專利名稱：改變牛奶中脂肪酸組成的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種降低牛奶中相對(duì)于不飽和脂肪酸水平的飽和脂肪酸水平的方法。具體而言，本發(fā)明涉及基于其牛奶中所產(chǎn)生的β-酪蛋白的位于67位上的氨基酸殘基對(duì)奶牛進(jìn)行基因型分析和/或表型分析。
背景技術(shù)：
已知膳食飽和脂肪酸攝入是人類心臟疾病的一個(gè)主要危險(xiǎn)因素，特別是在人口營(yíng)養(yǎng)良好的國(guó)家中。畜產(chǎn)品如乳制品(尤其是牛奶)是人類膳食飽和脂肪酸攝入的主要來(lái)源。牛奶中所發(fā)現(xiàn)的飽和脂肪酸、特別是那些鏈長(zhǎng)度少于18個(gè)碳原子的飽和脂肪酸水平是冠心病的一個(gè)危險(xiǎn)因素，這一觀點(diǎn)已被廣泛接受。相反，不飽和脂肪酸被認(rèn)為是有益的。因此，人們優(yōu)選消費(fèi)植物來(lái)源的油類而非畜產(chǎn)品。
醫(yī)學(xué)團(tuán)體也關(guān)注牛奶中所發(fā)現(xiàn)的脂肪的消耗，因?yàn)槠渲泻胸S富的飽和脂肪酸C:14:0，其被認(rèn)為可導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣化。乳品工業(yè)也部分地對(duì)此作出了反應(yīng)，使用化學(xué)分離和提取技術(shù)生產(chǎn)“低脂肪”的牛奶替換產(chǎn)品。
除脂肪外，牛奶中包括β-酪蛋白A1變體在內(nèi)的特殊蛋白成分也是健康危險(xiǎn)因素。已有許多報(bào)導(dǎo)稱人類的β-酪蛋白A1消耗量與一些疾病、特別是糖尿病(Elliott等人，1999年，Diabetologia 42292-6；Wasmuth等人，1999年，Diabetologia 42(增刊1)A88 Proceedings of the Kongress derEuropischen Diabetesgesellschaft 28卷.-1999年9月30日，布魯塞爾/比利時(shí))和冠心病(McLachlan，C.N.，Med.Hypotheses 56(2)262-72，2001)的較高發(fā)病率有關(guān)。
除通過(guò)鑒定奶牛牛奶中所產(chǎn)生的特定的β-酪蛋白的一種或多種變體來(lái)對(duì)奶牛進(jìn)行表型分析外，眾所周知的是還可以對(duì)奶牛進(jìn)行特定單核苷酸多態(tài)性(SNP)的基因型分析以確定其在牛奶中將產(chǎn)生哪一種或哪些種β-酪蛋白變體?；谠摶蛐头治龇椒▉?lái)選擇奶牛以獲得產(chǎn)生不含β-酪蛋白A1變體、且優(yōu)選僅含β-酪蛋白A2變體的產(chǎn)奶牛的方法是PCT/NZ96/00039(作為WO 96/36239公布)的主題。
申請(qǐng)人現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)牛奶中飽和與不飽和脂肪酸的比例與牛奶中的β-酪蛋白變體之間存在相關(guān)性。盡管存在改變畜產(chǎn)品中脂肪酸組成的已知方法，但這些方法通常包括化學(xué)提取、特殊飼養(yǎng)和管理系統(tǒng)以及牛奶中特定脂肪酸水平的定量基因選擇。每種方法均花費(fèi)高昂并且通常效率低下。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供相對(duì)于不飽和脂肪酸的飽和脂肪酸水平降低的牛奶或由該牛奶獲得的產(chǎn)品，或者至少為公眾提供一種有用的替代品。
