本發(fā)明涉及一種植物源消毒劑，具體地說是一種用于公共場所的植物精油消毒劑。
背景技術(shù)：
：消毒劑用于殺滅傳播媒介上病原微生物，使其達(dá)到無害化要求，將病原微生物消滅于人體之外，切斷傳染病的傳播途徑，達(dá)到控制傳染病的目的。消毒劑按照其作用的水平可分為滅菌劑、高效消毒劑、中效消毒劑、低效消毒劑。現(xiàn)在人們一般使用化學(xué)消毒劑，在使用過程中人們逐漸認(rèn)識到化學(xué)消毒劑在殺滅病原菌的同時，對人類、畜禽、環(huán)境也存在不同程度的毒副作用。比如，甲醛的致癌、酚類消毒劑的刺激性、用于飲用水消毒的氯制劑的致突變作用等，同時耐藥菌株的出現(xiàn)導(dǎo)致消毒效果下降或失效，因此，對消毒劑提出了更高的要求。在當(dāng)今世界共同聚焦食品和環(huán)境安全的前景下，開發(fā)安全高效的植物源殺菌消毒劑已越來越受到關(guān)注。比如專利號201510159682.5的專利中采用野菊花、連翹、石薺苧、紫草、當(dāng)歸、巴豆、牡丹皮、薰衣草精油、玫瑰果油、茶樹精油等多種混合物制成消毒劑，組分復(fù)雜，殺菌效果不顯著，作用時間不明確；專利(申請?zhí)?014100451136.4)組合了多種中草藥提取物，對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌均有良好殺菌效果，但是中藥提取物的葉綠素不易去除，藥液顏色較深，容易污染墻壁、家具、衣物等。茶樹精油(teatreeoil)提取于桃金娘科(myrtaceae)白千層屬(melaleuca)的灌木樹種—互葉白千層(melaleucaalternifo-lia)的新鮮枝葉。近年來，茶樹精油作為天然抗菌劑逐漸引起了醫(yī)藥界研究者的廣泛關(guān)注，證實了茶樹精油是一種抗菌譜廣、抗菌活性強(qiáng)、臨床療效好、不良反應(yīng)少的天然抗菌藥物。細(xì)菌對植物提取物不易產(chǎn)生耐藥性，而且植物提取物毒副作用較小。消毒劑與抑菌劑作用不盡相同，根據(jù)《消毒技術(shù)規(guī)范》要求，載體定量試驗和載體流動浸泡試驗時，每次試驗對各類微生物的殺滅對數(shù)值或滅活對數(shù)值≥3.00，即滅殺微生物的效果達(dá)到99.9％。而抑菌效果，指能可逆性抑制細(xì)菌的繁殖，但不直接殺死細(xì)菌。一般要求抑制微生物生長達(dá)到50％即可達(dá)到抑菌效果。大量研究，如丁香、薰衣草、迷迭香和鼠尾草等精油都具有很好的抑菌效果，但作為天然植物源產(chǎn)物很難達(dá)到殺菌效果。所以，克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，研發(fā)出一款天然提取物消毒劑，滿足了市場對非化學(xué)品消毒劑的迫切需求，對天然消毒劑市場的發(fā)展具有重要的推動作用。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供一種具有顯著的殺菌作用，殺菌時間短，殺菌效果好，無毒副作用，適宜長期應(yīng)用于公共場所的植物精油消毒劑。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)：一種用于公共場所的植物精油消毒劑，其特征在于：它含有下列組分按其體積份數(shù)比：茶樹精油5-15份，吐溫-205-20份，聚氧乙烯40氫化蓖麻油5-20份，乙醇10-30份。所述的含有組份中，其按其體積份數(shù)比：茶樹精油8份，吐溫-2012份，聚氧乙烯40氫化蓖麻油15份，乙醇10份。該消毒劑所采用的茶樹精油為4-松油醇含量不低于30％，桉葉油含量不高于3％。本發(fā)明的有益效果是：本消毒劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念珠菌等常見致病菌具有顯著的殺菌效果和穩(wěn)定性，急性毒性試驗證明，該植物精油消毒劑屬于實際無毒級物質(zhì)，制備方法簡單，易于工業(yè)化，適宜應(yīng)用于醫(yī)院、幼兒園、學(xué)校等公共場所及家庭環(huán)境的消毒。具體實施方式為了使本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合最佳實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。實施例1將茶樹精油5ml、吐溫-205ml混合，加入聚氧乙烯40氫化蓖麻油10ml，加熱至35-37℃，攪拌使其充分溶解。當(dāng)混合液降溫至25℃后，加入10ml乙醇，攪拌混勻即得。