甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，該方法主要是選取繼代增殖無根甘蔗組培苗開瓶煉苗,同時噴施植物生長促進(jìn)液，煉苗2-3天后將試管苗取出清洗，進(jìn)行消毒和生長素溶液浸泡處理，最后將試管苗分成單株或小叢種植于種植盆中并放入育苗溫室進(jìn)行培育生根。本發(fā)明的甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，省去了無根試管苗的試管內(nèi)生根的傳統(tǒng)程序，用自養(yǎng)生根代替?zhèn)鹘y(tǒng)的異養(yǎng)生根，縮短育苗周期，節(jié)約生產(chǎn)成本，有利于甘蔗健康試管苗的大規(guī)模生產(chǎn)和推廣。
【專利說明】甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物試管苗的光合自養(yǎng)生根方法，具體涉及一種甘蔗試管苗光合 自養(yǎng)生根方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 植物組織培養(yǎng)一般要經(jīng)過四個階段，即初代培養(yǎng)（或建立無菌培養(yǎng)體系）、繼代增 殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽。目前，已在生產(chǎn)上大規(guī)模應(yīng)用的甘蔗試管苗快速繁育技術(shù)也 包括了以上四個階段。然而這種傳統(tǒng)的甘蔗試管苗生產(chǎn)過程復(fù)雜，且對培養(yǎng)環(huán)境條件高，致 使甘蔗組織培養(yǎng)工廠化生產(chǎn)試管苗的成本居高不下，已經(jīng)不能為市場所接受，限制了甘蔗 健康種苗的種植和推廣。因而，簡化甘蔗試管苗生產(chǎn)程序，降低生產(chǎn)成本，是解決制約甘蔗 健康種苗大規(guī)模生產(chǎn)推廣這一難題的最有效途徑。
[0003] 研究表明，在植物組織培養(yǎng)過程中，試管苗的生根成本占整個試管苗生產(chǎn)成本的 35 %?75 %，因此簡化試管苗生根技術(shù)可使植物試管苗生產(chǎn)成本大幅度下降。試管苗瓶外 生根技術(shù)是近年研究成功的一項先進(jìn)的組培生根技術(shù)，是植物試管苗簡化生產(chǎn)技術(shù)的重要 組成部分。試管苗瓶外生根技術(shù)是將無根試管苗直接栽培于溫室苗圃中進(jìn)行生根，將傳統(tǒng) 的生根和馴化兩個階段結(jié)合起來，省去了無根試管苗的試管內(nèi)生根的傳統(tǒng)程序，用自養(yǎng)生 根代替?zhèn)鹘y(tǒng)的異養(yǎng)生根，縮短育苗周期，節(jié)約生產(chǎn)成本。同時，植物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展非 常迅速，國內(nèi)外對滿天星、羅漢果、牡丹、甘蔗、草莓等一大批植物試管苗瓶外生根技術(shù)進(jìn)行 了研究，并獲得了成功。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是克服傳統(tǒng)甘蔗試管苗生產(chǎn)過程復(fù)雜，培養(yǎng)環(huán)境要求嚴(yán)格，成本高 的難題，提供一種甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法。
[0005] 本發(fā)明是通過如下方式實現(xiàn)的：
[0006] 甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，包括以下步驟：
[0007] (1)選取繼代增殖無根甘蔗苗置于繼代增殖培養(yǎng)基中，放于陰涼、避風(fēng)處，打開瓶 蓋，噴施植物生長調(diào)節(jié)劑混合液，煉苗1-2天；
[0008] (2)第2天從瓶中取出試管苗，用清水洗凈培養(yǎng)基，晾干后用0. 4-0. 8%的高錳酸 鉀溶液浸泡消毒3-8分鐘，再次用清水洗凈高錳酸鉀溶液，晾干，接著將試管苗置于含萘乙 酸80-140mg/L、吲哚丁酸60-120mg/L的生長素混合液中浸泡20-40分鐘；
[0009] (3)將試管苗分成單株或小叢種植于放有栽培基質(zhì)的種植盆中，移入育苗溫室進(jìn) 行培育管理：
[0010] 種植第1天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度90 %，每間隔10分鐘噴淋10秒；濕度要求 90-100% ；
[0011] 種植第2-6天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度80%，每間隔10分鐘噴淋10秒；濕度要求 80-100% ；
[0012] 種植第7-9天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度75%，每間隔10分鐘噴淋10秒，濕度要求 75-100% ；
[0013] 種植第10-11天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔10分鐘噴淋10秒，濕度要求 70-100% ；
[0014] 種植第12天后設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔30分鐘噴淋10秒，略高于自然 濕度，即得到長出健壯根系的甘蔗試管苗。
[0015] 進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟（1)中，所述植物生長調(diào)節(jié)劑混合液為濃度10-20mg/L的赤霉 素（GA 3)和濃度20-200mg/L吲哚丁酸按重量比1:2-20混合。
[0016] 進(jìn)一步優(yōu)選的，所用甘蔗的品種為新臺糖22號，該品種萌芽良好，分蘗力強(qiáng)，甘蔗 基部粗大，不易倒伏及抽穗開花，內(nèi)容充實抗病力較強(qiáng)，適宜在廣西種植。
[0017] 進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟（1)中，所述繼代增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA l.Omg/L、萘乙酸 0. 01mg/L、蔗糖20g/L，培養(yǎng)基為常規(guī)繼代增殖培養(yǎng)，加入適量6-BA和萘乙酸，可以促進(jìn)試 管苗分蘗和生長。
[0018] 進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟（3)中，所述栽培基質(zhì)為蛭石與蔗葉有機(jī)肥混合物，蛭石盛于 種植盆內(nèi)，可以疏松土壤，透氣性好，吸水力強(qiáng)，溫度變化小，有利于植株的生長，蔗葉有機(jī) 肥含有氮、磷、鉀、鎂、鈣、硫等多種甘蔗生長所必需的營養(yǎng)成分，且成本低廉。
[0019] 進(jìn)一步優(yōu)選的，所述蛭石與蔗葉有機(jī)肥的體積比為1 :1。
[0020] 進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟（3)中，所述育苗溫室用遮陽網(wǎng)控制光照強(qiáng)度，光照強(qiáng)度控制 為2000-100001X，溫度控制為20-35°C，幼苗培養(yǎng)初期對環(huán)境進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)，是其處于半自 然的生長環(huán)境，利于幼苗的生根和存活，也使幼苗得到鍛煉，能較好的適應(yīng)自然條件，利于 下一步生根存活。
[0021] 本發(fā)明的有益效果是：
[0022] 1.將甘蔗無根試管苗直接栽培于日光溫室中進(jìn)行自養(yǎng)生根，用自養(yǎng)生根方法代替 了傳統(tǒng)的試管內(nèi)生根或異養(yǎng)生根方法，甘蔗試管苗組織培養(yǎng)過程由傳統(tǒng)的四個階段簡化為 三個階段，節(jié)省培養(yǎng)室占用空間、勞動力、生根培養(yǎng)基化學(xué)試劑和能源投入，顯著地提高了 生產(chǎn)效率。
[0023] 2.在溫室培育生根過程中不要求無菌環(huán)境，操作簡單，節(jié)省能源及勞動力投入。
[0024] 3.試管苗生根栽培基質(zhì)為價格較為低廉的蛭石與蔗葉有機(jī)肥混合物代替昂貴的 MS生根培養(yǎng)基，利于降低成本。
[0025] 4.由于試管苗生根一苗圃馴化進(jìn)行有機(jī)結(jié)合，生產(chǎn)周期比傳統(tǒng)方法縮短12-15 天。
[0026] 5.試管苗存活率高，可達(dá)到80-90%，達(dá)到有根試管苗圃移栽存活率水平。
[0027] 6.由于甘蔗試管苗組織培養(yǎng)過程由傳統(tǒng)的四個階段簡化為三個階段，加之甘蔗試 管苗光合自養(yǎng)生根方法操作簡單，與傳統(tǒng)苗圃移栽及管理方法沒有太大差異，甘蔗試管苗 生產(chǎn)成本比傳統(tǒng)方法生產(chǎn)成本降低35-40 %，經(jīng)濟(jì)效益顯著。

【具體實施方式】
[0028] 下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述，但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍和應(yīng)用 范圍。
[0029] 實施例I
[0030] 甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，包括以下步驟：
[0031] (1)選取新臺糖22號繼代增殖無根甘蔗苗置于含MS+6-BA 1.0mg/L+萘乙酸 0. Olmg/L+蔗糖20g/L的繼代增殖培養(yǎng)基中，放于陰涼、避風(fēng)處，打開瓶蓋，噴施含重量比 1:2的赤霉素（GA3)(濃度10mg/L)和吲哚丁酸（濃度20mg/L)植物生長調(diào)節(jié)劑混合液，，煉 苗1天；
[0032] (2)第2天從瓶中取出試管苗，用清水洗凈培養(yǎng)基，晾干后用0. 4%的高錳酸鉀 溶液浸泡消毒6分鐘，再次用清水洗凈高錳酸鉀溶液，晾干，接著將試管苗置于含萘乙酸 100mg/L、卩引哚丁酸100mg/L的生長素混合液中浸泡30分鐘，瞭干；
[0033] (3)將試管苗分成單株種植于含有由體積比1:1的蛭石與蔗葉有機(jī)肥混合物組成 的栽培基質(zhì)的種植盆中，移入育苗溫室，育苗溫室透光率控制為10 %，光照強(qiáng)度控制為不高 于80001x，溫度控制為25-35°C，對溫室濕度和噴淋參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)，管理試管苗的生長：種 植第1天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度90%，每間隔10分鐘噴淋10秒；種植第2-6天設(shè)置噴淋參 數(shù)為濕度80%，每間隔10分鐘噴淋10秒；種植第7-9天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度75%，每間隔 10分鐘噴淋10秒，種植第10-11天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔10分鐘噴淋10秒； 種植第12天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔30分鐘噴淋10秒。
[0034] 種植第13天對試管苗進(jìn)行統(tǒng)計，種植50株，存活41株，存活率為82%。
[0035] 實施例2
[0036] 甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，包括以下步驟：
[0037] (1)選取新臺糖22號繼代增殖無根甘蔗苗置于含MS+6-BA 1.0mg/L、萘乙酸 0. Olmg/L、蔗糖20g/L的繼代增殖培養(yǎng)基中，放于陰涼、避風(fēng)處，打開瓶蓋，噴施含重量比 1:5的赤霉素（GA3)(濃度10mg/L)和吲哚丁酸（濃度50mg/L)植物生長調(diào)節(jié)劑混合液，，煉 苗1天；
[0038] (2)第2天從瓶中取出試管苗，用清水洗凈培養(yǎng)基，晾干后用0. 4%的高錳酸鉀 溶液浸泡消毒6分鐘，再次用清水洗凈高錳酸鉀溶液，晾干，接著將試管苗置于含萘乙酸 100mg/L、卩引哚丁酸100mg/L的生長素混合液中浸泡30分鐘，瞭干；
[0039] (3)將試管苗分成小叢種植于含有由由體積比1:1的蛭石與蔗葉有機(jī)肥混合物組 成的栽培基質(zhì)的種植盆中，移入育苗溫室，育苗溫室透光率控制為10 %，光照強(qiáng)度控制為不 高于80001x，溫度控制為25-35°C，對溫室濕度和噴淋參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)，管理試管苗的生長： 種植第1天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度90%，每間隔10分鐘噴淋10秒；種植第2-6天設(shè)置噴淋參 數(shù)為濕度80%，每間隔10分鐘噴淋10秒；種植第7-9天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度75%，每間隔 10分鐘噴淋10秒，種植第10-11天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔10分鐘噴淋10秒； 種植第12天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔30分鐘噴淋10秒。
[0040] 種植第13天對試管苗進(jìn)行統(tǒng)計，種植50叢，存活43叢，存活率為86%。
[0041] 實施例3
[0042] 甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，包括以下步驟：
[0043] (1)選取新臺糖22號繼代增殖無根甘蔗苗置于含MS+6-BA l.Omg/L+萘乙酸 0. 01mg/L+蔗糖20g/L的繼代增殖培養(yǎng)基中，放于陰涼、避風(fēng)處，打開瓶蓋，噴施含重量比 1:10的赤霉素（GA3)(濃度10mg/L)和吲哚丁酸（濃度100mg/L)植物生長調(diào)節(jié)劑混合液，， 煉苗1天；
[0044] (2)第2天從瓶中取出試管苗，用清水洗凈培養(yǎng)基，晾干后用0. 4%的高錳酸鉀 溶液浸泡消毒6分鐘，再次用清水洗凈高錳酸鉀溶液，晾干，接著將試管苗置于含萘乙酸 100mg/L、卩引哚丁酸100mg/L的生長素混合液中浸泡30分鐘，瞭干；
[0045] (3)將試管苗分成小叢種植于含有由體積比1:1的蛭石與蔗葉有機(jī)肥混合物組成 的栽培基質(zhì)的種植盆中，移入育苗溫室，育苗溫室透光率控制為10 %，光照強(qiáng)度控制為不高 于80001X，溫度控制為25-35°C，對溫室濕度和噴淋參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)，管理試管苗的生長：種 植第1天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度90%，每間隔10分鐘噴淋10秒；種植第2-6天設(shè)置噴淋參 數(shù)為濕度80 %，每間隔10分鐘噴淋10秒；種植第7-9天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度75 %，每間隔 10分鐘噴淋10秒，種植第10-11天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔10分鐘噴淋10秒； 種植第12天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔30分鐘噴淋10秒。
[0046] 種植第13天對試管苗進(jìn)行統(tǒng)計，種植45叢，存活38叢，存活率為84%。
[0047] 實施例4
[0048] 甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，包括以下步驟：
[0049] (1)選取新臺糖22號繼代增殖無根甘蔗苗置于含MS+6-BA l.Omg/L+萘乙酸 0. 01mg/L+蔗糖20g/L的繼代增殖培養(yǎng)基中，放于陰涼、避風(fēng)處，打開瓶蓋，噴施含重量比 1:20的赤霉素（GA3)(濃度10mg/L)和吲哚丁酸（濃度200mg/L)植物生長調(diào)節(jié)劑混合液，， 煉苗1天；
[0050] (2)第2天從瓶中取出試管苗，用清水洗凈培養(yǎng)基，晾干后用0. 4%的高錳酸鉀 溶液浸泡消毒6分鐘，再次用清水洗凈高錳酸鉀溶液，晾干，接著將試管苗置于含萘乙酸 100mg/L、卩引哚丁酸100mg/L的生長素混合液中浸泡30分鐘，瞭干；
