本發(fā)明涉及一種松杉靈芝速生栽培方法，尤其涉及一種可實(shí)現(xiàn)將松杉靈芝生產(chǎn)周期縮短到1年時(shí)間的松杉靈芝人工栽培方法。
背景技術(shù)：
松杉靈芝(Ganoderma tsugae Murr.)，別名鐵杉靈芝、鐵杉樹(shù)芝。生長(zhǎng)在針葉樹(shù)倒腐木上，以落葉松、云、冷杉為主要寄主，在我國(guó)主要分布在黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古等溫帶地區(qū)。松杉靈芝入藥在我國(guó)已有悠久的歷史，是中藥寶庫(kù)中一味珍貴藥材，具有增強(qiáng)免疫、抑制腫瘤、保肝解毒、改善心腦血管、安神健腦、調(diào)節(jié)消化系統(tǒng)機(jī)能、潤(rùn)肺平喘、抗衰老、美容美顏的作用。
近幾年，松杉靈芝的藥用價(jià)值被廣泛認(rèn)可，市場(chǎng)銷(xiāo)售前景較好，因此開(kāi)展松杉靈芝的人工代料栽培具有可觀的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
松杉靈芝是一種高腐生菌，一般兩年為1個(gè)生產(chǎn)周期。當(dāng)年也可出芝，但產(chǎn)量非常低，浪費(fèi)人工管理，還影響第二年出芝產(chǎn)量，養(yǎng)殖當(dāng)年出芝見(jiàn)效的探索道路還很漫長(zhǎng)。本發(fā)明通過(guò)合理安排栽培季節(jié)，采取價(jià)格低廉的松樹(shù)木屑為原料，集成了原材料發(fā)酵、變溫刺激的后熟管理以及專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土等技術(shù)，將松杉靈芝的生產(chǎn)周期縮短到1年時(shí)間，產(chǎn)量與兩年出芝的產(chǎn)量相當(dāng)，降低了管理和生產(chǎn)成本，具有很好的經(jīng)濟(jì)效益。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，而提供了一種松杉靈芝速生栽培方法。
本發(fā)明的一種松杉靈芝速生栽培方法，它是按照以下步驟進(jìn)行的：
一、菌種選擇：選取野生靈芝作為種源；
二、靈芝培養(yǎng)基制備：按質(zhì)量百分含量計(jì)，將75～85％的落葉松木木屑、10～20％麩皮、1～2％豆粉、0.5～1％石灰、0.5～1％蔗糖和0.5～1％石膏粉混合后，即得靈芝培養(yǎng)基；靈芝培養(yǎng)基的含水量為60％～65％；
三、將步驟二的靈芝培養(yǎng)基進(jìn)行拌料與裝袋，滅菌；
四、將步驟一的菌種接種至滅菌后的靈芝培養(yǎng)基中，進(jìn)行菌絲培養(yǎng)，后熟管理；
五、選地建棚：
土地經(jīng)深翻暴曬，按東西走向整畦，畦寬1.5米，高20厘米，畦間走道30厘米，四周開(kāi)20厘米排水溝，建棚，并撒滅蟲(chóng)藥，棚兩側(cè)設(shè)通風(fēng)門(mén)，大棚上覆塑料大棚膜和遮陽(yáng)網(wǎng)；
六、將步驟四的菌絲培養(yǎng)后的菌袋采用墻式碼垛方式置于步驟五建的大棚內(nèi)，并進(jìn)行脫袋覆土；
七、出芝管理：控制大棚內(nèi)的溫度至23℃～28℃，空氣相對(duì)濕度保持在80％～90％；
八、進(jìn)行子實(shí)體采收，即完成所述的松杉靈芝速生栽培；
其中，在配制步驟二中所述的靈芝培養(yǎng)基前，對(duì)靈芝培養(yǎng)基的原料進(jìn)行預(yù)處理，具體過(guò)程如下：
1)預(yù)濕：建堆前1天，先將落葉松木木屑過(guò)篩，然后與麩皮、豆粉、石灰、蔗糖和石膏粉混合均勻，加水浸透培養(yǎng)料至含水量達(dá)到65％-70％為止；
2)對(duì)待建料堆的場(chǎng)地和工具進(jìn)行消毒；
3)建堆：在建堆場(chǎng)地，邊建堆邊均勻地灑水，先鋪一層步驟1)厚度為15～25厘米預(yù)濕的培養(yǎng)料，然后撒一層混合降解菌，再鋪一層厚度為15～25厘米預(yù)濕的培養(yǎng)料，再撒一層混合降解菌，依次堆起至高度100厘米，上寬80～90厘米，下寬120～200厘米的堆料；建堆后，在堆頂和堆的兩側(cè)豎直和斜向用2×0.1米的木棍相隔1米扎洞通氣，堆料四周挖排水溝；
4)發(fā)酵、翻堆、補(bǔ)水：建堆后第二天開(kāi)始升溫發(fā)酵，當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持48小時(shí)進(jìn)行第一次翻堆，將上層的料倒到下層，下層的料倒到上層，外層的料倒到中間，中間的料倒到外層，翻堆時(shí)注意補(bǔ)水，重新建堆后當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持24小時(shí)進(jìn)行第二次翻堆；
5)重復(fù)步驟4)的操作3～4次；使堆料柔軟富有彈性，色澤呈褐色到棕褐色，無(wú)異味。
所述的混合降解菌為將木質(zhì)纖維素降解菌II83、木質(zhì)纖維素降解菌K24和木質(zhì)纖維素降解菌K20混合而成，混合降解菌的制備過(guò)程如下：
將將木質(zhì)纖維素降解菌II83、木質(zhì)纖維素降解菌K24和木質(zhì)纖維素降解菌K20分別接種至搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，在37℃，避光，180r/min振蕩培養(yǎng)5天；將培養(yǎng)后的三個(gè)菌株的菌液分別以10％的接種量接入固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃，避光培養(yǎng)20天，或者將三個(gè)菌株的菌液分別以10％的接種量接入液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃，靜止培養(yǎng)5天；
所述的搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基組分為：蛋白胨1～3g，NH4NO31～2g，CaCl20.1～0.5g，K2HPO40.3～0.7g，F(xiàn)eCl30.01～0.03，MgSO4·7H2O 0.3～0.7g，NaCl 1～2g，蒸餾水1000mL，pH＝7.0；
所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)基按質(zhì)量百分比計(jì)組分為：稻草秸稈60％、粗木屑38％，石灰1％，石膏1％；含水量為60％；
所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基組分為：葡萄糖3～7g，蛋白胨1～3g，NH4NO31～2g，CaCl20.1～0.3g，K2HPO40.3～0.7g，F(xiàn)eCl30.01～0.03，MgSO4·7H2O 0.3～0.7g，NaCl 1～2g，蒸餾水1000mL，pH＝7.0。
本發(fā)明包含以下有益效果：
1、本發(fā)明中所栽培的松杉靈芝菌絲體，具有以下的形態(tài)特征，將松杉靈芝菌株接種到PDA平板培養(yǎng)基上，在25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5-7天后，菌絲體呈黃褐色，長(zhǎng)勢(shì)好；將松杉靈芝菌株接種到木屑試管培養(yǎng)基上，在25℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，生長(zhǎng)速度約為2.04mm/d。
2、本發(fā)明中所栽培的松杉靈芝子實(shí)體，具有以下的形態(tài)特征，菌蓋(15-18)cm×(7-9)cm，近柄處菌蓋厚2-3cm，扇形或腎形；菌蓋表面紅褐色，邊緣新生部分呈白色至淡黃色，成熟個(gè)體菌蓋近柄處顏色由黃褐色變成紅褐色，漆樣光澤逐漸變強(qiáng)，成熟個(gè)體的邊緣通常有同心環(huán)帶的褶皺。菌孔面白色至乳白色，菌肉黃褐色至淺灰褐色，軟纖維質(zhì)至軟木質(zhì)。菌柄長(zhǎng)5-8cm，粗3.5-5.5cm，扁圓柱形，呈紅褐色至紫褐色，革質(zhì)，菌柄的菌肉呈淺褐色，纖維質(zhì)至木質(zhì)。
3、本發(fā)明中松杉靈芝栽培方法的產(chǎn)量和生物學(xué)效率，本發(fā)明中松杉靈芝栽培方法的松杉靈芝單支干品質(zhì)量為25-32g，每平方米產(chǎn)量為629-800g。本發(fā)明中松杉靈芝栽培方法的生物學(xué)效率可達(dá)5-8％，獲得的松杉靈芝口感較苦，商品性狀佳，可滿(mǎn)足市場(chǎng)需求。
4、本發(fā)明的方法可實(shí)現(xiàn)一種松杉靈芝速生栽培方法，通過(guò)合理安排栽培季節(jié)，采取價(jià)格低廉的松樹(shù)木屑為原料，集成了原材料發(fā)酵、變溫刺激的后熟管理以及專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土等技術(shù)，將松杉靈芝的生產(chǎn)周期縮短到1年時(shí)間，產(chǎn)量與兩年出芝的產(chǎn)量相當(dāng)。養(yǎng)菌時(shí)應(yīng)注意通風(fēng)、遮蓋，防止溫度過(guò)低。
具體實(shí)施方式
具體實(shí)施方式一：本實(shí)施方式的本發(fā)明的一種松杉靈芝速生栽培方法，它是按照以下步驟進(jìn)行的：
一、菌種選擇：選取野生靈芝作為種源；
二、靈芝培養(yǎng)基制備：按質(zhì)量百分含量計(jì)，將75～85％的落葉松木木屑、10～20％麩皮、1～2％豆粉、0.5～1％石灰、0.5～1％蔗糖和0.5～1％石膏粉混合后，即得靈芝培養(yǎng)基；靈芝培養(yǎng)基的含水量為60％～65％；
三、將步驟二的靈芝培養(yǎng)基進(jìn)行拌料與裝袋，滅菌；
四、將步驟一的菌種接種至滅菌后的靈芝培養(yǎng)基中，進(jìn)行菌絲培養(yǎng)，后熟管理；
五、選地建棚：
土地經(jīng)深翻暴曬，按東西走向整畦，畦寬1.5米，高20厘米，畦間走道30厘米，四周開(kāi)20厘米排水溝，建棚，并撒滅蟲(chóng)藥，棚兩側(cè)設(shè)通風(fēng)門(mén)，大棚上覆塑料大棚膜和遮陽(yáng)網(wǎng)；
六、將步驟四的菌絲培養(yǎng)后的菌袋采用墻式碼垛方式置于步驟五建的大棚內(nèi)，并進(jìn)行脫袋覆土；
七、出芝管理：控制大棚內(nèi)的溫度至23℃～28℃，空氣相對(duì)濕度保持在80％～90％；
八、進(jìn)行子實(shí)體采收，即完成所述的松杉靈芝速生栽培；
其中，在配制步驟二中所述的靈芝培養(yǎng)基前，對(duì)靈芝培養(yǎng)基的原料進(jìn)行預(yù)處理，具體過(guò)程如下：
1)預(yù)濕：建堆前1天，先將落葉松木木屑過(guò)篩，然后與麩皮、豆粉、石灰、蔗糖和石膏粉混合均勻，加水浸透培養(yǎng)料至含水量達(dá)到65％-70％為止；
2)對(duì)待建料堆的場(chǎng)地和工具進(jìn)行消毒；
3)建堆：在建堆場(chǎng)地，邊建堆邊均勻地灑水，先鋪一層步驟1)厚度為15～25厘米預(yù)濕的培養(yǎng)料，然后撒一層混合降解菌，再鋪一層厚度為15～25厘米預(yù)濕的培養(yǎng)料，再撒一層混合降解菌，依次堆起至高度100厘米，上寬80～90厘米，下寬120～200厘米的堆料；建堆后，在堆頂和堆的兩側(cè)豎直和斜向用2×0.1米的木棍相隔1米扎洞通氣，堆料四周挖排水溝；
4)發(fā)酵、翻堆、補(bǔ)水：建堆后第二天開(kāi)始升溫發(fā)酵，當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持48小時(shí)進(jìn)行第一次翻堆，將上層的料倒到下層，下層的料倒到上層，外層的料倒到中間，中間的料倒到外層，翻堆時(shí)注意補(bǔ)水，重新建堆后當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持24小時(shí)進(jìn)行第二次翻堆；
5)重復(fù)步驟4)的操作3～4次；使堆料柔軟富有彈性，色澤呈褐色到棕褐色，無(wú)異味。
所述的混合降解菌為將木質(zhì)纖維素降解菌II83、木質(zhì)纖維素降解菌K24和木質(zhì)纖維素降解菌K20混合而成，混合降解菌的制備過(guò)程如下：
將將木質(zhì)纖維素降解菌II83、木質(zhì)纖維素降解菌K24和木質(zhì)纖維素降解菌K20分別接種至搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，在37℃，避光，180r/min振蕩培養(yǎng)5天；將培養(yǎng)后的三個(gè)菌株的菌液分別以10％的接種量接入固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃，避光培養(yǎng)20天，或者將三個(gè)菌株的菌液分別以10％的接種量接入液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃，靜止培養(yǎng)5天；
所述的搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基組分為：蛋白胨1～3g，NH4NO31～2g，CaCl20.1～0.5g，K2HPO40.3～0.7g，F(xiàn)eCl30.01～0.03，MgSO4·7H2O 0.3～0.7g，NaCl 1～2g，蒸餾水1000mL，pH＝7.0；
