蟲草黃豆的制作方法
【技術(shù)領域】
[0001] 米用冬蟲夏草（Ophiocordycepssinensis)和蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)， 以黃豆為培養(yǎng)基，進行雙菌混合固態(tài)發(fā)酵，屬于生物工程技術(shù)領域。利用菌株Cordyc印s militaris保藏號為CICC14013,菌株Ophiocordycepssinensis保藏號為CICC14088,通 過雙菌混合固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)得到營養(yǎng)保健黃豆。
【背景技術(shù)】
[0002] 蟲草屬（Cordyceps)隸屬于真菌界（Fungi)、子囊菌門（Ascomycota)、子囊菌 綱（Ascomycetes)、奠殼菌亞綱（Sordariomycetidae)、肉座菌目（Hypocreales)、麥角菌 科（Clavicipitaceae)。蟲草屬真菌大多數(shù)是藥用真菌，其中冬蟲夏草（Ophiocordyceps sinensis)普遍為人們所熟知，應用歷史也最為久遠，而蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)的 應用研宄最為深入。
[0003] 冬蟲夏草據(jù)文獻考證最早記載于公元710年《月王藥診》，以藥記載始見于清代吳 儀洛《本草從新》（公元1757年），認為其"甘平，保肺益腎，止血化痰，已勞咳，治膈癥皆良"。 冬蟲夏草為我國傳統(tǒng)名貴中藥，它與人參、鹿茸同被譽為中國中藥三寶。其具有補而不峻、 溫而不火、滋而不膩的藥效特點，更具有陰陽同補的獨特功效，使它成為滋補圣藥，被醫(yī)學 家譽為"百藥之王"。
[0004] 蛹蟲草是我國非常珍貴的中藥藥材之一，它的藥用價值在很早就有記載，李時珍 (1518)在《本草綱目》中指出，蟬花能主治"小兒天吊驚癇，夜啼，心悸"。蛹蟲草易于規(guī)模 化人工培養(yǎng)，其活性成分和藥理作用又與冬蟲夏草相似。
[0005] 當前將冬蟲夏草或蛹蟲草應用于糧食原料發(fā)酵已經(jīng)被廣泛報道。例如：專利 200610117997. 4采用蛹蟲草工業(yè)化培養(yǎng)廢棄物制成米粉產(chǎn)品；專利200710050135. 9將 蟲草粉碎后與炒熟的草青稞混合做成保健品；專利200710166278. 6采用小麥培養(yǎng)蛹蟲草 子實體；專利200810068734. 8采用紅曲協(xié)同發(fā)酵從而提高蛹蟲草子實體及蟲草菌素的產(chǎn) 量；專利200910218363. 1公開了一種通過茯苓與蛹蟲草固體共發(fā)酵提高主要藥用成分的 方法；專利201110055425. 9利用固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)蛹蟲草發(fā)酵米；專利201110348239. 4以蓮 子為基質(zhì)，進行蛹蟲草或冬草夏草的固態(tài)發(fā)酵；專利201110064459. 4公開了一種蛹蟲草稻 谷食品的制備方法；專利201310150267. 4和201310151228. 6分別以黃豆和花生為基質(zhì)， 接種蛹蟲草后進行固態(tài)發(fā)酵，但過程中需添加昆蟲酶解液，導致成本和質(zhì)量難以控制；專利 201210064068. 7公開了一種以靈芝、桑黃等能夠高效產(chǎn)纖維素酶的菌子實體作為培養(yǎng)基主 料、糧食原料為輔料，再接種入蛹蟲草、冬蟲夏草、香菇、猴頭菌、金針姑等菌種進行混合培 養(yǎng)，制成保健品或添加劑，但該工藝復雜，食藥用菌子實體價格昂貴，而且經(jīng)高壓滅菌后破 壞了食藥用菌子實體的有效成分，再經(jīng)其它菌種發(fā)酵后成分復雜而不可控，各種復雜的菌 種組合也將導致最終產(chǎn)品質(zhì)量的不穩(wěn)定。
[0006] 綜上所述，當前蛹蟲草或冬蟲夏草的固態(tài)發(fā)酵過程均會添加無機鹽、昆蟲水解 液或其它藥用成分，以期提高蟲草菌體或蟲草素產(chǎn)量及藥效。不同的添加物會導致成分 復雜及導入外來的污染源，而且不容易建立質(zhì)量指標體系。另外，蛹蟲草的固態(tài)發(fā)酵過 程經(jīng)常將蟲草素（Cordycepin)作為重要的質(zhì)量指標。蟲草素，也被稱為3' -脫氧腺苷 (3-deoxyadenosine)，自發(fā)現(xiàn)以來，其藥理作用不斷被揭曉。經(jīng)研宄人員們研宄發(fā)現(xiàn)，蟲草 素具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗白細胞、抗真菌、抗病毒等多種藥理作用。有趣的是，蟲草素主 要存于蛹蟲草中，而在冬蟲夏草中的含量極微，但蟲草素的缺失并未影響冬蟲夏草的顯著 功效。因此，冬蟲夏草和蛹蟲草這兩種功效相似，但成分不完全相同的菌種具有互補性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 基于當前的情況，本發(fā)明以黃豆為培養(yǎng)基，在不添加任何其它添加物的情況下，僅 將黃豆進行膨化處理，滅菌后同時接種冬蟲夏草和蛹蟲草進行混合培養(yǎng)，最終得到高蟲草 素含量和高生物活性的養(yǎng)生保健黃豆。該方法實施簡單，質(zhì)量可控，具有廣闊的應用開發(fā)前 景。
