一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]植物單倍體(雙單倍體)技術(shù)是一種快速而有效的種質(zhì)創(chuàng)新方法，可通過花藥(小孢子)培養(yǎng)的方法實(shí)現(xiàn)，多用于十字花科、禾本科和煙草等經(jīng)濟(jì)作物，但在木本植物諸如各類果樹中應(yīng)用較少。果樹作為一種木本植物，其幼年期(童期)較長(zhǎng)，成年后一年開花一次；不能像小麥和水稻等草本植物那樣實(shí)現(xiàn)一年多季種植并成花。這嚴(yán)重阻礙基于單倍體(雙單倍體)技術(shù)的果樹種質(zhì)創(chuàng)新進(jìn)程。
[0003]目前，單倍體(雙單倍體)技術(shù)在獼猴桃種質(zhì)創(chuàng)新中基本未開展。獼猴桃屬植物現(xiàn)有54個(gè)種和21個(gè)變種，其中毛花獼猴桃可一年間不斷地現(xiàn)蕾、開花、結(jié)果，其余獼猴桃種如中華獼猴桃和美味獼猴桃作為市場(chǎng)應(yīng)用價(jià)值極高的栽培種，也是育種學(xué)家種質(zhì)創(chuàng)新的主要對(duì)象，花期一年僅一次，即使是毛花獼猴桃也只能在其生長(zhǎng)期內(nèi)獲得花蕾，使得基于單倍體(雙單倍體)技術(shù)的種質(zhì)創(chuàng)新周期較長(zhǎng)，與傳統(tǒng)的雜交育種相比，不能最大限度體現(xiàn)單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新的優(yōu)越性。
[0004]獼猴桃花芽的生理分化在越冬前完成。完成花芽生理分化的枝條已具備形成花芽的先天條件，即相關(guān)基因已進(jìn)行選擇性表達(dá)。對(duì)離體的枝條給予適宜條件，可使其按照其既定發(fā)育模式提前萌發(fā)，便可獲得花蕾，從而解決單倍體(雙單倍體)技術(shù)在果樹中應(yīng)用的瓶頸問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]發(fā)明目的:為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提出了一種使得獼猴桃提前現(xiàn)蕾開花，方法簡(jiǎn)單易操作，推廣性強(qiáng)的一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法。
[0006]技術(shù)方案:為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為:一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，包括以下步驟:
[0007](I)枝條選擇及處理:11月份進(jìn)行收集用做插穗的枝條；從樹勢(shì)良好的雄株上采集一年生木質(zhì)化的枝條，用濕報(bào)紙包裹置于0-4°C冰箱冷藏處理；
[0008](2)扦插床的準(zhǔn)備:扦插床建于向陽處的溫室大棚內(nèi)，扦插床底部土壤深翻暴曬并做成寬80-100cm的畦，其上鋪設(shè)15-20cm高的扦插基質(zhì)，經(jīng)暴曬并噴灑并噴灑廣普性殺菌劑25%嘧菌酯1500倍稀釋液和10%世高1000-1500倍稀釋液達(dá)到滅菌殺蟲的作用；
[0009](3)插穗準(zhǔn)備:將步驟(I)冷藏處理的枝條取出，剪切成10_15cm的插穗捆扎，下切口對(duì)齊，并將下切口浸沒于生根粉溶液10-12h，上切口涂上傷口涂布劑，防止病蟲害的入侵和水分是散失；
[0010](4)扦插:扦插深度為插穗長(zhǎng)度的1/2-2/3 ;扦插后用噴壺澆透水，使插穗與扦插床扦插基質(zhì)充分接觸；
[0011](5)扦插后的管理:溫度控制在20_25°C ;插穗未萌動(dòng)前一周澆透水一次，抽梢展葉后2-3天澆透水一次；總體上對(duì)水分的要求是，苗床表層沙土不發(fā)白，手握成團(tuán)但不出水為宜；晴天需遮蔭，中午溫度高時(shí)需掀棚換氣；
[0012](6)插穗萌發(fā)現(xiàn)蕾及疏蕾，采集小孢子處于單核期至雙核早期的花蕾用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)。
[0013]所述步驟(I)中冷藏處理時(shí)間不低于I周，一方面進(jìn)行需冷量的積累，一方面對(duì)離體枝條進(jìn)行保存。
[0014]更為優(yōu)選的，所述步驟(2)中的扦插基質(zhì)為細(xì)河沙、蛭石和泥炭土按2:1:2的質(zhì)量比例混合而成。
[0015]為得到更優(yōu)的生根效果，用含有效成分為20%萘乙酸粉劑稀釋1000-2000倍配置而成的生根粉溶液浸泡插穗下切口。
[0016]更為優(yōu)選的，所述步驟(4)中扦插的時(shí)間選擇當(dāng)年11月份至次年大田獼猴桃芽體萌動(dòng)前均可。
[0017]為保證花蕾發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)供給充足，所述步驟(6)中的花蕾采集具體為新梢2-3cm摘心，每個(gè)插穗保留2-4個(gè)花蕾。
[0018]更進(jìn)一步的，所述花蕾的采集選擇摘除副蕾。
[0019]本發(fā)明的原理為:獼猴桃花芽的生理分化后，即完成相關(guān)基因的選擇性表達(dá)，離體枝條完成一定需冷量積累后，給予適宜的外界環(huán)境條件，使其按照既定的模式生長(zhǎng)發(fā)育，達(dá)到提前現(xiàn)蕾開花的目的。