所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)基按質(zhì)量百分比計(jì)組分為：稻草秸稈60％、粗木屑38％，石灰1％，石膏1％；含水量為60％；
所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基組分為：葡萄糖3～7g，蛋白胨1～3g，NH4NO31～2g，CaCl20.1～0.3g，K2HPO40.3～0.7g，F(xiàn)eCl30.01～0.03，MgSO4·7H2O 0.3～0.7g，NaCl 1～2g，蒸餾水1000mL，pH＝7.0。
具體實(shí)施方式二：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：所述的靈芝培養(yǎng)基按質(zhì)量百分含量計(jì)為80％的落葉松木木屑、15％麩皮、2％豆粉、1％石灰、1％蔗糖和1％石膏粉；靈芝培養(yǎng)基的含水量為60％～65％。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式三：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：步驟2)建堆的場(chǎng)地選擇為在生產(chǎn)車(chē)間或栽培場(chǎng)附近或在室內(nèi)選擇場(chǎng)地。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式四：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：步驟三中所述的拌料與裝袋操作如下：
先將發(fā)酵好的落葉松木木屑放入攪拌機(jī)內(nèi)，然后把石膏粉、石灰和蔗糖溶于水中，與麥麩和豆粉一同加入到落葉松木木屑中，反復(fù)攪拌均勻，調(diào)整至含水量為55～65％；
選擇聚乙烯或聚丙烯菌袋裝袋，每袋裝濕料為1.0～1.5kg，即完成所述的拌料與裝袋。
其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式五：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：步驟三中所述的滅菌為常壓100℃滅菌8～10h。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式六：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：步驟四中所述的接種操作為：將滅菌后的菌袋搬入冷卻間，待菌袋溫度降到30℃以下時(shí)，將菌袋運(yùn)到接種室，按無(wú)菌操作接種。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式七：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：步驟四中所述的菌絲培養(yǎng)操作為：
接種后的菌袋放在通風(fēng)干燥的發(fā)菌室培養(yǎng)，發(fā)菌室預(yù)先用甲醛或硫磺熏蒸消毒，發(fā)菌室溫度控制在24～28℃，暗光培養(yǎng)30～40天。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式八：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：步驟四中所述的后熟管理操作為：
當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋后，進(jìn)入后熟管理階段，溫度控制在23～28℃，每周翻堆一次，后熟管理為150天，后熟管理期間進(jìn)行3-4次變溫刺激：首先，將溫度降到0～10℃，持續(xù)2-3天，然后再將溫度提升到23～28℃，即完成所述的后熟管理。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式九：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：所述的墻式碼垛方式操作為：
將菌袋的菌袋口兩兩相對(duì)放置碼垛，并將剪掉1/3的菌袋，其中，剪掉的菌袋為菌袋口區(qū)域的菌袋，碼垛的垛為7～8個(gè)菌袋高度，所碼垛中間留有5～10厘米的間隙，并在間隙中填充營(yíng)養(yǎng)土，并且，在碼垛過(guò)程中，每碼一層覆蓋一層5～10厘米的營(yíng)養(yǎng)土；所述的營(yíng)養(yǎng)土按重量百分比計(jì)，是由30％木屑、55％山土、10％麩皮、2％石灰、3％蔗糖、0.5％磷酸二氫鉀和0.05％硫酸鎂制成；營(yíng)養(yǎng)土含水量為60～70％；營(yíng)養(yǎng)土制備是將上述組分混合均勻后，堆悶24～36h，即得到所述的營(yíng)養(yǎng)土。
其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式十：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：所述的脫袋覆土操作為：
在大棚內(nèi)做畦床，床高15～25厘米，寬80～100厘米，將菌袋脫掉，并將菌柱擺放到畦床內(nèi)，每?jī)蓚€(gè)菌柱之間間隔3～7厘米，開(kāi)始覆營(yíng)養(yǎng)土，加土到一半時(shí)澆一次水，澆透土層后繼續(xù)覆土，直至覆蓋表層土至2～3厘米厚，再澆一次水；然后覆蓋草簾，7～10天后澆水、通風(fēng)，保持溫度至28-30℃，即完成所述的脫袋覆土；其中，營(yíng)養(yǎng)土按重量百分比計(jì)，是由30％木屑、55％山土、10％麩皮、2％石灰、3％蔗糖、0.5％磷酸二氫鉀和0.05％硫酸鎂制成；營(yíng)養(yǎng)土含水量為60～70％；營(yíng)養(yǎng)土制備是將上述組分混合均勻后，堆悶24～36h，即得到所述的營(yíng)養(yǎng)土。
其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式十一：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：所述的出芝管理為：墻式碼垛或覆土后，溫度適宜時(shí)(氣溫23℃左右)，原基陸續(xù)長(zhǎng)出，20天左右原基分化成菌柄。從子實(shí)體形成到成熟需35天左右，松杉靈芝子實(shí)體生長(zhǎng)最適溫度是23℃～28℃，空氣相對(duì)濕度保持在80％～90％最佳濕度的調(diào)節(jié)主要靠每天噴水。噴水的原則是：勤噴、少?lài)?、噴勻；晴天多噴，雨天不噴?/p>
