩(wěn)定的培育效果。
[0021] 通過本發(fā)明的強(qiáng)化培養(yǎng)方法，既可有效地逐步提高黑色指突水虻種對煙堿的耐受 能力，又不至于對黑色指突水虻種造成嚴(yán)重的滯育，可以循序漸進(jìn)地增強(qiáng)野生黑色指突水 虻種對煙堿的耐受能力，直至培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度達(dá)3%。為止。

【具體實(shí)施方式】
[0022] 下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明采用的試劑、 設(shè)備為本【技術(shù)領(lǐng)域】常規(guī)試劑和設(shè)備。
[0023] 煙堿購于常規(guī)化學(xué)試劑店，純度> 99. 5%。
[0024] 實(shí)施例1從野生黑色指突水虻品種中篩選出耐煙堿黑色指突水虻品種 S01.天氣晴好時(shí)，配制誘集培養(yǎng)料，所述誘集培養(yǎng)料由如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分組 成：麩皮90%、進(jìn)口魚粉10%，用質(zhì)量百分比濃度1%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為 70%。
[0025] S02.將上述調(diào)制好的培養(yǎng)料，每I kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高 =45cm*30cm*12cm)。于當(dāng)日上午8:00將裝有培養(yǎng)料的塑料盆放于一生活垃圾堆旁，下午 17:00收回各處塑料盆，帶回室內(nèi)培養(yǎng)。
[0026] S03.在室內(nèi)條件下(溫度25°C，濕度30%)，將誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟， 利用黑色指突水虻預(yù)蛹的離食期行為將預(yù)蛹與配方料分離（即黑色指突水虻預(yù)蛹老熟時(shí)會 自行爬離培養(yǎng)料，尋找干燥的地方化蛹)。
[0027] S04.在解剖鏡下通過幼蟲的形態(tài)學(xué)鑒定，用鑷子單獨(dú)挑出黑色指突水虻預(yù)蛹，排 除其他蠅種。
[0028] S05.篩選出20?25天老熟、每條預(yù)蛹重0. 10?0. 16 g、體態(tài)豐腴、顏色烏黑的 黑色指突水虻預(yù)蛹，在室溫條件下，讓這些黑色指突水虻預(yù)蛹自然化蛹、羽化后即可獲得耐 煙堿的黑色指突水虻種。
[0029] 實(shí)施例2從野生黑色指突水虻品種中篩選出耐煙堿黑色指突水虻品種 S01.天氣晴好時(shí)，配制誘集培養(yǎng)料，所述誘集培養(yǎng)料由如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分組成： 麩皮80%、進(jìn)口魚粉20%，用質(zhì)量百分比濃度1. 5%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為 70%。
[0030] S02.將上述調(diào)制好的培養(yǎng)料，每Ikg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高 =45cm*30cm*12cm)。于當(dāng)日上午8:00將裝有培養(yǎng)料的塑料盆放于一生活垃圾堆旁，下午 17:00收回各處塑料盆，帶回室內(nèi)培養(yǎng)。
[0031] S03.在室內(nèi)條件下(溫度25°C，濕度30%)，將誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟， 利用黑色指突水虻預(yù)蛹的離食期行為將預(yù)蛹與配方料分離（即黑色指突水虻預(yù)蛹老熟時(shí)會 自行爬離培養(yǎng)料，尋找干燥的地方化蛹)。
[0032] S04.在解剖鏡下通過幼蟲的形態(tài)學(xué)鑒定，用鑷子單獨(dú)挑出黑色指突水虻預(yù)蛹，排 除其他蠅種。
[0033] S05.篩選出20?25天老熟、每條預(yù)蛹重0. 10?0. 16 g、體態(tài)豐腴、顏色烏黑的 黑色指突水虻預(yù)蛹，在室溫條件下，讓這些黑色指突水虻預(yù)蛹自然化蛹、羽化后即可獲得耐 煙堿的黑色指突水虻種。
[0034] 實(shí)施例3從野生黑色指突水虻品種中篩選出耐煙堿黑色指突水虻品種 S01.天氣晴好時(shí)，配制誘集培養(yǎng)料，所述誘集培養(yǎng)料由如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分組 成：麩皮70%、進(jìn)口魚粉30%，用質(zhì)量百分比濃度2%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為 70%。
[0035] S02.將上述調(diào)制好的培養(yǎng)料，每I kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高 =45cm*30cm*12cm)。于當(dāng)日上午8:00將裝有培養(yǎng)料的塑料盆放于一生活垃圾堆旁，下午 17:00收回各處塑料盆，帶回室內(nèi)培養(yǎng)。
[0036] S03.在室內(nèi)條件下(溫度25°C，濕度30%)，將誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟， 利用黑色指突水虻預(yù)蛹的離食期行為將預(yù)蛹與配方料分離（即黑色指突水虻預(yù)蛹老熟時(shí)會 自行爬離培養(yǎng)料，尋找干燥的地方化蛹)。
[0037] S04.在解剖鏡下通過幼蟲的形態(tài)學(xué)鑒定，用鑷子單獨(dú)挑出黑色指突水虻預(yù)蛹，排 除其他蠅種。
[0038] S5.篩選出20?25天老熟、每條預(yù)蛹重0. 10?0. 16 g、體態(tài)豐腴、顏色烏黑的黑 色指突水虻預(yù)蛹，在室溫條件下，讓這些黑色指突水虻預(yù)蛹自然化蛹、羽化后即可獲得耐煙 堿的黑色指突水虻種。
[0039] 實(shí)施例4對篩選出來的耐煙堿黑色指突水虻品種進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)使其耐受質(zhì)量百 分比濃度為3%。的煙堿水溶液的配方料 將實(shí)施例1?3任意實(shí)施例篩選出來的耐煙堿黑色指突水虻品種進(jìn)行培養(yǎng)，使其耐受 質(zhì)量百分比濃度為3%。的煙堿水溶液的配方料，具體方法如下： 511. 初始階段： 配制初始培養(yǎng)料，所述初始培養(yǎng)料由如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分組成：麩皮90%、進(jìn)口魚 粉10%，用質(zhì)量百分比濃度1%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%。將上述調(diào)制好 的培養(yǎng)料，每I kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高=45cm*30cm*12cm)，每盆接入黑色指突 水虻卵0. 8 g ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老 熟、化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲（喂養(yǎng)方法：按照重量百分?jǐn)?shù)計(jì)，所述全脂奶粉、紅糖的用量比 例為全脂奶粉70%，紅糖30% ;水喂養(yǎng)的方式是利用海綿吸飽水，供成蟲吮吸。下同）。
[0040] 強(qiáng)化階段： 512. 第1次強(qiáng)化階段：待初始階段的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)生的卵采用第1次強(qiáng)化培養(yǎng) 料進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)；所述第1次強(qiáng)化培養(yǎng)料含有如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分：麩皮80%、進(jìn)口魚 粉20%，用質(zhì)量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%，S選自 0. 1?0. 5 ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、 化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲。
[0041] S13.第N+1次強(qiáng)化階段：對第N次強(qiáng)化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進(jìn)行強(qiáng)化培 養(yǎng)，并且第N+1次強(qiáng)化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質(zhì)量百分 比濃度=(第N次培育培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的 自然數(shù)，重復(fù)強(qiáng)化，直至最后一次強(qiáng)化階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度達(dá) 3%。為止。
[0042] 優(yōu)選地，本實(shí)施中，在整個培育階段中，煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度依次為 1. 1 %。、1· 2 %。、1· 3 %。、1· 4%。、1· 5 %。、1· 6 %。、1· 7 %。、1· 8 %。、1· 9 %。、2· 0 %。、2· 1 %。、2· 2 %〇、 2. 3%。、2· 4%。、2· 5%。、2· 6%。、2· 7%。、2· 8%。、2· 9%。、3· 0%。；也即黑色指突水虻卵共經(jīng)歷 20 次 強(qiáng)化培養(yǎng)。此階段培養(yǎng)出的黑色指突水虻種即對煙堿具有較高耐受能力。
[0043] 實(shí)施例5對篩選出來的耐煙堿黑色指突水虻品種進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)使其耐受質(zhì)量百 分比濃度為3%。的煙堿水溶液的配方料 將實(shí)施例1?3任意實(shí)施例篩選出來的耐煙堿黑色指突水虻品種進(jìn)行培養(yǎng)，使其耐受 質(zhì)量百分比濃度為3%。的煙堿水溶液的配方料，具體方法如下： 511. 初始階段： 配制初始培養(yǎng)料，所述初始培養(yǎng)料由如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分組成：麩皮80%、進(jìn)口魚 粉20%，用質(zhì)量百分比濃度1%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%。將上述調(diào)制好 的培養(yǎng)料，每I kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高=45cm*30cm*12cm)，每盆接入黑色指突 水虻卵0. 8 g ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老 熟、化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲。