[0051] (3)將試管苗分成單株種植于含有由由體積比1:1的蛭石與蔗葉有機(jī)肥混合物組 成的栽培基質(zhì)的種植盆中，移入育苗溫室，育苗溫室透光率控制為12%，光照強(qiáng)度控制為 95001x，溫度控制為35°C，對溫室濕度和噴淋參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)，管理試管苗的生長：種植第1 天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度90 %，每間隔10分鐘噴淋10秒；種植第2-6天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕 度80%，每間隔10分鐘噴淋10秒；種植第7-9天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度75%，每間隔10分 鐘噴淋10秒，種植第10-11天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔10分鐘噴淋10秒；種植 第12天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔30分鐘噴淋10秒。
[0052] 種植第13天對試管苗進(jìn)行統(tǒng)計，種植40株，存活38株，存活率為95%。
[0053] 對比實施例1
[0054] 作為對比，采用生長調(diào)節(jié)劑赤霉素（GA3)(代號為A)、奈乙酸（代號為B)替代吲哚 丁酸（代號為C)，按照實施例1-4的方案培育甘蔗試管苗，統(tǒng)計甘蔗試管苗的存活率，結(jié)果 如表1所示：
[0055] 表1不同生長調(diào)節(jié)劑處理的甘蔗試管苗存活率
[0056]

【權(quán)利要求】
1. 甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 選取繼代增殖無根甘蔗苗置于繼代增殖培養(yǎng)基中，放于陰涼、避風(fēng)處，打開瓶蓋，噴 施植物生長調(diào)節(jié)劑混合液，煉苗1-2天； (2) 煉苗后從瓶中取出試管苗，用清水洗凈培養(yǎng)基，晾干后用0. 4-0. 8%的高錳酸鉀溶 液浸泡消毒3-8分鐘，再次用清水洗凈高錳酸鉀溶液，晾干，接著將試管苗置于含萘乙酸 80-140 mg/L、吲哚丁酸60-120 mg/L的生長素混合液中浸泡20-40分鐘； (3) 將試管苗分成單株或小叢種植于放有栽培基質(zhì)的種植盆中，移入育苗溫室進(jìn)行生 根培育管理： 種植第1天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度90%，每間隔10分鐘噴淋10秒；濕度要求90-100% ; 種植第2-6天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度80%，每間隔10分鐘噴淋10秒；濕度要求80-100% ; 種植第7-9天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度75%，每間隔10分鐘噴淋10秒，濕度要求75-100% ; 種植第10-11天設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔10分鐘噴淋10秒，濕度要求 70-100% ； 種植第12天后設(shè)置噴淋參數(shù)為濕度70%，每間隔30分鐘噴淋10秒，略高于自然濕度； 即得到長出健壯根系的甘蔗試管苗。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，其特征在于，步驟（1)中，所 述植物生長調(diào)節(jié)劑混合液為濃度10_20mg/L的赤霉素（GA 3)和濃度20-200 mg/L吲哚丁酸 按重量比1:2-20混合。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，其特征在于，所用甘蔗的 品種為新臺糖22號。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，其特征在于，步驟（1)中，所 述繼代增殖培養(yǎng)基包括MS+6-BA 1.0 mg/L、萘乙酸0.01 mg/L、蔗糖20 g/L。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，其特征在于，步驟（3)中，所 述栽培基質(zhì)為蛭石與蔗葉有機(jī)肥混合物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，其特征在于，所述蛭石與蔗 葉有機(jī)肥的體積比為1 :1。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根方法，其特征在于，步驟（3)中，所 述育苗溫室為用遮陽網(wǎng)控制光照強(qiáng)度，光照強(qiáng)度為2000-10000 lx，溫度為20-35°C。
【文檔編號】A01H4/00GK104273030SQ201410536662
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2014年10月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月11日
【發(fā)明者】何為中 申請人:廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院甘蔗研究所