其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式十二：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：子實(shí)體采收過(guò)程中：當(dāng)子實(shí)體邊緣的白色環(huán)圈消失，變成黃褐色，菌蓋開(kāi)始木質(zhì)化，放射出大量的棕紅色煙霧狀孢子粉末，這時(shí)停止噴水7天左右即可進(jìn)行采收。
其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式十三：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：當(dāng)子實(shí)體采收后進(jìn)行采后管理，靈芝采收以后，可向畦地內(nèi)適當(dāng)澆水，以利于第2潮原基出現(xiàn)。以后的管理方法與前述相同。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式十四：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：本實(shí)施方式的栽培季節(jié)選擇如下：在10月～11月接種，12月底菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋，翌年1-5月份進(jìn)行后熟管理，6月份入棚出芝，9月底10月初采收結(jié)束。生產(chǎn)周期1年時(shí)間。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式十五：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：接種過(guò)程中：將滅菌后的菌袋搬入冷卻間，待菌袋溫度降到30℃以下時(shí)，將菌袋運(yùn)到接種室，按無(wú)菌操作接種，每袋二級(jí)種一般接種70袋左右，接種量大能加快菌絲定植，降低污染率。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式十六：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：所述的木質(zhì)纖維素降解菌K24為霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei)K24，保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址是北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏日期為2014年12月12日，保藏號(hào)CGMCC No.10169。其已經(jīng)被專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮?01510869089.X，申請(qǐng)日為2015年12月3日的專(zhuān)利所公開(kāi)。
其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式十七：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：所述的木質(zhì)纖維素降解菌II83為肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)II83，保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址是北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏日期為2014年12月12日，保藏號(hào)CGMCC No.10168。其已經(jīng)被專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮?01510869181.6，申請(qǐng)日為2015年12月3日的專(zhuān)利所公開(kāi)。
其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式十八：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是：所述的木質(zhì)纖維素降解菌K20為霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei)K20，藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址是北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏日期為2014年12月12日，保藏號(hào)CGMCC No.10163。其已經(jīng)被專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮?01510861983.2，申請(qǐng)日為2015年12月2日的專(zhuān)利所公開(kāi)。
其它與具體實(shí)施方式一相同。
本發(fā)明內(nèi)容不僅限于上述各實(shí)施方式的內(nèi)容，其中一個(gè)或幾個(gè)具體實(shí)施方式的組合同樣也可以實(shí)現(xiàn)發(fā)明的目的。
通過(guò)以下實(shí)施例驗(yàn)證本發(fā)明的有益效果：
實(shí)施例1
(1)菌種選擇，選取野生靈芝作為種源，進(jìn)行組織分離、馴化培養(yǎng)，選育出的新的靈芝菌種。
(2)降解菌制備，A.液體發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖5g，蛋白胨2g，NH4NO3 1.0g，CaCl20.2g，K2HPO4 0.5g，F(xiàn)eCl3 0.02，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl 1.0g，蒸餾水1000mL，pH 7.0；B.搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基：蛋白胨2g，NH4NO3 1.0g，CaCl2 0.2g，K2HPO4 0.5g，F(xiàn)eCl3 0.02，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl 1.0g，蒸餾水1000mL，pH 7.0；C.固體發(fā)酵培養(yǎng)基：稻草秸稈60％、粗木屑38％，石灰1％，石膏1％，含水量60％。