發(fā)明綜述在本發(fā)明的第一方面，其提供了一種降低牛奶中相對(duì)于不飽和脂肪酸水平的飽和脂肪酸水平的方法，該方法是(a)通過(guò)檢測(cè)畜群中各個(gè)奶牛的遺傳物質(zhì)是否存在編碼在67位上帶有脯氨酸殘基的β-酪蛋白的DNA或通過(guò)檢測(cè)畜群中各個(gè)奶牛產(chǎn)生的牛奶(或由該牛奶制備的產(chǎn)品)是否存在在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白來(lái)確定畜群中哪些奶牛產(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶，所述的畜群包括產(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶的奶牛和產(chǎn)生含有在67位上帶有組氨酸的β-酪蛋白的牛奶的奶牛；(b)選擇具有編碼在67位上帶有脯氨酸殘基的β-酪蛋白的DNA的奶?；虍a(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶的奶牛；以及(c)給選出的奶牛擠奶，得到與由該畜群獲得的牛奶相比相對(duì)于不飽和脂肪酸水平的飽和脂肪酸水平降低的牛奶。
優(yōu)選的是在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白包括β-酪蛋白A2、A3、D、E和F中的一個(gè)或多個(gè)。還優(yōu)選的是在67位上帶有組氨酸的β-酪蛋白包括β-酪蛋白A1、B和C中的一個(gè)或多個(gè)。
在本發(fā)明的一項(xiàng)優(yōu)選實(shí)施方案中，在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白為β-酪蛋白A2，在67位上帶有組氨酸的β-酪蛋白為β-酪蛋白A1。
還優(yōu)選的是除了降低奶牛群所產(chǎn)生的牛奶中的相對(duì)于不飽和脂肪酸水平的飽和脂肪酸水平之外，還降低每條碳鏈中含有6至14個(gè)碳原子的短鏈和中鏈飽和脂肪酸(C6:0-C14:0)水平。
在本發(fā)明的另一項(xiàng)優(yōu)選實(shí)施方案中，通過(guò)檢測(cè)奶牛的遺傳物質(zhì)是否存在編碼在67位上帶有脯氨酸殘基的β-酪蛋白的DNA來(lái)確定畜群中哪些奶牛產(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶。在一項(xiàng)備選實(shí)施方案中，通過(guò)檢測(cè)奶牛所產(chǎn)生的牛奶(或由該牛奶制備的產(chǎn)品)是否存在在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白來(lái)確定畜群中哪些奶牛產(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶。
盡管奶牛的遺傳物質(zhì)可以是含有有核細(xì)胞的任何組織，但遺傳物質(zhì)優(yōu)選由血液、毛發(fā)或牛奶獲得。
在本發(fā)明的第二方面，其提供了由用本發(fā)明第一方面的方法獲得的牛奶。
在本發(fā)明的第三方面，其提供了由用本發(fā)明第一方面的方法獲得的牛奶制備的奶制品。
在本發(fā)明的第四方面，其提供了一種通過(guò)向食物中添加一定量的在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白而改變食物中飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸比例的方法。
優(yōu)選通過(guò)降低食物中的飽和脂肪酸水平來(lái)改變飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的比例。
優(yōu)選所述的食物是牛奶或由牛奶制備的奶制品。還優(yōu)選的是通過(guò)添加用本發(fā)明第一方面的方法獲得的牛奶(或牛奶提取物)而將在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白添加至食物中。
發(fā)明詳述眾所周知，動(dòng)物的遺傳因素對(duì)產(chǎn)量水平和產(chǎn)品質(zhì)量以及對(duì)健康、環(huán)境和動(dòng)物福利問(wèn)題均有重要影響。能通過(guò)使用遺傳學(xué)檢測(cè)來(lái)確定動(dòng)物的表型是一種有價(jià)值的工具，其可用于實(shí)現(xiàn)具有有利特性的動(dòng)物和畜產(chǎn)品的快速鑒別，并可用于形成產(chǎn)量和/或產(chǎn)品質(zhì)量提高的動(dòng)物組?？梢愿鶕?jù)與涉及經(jīng)濟(jì)利益的動(dòng)物或畜產(chǎn)品特性相關(guān)的遺傳學(xué)差異對(duì)動(dòng)物進(jìn)行分組。
在一些情況下，負(fù)責(zé)動(dòng)物的特定身體特性的基因(或該基因的變體)可通過(guò)單核苷酸多態(tài)性(SNP)進(jìn)行鑒定。SNP是動(dòng)物基因組中某一位置的一段DNA序列，該序列與另一動(dòng)物的動(dòng)物基因組中相同位置的DNA序列僅有一個(gè)核苷酸不同。盡管差異如此小，但這可能意味著該動(dòng)物可表現(xiàn)出另一動(dòng)物所不具有的特定身體特性。
牛奶的酪蛋白含量和脂肪含量之間的關(guān)聯(lián)性已經(jīng)被確定，但是這些關(guān)聯(lián)性在相關(guān)的大小和方向上是不定的。因此，其結(jié)果是不確定的。Bovenhius和Weller(Genetics；137(10)267-80，1994)的結(jié)論為如果存在關(guān)聯(lián)性，則其原因在于與相同牛染色體(染色體6)上的脂肪QTL的連鎖(在種畜譜系中)或連鎖不平衡(在群體中)。從發(fā)表的資料得出的總體結(jié)論為牛奶中的脂肪總量與β-酪蛋白的基因型無(wú)關(guān)，且β-酪蛋白對(duì)人類健康的一種或多種影響與脂肪攝入量無(wú)關(guān)。然而，申請(qǐng)人現(xiàn)已確定在牛染色體6上的β-酪蛋白基因的基因型與牛奶中的脂肪酸組成之間存在出乎意料的關(guān)系。
申請(qǐng)人已經(jīng)證實(shí)了先前的發(fā)現(xiàn)，即含有β-酪蛋白A1的牛奶(A1牛奶)與不含β-酪蛋白A1的牛奶(A2牛奶)相比具有相似的脂肪總體百分?jǐn)?shù)。令人驚奇且與先前的發(fā)現(xiàn)相矛盾的是，申請(qǐng)人已發(fā)現(xiàn)與A2牛奶相比，A1牛奶具有更高百分?jǐn)?shù)的飽和脂肪酸和更低百分?jǐn)?shù)的不飽和脂肪酸。同樣令人驚奇的發(fā)現(xiàn)是在那些β-酪蛋白A2純合的奶牛的牛奶中C6、C8、C10、C12和C14脂肪酸水平降低。這一重要發(fā)現(xiàn)表明基本上不含β-酪蛋白A1的牛奶也可產(chǎn)生含有較低水平的飽和脂肪酸及中鏈脂肪酸(C6至C14)和較高水平的不飽和脂肪酸的牛奶脂肪。因此，該牛奶具有健康益處，即降低與飽和脂肪酸高攝入相關(guān)的疾病如動(dòng)脈粥樣硬化、肥胖、冠心病和糖尿病的危險(xiǎn)。
通常，奶牛在其牛奶中產(chǎn)生β-酪蛋白。然而，可存在不同的β-酪蛋白變體，包括A1、A2、A3、B、C、D、E和F。這些蛋白之間的差異由β-酪蛋白基因中的序列變異確定。例如，一種差異是A2、A3、D、E和F變體在67位上帶有脯氨酸殘基，而A1、B和C變體在67位上帶有組氨酸殘基。該差異可通過(guò)在β-酪蛋白基因編碼區(qū)域的200位上用核苷酸胞嘧啶取代核苷酸腺嘌呤來(lái)確定。奶牛的β-酪蛋白變體表型可通過(guò)負(fù)責(zé)區(qū)分這些變體類型的SNP的基因型分析來(lái)間接確定。
申請(qǐng)人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)根據(jù)β-酪蛋白變體類型或β-酪蛋白基因的遺傳變異選擇動(dòng)物可確定在其牛奶脂肪酸組成上具有顯著差異的動(dòng)物組。例如，β-酪蛋白基因編碼區(qū)域200位上的腺嘌呤核苷酸純合的動(dòng)物(A1)的牛奶在脂肪酸組成上與該位置為腺嘌呤和胞嘧啶核苷酸雜合的動(dòng)物(A1/A2)的牛奶不同，其與該位置為胞嘧啶純合的動(dòng)物(A2)的牛奶也不相同。