[0008] 本發(fā)明所用的冬蟲夏草菌株Ophiocordycepssinensis保藏號為CICC14088,蛹 蟲草菌株Cordycepsmilitari保藏號為CICC14013。
[0009] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0010] (1)部分黃豆采用含有三個區(qū)段的雙螺桿擠壓膨化機進行處理。第1區(qū)段為預 熱區(qū)，使用溫度為40-60°C，第2區(qū)為運輸區(qū)，溫度為120-160°C，第3區(qū)為熟化區(qū)，溫度為 140-180 °C。膨化前黃豆的含水量為10% -20%。
[0011] (2)部份黃豆機械粉碎至粒徑為0.l-2mm。
[0012] (3)將擠壓膨化的黃豆與機械粉碎的黃豆以一定比例混合，擠壓膨化的黃豆所占 比例為1-100%?；旌虾笱a充水分使含水量達20% -70%，121°C保溫20分鐘滅菌。冷卻 后，接入冬蟲夏草，接種量為1-10%。同時，接入蛹蟲草，接種量為1-10%。起始pH和發(fā)酵 過程pH均為自然，發(fā)酵溫度為15-28°C，環(huán)境相對濕度為60% -100%，發(fā)酵周期為5-25天。 最終蟲草素的含量最尚可達7. 5%。
[0013] 本發(fā)明所用的冬蟲夏草和蛹蟲草菌種保存用斜面培養(yǎng)基配方均為：葡萄糖20g/ 1，馬鈴薯汁200g/l，瓊脂20g/l，pH自然。
[0014] 本發(fā)明的冬蟲夏草和蛹蟲草的種子培養(yǎng)基配方均為：葡萄糖20g/l，馬鈴薯汁 200g/l，pH自然。將斜面菌種接種到裝有種子培養(yǎng)基的三角瓶后，種子的培養(yǎng)時間為96小 時，種子的培養(yǎng)溫度為25°C。
[0015] 蟲草素含量采用液相色譜法測定。測定方法詳見：韋會平，葉小莉，張華英，李 學剛，鐘運俊，用蛹蟲草固體發(fā)酵法高效生產(chǎn)蟲草素的研宄，中國中藥雜志，1998, 33 (19)， 2159-2162。
[0016] 本發(fā)明的有益效果：通過膨化，在短時間內(nèi)使黃豆淀粉糊化和黃豆蛋白質(zhì)變性。膨 化黃豆與機械粉碎黃豆混合后進行發(fā)酵，一方面使得菌體可以快速利用膨化過程所產(chǎn)生的 營養(yǎng)物質(zhì)，另一方面機械粉碎黃豆相當于是固態(tài)發(fā)酵載體使發(fā)酵基質(zhì)保持疏松有利菌體生 長，當菌體生長旺盛時菌體產(chǎn)生大量胞外酶又可以進一步分解利用機械粉碎黃豆。該過程 無需添加其它物質(zhì)，保證發(fā)酵產(chǎn)品的質(zhì)量高度可控。冬蟲夏草和蛹蟲草兩種性質(zhì)類似菌種 的共發(fā)酵，一方面相似性質(zhì)菌種的發(fā)酵產(chǎn)物不會改變總體的藥理藥學性狀，另一方面可以 調(diào)和兩種菌種發(fā)酵產(chǎn)物各自的缺陷。該方法簡單可行，易于實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，具有廣泛的應 用前景。
【具體實施方式】
[0017] 實施例1
[0018] 采用濟南聚賢機械設備有限公司生產(chǎn)的DS56-III型雙螺桿擠壓膨化機處理黃豆， 所用的黃豆為市售，經(jīng)水分測定儀測定其含水率為13. 6%。設定進料速度為120kg/h。表 1列出了三個區(qū)段的溫度組合及膨化度。由表1可以看出當預熱區(qū)、運輸區(qū)、熟化區(qū)的溫度 分別為60、160、190°C時黃豆的膨化度最高，在此溫度條件下進一步往黃豆中補充少量無 菌水或者將黃豆進一步烘干，考察不同含水量時的膨化度。由表2可以看出，含水率為在 14-18%左右時膨化效果良好，因此可以直接用市售黃豆進行膨化。
[0019] 表1 :擠壓膨化機不同各區(qū)段不同溫度組合得到膨化黃豆的膨化度
[0020]
【主權(quán)項】
1. 本發(fā)明采用黃豆為基質(zhì)，進行冬蟲夏草和蛹蟲草混合固態(tài)發(fā)酵。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合固態(tài)發(fā)酵，其特征在于部分黃豆需進行膨化處理。
【專利摘要】以黃豆為培養(yǎng)基，采用冬蟲夏草和蛹蟲草進行雙菌混合固態(tài)發(fā)酵，屬于生物工程技術(shù)領域。本發(fā)明通過雙菌生物轉(zhuǎn)化得到的黃豆，具有養(yǎng)生保健之功效，具有良好的應用前景。
【IPC分類】A01G1-04, C05G3-00
【公開號】CN104823693
【申請?zhí)枴緾N201510126378
【發(fā)明人】蔡宇杰, 鄧華祥, 白玉, 管政兵, 廖祥儒, 張大兵
【申請人】江南大學
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年3月20日