[0020]有益效果:本發(fā)明提供的一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，將離體枝條進(jìn)行一定需冷量的積累后，給予適宜的外界環(huán)境條件，使其按照既定的模式生長(zhǎng)發(fā)育，達(dá)到提前現(xiàn)蕾開花的目的。與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):a)使得非花期獼猴桃獲得花蕾，實(shí)現(xiàn)一年可多次進(jìn)行獼猴桃單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新山)應(yīng)用范圍廣，可推廣到其它木本果樹，為基于單倍體(雙單倍體)技術(shù)的種質(zhì)創(chuàng)新提供原始實(shí)驗(yàn)材料。
【附圖說明】
[0021]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1中華獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
[0022]圖2為本發(fā)明實(shí)施例2美味獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
[0023]圖3為本發(fā)明實(shí)施例2美味獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
[0024]圖4為本發(fā)明實(shí)施例3毛花獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
[0025]圖5為本發(fā)明實(shí)施例3毛花獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0026]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明:
[0027]實(shí)施例1:
[0028]I)試驗(yàn)步驟:
[0029]在江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)基地，選取中華獼猴桃枝條進(jìn)行離體試驗(yàn)，具體一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，包括以下步驟:
[0030](I)枝條選擇及處理:11月份進(jìn)行收集用做插穗的枝條；從樹勢(shì)良好的中華獼猴桃雄株上采集一年生木質(zhì)化的枝條，用濕報(bào)紙包裹置于0-4°C冰箱冷藏處理；冷藏處理時(shí)間不低于I周，一方面進(jìn)行需冷量的積累，一方面對(duì)離體枝條進(jìn)行保存；
[0031](2)扦插床的準(zhǔn)備:扦插床建于向陽處的溫室大棚內(nèi)，扦插床底部土壤深翻暴曬并做成寬80cm的畦，其上鋪設(shè)15cm高的扦插基質(zhì)，扦插基質(zhì)具體為細(xì)河沙、輕石和泥炭土按2:1:2的質(zhì)量比例混合而成，經(jīng)暴曬并噴灑廣普性殺菌劑25%嘧菌酯1500倍稀釋液和10%世高1000-1500倍稀釋液達(dá)到滅菌殺蟲的作用；
[0032](3)插穗準(zhǔn)備:將步驟(I)冷藏處理的枝條取出，剪切成1cm的插穗捆扎，下切口對(duì)齊，并將下切口浸沒于生根粉溶液10h，上切口涂上傷口涂布劑，防止病蟲害的入侵和水分是散失；
[0033](4)扦插:扦插的時(shí)間選擇當(dāng)年11月份，扦插深度為插穗長(zhǎng)度的1/2 ;扦插后用噴壺饒透水，使插穗與扦插床扦插基質(zhì)充分接觸；
[0034](5)扦插后的管理:溫度控制在20_25°C ;插穗未萌動(dòng)前一周澆透水一次，抽梢展葉后2-3天澆透水一次；總體上對(duì)水分的要求是，苗床表層沙土不發(fā)白，手握成團(tuán)但不出水為宜；晴天需遮蔭，中午溫度高時(shí)需掀棚換氣；
[0035](6)插穗萌發(fā)現(xiàn)蕾及疏蕾，采集小孢子處于單核期至雙核早期的花蕾用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)；為保證花蕾發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)供給充足，花蕾采集具體為新梢2-3cm摘心，每個(gè)插穗保留2-4個(gè)花蕾；摘除副蕾。
[0036]2)試驗(yàn)結(jié)果:
[0037]扦插后6-10天芽體萌動(dòng)，90%以上插穗可抽新梢；提前現(xiàn)蕾開花，成功用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新；其中含花蕾新梢的百分比與先前插穗枝條選擇有關(guān)。
[0038]實(shí)施例2:
[0039]I)試驗(yàn)步驟:
[0040]在江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)基地，選取美味獼猴桃枝條進(jìn)行離體試驗(yàn)，具體一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，包括以下步驟:
[0041](I)枝條選擇及處理:11月份進(jìn)行收集用做插穗的枝條；從樹勢(shì)良好的美味獼猴桃雄株上采集一年生木質(zhì)化的枝條，用濕報(bào)紙包裹置于0-4°C冰箱