更具體而言，在β-酪蛋白基因200位上的腺嘌呤可以增加飽和脂肪酸C6:0、C8:0、C10:0、C12:0和C14:0的水平并以相當(dāng)?shù)牧繙p少不飽和脂肪酸C18:1。除去畜群、畜群中的特別個(gè)體、品種、年齡2-8+、產(chǎn)奶天數(shù)、甲基化組以及種畜的影響后，β-酪蛋白基因型占動(dòng)物間這些特殊脂肪酸特性變異的15-20％。
β-酪蛋白在67位上存在組氨酸使得能在酶作用下形成β-酪啡肽(casomorphin)-7。β-酪啡肽-7是一種七氨基酸肽，其只能由β-酪蛋白A1、B和C形成。已知酪啡肽可作為阿片類發(fā)揮作用。得自Lin等人(1998，Peptides 19(2)325-31)的資料顯示β-酪啡肽-7可調(diào)節(jié)膳食脂肪的攝入。β-酪啡肽可刺激大鼠攝入膳食脂肪，而腸抑素(enterostatin)可抑制其攝入。另外，還發(fā)現(xiàn)來(lái)自酪蛋白水解產(chǎn)物的帶有酪氨酰端基的肽(如β-酪啡肽-7)可促進(jìn)人LDL(低密度脂蛋白)的過(guò)氧化物酶依賴性氧化。因此，在其與危害人類健康的因素的關(guān)系方面，當(dāng)前對(duì)β-酪蛋白A1的理解與酪蛋白和自其衍生得到的肽對(duì)消費(fèi)者的脂肪代謝的作用有關(guān)，并且與來(lái)自不同β-酪蛋白基因型動(dòng)物的牛奶的脂肪組成差異無(wú)關(guān)。
β-酪蛋白影響牛奶脂肪酸組成的機(jī)制原因是連鎖基因這一點(diǎn)并不必然。這是由于通過(guò)種畜所觀察到的影響大小和一致性。據(jù)推測(cè)，該發(fā)現(xiàn)與β-酪蛋白對(duì)乳腺組織中脂類生物合成的直接影響有關(guān)，但這并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制?；蛘?，該發(fā)現(xiàn)可能是牛奶中酪蛋白與脂類相互作用的直接結(jié)果。如果后者是正確的話，則改變產(chǎn)品的脂肪酸特性是可能的。因此，在所述的工藝條件下將得自選出的酪蛋白變體型(例如不含β-酪蛋白A1)動(dòng)物的β-酪蛋白添加至產(chǎn)品中可有益地改變產(chǎn)品的脂肪酸特性。
β-酪蛋白檢測(cè)可用于選擇產(chǎn)奶畜群中所包括的動(dòng)物，或者可用于選擇產(chǎn)奶畜群中所包括的用作種畜、母畜或用于人工繁殖或克隆以繁殖動(dòng)物后代的組織捐獻(xiàn)者的動(dòng)物。這樣，可以形成所產(chǎn)生的牛奶在牛奶的蛋白部分中不存在β-酪蛋白A1蛋白(或所含的唯一β-酪蛋白是β-酪蛋白A2)且在牛奶的脂肪部分中特定飽和脂肪酸水平降低和特定不飽和脂肪酸水平升高的的產(chǎn)奶奶牛群。根據(jù)所述基因型分析選擇奶牛以形成可產(chǎn)生不含β-酪蛋白A1變體且優(yōu)選僅含β-酪蛋白A2變體的牛奶的產(chǎn)奶畜群的方法是PCT/NZ96/00039(作為WO96/36239公布)的主題。
本發(fā)明的另一特征是一旦選出具有特定基因型的動(dòng)物并由其產(chǎn)生牛奶，即可證明牛奶或其它產(chǎn)品如奶粉和精制奶制品的來(lái)源為所選出的動(dòng)物所產(chǎn)生。這可通過(guò)測(cè)定所述奶制品的脂肪酸組成來(lái)實(shí)現(xiàn)。因此，消費(fèi)者可確信牛奶確實(shí)來(lái)自所需基因型的動(dòng)物。
本發(fā)明的牛奶的益處相當(dāng)多(1)不存在β-酪蛋白A1蛋白且僅存在β-酪蛋白A2可使冠心病和1型糖尿病的危險(xiǎn)更低；(2)用不飽和脂肪替代飽和脂肪可使冠心病、肥胖和其它疾病的危險(xiǎn)更低；(3)減少被認(rèn)為可導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣化的C14:0的消耗。
酪蛋白影響牛奶脂肪酸組成的機(jī)制尚不清楚，但是其可能通過(guò)由酪蛋白形成酪啡肽被介導(dǎo)。在這一點(diǎn)和人類消耗β-酪蛋白A1的影響之間可能存在機(jī)理性關(guān)系。然而，酪蛋白基因型對(duì)牛奶脂肪酸特性的直接影響與酪蛋白和酪蛋白代謝物對(duì)消費(fèi)者代謝的直接影響具有截然不同的效用。也可能存在β-酪蛋白(或其特定變體)直接改變牛奶脂肪酸組成的直接影響。