實施例2將茶樹精油15ml、吐溫-2020ml混合，加入聚氧乙烯40氫化蓖麻油20ml，加熱至35-37℃，攪拌使其充分溶解。當(dāng)混合液降溫至25℃后，加入30ml乙醇，攪拌混勻即得。實施例3將茶樹精油8ml、吐溫-2012ml混合，加入聚氧乙烯40氫化蓖麻油15ml，加熱至35-37℃，攪拌使其充分溶解。當(dāng)混合液降溫至25℃后，加入10ml乙醇，攪拌混勻即得。以上各實施例中，消毒劑的劑型優(yōu)選為噴霧劑。茶樹精油殺菌抑菌效果的鑒定(1)實驗方法：取無菌小平皿，標(biāo)明所注入10％的茶樹精油溶液。按每片5.0ml的量，吸取相應(yīng)濃度的溶液注入平皿中。將盛有消毒劑平皿置20℃±1℃水浴箱內(nèi)5min后，用無菌鑷子分別放入預(yù)先制備的菌片3片，并使之浸透于消毒液中。待菌藥相互作用至各預(yù)定時間，用無菌鑷子將菌片取出分別移入一含5.0ml中和劑試管中。用電動混合器混合20s，或?qū)⒃嚬茉谑终粕险袂?0次，使菌片上的細(xì)菌被洗脫進(jìn)入中和液中，再放置5min以上，使中和作用充分。最終進(jìn)一步混勻后，吸取1.0ml直接接種平皿，每管接種2個平皿，測定存活菌數(shù)。另取一平皿，注入10.0ml稀釋液代替消毒液，放入2片菌片，作為陽性對照組所有試驗樣本均在37℃溫箱中培養(yǎng)，對細(xì)菌繁殖體培養(yǎng)48h觀察最終結(jié)果(2)實驗結(jié)果：表110％茶樹精油對金黃色葡萄菌的殺菌抑菌率表210％茶樹精油對綠膿桿菌的殺菌抑菌率根據(jù)載體定量殺滅試驗的方法和要求，各次的殺滅率均≥99.9％或殺滅對數(shù)值均≥3.00，可判斷消毒合格。根據(jù)結(jié)果在30min以內(nèi)，10％茶樹精油溶液達(dá)不到消毒劑殺菌要求。2.茶樹精油消毒劑配方的確定目前對茶樹精油抗菌活性的作用機(jī)制的研究表明，細(xì)菌細(xì)胞膜是茶樹精油作用位點。主要作用機(jī)制是茶樹精油中的成分插入到胞膜磷脂分子之間，改變其結(jié)構(gòu)，破壞膜的完整性和增加膜的流動性。但這種破壞作用并不是引起整個細(xì)菌溶解，而是增加胞膜的通透性，引起細(xì)菌內(nèi)重要物質(zhì)泄漏以及降低胞膜調(diào)節(jié)滲透壓和排出有害物質(zhì)的能力，最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡。同時，根據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，一定比例的乙醇可以有效的增強(qiáng)茶樹精油對細(xì)菌細(xì)胞壁的穿透性，從而增強(qiáng)精油與細(xì)菌的結(jié)合，增強(qiáng)其抑菌殺菌的功能。另外，乙醇的添加可以幫助茶樹精油在水中的溶解性，使茶樹精油在水中溶解的更均勻，增強(qiáng)其穩(wěn)定性。本發(fā)明通過對添加不同濃度的乙醇，開發(fā)出一款滿足殺菌劑規(guī)范要求的植物源殺菌劑。實驗方法：取無菌小平皿，標(biāo)明所注入茶樹精油與乙醇的濃度。按每片5.0ml的量，吸取相應(yīng)濃度的溶液注入平皿中。將盛有消毒劑平皿置20℃±1℃水浴箱內(nèi)5min后，用無菌鑷子分別放入預(yù)先制備的菌片3片，并使之浸透于消毒液中。待菌藥相互作用至各預(yù)定時間，用無菌鑷子將菌片取出分別移入一含5.0ml中和劑試管中。用電動混合器混合20s，或?qū)⒃嚬茉谑终粕险袂?0次，使菌片上的細(xì)菌被洗脫進(jìn)入中和液中，再放置5min以上，使中和作用充分。最終進(jìn)一步混勻后，吸取1.0ml直接接種平皿，每管接種2個平皿，測定存活菌數(shù)。另取一平皿，注入10.0ml稀釋液代替消毒液，放入2片菌片，作為陽性對照組所有試驗樣本均在37℃溫箱中培養(yǎng)，對細(xì)菌繁殖體培養(yǎng)48h觀察最終結(jié)果實驗結(jié)果：表310％茶樹精油+5％乙醇對金黃色葡萄菌的殺菌抑菌率表410％茶樹精油+20％乙醇對金黃色葡萄菌的殺菌抑菌率表510％茶樹精油+20％乙醇對大腸桿菌的殺菌抑菌率根據(jù)載體定量殺滅試驗的方法和要求，各次的殺滅率均≥99.9％或殺滅對數(shù)值均≥3.00，可判斷消毒合格。