分別將木質(zhì)纖維素降解菌(K20)、木質(zhì)纖維素降解菌(K24)和木質(zhì)纖維素降解菌(II83)分別接入搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，在37℃，避光，180r/min振蕩培養(yǎng)5天，然后將三個(gè)菌株的液體菌種分別以10％的接種量接入固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃，避光培養(yǎng)20天，或者將三個(gè)菌株的液體菌種分別以10％的接種量接入液體發(fā)酵罐中，37℃，靜止培養(yǎng)5天。
(3)靈芝培養(yǎng)基制備,以落葉松木木屑為主要原料，以麩皮、豆粉、石膏、石灰、蔗糖等為輔料，栽培配方質(zhì)量比為：落葉松木木屑80％，麩皮15％，豆粉2％，蔗糖1％，石膏粉1％，石灰1％。含水量60％～65％。
(4)原材料預(yù)處理，①預(yù)濕，建堆前1天，先將主料過(guò)篩，將主料和輔料混合均勻，然后用水濕透至手握料能從指縫中滲出2～3滴水為宜。②建堆，先鋪一層預(yù)濕好的培養(yǎng)料(厚度20厘米)，邊建堆邊均勻地灑水，然后撒一層混合降解菌(木質(zhì)纖維素降解菌(K20)、木質(zhì)纖維素降解菌(K24)和木質(zhì)纖維素降解菌(II83)條狀依次均勻鋪在培養(yǎng)料上)，然后再鋪一層預(yù)濕好的培養(yǎng)料(厚度20厘米)，再撒一層混合降解菌，依次堆起至100厘米，上寬80～90厘米，下寬120～200厘米，堆頂部成龜背形，長(zhǎng)度不限。加水量為建堆完成后有少量水滲出堆外為宜。堆建好后，在堆頂和堆的兩側(cè)豎直和斜向用2×0.1米的木棍相隔1米扎洞通氣。注意防雨，堆四周挖排水溝及時(shí)排除積水。③翻堆，建堆后第二天開(kāi)始升溫發(fā)酵，當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持72小時(shí)進(jìn)行第一次翻堆，將上層的料倒到下層，下層的料倒到上層，外層的料倒到中間，中間的料倒到外層。補(bǔ)水，按上法重新建堆、打孔，當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持24小時(shí)進(jìn)行第二次翻堆。依此法進(jìn)行翻堆，并注意補(bǔ)水，共翻堆3次，使堆料柔軟富有彈性，色澤呈褐色到棕褐色，無(wú)異味。
(5)拌料與裝袋，先將發(fā)酵好的主料放入攪拌機(jī)內(nèi)，然后把石膏、石灰、蔗糖等全部溶于水中，與麥麩、豆餅粉等輔料一同加入主料中，反復(fù)攪拌均勻，含水量為60％左右。裝入16.5cm*37cm的聚乙烯，每袋裝濕料約1.2kg，裝袋時(shí)保持松緊適宜。
(6)滅菌，常壓100℃滅菌8～10h，一般將菌袋裝入鐵框或塑料筐中進(jìn)行滅菌，菌袋不擠壓，留有一定的空隙，使蒸汽流通順暢，受熱一致，避免出現(xiàn)死角。
(7)接種，將滅菌后的菌袋搬入冷卻間，待菌袋溫度降到30℃以下時(shí)，將菌袋運(yùn)到接種室，按無(wú)菌操作接種，每袋二級(jí)種一般接種70袋左右，接種量大能加快菌絲定植，降低污染率。
(8)菌絲培養(yǎng)，接種后的菌袋應(yīng)放在通風(fēng)干燥的發(fā)菌室培養(yǎng)，溫度控制在25～28℃，經(jīng)過(guò)30-40天的暗光培養(yǎng)后基本可以長(zhǎng)滿(mǎn)全袋。
(9)后熟管理，當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋后，進(jìn)入后熟管理階段，適當(dāng)打開(kāi)發(fā)菌室窗簾，進(jìn)行散射光刺激，溫度控制在25℃左右，加強(qiáng)通風(fēng)換氣，保持室內(nèi)空氣新鮮、干燥，每周翻堆(或倒架)一次，以免燒菌。經(jīng)過(guò)150天的后熟培養(yǎng)，袋內(nèi)菌絲的顏色由白轉(zhuǎn)為淡黃，由淡黃轉(zhuǎn)為褐色，菌絲體達(dá)到生理成熟。后熟管理期間最好有3-4次變溫刺激，將溫度降到0-10℃，每次低溫持續(xù)2-3天，然后再將溫度提升到25℃左右。
(10)栽培季節(jié)選擇，本實(shí)施例在10月～11月接種，12月底菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋，翌年1-5月份進(jìn)行后熟管理，6月份入棚出芝，9月底10月初采收結(jié)束。生產(chǎn)周期1年時(shí)間。
(11)專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土的制備，木屑30％、山土55％、麩皮10％，石灰2％，蔗糖3％、磷酸二氫鉀0.5％、硫酸鎂0.05％、含水量達(dá)65％左右，充分混合均勻后，堆悶24-36h備用。
(12)出芝模式，①墻式碼垛：兩趟菌袋袋口向里碼成墻，向里的菌袋上部事先要割掉袋長(zhǎng)度1/3左右的塑料袋，垛一般為7-9個(gè)高，兩趟中間留5－10cm，中間灌上營(yíng)養(yǎng)土，袋與袋之間距離3-5公分左右，碼一層撒上一層土，上面也蓋上5－10cm的土。，7～10天后正常澆水、通風(fēng)，保證適宜溫度管理。保持溫度28-30℃。
(13)出芝管理，墻式碼垛或覆土后，溫度適宜時(shí)(氣溫23℃左右)，原基陸續(xù)長(zhǎng)出，20天左右原基分化成菌柄。從子實(shí)體形成到成熟需35天左右，松杉靈芝子實(shí)體生長(zhǎng)最適溫度是23℃～28℃，空氣相對(duì)濕度保持在80％～90％最佳濕度的調(diào)節(jié)主要靠每天噴水。噴水的原則是：勤噴、少?lài)姟妱?；晴天多噴，雨天不噴?/p>
(14)子實(shí)體采收，當(dāng)子實(shí)體邊緣的白色環(huán)圈消失，變成黃褐色，菌蓋開(kāi)始木質(zhì)化，放射出大量的棕紅色煙霧狀孢子粉末，這時(shí)停止噴水7天左右即可進(jìn)行采收。
(15)采后管理，靈芝采收以后，可向畦地內(nèi)適當(dāng)澆水，以利于第2潮原基出現(xiàn)。以后的管理方法與前述相同。
將本實(shí)施例培養(yǎng)的松杉靈芝菌株接種到PDA平板培養(yǎng)基上，在25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5-7天后，菌絲體呈黃褐色，長(zhǎng)勢(shì)好；將松杉靈芝菌株接種到木屑試管培養(yǎng)基上，在25℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，生長(zhǎng)速度約為2.01mm/d。