實(shí)施例提取DNA并測(cè)定牛奶的脂肪酸組成，所述牛奶來(lái)自β-酪蛋白基因200位核苷酸雜合A/C的六頭種畜的1114頭后代。
用以下方法從牛奶中提取DNA。通過(guò)倒置將牛奶充分混合并用移液管吸取1.0ml放入1.5ml的微量離心管中。將離心管于8,000rpm下離心10分鐘，從每個(gè)樣品中用移液管吸取100μl上清液等分試樣(含粗品DNA)放入新的1.5ml管中。將粗品DNA提取物于-20℃下冷凍貯存，取1-5μl不經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于基因型分析。
所用的基因型分析方法以前在PCT/NZ96/00039(作為WO 96/36239公布)中有詳細(xì)描述。
將用于脂肪酸分析的樣品在15,000rpm下離心15分鐘。從每個(gè)樣品中取出上層脂類的等分試樣。將該脂類樣品加熱至60.0℃，取出融化的脂類并冷凍貯存。隨后將樣品甲基化并用氣相色譜法進(jìn)行分析。將色譜圖上的峰面積進(jìn)行積分以定量每個(gè)脂肪酸的水平。通過(guò)將每個(gè)峰的保留時(shí)間與已知標(biāo)準(zhǔn)相比較來(lái)確定每種脂肪酸的身份。
在所分析的樣品中，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行200位處的CC(A2)、AC(A1/A2)或AA(A1)檢測(cè)。使用廣義線性模型比較基因型之間的差異，其中對(duì)原始數(shù)據(jù)就可能影響脂肪酸組成的其它因素進(jìn)行調(diào)整。就以下因素進(jìn)行預(yù)調(diào)整畜群、畜群中的特別個(gè)體、品種、年齡2-8+、產(chǎn)奶天數(shù)以及畜群中的甲基化組。最后，對(duì)種畜、基因型以及種畜與基因型的相互作用進(jìn)行擬合。
表1中給出了該研究的結(jié)果，該結(jié)果顯示A2基因型對(duì)脂肪酸組成有顯著影響。各個(gè)脂肪酸之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性水平各不相同(*＝p＜0.05，**＝p＜0.1，***＝p＜0.001)。與A1相比，具有A2基因型的動(dòng)物的牛奶具有顯著更高百分?jǐn)?shù)的長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸(C18:1)和更低百分?jǐn)?shù)的飽和中鏈脂肪酸(C6:0-C14:0)；而A1/A2個(gè)體的這些值居中。
對(duì)于總C18:1百分?jǐn)?shù)，A2來(lái)源的牛奶較A1來(lái)源的牛奶含有的C18:1多約3％。C18:1在牛奶脂肪中占約15％，因此作為全部牛奶脂肪的比例，總影響為C18:1多約0.5％。飽和脂肪酸百分?jǐn)?shù)的降低與不飽和脂肪酸的路由器C1在s4時(shí)刻接收到應(yīng)答分組，并根據(jù)這四個(gè)時(shí)間戳計(jì)算時(shí)鐘差(見(jiàn)圖3)。時(shí)間戳的定義如下

假設(shè)分組從C1傳輸?shù)紺2和從C2傳輸?shù)紺1在傳輸介質(zhì)上所消耗的時(shí)間相等，定義為介質(zhì)傳輸延遲Δs。時(shí)鐘差c可以如下計(jì)算s1+Δt-c=s2s3+Δt+c=s4⇒c=(s1+s4)-(s2+s3)2]]>需要強(qiáng)調(diào)，時(shí)間戳s1、s2、s3和s4是分組離開(kāi)和到達(dá)網(wǎng)卡的時(shí)刻。這些參數(shù)并不容易測(cè)量，這是產(chǎn)生誤差的一個(gè)重要原因。在實(shí)現(xiàn)時(shí)，應(yīng)該盡可能使測(cè)量點(diǎn)靠近傳輸介質(zhì)。顯然，時(shí)鐘差測(cè)量協(xié)議基于數(shù)據(jù)鏈路層。
在已知時(shí)鐘差的基礎(chǔ)上，鏈路的分組傳輸延遲可以用如下方法測(cè)量路由器C2向C1發(fā)送一個(gè)測(cè)量分組，分組中記錄了分組離開(kāi)發(fā)送點(diǎn)的時(shí)刻t1。測(cè)量分組經(jīng)過(guò)C2的發(fā)送緩沖隊(duì)列、傳輸介質(zhì)和C1的接收緩沖隊(duì)列，最后到達(dá)C1的接收測(cè)量點(diǎn)(見(jiàn)圖4)。時(shí)間戳的定義如下

若時(shí)鐘C1相對(duì)于時(shí)鐘C2的偏差為c，則路由器C2到C1的分組傳輸延遲的計(jì)算公式為d＝t2-t1-c由于延遲測(cè)量分組在用戶數(shù)據(jù)通路上傳輸，延遲測(cè)量協(xié)議應(yīng)在網(wǎng)絡(luò)層上實(shí)現(xiàn)。
分組丟失率的測(cè)量方法如下路由器C2設(shè)定丟失率測(cè)量周期為T(mén)。每個(gè)周期結(jié)束時(shí)，C2向C1發(fā)送一個(gè)測(cè)量分組，該分組中記錄了這個(gè)周期內(nèi)從C2的發(fā)送測(cè)量點(diǎn)向C1發(fā)送的用戶數(shù)據(jù)分組的數(shù)量，記為p1(見(jiàn)圖5)。
路由器C1當(dāng)接收到來(lái)自路由器C2的測(cè)量分組時(shí)，C1統(tǒng)計(jì)接收測(cè)量點(diǎn)自接收到上個(gè)測(cè)量分組后成功接收到的來(lái)自C2的用戶數(shù)據(jù)分組數(shù)量p2。由于從發(fā)送測(cè)量點(diǎn)到接收測(cè)量點(diǎn)<p>表1(續(xù))

盡管通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了闡述，但應(yīng)當(dāng)理解可以進(jìn)行變化和修改而不超出本發(fā)明的范圍。此外，如果存在特定特征的已知等價(jià)物，則引入該等價(jià)物，就如同在本說(shuō)明書(shū)中具體提及一樣。
工業(yè)適用性含有與不飽和脂肪酸相比低水平飽和脂肪酸的牛奶可用于避免某些疾病和病癥。膳食脂肪酸攝入是心臟疾病的一個(gè)主要危險(xiǎn)因素，并且該膳食脂肪酸攝入中的許多來(lái)自牛奶和奶制品消耗。通過(guò)僅對(duì)那些基于其產(chǎn)生在67位上帶有脯氨酸而非組氨酸的β-酪蛋白變體的能力進(jìn)行了基因型分析或表型分析的奶牛擠奶以獲得相對(duì)于不飽和脂肪酸的飽和脂肪酸水平低的牛奶是一種生產(chǎn)對(duì)人類健康有益的牛奶的有用方法。
權(quán)利要求
1.一種降低牛奶中相對(duì)于不飽和脂肪酸水平的飽和脂肪酸水平的方法，該方法是(a)通過(guò)檢測(cè)畜群中各個(gè)奶牛的遺傳物質(zhì)是否存在編碼在67位上帶有脯氨酸殘基的β-酪蛋白的DNA或通過(guò)檢測(cè)畜群中各個(gè)奶牛產(chǎn)生的牛奶(或由該牛奶制備的產(chǎn)品)是否存在在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白來(lái)確定畜群中哪些奶牛產(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶，所述的畜群包括產(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶的奶牛和產(chǎn)生含有在67位上帶有組氨酸的β-酪蛋白的牛奶的奶牛；(b)選擇具有編碼在67位上帶有脯氨酸殘基的β-酪蛋白的DNA的奶?；虍a(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶的奶牛；以及(c)給選出的奶牛擠奶，得到與由該畜群獲得的牛奶相比相對(duì)于不飽和脂肪酸水平的飽和脂肪酸水平降低的牛奶。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白包括β-酪蛋白A2、A3、D、E和F中的一個(gè)或多個(gè)。
3.權(quán)利要求2所述的方法，其中在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白為β-酪蛋白A2。
4.權(quán)利要求1所述的方法，其中在67位上帶有組氨酸的β-酪蛋白包括β-酪蛋白A1、B和C中的一個(gè)或多個(gè)。
5.權(quán)利要求4所述的方法，其中在67位上帶有組氨酸的β-酪蛋白為β-酪蛋白A1。
6.權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的方法，其中與由該畜群獲得的牛奶相比，每條鏈中含有6至14個(gè)碳原子的短鏈和中鏈飽和脂肪酸(C6:0-C14:0)水平降低。
7.權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的方法，其中通過(guò)檢測(cè)奶牛的遺傳物質(zhì)是否存在編碼在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的DNA來(lái)確定該畜群中哪些奶?？僧a(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶。
8.權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的方法，其中通過(guò)檢測(cè)奶牛所產(chǎn)生的牛奶(或由該牛奶制備的產(chǎn)品)是否存在在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白來(lái)確定該畜群中哪些奶牛產(chǎn)生含有在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白的牛奶。
9.權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的方法，其中奶牛的遺傳物質(zhì)可以是含有有核細(xì)胞的任何組織。
10.權(quán)利要求9所述的方法，其中遺傳物質(zhì)由血液、毛發(fā)或牛奶獲得。
11.用權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的方法獲得的牛奶。
12.由用權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的方法獲得的牛奶制備的奶制品。
13.通過(guò)向食物中添加一定量的在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白而改變食物中飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸比例的方法。
14.權(quán)利要求13所述的方法，其中通過(guò)降低食物中的飽和脂肪酸水平來(lái)改變飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的比例。
15.權(quán)利要求13或權(quán)利要求14所述的方法，其中所述的食物為牛奶或由牛奶制備的奶制品。
16.權(quán)利要求13至15中任一項(xiàng)所述的方法，其中通過(guò)添加用權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的方法獲得的牛奶(或牛奶提取物)而將在67位上帶有脯氨酸的β-酪蛋白添加至食物中。
全文摘要
一種降低牛奶中相對(duì)于不飽和脂肪酸水平的飽和脂肪酸水平的方法。具體而言，基于其牛奶中所產(chǎn)生的β－酪蛋白的位于67位上的氨基酸殘基對(duì)奶牛進(jìn)行基因型分析和/或表型分析。本發(fā)明所基于的發(fā)現(xiàn)是牛奶中飽和與不飽和脂肪酸的比例和牛奶中的β－酪蛋白變體之間存在相關(guān)性。
文檔編號(hào)A23C7/00GK1665386SQ03815808
公開(kāi)日2005年9月7日 申請(qǐng)日期2003年7月3日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月3日
發(fā)明者C·A·莫里斯, M·L·塔特 申請(qǐng)人:A2有限公司