[0044] 強(qiáng)化階段： 512. 第1次強(qiáng)化階段：待初始階段的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)生的卵采用第1次強(qiáng)化培養(yǎng) 料進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)；所述第1次強(qiáng)化培養(yǎng)料含有如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分：麩皮80%、進(jìn)口魚 粉20%，用質(zhì)量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%，S選自 0. 1?0. 5 ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、 化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲； 513. 第N+1次強(qiáng)化階段：對第N次強(qiáng)化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)，并 且第N+1次強(qiáng)化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度 =(第N次培育培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的自然數(shù)， 重復(fù)強(qiáng)化，直至最后一次強(qiáng)化階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度達(dá)3%。為止。
[0045] 優(yōu)選地，本實(shí)施中，在整個培育階段中，煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度依次為 1. 2%?、I. 4%〇、I. 6%〇、1. 8%?、2. 0%?、2. 2%?、2. 4%〇、2. 6%?、2. 8%?、3. 0%?;也即黒色指關(guān)水ifc 卵共經(jīng)歷10次強(qiáng)化培養(yǎng)。此階段培養(yǎng)出的黑色指突水虻種即對煙堿具有較高耐受能力。
[0046] 實(shí)施例6對篩選出來的耐煙堿黑色指突水虻品種進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)使其耐受質(zhì)量百 分比濃度為3%。的煙堿水溶液的配方料 將實(shí)施例1?3任意實(shí)施例篩選出來的耐煙堿黑色指突水虻品種進(jìn)行培養(yǎng)，使其耐受 質(zhì)量百分比濃度為3%。的煙堿水溶液的配方料，具體方法如下： 511. 初始階段： 配制初始培養(yǎng)料，所述初始培養(yǎng)料由如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分組成：麩皮70%、進(jìn)口魚 粉30%，用質(zhì)量百分比濃度1%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%。將上述調(diào)制好 的培養(yǎng)料，每I kg裝入一方形塑料盆中（長*寬*高=45cm*30cm*12cm)，每盆接入黑色指突 水虻卵0. 8 g ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老 熟、化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲。
[0047] 強(qiáng)化階段： 512. 第1次強(qiáng)化階段：待初始階段的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)生的卵采用第1次強(qiáng)化培養(yǎng) 料進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)；所述第1次強(qiáng)化培養(yǎng)料含有如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分：麩皮80%、進(jìn)口魚 粉20%，用質(zhì)量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%，S選自 0. 1?0. 5 ;在室內(nèi)條件下(溫度25?30°C，濕度30?70%)，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、 化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲； 513. 第N+1次強(qiáng)化階段：對第N次強(qiáng)化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)，并 且第N+1次強(qiáng)化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度 =(第N次培育培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的自然數(shù)， 重復(fù)強(qiáng)化，直至最后一次強(qiáng)化階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度達(dá)3%。為止。
[0048] 優(yōu)選地，本實(shí)施中，在整個培育階段中，煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度依次為 1. 5%。、2. 0%。、2. 5%。、3. 0%。;也即黑色指突水虻卵共經(jīng)歷4次強(qiáng)化培養(yǎng)。此階段培養(yǎng)出的黑 色指突水虻種即對煙堿具有較高耐受能力。
[0049] 對比例1 操作同實(shí)施例1，不同的是所述誘集培養(yǎng)料由如下重量百分?jǐn)?shù)的各組分組成：麩皮80% 和進(jìn)口魚粉20%。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)利用如上誘集培養(yǎng)料誘集到的卵都不是耐煙堿的品種。
[0050] 實(shí)施例7 將本發(fā)明實(shí)施例1至3篩選出來的黑色指突水虻品種、實(shí)施例4至6經(jīng)過培養(yǎng)耐受3%。 的煙堿配方料的黑色指突水虻品種、對比例1處理后的黑色指突水虻品種進(jìn)行耐煙堿能力 測試，測試過程為： 分別取所述實(shí)施例培養(yǎng)處理后的黑色指突水虻成蟲所產(chǎn)的卵〇. 5g，分別接入Ikg重的 含較高質(zhì)量百分比濃度煙堿水溶液的配方料(麩皮80%、進(jìn)口魚粉20%，用質(zhì)量百分比濃度 3. 0%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%)中，測試結(jié)果見表1所示： 表1

【權(quán)利要求】
1. 一種耐煙堿黑色指突水虻品種的強(qiáng)化方法，其特征在于，包括如下步驟： 初始階段：將耐煙堿黑色指突水虻品種的卵接種在初始培養(yǎng)料中，所述初始培養(yǎng)料由 以下各重量分?jǐn)?shù)的組分組成：麩皮70?90%、進(jìn)口魚粉10?30%，用質(zhì)量百分比濃度1%〇的 煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70% ;在室內(nèi)條件下，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化 蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲； 第1次強(qiáng)化階段：待初始階段的成蟲產(chǎn)卵后，將其產(chǎn)的卵采用第1次強(qiáng)化培養(yǎng)料進(jìn)行強(qiáng) 化培養(yǎng)；所述第1次強(qiáng)化培養(yǎng)料由以下各重量分?jǐn)?shù)的各組分組成：麩皮70?90%、進(jìn)口魚粉 10?30%，用質(zhì)量百分比濃度（1+S) %。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70%，S選自 0. 1?0. 5 ;在室內(nèi)條件下，將上述蟲卵培育至幼蟲老熟、化蛹、羽化后，喂養(yǎng)其成蟲； 第N+1次強(qiáng)化階段：對第N次強(qiáng)化階段所得的成蟲產(chǎn)的卵再次進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)，并且第 N+1次強(qiáng)化階段所用的培養(yǎng)料所含組分符合如下比例：煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度=(第 N次強(qiáng)化培養(yǎng)料中煙堿的含量+S) %。，其余組分含量不變，N為大于等于1的自然數(shù)，重復(fù) 強(qiáng)化，直至最后一次強(qiáng)化階段所述培養(yǎng)料中煙堿水溶液的質(zhì)量百分比濃度達(dá)3%。為止。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述強(qiáng)化方法，其特征在于，所述室內(nèi)條件為溫度25?30°C，濕度 30 ?70%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述強(qiáng)化方法，其特征在于，所述初始培養(yǎng)料的配置方法為將初始 培養(yǎng)料的各組分混勻后，加入特定濃度的煙堿水溶液將培養(yǎng)料的濕度調(diào)至70%。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述強(qiáng)化方法，其特征在于，每1 kg初始培養(yǎng)料中接入黑色指突水 虻卵0. 5?1. 0g ;每1 kg強(qiáng)化培養(yǎng)料中接入黑色指突水虻卵0. 5?1. 0 g。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述培育方法，其特征在于，所述喂養(yǎng)其成蟲是利用水喂養(yǎng)。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1或5所述強(qiáng)化方法，其特征在于，所述清水為純凈水、自來水、井水或 無毒的河水；利用水喂養(yǎng)的方式是采用海綿吸飽水，供成蟲吮吸。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述強(qiáng)化方法，其特征在于，所述耐煙堿黑色指突水虻品種的篩選 方法為：
51. 配置誘集培養(yǎng)料，將誘集培養(yǎng)料裝入開口容器中； 所述誘集培養(yǎng)料由以下各重量分?jǐn)?shù)的各組分組成：麩皮70?90%、進(jìn)口魚粉10?30%， 用質(zhì)量百分比濃度1%。?2%。的煙堿水溶液將上述配方料調(diào)至濕度為70% ;
52. 天氣晴好時(shí)，上午將裝有誘集培養(yǎng)料的容器分別放于生活垃圾堆、雞場和豬場來誘 集野生蟲卵，下午收回放于各處的容器；
53. 將回收的各容器放在室內(nèi)培養(yǎng)，等誘集到的野生蟲卵培育至幼蟲老熟時(shí)，利用黑色 指突水虻預(yù)蛹的離食期行為將預(yù)蛹與配方料分離；
54. 通過黑色指突水虻幼蟲的形態(tài)學(xué)鑒定，挑出黑色指突水虻預(yù)蛹；
55. 篩選出20?25天老熟、每條預(yù)蛹重0. 10?0. 16g、體態(tài)豐腴、顏色烏黑的黑色指 突水虻預(yù)蛹，在室溫條件下，讓黑色指突水虻預(yù)蛹自然化蛹、羽化后即可獲得耐煙堿的黑色 指突水虻種。
【文檔編號】A01K67/033GK104285898SQ201410421796
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年8月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月25日
【發(fā)明者】陳澤鵬, 胡新軍 申請人:中國煙草總公司廣東省公司, 中山大學(xué)