本實(shí)施例中所栽培的松杉靈芝子實(shí)體，具有以下的形態(tài)特征，菌蓋(14-18)cm×(7.5-9)cm，，近柄處菌蓋厚2-3cm，扇形或腎形；菌蓋表面紅褐色，邊緣新生部分呈白色至淡黃色，成熟個(gè)體菌蓋近柄處顏色由黃褐色變成紅褐色，漆樣光澤逐漸變強(qiáng)，成熟個(gè)體的邊緣通常有同心環(huán)帶的褶皺。菌孔面白色至乳白色，菌肉黃褐色至淺灰褐色，軟纖維質(zhì)至軟木質(zhì)。菌柄長(zhǎng)5-8cm，粗3.5-5.5cm，扁圓柱形，呈紅褐色至紫褐色，革質(zhì)，菌柄的菌肉呈淺褐色，纖維質(zhì)至木質(zhì)。
本實(shí)施例中松杉靈芝栽培方法的產(chǎn)量和生物學(xué)效率，本實(shí)施例中松杉靈芝栽培方法的松杉靈芝單支干品質(zhì)量為23-32g，每平方米產(chǎn)量為618-786g。本實(shí)施例中松杉靈芝栽培方法的生物學(xué)效率可達(dá)5-8％，獲得的松杉靈芝口感較苦，商品性狀佳，可滿(mǎn)足市場(chǎng)需求。
本實(shí)施例的方法可實(shí)現(xiàn)一種松杉靈芝速生栽培方法，通過(guò)合理安排栽培季節(jié)，采取價(jià)格低廉的松樹(shù)木屑為原料，集成了原材料發(fā)酵、變溫刺激的后熟管理以及專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土等技術(shù)，將松杉靈芝的生產(chǎn)周期縮短到1年時(shí)間，產(chǎn)量與兩年出芝的產(chǎn)量相當(dāng)。應(yīng)注意通風(fēng)、遮蓋，防止溫度過(guò)低。
實(shí)施例2
(1)菌種選擇，選取野生靈芝作為種源，進(jìn)行組織分離、馴化培養(yǎng)，選育出的新的靈芝菌種。
(2)降解菌制備，A.液體發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖5g，蛋白胨2g，NH4NO3 1.0g，CaCl20.2g，K2HPO4 0.5g，F(xiàn)eCl3 0.02，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl 1.0g，蒸餾水1000mL，pH 7.0；B.搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基：蛋白胨2g，NH4NO3 1.0g，CaCl2 0.2g，K2HPO4 0.5g，F(xiàn)eCl3 0.02，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl 1.0g，蒸餾水1000mL，pH 7.0；C.固體發(fā)酵培養(yǎng)基：稻草秸稈60％、粗木屑38％，石灰1％，石膏1％，含水量60％。
分別將木質(zhì)纖維素降解菌(K20)、木質(zhì)纖維素降解菌(K24)和木質(zhì)纖維素降解菌(II83)分別接入搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，在37℃，避光，180r/min振蕩培養(yǎng)5天，然后將三個(gè)菌株的液體菌種分別以10％的接種量接入固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃，避光培養(yǎng)20天，或者將三個(gè)菌株的液體菌種分別以10％的接種量接入液體發(fā)酵罐中，37℃，靜止培養(yǎng)5天。
(3)靈芝培養(yǎng)基制備,以落葉松木木屑為主要原料，以麩皮、豆粉、石膏、石灰、蔗糖等為輔料，栽培配方質(zhì)量比為：落葉松木木屑80％，麩皮15％，豆粉2％，蔗糖1％，石膏粉1％，石灰1％。含水量60％～65％。
(4)原材料預(yù)處理，①預(yù)濕，建堆前1天，先將主料過(guò)篩，將主料和輔料混合均勻，然后用水濕透至手握料能從指縫中滲出2～3滴水為宜。②建堆，先鋪一層預(yù)濕好的培養(yǎng)料(厚度20厘米)，邊建堆邊均勻地灑水，然后撒一層混合降解菌(木質(zhì)纖維素降解菌(K20)、木質(zhì)纖維素降解菌(K24)和木質(zhì)纖維素降解菌(II83)條狀依次均勻鋪在培養(yǎng)料上)，然后再鋪一層預(yù)濕好的培養(yǎng)料(厚度20厘米)，再撒一層混合降解菌，依次堆起至100厘米，上寬80～90厘米，下寬120～200厘米，堆頂部成龜背形，長(zhǎng)度不限。加水量為建堆完成后有少量水滲出堆外為宜。堆建好后，在堆頂和堆的兩側(cè)豎直和斜向用2×0.1米的木棍相隔1米扎洞通氣。注意防雨，堆四周挖排水溝及時(shí)排除積水。③翻堆，建堆后第二天開(kāi)始升溫發(fā)酵，當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持48小時(shí)進(jìn)行第一次翻堆，將上層的料倒到下層，下層的料倒到上層，外層的料倒到中間，中間的料倒到外層。補(bǔ)水，按上法重新建堆、打孔，當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持24小時(shí)進(jìn)行第二次翻堆。依此法進(jìn)行翻堆，并注意補(bǔ)水，共需翻堆4次，使堆料柔軟富有彈性，色澤呈褐色到棕褐色，無(wú)異味。
(5)拌料與裝袋，先將發(fā)酵好的主料放入攪拌機(jī)內(nèi)，然后把石膏、石灰、蔗糖等全部溶于水中，與麥麩、豆餅粉等輔料一同加入主料中，反復(fù)攪拌均勻，含水量為60％左右。選擇質(zhì)量好的聚乙烯或聚丙烯菌袋裝袋，要求菌袋封底口嚴(yán)、折疊處不裂口，菌袋沒(méi)有砂眼的合格菌袋。每袋裝濕料約1.2kg，裝袋時(shí)保持松緊適宜。
(6)滅菌，常壓100℃滅菌8～10h。
(7)接種，將滅菌后的菌袋搬入冷卻間，待菌袋溫度降到30℃以下時(shí)，按無(wú)菌操作接種，接入液體菌中，每個(gè)栽培袋接種10mL。
(8)菌絲培養(yǎng)，接種后的菌袋應(yīng)放在通風(fēng)干燥的發(fā)菌室培養(yǎng)，室內(nèi)要求清潔衛(wèi)生，并預(yù)先用甲醛或硫磺熏蒸消毒，溫度控制在24～26℃，經(jīng)過(guò)30-40天的暗光培養(yǎng)后基本可以長(zhǎng)滿(mǎn)全袋。
(9)后熟管理，當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋后，進(jìn)入后熟管理階段，適當(dāng)打開(kāi)發(fā)菌室窗簾，進(jìn)行散射光刺激，溫度控制在25℃左右，加強(qiáng)通風(fēng)換氣，保持室內(nèi)空氣新鮮、干燥，每周翻堆(或倒架)一次，以免燒菌。經(jīng)過(guò)150天的后熟培養(yǎng)，袋內(nèi)菌絲的顏色由白轉(zhuǎn)為淡黃，由淡黃轉(zhuǎn)為褐色，菌絲體達(dá)到生理成熟。后熟管理期間最好有3-4次變溫刺激，將溫度降到0-10℃，每次低溫持續(xù)2-3天，然后再將溫度提升到25℃左右。
(10)栽培季節(jié)選擇，本實(shí)施例在10月～11月接種，12月底菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋，翌年1-5月份進(jìn)行后熟管理，6月份入棚出芝，9月底10月初采收結(jié)束。生產(chǎn)周期1年時(shí)間。
(11)專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土的制備，木屑30％、山土55％、麩皮10％，石灰2％，蔗糖3％、磷酸二氫鉀0.5％、硫酸鎂0.05％、含水量達(dá)65％左右，充分混合均勻后，堆悶24-36h備用。
(12)出芝模式，脫袋覆土：在大棚內(nèi)做畦床，床高20公分左右，寬80－100公分，將菌袋塑料袋脫袋，將菌柱擺放到畦床內(nèi)，菌柱與菌柱之間5公分左右，開(kāi)始覆專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土，加土到一半時(shí)澆一次水，澆透土層后繼續(xù)覆土，直至覆蓋表層土2～3cm，再澆一次水。覆蓋草簾，7～10天后正常澆水、通風(fēng)，保證適宜溫度管理。保持溫度28-30℃。
(13)出芝管理，墻式碼垛或覆土后，溫度適宜時(shí)(氣溫23℃左右)，原基陸續(xù)長(zhǎng)出，20天左右原基分化成菌柄。從子實(shí)體形成到成熟需35天左右，在這期間要靈活控制空氣相對(duì)濕度保持在80％～90％噴水的原則是：勤噴、少?lài)姟妱?；晴天多噴，雨天不噴?/p>
(14)子實(shí)體采收，當(dāng)子實(shí)體邊緣的白色環(huán)圈消失，變成黃褐色，菌蓋開(kāi)始木質(zhì)化，放射出大量的棕紅色煙霧狀孢子粉末，這時(shí)停止噴水7天左右即可進(jìn)行采收。
(15)采后管理，靈芝采收以后，可向畦地內(nèi)適當(dāng)澆水，以利于第2潮原基出現(xiàn)。以后的管理方法與前述相同。
將本實(shí)施例松杉靈芝菌株接種到PDA平板培養(yǎng)基上，在25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5-7天后，菌絲體呈黃褐色，長(zhǎng)勢(shì)好；將松杉靈芝菌株接種到木屑試管培養(yǎng)基上，在25℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，生長(zhǎng)速度約為2.04mm/d。
本實(shí)施例中所栽培的松杉靈芝子實(shí)體，菌蓋(14-18)cm×(7-9)cm，，近柄處菌蓋厚2-3cm，扇形或腎形；菌蓋表面紅褐色，邊緣新生部分呈白色至淡黃色，成熟個(gè)體菌蓋近柄處顏色由黃褐色變成紅褐色，漆樣光澤逐漸變強(qiáng)，成熟個(gè)體的邊緣通常有同心環(huán)帶的褶皺。菌孔面白色至乳白色，菌肉黃褐色至淺灰褐色，軟纖維質(zhì)至軟木質(zhì)。菌柄長(zhǎng)5-8cm，粗3.5-5.5cm，扁圓柱形，呈紅褐色至紫褐色，革質(zhì)，菌柄的菌肉呈淺褐色，纖維質(zhì)至木質(zhì)。
本實(shí)施例中松杉靈芝栽培方法的松杉靈芝單支干品質(zhì)量為26-32g，每平方米產(chǎn)量為635-800g。本實(shí)施例中松杉靈芝栽培方法的生物學(xué)效率可達(dá)5.4-8％，獲得的松杉靈芝口感較苦，商品性狀佳，可滿(mǎn)足市場(chǎng)需求。
本實(shí)施例的方法可實(shí)現(xiàn)一種松杉靈芝速生栽培方法，通過(guò)合理安排栽培季節(jié)，采取價(jià)格低廉的松樹(shù)木屑為原料，集成了原材料發(fā)酵、變溫刺激的后熟管理以及專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土等技術(shù)，將松杉靈芝的生產(chǎn)周期縮短到1年時(shí)間，產(chǎn)量與兩年出芝的產(chǎn)量相當(dāng)。應(yīng)注意通風(fēng)、遮蓋，防止溫度過(guò)低。
實(shí)施例3
(1)菌種選擇，選取野生靈芝作為種源，進(jìn)行組織分離、馴化培養(yǎng)，選育出的新的靈芝菌種。
(2)降解菌制備，A.液體發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖5g，蛋白胨2g，NH4NO3 1.0g，CaCl20.2g，K2HPO4 0.5g，F(xiàn)eCl3 0.02，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl 1.0g，蒸餾水1000mL，pH 7.0；B.搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基：蛋白胨2g，NH4NO3 1.0g，CaCl2 0.2g，K2HPO4 0.5g，F(xiàn)eCl3 0.02，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl 1.0g，蒸餾水1000mL，pH 7.0；C.固體發(fā)酵培養(yǎng)基：稻草秸稈60％、粗木屑38％，石灰1％，石膏1％，含水量60％。
分別將木質(zhì)纖維素降解菌(K20)、木質(zhì)纖維素降解菌(K24)和木質(zhì)纖維素降解菌(II83)分別接入搖瓶發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，在37℃，避光，180r/min振蕩培養(yǎng)5天，然后將三個(gè)菌株的液體菌種分別以10％的接種量接入固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃，避光培養(yǎng)20天，或者將三個(gè)菌株的液體菌種分別以10％的接種量接入液體發(fā)酵罐中，37℃，靜止培養(yǎng)5天。
(3)靈芝培養(yǎng)基制備，以落葉松木木屑為主要原料，以麩皮、豆粉、石膏、石灰、蔗糖等為輔料，栽培配方質(zhì)量比為：落葉松木木屑80％，麩皮15％，豆粉2％，蔗糖1％，石膏粉1％，石灰1％。含水量60％～65％。
(4)原材料預(yù)處理，①預(yù)濕，建堆前1天，先將主料過(guò)篩，將主料和輔料混合均勻，然后用水濕透至手握料能從指縫中滲出2～3滴水為宜。②建堆，先鋪一層預(yù)濕好的培養(yǎng)料(厚度20厘米)，邊建堆邊均勻地灑水，然后撒一層混合降解菌(木質(zhì)纖維素降解菌(K20)、木質(zhì)纖維素降解菌(K24)和木質(zhì)纖維素降解菌(II83)條狀依次均勻鋪在培養(yǎng)料上)，然后再鋪一層預(yù)濕好的培養(yǎng)料(厚度20厘米)，再撒一層混合降解菌，依次堆起至100厘米，上寬80～90厘米，下寬120～200厘米，堆頂部成龜背形，長(zhǎng)度不限。加水量為建堆完成后有少量水滲出堆外為宜。堆建好后，在堆頂和堆的兩側(cè)豎直和斜向用2×0.1米的木棍相隔1米扎洞通氣。注意防雨，堆四周挖排水溝及時(shí)排除積水。③翻堆，建堆后第二天開(kāi)始升溫發(fā)酵，當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持48小時(shí)進(jìn)行第一次翻堆，將上層的料倒到下層，下層的料倒到上層，外層的料倒到中間，中間的料倒到外層。補(bǔ)水，按上法重新建堆、打孔，當(dāng)堆內(nèi)溫度升到60℃時(shí)，保持24小時(shí)進(jìn)行第二次翻堆。依此法進(jìn)行翻堆，并注意補(bǔ)水，共需翻堆4次，使堆料柔軟富有彈性，色澤呈褐色到棕褐色，無(wú)異味。
(5)拌料與裝袋，先將發(fā)酵好的主料放入攪拌機(jī)內(nèi)，然后把石膏、石灰、蔗糖等全部溶于水中，與麥麩、豆餅粉等輔料一同加入主料中，反復(fù)攪拌均勻，含水量為60％左右。選擇質(zhì)量好的聚乙烯或聚丙烯菌袋裝袋，要求菌袋封底口嚴(yán)、折疊處不裂口，菌袋沒(méi)有砂眼的合格菌袋。每袋裝濕料約1.2kg，裝袋時(shí)保持松緊適宜。
(6)滅菌，常壓100℃滅菌8～10h。
(7)接種，將滅菌后的菌袋搬入冷卻間，待菌袋溫度降到30℃以下時(shí)，按無(wú)菌操作接種，接入液體菌中，每個(gè)栽培袋接種10mL。
(8)菌絲培養(yǎng)，接種后的菌袋應(yīng)放在通風(fēng)干燥的發(fā)菌室培養(yǎng)，室內(nèi)要求清潔衛(wèi)生，并預(yù)先用甲醛或硫磺熏蒸消毒，溫度控制在24～26℃，經(jīng)過(guò)30-40天的暗光培養(yǎng)后基本可以長(zhǎng)滿(mǎn)全袋。
(9)后熟管理，當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋后，進(jìn)入后熟管理階段，適當(dāng)打開(kāi)發(fā)菌室窗簾，進(jìn)行散射光刺激，溫度控制在25℃左右，加強(qiáng)通風(fēng)換氣，保持室內(nèi)空氣新鮮、干燥，每周翻堆(或倒架)一次，以免燒菌。經(jīng)過(guò)150天的后熟培養(yǎng)，袋內(nèi)菌絲的顏色由白轉(zhuǎn)為淡黃，由淡黃轉(zhuǎn)為褐色，菌絲體達(dá)到生理成熟。后熟管理期間最好有3-4次變溫刺激，將溫度降到0-10℃，每次低溫持續(xù)2-3天，然后再將溫度提升到25℃左右。
(10)栽培季節(jié)選擇，本實(shí)施例在10月～11月接種，12月底菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋，翌年1-5月份進(jìn)行后熟管理，6月份入棚出芝，9月底10月初采收結(jié)束。生產(chǎn)周期1年時(shí)間。
(11)專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土的制備，木屑30％、山土55％、麩皮10％，石灰2％，蔗糖3％、磷酸二氫鉀0.5％、硫酸鎂0.05％、含水量達(dá)65％左右，充分混合均勻后，堆悶24-36h備用。
(12)出芝模式，脫袋覆土：在大棚內(nèi)做畦床，床高20公分左右，寬80－100公分，將菌袋塑料袋脫袋，將菌柱擺放到畦床內(nèi)，菌柱與菌柱之間5公分左右，開(kāi)始覆專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土，加土到一半時(shí)澆一次水，澆透土層后繼續(xù)覆土，直至覆蓋表層土2～3cm，再澆一次水。覆蓋草簾，7～10天后正常澆水、通風(fēng)，保證適宜溫度管理。保持溫度28-30℃。
(13)出芝管理，墻式碼垛或覆土后，溫度適宜時(shí)(氣溫23℃左右)，原基陸續(xù)長(zhǎng)出，20天左右原基分化成菌柄。從子實(shí)體形成到成熟需35天左右，在這期間要靈活控制空氣相對(duì)濕度保持在80％～90％噴水的原則是：勤噴、少?lài)?、噴勻；晴天多噴，雨天不噴?/p>
(14)子實(shí)體采收，當(dāng)子實(shí)體邊緣的白色環(huán)圈消失，變成黃褐色，菌蓋開(kāi)始木質(zhì)化，放射出大量的棕紅色煙霧狀孢子粉末，這時(shí)停止噴水7天左右即可進(jìn)行采收。
(15)采后管理，靈芝采收以后，可向畦地內(nèi)適當(dāng)澆水，以利于第2潮原基出現(xiàn)。以后的管理方法與前述相同。
將本實(shí)施例松杉靈芝菌株接種到PDA平板培養(yǎng)基上，在25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5-7天后，菌絲體呈黃褐色，長(zhǎng)勢(shì)好；將松杉靈芝菌株接種到木屑試管培養(yǎng)基上，在25℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，生長(zhǎng)速度約為2.04mm/d。
本實(shí)施例中所栽培的松杉靈芝子實(shí)體，菌蓋(13-17)cm×(7-9)cm，，近柄處菌蓋厚2-3cm，扇形或腎形；菌蓋表面紅褐色，邊緣新生部分呈白色至淡黃色，成熟個(gè)體菌蓋近柄處顏色由黃褐色變成紅褐色，漆樣光澤逐漸變強(qiáng)，成熟個(gè)體的邊緣通常有同心環(huán)帶的褶皺。菌孔面白色至乳白色，菌肉黃褐色至淺灰褐色，軟纖維質(zhì)至軟木質(zhì)。菌柄長(zhǎng)5-7cm，粗3.0-4.9cm，扁圓柱形，呈紅褐色至紫褐色，革質(zhì)，菌柄的菌肉呈淺褐色，纖維質(zhì)至木質(zhì)。
本實(shí)施例中松杉靈芝栽培方法的松杉靈芝單支干品質(zhì)量為26-32g，每平方米產(chǎn)量為635-800g。本發(fā)明中松杉靈芝栽培方法的生物學(xué)效率可達(dá)5.4-8％，獲得的松杉靈芝口感較苦，商品性狀佳，可滿(mǎn)足市場(chǎng)需求。
本實(shí)施例的方法可實(shí)現(xiàn)一種松杉靈芝速生栽培方法，通過(guò)合理安排栽培季節(jié)，采取價(jià)格低廉的松樹(shù)木屑為原料，集成了原材料發(fā)酵、變溫刺激的后熟管理以及專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土等技術(shù)，將松杉靈芝的生產(chǎn)周期縮短到1年時(shí)間，產(chǎn)量與兩年出芝的產(chǎn)量相當(dāng)。應(yīng)注意通風(fēng)、遮蓋，防止溫度過(guò)低。