實施例3的定量殺菌試驗、急性毒性試驗及穩(wěn)定性試驗實驗方法試驗用菌：金黃色葡萄球菌(staphylococcusaureus)atcc6538，大腸桿菌(escherichiacoli)8099，白色念珠菌(candidaalbicans)atcc10231細(xì)菌懸液的制備按照2002版《消毒技術(shù)規(guī)范》將金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌接種于新鮮營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，置37℃培養(yǎng)24小時，加入3.0ml～5.0ml無菌pbs緩沖溶液加入斜面試管內(nèi)，反復(fù)吹吸，洗下菌苔。制備不同濃度的實驗菌懸液備用，菌懸液含菌量1×108cfu/ml～5×108cfu/ml菌片的制備將經(jīng)滅菌的10mm×10mm濾紙片平鋪于無菌平皿內(nèi)，涂勻整個載體表面菌液滴加量每片為10μl，滴染菌液后，置室溫下自然陰干后再使用。中和劑鑒定試驗實驗菌株為金黃色葡萄球菌，共6組試驗，按載體定量殺菌試驗方法進(jìn)行。結(jié)果判定，以第1組有極少量菌生長或無菌生長，第2組有較第1組為多，但較第3、4、5(組)為少的試驗菌菌落生長，第3、4、5(組)間細(xì)菌數(shù)的誤差率不超出15％，第6組不長菌，試驗重復(fù)3次。載體浸泡定量殺菌試驗取無菌小平皿，標(biāo)明所注入消毒液的濃度。按每片5.0ml的量，吸取相應(yīng)濃度的消毒劑溶液注入平皿中。將盛有消毒劑平皿置20℃±1℃水浴箱內(nèi)5min后，用無菌鑷子分別放入預(yù)先制備的菌片3片，并使之浸透于消毒液中。待菌藥相互作用至各預(yù)定時間，用無菌鑷子將菌片取出分別移入一含5.0ml中和劑試管中。用電動混合器混合20s，或?qū)⒃嚬茉谑终粕险袂?0次，使菌片上的細(xì)菌被洗脫進(jìn)入中和液中，再放置5min以上，使中和作用充分。最終進(jìn)一步混勻后，吸取1.0ml直接接種平皿，每管接種2個平皿，測定存活菌數(shù)。另取一平皿，注入10.0ml稀釋液代替消毒液，放入2片菌片，作為陽性對照組所有試驗樣本均在37℃溫箱中培養(yǎng)，對細(xì)菌繁殖體培養(yǎng)48h觀察最終結(jié)果；急性毒性試驗選取體重為20g昆明種小鼠20只，雌雄各半。試驗前禁食過夜，不限制飲水。染毒方法用經(jīng)口灌胃方式將受試物給予動物。按每次0.2ml/10g(體重)的量，分兩次進(jìn)行(中間隔12h),對每只小鼠先稱重再灌相應(yīng)量的消毒劑。染毒后觀察動物的中毒表現(xiàn)和死亡數(shù)及死亡時間，觀察時間14天。穩(wěn)定性試驗茶樹精油消毒劑是以植物為主要有效成分的消毒劑，故應(yīng)用微生物法進(jìn)行穩(wěn)定性實驗。將消毒劑溶液密封避光包裝，采用加速試驗，置于54℃恒溫箱存放14天，分別在存放前、后按載體定量殺菌試驗程序進(jìn)行試驗，各組試驗重復(fù)3次，計算殺滅對數(shù)值。除測定殺滅微生物效果外，還應(yīng)觀察消毒劑有無顏色變化，有無沉淀或懸浮物產(chǎn)生。實驗結(jié)果中和劑鑒定試驗效果中和劑鑒定試驗結(jié)果見表1。結(jié)果表明，中和劑選用含4％甘氨酸、2％卵磷脂、4％甘氨酸、pbs(0.03mol/l)的中和劑能有效中和該消毒劑對試驗菌的殘留作用，且中和劑及中和產(chǎn)物對試驗菌生長無影響。表6中和劑鑒定試驗結(jié)果組別平均菌落數(shù)(cfu/ml)消毒劑+菌懸液25消毒劑+菌懸液+中和劑260(消毒劑+中和劑)+菌懸液2590000中和劑+菌懸液2750000菌懸液2650000未接種菌培養(yǎng)基對照0定量殺菌試驗結(jié)果定量殺菌試驗結(jié)果表明，該消毒劑作用20min,對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念珠菌的平均殺滅對數(shù)值均≥3(表2)表7消毒劑殺菌試驗結(jié)果注：要求載體定量殺滅試驗中，各次的殺滅對數(shù)均應(yīng)≥3.00，可判定為消毒合格。試驗重復(fù)三次急性毒性試驗給藥14天后動物未見明顯的中毒癥狀，觀察期間無動物死亡，可判定該消毒劑對小鼠急性經(jīng)口灌胃ld50大于5000mg/kg(體重)，屬于實際無毒級物質(zhì)。穩(wěn)定性試驗穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明，該消毒劑原液在54℃保存14d后，對金黃色葡萄球菌的平均殺滅對數(shù)值差基本無差別。表8消毒劑放置前后對金黃色葡萄球菌的殺滅效果以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁12