本發(fā)明屬于香蕉組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種提高香蕉花藥萌發(fā)率的培養(yǎng)基。
背景技術(shù):
香蕉(學(xué)名:musananalour.)芭蕉科芭蕉屬植物,又指其果實(shí)。熱帶地區(qū)廣泛栽培食用。香蕉味香、富含營養(yǎng),終年可收獲,在溫帶地區(qū)也很受重視。植株為大型草本,從根狀莖發(fā)出,由葉鞘下部形成高3~6公尺(10~20尺)的假桿;葉長圓形至橢圓形,有的長達(dá)3~3.5公尺(10~11.5尺),寬65公分(26寸),10~20枚簇生莖頂。穗狀花序下垂[1],由假桿頂端抽出,花多數(shù),淡黃色;果序彎垂,結(jié)果10~20串,約50~150個。植株結(jié)果后枯死,由根狀莖長出的吸根繼續(xù)繁殖,每一根株可活多年。原產(chǎn)亞洲東南部:臺灣、海南、廣東、廣西等地區(qū)均有栽培。目前香蕉是一種廣受歡迎的水果,也是部分地區(qū)的主要糧食,擁有極大市場需求量,對香蕉進(jìn)行快速繁殖的研究具有一定的必要性,不僅能解決龐大的市場需求量,也能在一定程度上保存優(yōu)良的香蕉品種,組織培養(yǎng)是香蕉快速繁殖的方法之一,然而現(xiàn)有的香蕉培養(yǎng)基中多是采用ms培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基再添加植物激素制成,但這種培養(yǎng)的誘導(dǎo)已經(jīng)無法滿足目前的需求增長速度。
稀土元素是17種特殊的元素的統(tǒng)稱,它的得名是因?yàn)槿鸬淇茖W(xué)家在提取稀土元素時應(yīng)用了稀土化合物,所以得名稀土元素。然而稀土是歷史遺留下來的名稱,稀土是從18世紀(jì)末開始陸續(xù)發(fā)現(xiàn),當(dāng)時人們常把不溶于水的固體氧化物稱為土,例如,將氧化鋁稱為“陶土”,氧化鈣稱為”堿土“等。稀土一般是以氧化物狀態(tài)分離出來的,當(dāng)時比較稀少,因而得名為稀土(rareearth,簡稱re或r),然而經(jīng)過大量的科學(xué)研究,在組織培養(yǎng)當(dāng)中添加了稀土元素會大大地提高組織培養(yǎng)的質(zhì)量。
鈰是周期系第ιιι族副族鑭系元素,一種稀土元素。原子序數(shù)58。穩(wěn)定同位素:136、138、140、142?;疑饘?,有展性。密度:正方晶體6.9,立方晶體6.7。熔點(diǎn)799℃,沸點(diǎn)3426℃。鈰是一種銀灰色的活潑金屬,粉末在空氣中易自燃,易溶于酸。鈰的名稱來源于小行星谷神星的英文名。鈰在地殼中的含量約0.0046%,是稀土元素中豐度最高的。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
基于現(xiàn)有技術(shù)中香蕉的需求量巨大但供給品質(zhì)參差不齊,且現(xiàn)有培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效率低的問題,本發(fā)明提供一種提高香蕉花藥萌發(fā)率的培養(yǎng)基,其以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,并添加tdz(噻苯隆)、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)、活性炭、硝酸鈰、維生素、瓊脂粉和白砂糖,其以香蕉的花藥作為外植體,避免了外植體帶有病毒而影響植物品質(zhì)的問題,以n6培養(yǎng)基替代ms培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基更加適合對花藥的誘導(dǎo),本發(fā)明具有萌發(fā)率高和成本低的優(yōu)點(diǎn)。
一種提高香蕉花藥萌發(fā)率的培養(yǎng)基,其以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,并添加tdz(噻苯隆)、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)、活性炭、硝酸鈰、維生素、瓊脂粉和白砂糖。
優(yōu)選地,tdz(噻苯隆)的濃度為0.1-0.8mg/l、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)的濃度為1-4mg/l、活性炭的濃度為0.05-0.2mg/l、硝酸鈰的濃度為1-5g/l,維生素的濃度為0.1-0.5mg/l,瓊脂粉的濃度為8-12g/l、白砂糖的濃度為5-10g/l。
優(yōu)選地,tdz(噻苯隆)的濃度為0.4-0.6mg/l、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)的濃度為2-3mg/l、活性炭的濃度為0.1-0.15mg/l、硝酸鈰的濃度為2-4g/l,維生素的濃度為0.2-0.4mg/l,瓊脂粉的濃度為9-11g/l、白砂糖的濃度為6-8g/l。
優(yōu)選地,所述的培養(yǎng)基的ph值為5.8-6.8,使用微酸性的組培環(huán)境更加符合天然環(huán)境的酸堿度,從而提高組織培養(yǎng)的質(zhì)量。
優(yōu)選地,所述的培養(yǎng)基的ph值為6.2,經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)得出ph值為6.2時最適合香蕉花藥的誘導(dǎo)。
優(yōu)選地,所述的維生素是維生素c。
一種提高香蕉花藥萌發(fā)率的培養(yǎng)基的配制方法,其包括以下步驟:
步驟s10,使用電子秤按照n6培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方配制1000倍n6培養(yǎng)基母液;
步驟s20,取n6培養(yǎng)基母液配制n6培養(yǎng)基,并按配方添加活性炭、硝酸鈰、瓊脂粉和白砂糖,使用鹽酸或者氫氧化鈉調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph值;
步驟s30,使用高溫高壓蒸汽滅菌鍋用121℃對培養(yǎng)基滅菌20分鐘,取出培養(yǎng)基并在超凈工作臺中靜置冷卻;
步驟s40,按照配方配制tdz(噻苯隆)、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)和維生素溶液,并進(jìn)行過濾滅菌;
步驟s50,待培養(yǎng)基冷卻到60℃時向培養(yǎng)基中加入步驟s40配制好的試劑,搖晃均勻,靜置,冷卻凝固。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。
實(shí)施例一:
按以下步驟配制對照組的ms培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)組n6培養(yǎng)基:
步驟s10,使用電子秤按照n6培養(yǎng)基和ms培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方配制1000倍n6培養(yǎng)基母液和ms培養(yǎng)基母液。
步驟s20,取n6培養(yǎng)基母液配制n6培養(yǎng)基,并按配方添加活性炭、硝酸鈰、瓊脂粉和白砂糖;取ms培養(yǎng)基母液配制ms培養(yǎng)基添加iaa(吲哚乙酸)和naa(萘乙酸),使用鹽酸或者氫氧化鈉調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph值為6.2。
步驟s30,使用高溫高壓蒸汽滅菌鍋用121℃對培養(yǎng)基滅菌20分鐘,取出培養(yǎng)基并在超凈工作臺中靜置冷卻。
步驟s40,按照配方配制tdz(噻苯隆)、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)和維生素c溶液,并進(jìn)行過濾滅菌。
步驟s50,待培養(yǎng)基冷卻到60℃時向n6培養(yǎng)基中加入步驟s40配制好的n6試劑,搖晃均勻,靜置,冷卻凝固。
其中培養(yǎng)基的配方如下:以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加tdz(噻苯隆)的濃度為0.1mg/l、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)的濃度為1mg/l、活性炭的濃度為0.05mg/l、硝酸鈰的濃度為1g/l,維生素的濃度為0.1mg/l,瓊脂粉的濃度為8g/l、白砂糖的濃度為5g/l。
將已經(jīng)消毒的外植體分別接種到對照組的ms培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)組n6培養(yǎng)基中出行常規(guī)組織培養(yǎng),20天后統(tǒng)計(jì)萌發(fā)率得出對照組的萌發(fā)率為86%,實(shí)驗(yàn)組萌發(fā)率為93%,實(shí)驗(yàn)組萌發(fā)率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組。
實(shí)施例二:
實(shí)施例二與實(shí)施例一的不同之處在于,調(diào)整了培養(yǎng)基配方濃度。
按以下步驟配制對照組的ms培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)組n6培養(yǎng)基:
步驟s10,使用電子秤按照n6培養(yǎng)基和ms培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方配制1000倍n6培養(yǎng)基母液和ms培養(yǎng)基母液。
步驟s20,取n6培養(yǎng)基母液配制n6培養(yǎng)基,并按配方添加活性炭、硝酸鈰、瓊脂粉和白砂糖;取ms培養(yǎng)基母液配制ms培養(yǎng)基添加iaa(吲哚乙酸)和naa(萘乙酸),使用鹽酸或者氫氧化鈉調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph值為6.2。
步驟s30,使用高溫高壓蒸汽滅菌鍋用121℃對培養(yǎng)基滅菌20分鐘,取出培養(yǎng)基并在超凈工作臺中靜置冷卻。
步驟s40,按照配方配制tdz(噻苯隆)、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)和維生素c和b1溶液,并進(jìn)行過濾滅菌。
步驟s50,待培養(yǎng)基冷卻到60℃時向n6培養(yǎng)基中加入步驟s40配制好的n6試劑,搖晃均勻,靜置,冷卻凝固。
其中培養(yǎng)基的配方如下:以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加tdz(噻苯隆)的濃度為0.8mg/l、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)的濃度為4mg/l、活性炭的濃度為0.2mg/l、硝酸鈰的濃度為5g/l,維生素的濃度為0.5mg/l,瓊脂粉的濃度為12g/l、白砂糖的濃度為10g/l。
將已經(jīng)消毒的外植體分別接種到對照組的ms培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)組n6培養(yǎng)基中出行常規(guī)組織培養(yǎng),20天后統(tǒng)計(jì)萌發(fā)率得出對照組的萌發(fā)率為86%,實(shí)驗(yàn)組萌發(fā)率為90%,實(shí)驗(yàn)組萌發(fā)率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組。
實(shí)施例三:
實(shí)施例三與實(shí)施例一和二的不同之處在于,調(diào)整了培養(yǎng)基配方濃度。
按以下步驟配制對照組的ms培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)組n6培養(yǎng)基:
步驟s10,使用電子秤按照n6培養(yǎng)基和ms培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方配制1000倍n6培養(yǎng)基母液和ms培養(yǎng)基母液。
步驟s20,取n6培養(yǎng)基母液配制n6培養(yǎng)基,并按配方添加活性炭、硝酸鈰、瓊脂粉和白砂糖;取ms培養(yǎng)基母液配制ms培養(yǎng)基添加iaa(吲哚乙酸)和naa(萘乙酸),使用鹽酸或者氫氧化鈉調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph值為6.2。
步驟s30,使用高溫高壓蒸汽滅菌鍋用121℃對培養(yǎng)基滅菌20分鐘,取出培養(yǎng)基并在超凈工作臺中靜置冷卻。
步驟s40,按照配方配制tdz(噻苯隆)、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)和維生素c和b1溶液,并進(jìn)行過濾滅菌。
步驟s50,待培養(yǎng)基冷卻到60℃時向n6培養(yǎng)基中加入步驟s40配制好的n6試劑,搖晃均勻,靜置,冷卻凝固。
其中培養(yǎng)基的配方如下:以n6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加tdz(噻苯隆)的濃度為0.5mg/l、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)的濃度為2.5mg/l、活性炭的濃度為0.15mg/l、硝酸鈰的濃度為3g/l,維生素的濃度為0.3mg/l,瓊脂粉的濃度為10g/l、白砂糖的濃度為7g/l。
將已經(jīng)消毒的外植體分別接種到對照組的ms培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)組n6培養(yǎng)基中出行常規(guī)組織培養(yǎng),20天后統(tǒng)計(jì)萌發(fā)率得出對照組的萌發(fā)率為86%,實(shí)驗(yàn)組萌發(fā)率為98%,實(shí)驗(yàn)組萌發(fā)率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組。