專利名稱：光學活性(S或R)-α-氨基酸及光學活性(S或R)-α-氨基酸酯的制造方法
技術領域：
本發(fā)明涉及由a-氨基酸酯(外消旋體混合物)同時獲得光學活性(S 或R) -(x-氨基酸和作為其對映體酯的光學活性(R或S) -a-氨基酸酯的方 法。這些光學活性a-氨基酸及其酯是可以用作具有生理活性的天然物及藥 品的原料或合成中間體的化合物(例如，參見非專利文獻1、專利文獻1-5)。
背景技術：
以往，作為光學活性a-氨基酸及其酯的利用脂肪酶進行對映選擇性水 解反應的制造方法，例如已公開了在豬胰臟脂肪酶、源于洋蔥伯克霍爾德 菌(假單胞菌)(Burkholderia cepacia (Pseudomonas cepacia))的月旨肪酶、 源于酒曲菌(Rhizopus)的脂肪酶的存在下，使各種氨基酸酯在水中僅選 擇性地水解為對映體中的一種，從而得到光學活性(S)-氨基酸及光學活 性(R)-氨基酸酯的方法(例如，參見非專利文獻2)。
但是，這些方法要使用大量的酶，總的來說，作為酶對對映體之間的 選擇性指標的E值低，當作為生成物的光學活性羧酸為水溶性時，反應完 成后不容易100%地從水溶液中回收，此外還存在著在大量水的存在下基 質(zhì)本身水解導致光學純度下降的問題。還有，E值作為光學理論上的光學 分離選擇性的指標得到了廣泛應用(例如，參見非專利文獻3)。
另外，作為以往光學活性cc-氨基酸及其酯的利用蛋白酶進行對映選擇 性水解反應的制造方法，例如公開了在a-糜蛋白酶、卡斯柏格枯草桿菌、 枯草桿菌蛋白酶BPN，的存在下，使酪氨酸乙酯在乙腈中僅選擇性地水解 為對映體中的一種，從而得到光學活性(S)-酪氨酸及光學活性(R)-酪 氨酸酯的方法(例如，參見非專利文獻4)。其中改變乙腈中的水含量進行 了各種反應，相對于溶劑乙腈為5 10%時得到了最好的結果。
但是，在水含量相對于基質(zhì)為10當量以下這種極少量的體系中，水解并不進行。在該文獻采用的體系中，不容易完全抑制氨基酸酯本身的水 解，并且基質(zhì)相對于溶劑的濃度低，在工業(yè)上是不可取的方法。
另外，作為以往光學活性a-氨基酸及其酯的利用蛋白酶進行對映選擇 性水解反應的制造方法，例如公開了在ct-糜蛋白酶、卡斯柏格枯草桿菌、 枯草桿菌蛋白酶BPN'的存在下，使酪氨酸乙酯在乙腈-水混合溶劑中僅選
擇性地水解為對映體中的一種，從而得到光學活性(s)-酪氨酸及光學活
性(R)-酪氨酸酯的方法(例如，參見非專利文獻4)。其中改變乙腈中的 水含量進行了各種反應，當水相對于溶劑乙腈為5 10% (v/v)時得到了 最好的結果。
但是，對于上述反應體系，在水含量相對于基質(zhì)為10當量以下這種 極少量的體系中，水解并不進行，另外，也未提起。在本發(fā)明使用的體系 中，作為基質(zhì)使用的水量大，不容易完全抑制氨基酸酯本身的水解，并且 基質(zhì)相對于溶劑的濃度低，在工業(yè)上是不可取的方法。
非專利文獻1: J. Med. Chem.， 46, 4533(2003)
非專利文獻2: Chirality., 8， 418(1996)
非專利文獻3: J. Am. Chem. Soc., 104,7294(1982)
非專利文獻4: Biotechnology Letters, 13, (5)， 317(1991)
非專利文獻5:"化學辭典"，東京化學同人出版，948頁(2000年)
專利文獻1: WO9706162
專利文獻2: WO2005063198
專利文獻3: WO2004084812
專利文獻4: WO9803473
專利文獻5: WO200505130
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的課題在于解決上述問題，通過簡便的方法，利用使用酶的水 解反應以高E值由a-氨基酸酯(外消旋體混合物)同時制造光學活性(S 或R) -a-氨基酸和作為其對映體酯的光學活性(R或S) -a-氨基酸酯的方法。以往，通過(X-氨基酸酯(外消旋體混合物)的對映選擇性水解來制造 CC-氨基酸通常是按以下方法進行，g卩，在水解酶的存在下，在以水為主的 溶劑中使大量水和外消旋體的p-氨基酸酯反應。其原因是認為對于作為基 質(zhì)的外消旋體OC-氨基酸酯的水解反應，水量越多，就越能促進反應。為了 解決上述問題，本發(fā)明人進行深入研究，從而發(fā)現(xiàn)一種新型反應體系，其 中在脂肪酶或蛋白酶的存在下，通過在有機溶劑中使水和OC-氨基酸酯(外 消旋體混合物)進行反應，基本上完全抑制了由水引起的易水解基質(zhì)(卩-氨基酸酯)本身發(fā)生水解(這導致光學純度下降)，并且可以完全回收通
常因具有水溶性而難以分離的光學活性a-氨基酸，與以往技術相比，該反
應體系提高了收率、選擇性、操作性等，作為工業(yè)制造方法更有優(yōu)勢。
本發(fā)明涉及通式(n)表示的光學活性(S或R) -a-氨基酸及通式(III) 表示的光學活性(R或S) -ct-氨基酸酯的制造方法，其特征在于，在脂肪 酶或蛋白酶的存在下，在有機溶劑中使水和通式(I)表示的作為外消旋體 混合物的a-氨基酸酯的對映體中的僅一種進行反應；
式中，R表示可以具有取代基的烷基、烯基、炔基、環(huán)垸基、芳垸基、雜 芳烷基、芳基或雜芳基，W表示可以具有取代基的烷基；
式中，R及W與上述同義，*表示不對稱碳原子，但是具有與通式(II) 的化合物相反的立體絕對構型。
本發(fā)明還涉及光學活性(R或S) -a-氨基酸酯的酸鹽的制造方法，其
式中，R與上述同義，*表示不對稱碳原子;中從上述通式(II)表示的光學活性(S或R) -a-氨基酸和上述通式(III) 表示的光學活性(R或S)-oi-氨基酸酯的混合物中分別分離出兩種物質(zhì)后， 使得到的光學活性(R或S) -a-氨基酸酯和酸進行反應；
式中，R及W與上述同義，*表示不對稱碳原子，但是具有與通式(II) 的化合物相反的立體絕對構型。
根據(jù)本發(fā)明，可以通過簡便的方法，利用使用酶的水解反應以高E值 由a-氨基酸酯(外消旋體混合物)同時制造光學活性(S或R) -a-氨基酸 和作為其對映體酯的光學活性(R或S) -a-氨基酸酯的方法。
具體實施例方式
化合物(I)中的R表示可以具有取代基的烷基、烯基、炔基、環(huán)烷 基、芳垸基、雜芳基垸基、芳基或雜芳基，Ri表示可以具有取代基的烷基。
上述R中可以具有取代基的烷基中的垸基是直鏈狀或支化鏈狀的碳 原子數(shù)為1~10的垸基，例如可以列舉甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、 己基、庚基、辛基、壬基及癸基等烷基，優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、異丙 基、正丁基及正辛基等碳原子數(shù)為1~8的烷基，更優(yōu)選甲基及乙基等碳原 子數(shù)為1 2的垸基。還有，這些基團包括各種異構體。
關于可以具有取代基的烷基中的取代基，例如可以列舉氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等鹵素原子；羥基；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧 基等碳原子數(shù)為1 4的垸氧基；氨基；及二甲氨基、二乙氨基等被碳原子 數(shù)為1~6的烷基二取代的二垸基氨基；氰基；硝基等，但是優(yōu)選氟原子、 氯原子、羥基、氨基及二烷基氨基。
式中，R與上述同義，*表示不對稱碳原子;作為這種可以具有取代基的烷基，可以具體地列舉例如氟甲基、氯甲
基、羥甲基、甲氧基甲基、氨甲基、二甲氨基甲基、2-氯乙基、2，2-二氯 乙基、2-羥基乙基及2-氰基乙基等，但優(yōu)選氟甲基、氯甲基、羥甲基、氨 甲基、二甲氨基甲基、2-氯乙基及2-氰乙基。
作為上述R中可以具有取代基的烯基中的烯基，例如可以列舉乙烯 基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基及癸烯 基等碳原子數(shù)為2~10的烯基，優(yōu)選乙烯基、丙烯基、丁烯基及戊烯基等 碳原子數(shù)為2~5的烯基，更優(yōu)選乙烯基、1-丙烯及2-丙烯等碳原子數(shù)為2 3 的烯基。還有，這些基團包括各種異構體。
關于可以具有取代基的烯基中的取代基，例如可以列舉氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等鹵素原子；羥基；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧 基等碳原子數(shù)為l-4的烷氧基；氨基；及二甲氨基、二乙氨基等被碳原子 數(shù)為1~6的烷基二取代的二烷基氨基；氰基；硝基，但是優(yōu)選氟原子、氯 原子、羥基、氨基及二烷基氨基。
作為這種具有取代基的烯基，可以具體地列舉例如l-氟乙烯基、1-氯 乙烯基、1-羥基乙烯基、1-甲氧基乙烯基、1-氨基乙烯基、1-氰基乙烯基、 2-氟乙烯基、2-氯乙烯基、2-羥基乙烯基、2-甲氧基乙烯基、2-氨基乙烯基、
2- 氰基乙烯基、1，2-二甲氨基乙烯基、l-氟-2-丙烯基、l-氯-2-丙烯基、1-羥基-2-丙烯基、l-甲氧基-2-丙烯基、l-氨基-2-丙烯基、l-氰基-2-丙烯基、
3- 氟-l-丙烯基、3-氯-l-丙烯基、3-羥基-2-丙烯基、3-甲氧基-2-丙烯基、3-氨基-2-丙烯基、2-氰基-2-丙烯基、3，3-二甲氨基-2-丙烯基及3,3-二氯-2-丙 烯基等，優(yōu)選l-氟乙烯基、l-氯乙烯基、1-羥基乙烯基、1-氨基乙烯基、 1-氰基乙烯基、l-氟-2-丙烯基、l-氯-2-丙烯基及l(fā)-氰基-2-丙烯基。
作為上述R中可以具有取代基的炔基中的炔基，例如可以列舉乙炔 基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基及癸炔 基等碳原子數(shù)為2~10的炔基，優(yōu)選乙炔基、丙炔基、丁炔基及戊炔基等 碳原子數(shù)為2 5的炔基，更優(yōu)選乙炔基、1-丙炔及2-丙炔等碳原子數(shù)為2~3 的炔基。還有，這些基團包括各種異構體。
關于可以具有取代基的炔基中的取代基，例如可以列舉氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等鹵素原子；羥基；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等碳原子數(shù)為1 4的烷氧基；氨基；二甲氨基、二乙氨基等被碳原子數(shù) 為1 6的烷基二取代的二烷基氨基；氰基及硝基，但是優(yōu)選氟原子、氯原 子、羥基、氨基及二垸基氨基。
作為這種具有取代基的炔基，可以具體地列舉例如2-氟乙炔基、2-氯
乙炔基、2-羥基乙炔基、2-甲氧基炔基、2-氨基乙炔基、2-氰基乙炔基、1-氟-2-丙炔基、l-氯-2-丙炔基、l-羥基-2-丙炔基、l-甲氧基-2-丙炔基、1-氨 基-2-丙炔基、l-氰基-2-丙炔基、1，1-二氯-2-丙炔基及1，1-二氨基-2-丙炔基 等，但是優(yōu)選2-氟乙炔基、2-氯乙炔基、2-羥基乙炔基、2-氨基乙炔基、
1- 氟-2-丙炔基及U-二氯-2-丙炔基。
上述R中可以具有取代基的環(huán)烷基中的環(huán)垸基是碳原子數(shù)為3 10的 環(huán)烷基，例如可以列舉環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛 基、環(huán)壬基及環(huán)癸基之類的環(huán)烷基(還有，這些基團包括各種異構體)， 但優(yōu)選環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基及環(huán)辛基等碳原子數(shù)為 3~8的環(huán)烷基，更優(yōu)選環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及環(huán)己基等碳原子數(shù)為3 6 的環(huán)烷基。
關于可以具有取代基的環(huán)垸基中的取代基，可以列舉碳鏈原子數(shù)為 1~6的烷基、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等鹵素原子；羥基；甲氧 基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等碳原子數(shù)為1~4的烷氧基；氨基；二甲氨 基、二乙氨基等被碳原子數(shù)為1 6的烷基二取代的二垸基氨基；氰基及硝 基，但是優(yōu)選氟原子、氯原子、羥基、氨基及二垸基氨基。
作為這種具有取代基的環(huán)垸基，可以具體地列舉例如l-氟環(huán)丙基、2-氯環(huán)丙基、3-氟環(huán)丁基、甲氧基環(huán)丙基、氨基環(huán)戊基、二甲氨基環(huán)己基、
2- 氯環(huán)丙基、2,2-二氯環(huán)己基、2-羥基環(huán)丁基及2-氰基環(huán)己基等，優(yōu)選氟環(huán) 丙基及氯環(huán)丁基。
作為上述R中可以具有取代基的芳垸基中的芳烷基，例如可以列舉芐 基、l-萘甲基、2-萘甲基、苯乙基、苯丙基及苯丁基等碳原子數(shù)為6~14的 芳基在碳原子數(shù)為1~6的烷基上進行取代而形成的芳垸基，但優(yōu)選芐基、 l-萘甲基、2-萘甲基、l-苯乙基、2-苯乙基、3-苯丙基及3-苯丁基等芳基在 碳原子數(shù)為1~4的垸基上進行取代而形成的芳垸基，特別優(yōu)選芐基、1-萘 甲基、2-萘甲基等芳基在甲基上進行取代而形成的芳垸基。還有，這些基團包括各種異構體。
關于可以具有取代基的芳烷基中的取代基，例如可以列舉甲基、乙基、 丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等碳原子數(shù)為1 10 的烷基(還有，這些基團包括各種異構體)；羥基；硝基；氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等鹵素原子；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊 氧基、己氧基、庚氧基、辛氧基、壬氧基、癸氧基等碳原子數(shù)為1~10的 垸氧基(還有，這些基團包括各種異構體)；芐氧基、苯乙氧基、苯丙氧 基等碳原子數(shù)為7~10的芳垸氧基(還有，這些基團包括各種異構體)；苯 氧基、萘氧基等碳原子數(shù)為6~20的芳氧基(還有，這些基團包括各種異 構體)；甲氧基甲氧基、甲氧基乙氧基等碩原子數(shù)為2 12的垸氧基垸氧基 (還有，這些基團包括各種異構體)；甲氨基、乙氨基等單垸基氨基(還 有，這些基團包括各種異構體)；二甲氨基、二乙氨基等被碳原子數(shù)為1~6 的垸基二取代的二烷基氨基(還有，這些基團包括各種異構體)；甲酰氨 基、乙酰氨基、苯甲酰氨基等碳原子數(shù)為1~12的酰氨基(還有，這些基 團包括各種異構體)；硝基；氰基及三氟甲基等碳原子數(shù)為1 12的鹵化垸 基。
作為這種具有取代基的芳烷基，可以具體地列舉例如2-氟芐基、3-氟 芐基、4-氟芐基、3，4-二氟芐基、2，4-二氟芐基、2-氯芐基、3-氯芐基、4-氯芐基、2,4-二氯芐基、3，4-二氯芐基、2-溴芐基、3-溴芐基、4-溴芐基、 2,4-二溴節(jié)基、3,4-二溴節(jié)基、2-碘節(jié)基、3-碘節(jié)基、4-碘節(jié)基、2,3-二碘芐 基、3，4-二碘芐基、2-甲基節(jié)基、3-甲基芐基、4-甲基芐基、2-乙基芐基、
3- 乙基芐基、4-乙基芐基、2-羥基芐基、3-羥基芐基、4-羥基芐基、2-甲氧 基芐基、3-甲氧基芐基、4-甲氧基芐基、2,4-二甲氧基芐基、3，4-二甲氧基 芐基、2-乙氧基芐基、4-乙氧基芐基、2-三氟甲基芐基、4-三氟甲基芐基、
4- 芐氧基芐基、2-硝基芐基、3-硝基芐基、4-硝基芐基、2-氰基芐基、3-氰 基芐基、4-氰基芐基、4-二甲氨基芐基、4-甲酰氨基芐基、2-乙酰氨基芐基、 3-乙酰氨基芐基、4-乙酰氨基芐基、4-苯甲酰氨基芐基、l-萘甲基、2-萘甲 基、2- (2-氟苯基)乙基、2- (3-氟苯基)乙基、2- (4-氟苯基)乙基、2-
(3,4-二氟苯基)乙基、2- (2，4-二氟苯基)乙基、2- (2-氯苯基)乙基、 2- (3-氯苯基)乙基、2- (4-氯苯基)乙基、2- (2,4-二氯苯基)乙基、2-(3,4-二氯苯基)乙基、2- (2-溴苯基)乙基、2- (3-溴苯基)乙基、2- (4-溴苯基)乙基、2- (2，4-二溴苯基)乙基、2- (3，4-二溴苯基)乙基、2- (2-碘苯基)乙基、2- (3-碘苯基)乙基、2- (4-碘苯基)乙基、2- (2,3-二碘 苯基)乙基、2- (3,4-二碘苯基)乙基、2- (2-甲苯基)乙基、2- (3-甲苯 基)乙基、2- (4-甲苯基)乙基、2- (2-乙苯基)乙基、2- (3-乙苯基)乙 基、2- (4-乙苯基)乙基、2- (2-羥基苯基)乙基、2- (4-羥基苯基)乙基、 2- (2-甲氧基苯基)乙基、2- (3-甲氧基苯基)乙基、2- (4-甲氧基苯基) 乙基、2- (2,4-二甲氧基苯基)乙基、2- (3，4-二甲氧基苯基)乙基、2- (2-乙氧基苯基)乙基、2- (4-乙氧基苯基)乙基、2- (2-三氟甲基苯基)乙基、
2- (4-三氟甲基苯基)乙基、2- (4-節(jié)氧基苯基)乙基、2- (2-硝基苯基) 乙基、2- (3-硝基苯基)乙基、2- (4-硝基苯基)乙基、2- (2-氰基苯基) 乙基、2- (3-氰基苯基)乙基、2- (4-氰基苯基)乙基、2- (4-二甲氨基苯 基)乙基、2- (4-甲酰氨基苯基)乙基、2- (2-乙酰氨基苯基)乙基、2-
(3-乙酰氨基苯基)乙基、2- (4-乙酰氨基苯基)乙基、2- (4-苯甲酰氨基 苯基)乙基、3- (2-氟苯基)丙基、3- (4-氟苯基)丙基、3- (4-氯苯基) 丙基、3- (4-溴苯基)丙基、3- (4-碘苯基)丙基、3- (2-氯苯基)丙基、
3- (2-甲氧苯基)丙基、3- (4-甲氧苯基)丙基、3- (3，4-二甲氧基苯基) 丙基、3- (4-三氟甲基苯基)丙基、3- (2-三氟甲基苯基)丙基、3- (4-硝 基苯基)丙基、3- (4-氰基苯基)丙基及3- (4-乙酰氨基苯基)丙基等， 但優(yōu)選2-氟芐基、3-氟芐基、4-氟芐基、2-氯芐基、3-氯芐基、4-氯芐基、
2- 溴芐基、3-溴芐基、4-溴芐基、2-碘芐基、3-碘芐基、4-碘芐基、2-甲基 節(jié)基、3-甲基節(jié)基、4-甲基節(jié)基、2-羥基芐基、4-羥基芐基、2-甲氧基芐基、
3- 甲氧基芐基、4-甲氧基芐基、3，4-二甲氧基芐基、2-三氟甲基芐基、4-三 氟甲基芐基、4-芐氧基芐基、2-硝基芐基、3-硝基芐基、4-硝基芐基、2-氰基芐基、3-氰基芐基、4-氰基芐基、4-甲酰氨基芐基、3-乙酰氨基芐基、
4- 乙酰氨基芐基、4-苯甲酰氨基芐基、l-萘甲基、2-萘甲基、2- (2-氟苯基) 乙基、2- (3-氟苯基)乙基、2- (4-氟苯基)乙基、2- (2-氯苯基)乙基、 2- (3-氯苯基)乙基、2- (4-氯苯基)乙基、2- (2-溴苯基)乙基、2- (3-溴苯基)乙基、2- (4-溴苯基)乙基、2- (2-碘苯基)乙基、2- (3-碘苯基) 乙基、2_ (4-碘苯基)乙基、2- (2-甲苯基)乙基、2- (3-甲苯基)乙基、2- (4-甲苯基)乙基、2- (2-乙苯基)乙基、2- (2-羥基苯基)乙基、2- (4-羥基苯基)乙基、2- (2-甲氧基苯基)乙基、2- (3-甲氧基苯基)乙基、2-
(4-甲氧基苯基)乙基、2- (2，4-二甲氧基苯基)乙基、2- (3,4-二甲氧基 苯基)乙基、2- (2-三氟甲基苯基)乙基、2- (4-三氟甲基苯基)乙基、2-
(4-節(jié)氧基苯基)乙基、2- (2-硝基苯基)乙基、2- (3-硝基苯基)乙基、 2- (4-硝基苯基)乙基、2- (2-氰基苯基)乙基、2- (3-氰基苯基)乙基、
2- (4-氰基苯基)乙基、2- (2-乙酰氨基苯基)乙基、2- (3-乙酰氨基苯基) 乙基、2- (4-乙酰氨基苯基)乙基、2- (4-苯甲酰氨基苯基)乙基、3- (2-氟苯基)丙基、3- (4-氟苯基)丙基、3- (4-氯苯基)丙基、3- (4-溴苯基) 丙基、3- (4-碘苯基)丙基、3- (2-氯苯基)丙基、3- (2-甲氧苯基)丙基、
3- (4-甲氧苯基)丙基、3- (3,4-二甲氧基苯基)丙基、3- (4-三氟甲基苯 基)丙基、3- (2-三氟甲基苯基)丙基、3- (4-硝基苯基)丙基、3- (4-氰 基苯基)丙基及3- (4-乙酰氨基苯基)丙基，更優(yōu)選2-氟芐基、4-氟芐基、 2-氯芐基、4-氯芐基、2-溴芐基、4-溴芐基、2-碘芐基、4-碘芐基、2-甲基 節(jié)基、4-甲基芐基、4-羥基芐基、2-甲氧基芐基、3-甲氧基芐基、4-甲氧基 節(jié)基、3,4-二甲氧基芐基、2-三氟甲基芐基、4-三氟甲基芐基、4-芐氧基芐 基、2-硝基芐基、4-硝基芐基、2-氰基芐基、3-氰基芐基、4-氰基芐基、3-乙酰氨基芐基、4-乙酰氨基芐基、l-萘甲基、2-萘甲基、2- (2-氟苯基)乙 基、2- (4-氟苯基)乙基、2- (2-氣苯基)乙基、2- (4-氯苯基)乙基、2-
(2-溴苯基)乙基、2- (4-溴苯基)乙基、2- (2-碘苯基)乙基、2- (4-碘 苯基)乙基、2- (2-甲苯基)乙基、2- (4-甲苯基)乙基、2- (2-乙苯基) 乙基、2- (4-羥基苯基)乙基、2- (2-甲氧基苯基)乙基、2- (4-甲氧基苯 基)乙基、2- (3,4-二甲氧基苯基)乙基、2- (2-三氟甲基苯基)乙基、2-
(4-三氟甲基苯基)乙基、2- (4-芐氧基苯基)乙基、2- (2-硝基苯基)乙 基、2- (4-硝基苯基)乙基、2- (2-氰基苯基)乙基、2- (4-氰基苯基)乙 基、2- (2-乙酰氨基苯基)乙基及2- (4-乙酰氨基苯基)乙基，特別優(yōu)選 2-氟芐基、4-氟芐基、2-氯芐基、4-氯芐基、2-溴芐基、4-溴芐基、2-碘芐 基、4-碘芐基、2-甲基芐基、4-甲基芐基、4-羥基芐基、2-甲氧基芐基、4-甲氧基芐基、3,4-二甲氧基芐基、2-三氟甲基芐基、4-三氟甲基芐基、4-節(jié)氧基節(jié)基、2-硝基節(jié)基、4-硝基芐基、2-氰基芐基、3-氰基芐基、4-氰基芐基、3-乙酰氨基芐基、4-乙酰氨基芐基、l-萘甲基及2-萘甲基。
作為上述R中可以具有取代基的雜芳烷基中的雜芳垸基，例如可以列 舉2-吡啶基甲基、3-吡啶基甲基、3-吡啶基甲基、2-噻嗯基甲基、3-噻嗯 基甲基、2-咪唑基、4-咪唑基、2-噻嗯基甲基、3-B引哚基甲基、2-吡啶基乙 基、2-噻嗯基乙基、2-吡啶基丙基、2-吡啶基丁基等碳原子數(shù)為6~14的雜 芳基在碳原子數(shù)為1~6的烷基上進行取代而形成的雜芳烷基，但優(yōu)選2-吡啶基甲基、2-噻嗯基甲基、3-吲哚基甲基、2-吡啶基乙基、2-噻嗯基乙基 等雜芳基在碳原子數(shù)為1 2的烷基上進行取代而形成的雜芳垸基，更優(yōu)選 2-吡啶基甲基、2-噻嗯基甲基、3-吲哚基甲基等雜芳烷基在甲基上進行取 代而形成的雜芳烷基。還有，這些基團包括各種異構體。
作為上述R中可以具有取代基的雜芳烷基中的可具有取代基的雜芳 基，例如可以列舉2-呋喃基、3-呋喃基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、 2-吡咯基、3-吡咯基、2-噻嗯基、3-噻嗯基、2-吲哚基、3-吲哚基、2-咪唑 基、4-咪唑基、3-吡唑基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、2-喹啉及3-喹啉基。
作為可以具有取代基的雜芳基的取代基，可以列舉甲基、乙基、丙基、 丁基等碳原子數(shù)為1 4的烷基(還有，這些基團包括各種異構體)；羥基； 氯原子、溴原子、碘原子、氟原子等鹵素原子；乙氧基等碳原子數(shù)為2 4 的烷氧基(還有，這些基團包括各種異構體)；氨基；硝基；氰基及三氟 甲基等碳原子數(shù)為1~4的鹵化烷基。
作為這種可以具有取代基的雜芳基，可以具體地列舉例如2- (3-甲基) 呋喃基、2- (4-甲基)呋喃基、2- (3-乙基)呋喃基、2- (4-乙基)呋喃基、 2- (3-氟)呋喃基、2- (3-氯)呋喃基、2- (3-羥基)呋喃基、2- (3-甲氧 基)呋喃基、2- (3-氨基)呋喃基、2- (3-硝基)呋喃基、2- (3-氰基)呋 喃基、2- (3-甲基)吡啶基、2- (4-甲基)吡啶基、2- (3-乙基)吡啶基、 2- (4-乙基)吡啶基、2- (3-氟)吡啶基、2- (4-氯)吡啶基、2誦(3-羥基) 吡啶基、2- (3-甲氧基)吡啶基、2- (3-氨基)吡啶基、2- (3-硝基)吡啶 基、2- (3-氰基)吡啶基、2- (3,5-二氯)吡啶基、3- (2-氯)吡啶基、2-(3-甲基)吡咯基及2- (3-甲基)噻嗯基等，但優(yōu)選2- (3-甲基)呋喃基、 2- (3-氟)呋喃基、2- (3-甲基)吡啶基、2- (3-氟)吡啶基、2- (3-硝基) 吡啶基、2- (3-氰基)吡啶基及2- (3，5-二氯)吡啶基。作為這種可以具有取代基的雜芳烷基，可以具體地列舉例如2- (3-甲
基)呋喃基甲基、2- (4-甲基)呋喃基甲基、2- (3-乙基)呋喃基甲基、2-(4-乙基)呋喃基甲基、2- (3-氟)呋喃基甲基、2- (3-氯)呋喃基甲基、 2- (3-羥基)呋喃基甲基、2- (3-甲氧基)呋喃基甲基、2- (3-氨基)呋喃 基甲基、2- (3-硝基)呋喃基甲基、2- (3-氰基)呋喃基甲基、2- (3-甲基) 吡啶基甲基、2- (4-甲基)吡啶基甲基、2畫(3-乙基)吡啶基甲基、2- (4-乙基)吡啶基甲基、2- (3-氟)吡啶基甲基、2- (4-氯)吡啶基甲基、2-(3-羥基)吡啶基甲基、2- (3-甲氧基)吡啶基甲基、2- (3-氨基)吡啶基 甲基、2- (3-硝基)吡啶基甲基、2- (3-氰基)吡啶基甲基、2- (3,5-二氯) 吡啶基甲基、3- (2-氯)吡啶基甲基、2- (3-甲基)吡咯基甲基及2- (3-甲基)噻嗯基甲基等，但優(yōu)選2- (3-甲基)呋喃基甲基、2- (3-氟)呋喃 基甲基、2- (3-甲基)吡啶基甲基、2- (3-氟)吡啶基甲基、2- (3-硝基) 吡啶基、2- (3-氰基)吡啶基甲基及2- (3，5-二氯)吡啶基甲基。
作為上述R中可以具有取代基的芳基中的芳基，可以列舉苯基、萘基、 蒽基、菲基、聯(lián)苯基及聯(lián)萘基。
作為可以具有取代基的芳基中的取代基的，可以列舉甲基、乙基、丙 基、丁基等碳原子數(shù)為1~4的垸基(還有，這些基團包括各種異構體)； 羥基；氯原子、溴原子、碘原子、氟原子等鹵素原子；乙氧基等碳原子數(shù) 為2 4的垸氧基(還有，這些基團包括各種異構體)；二氧化亞甲基等碳 原子數(shù)為1 4的二氧化亞烷基；硝基；氰基及三氟甲基等碳原子數(shù)為1~4 的鹵化垸基。
作為這種可以具有取代基的芳基，可以具體地列舉例如2-甲苯基、3-甲苯基、4-甲苯基、2,3-二甲苯基、2,6-二甲苯基、2，4-二甲苯基、3，4匿二甲 苯基、三甲苯基、2-羥基苯基、3-羥基苯基、4-羥基苯基、2,3-二羥基苯基、 2,4-二羥基苯基、3,4-二羥基苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2，3-二氯苯基、2，4-二氯苯基、3，4-二氯苯基、3，5-二氯苯基、2-溴苯基、3-溴 苯基、4-溴苯基、2-碘苯基、3-碘苯基、4-碘苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、 4-氟苯基、2,3-二氟苯基、2，4-二氟苯基、3，4-二氟苯基、3-溴-5-氯-2-羥基 苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，3-二甲氧基苯基、 2,4-二甲氧基苯基、3,4-二甲氧基苯基、3,5-二甲氧基苯基、3,4-二氧化亞甲基苯基、4-乙氧基苯基、4-丁氧基苯基、4-異丙氧基苯基、1-苯氧基苯基、4-芐氧基苯基、4-三氟甲基苯基、2-硝基苯基、3-硝基苯基、4-硝基苯基、 4-氰基苯基、4-甲氧羰基苯基、1-萘基及2-萘基等，但優(yōu)選苯基、2-甲苯 基、3-甲苯基、4-甲苯基、2，3-二甲苯基、2-羥基苯基、3-羥基苯基、4-羥 基苯基、2,3-二羥基苯基、2，4-二羥基苯基、3，4-二羥基苯基、2-氯苯基、3- 氯苯基、4-氯苯基、2,3-二氯苯基、2，4-二氯苯基、3，4-二氯苯基、3,5-二 氯苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、2-碘苯基、3-碘苯基、4-碘苯基、2- 氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、3，4-二氟苯基、3-溴-5-氯-2-羥基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2,3-二甲氧基苯基、2，4-二甲 氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3,5-二甲氧基苯基、3,4-二氧化亞甲基苯基、4- 乙氧基苯基、4-三氟甲基苯基、4-硝基苯基、4-氰基苯基、1-萘基及2-萘基，更優(yōu)選苯基、2-甲苯基、3-甲苯基、4-甲苯基、2,3-二甲苯基、4-羥 基苯基、3,4-二羥基苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2,3-二氯苯基、 2,4-二氯苯基、3,4-二氯苯基、3，5-二氯苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、4-溴苯 基、4-碘苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、3，4-二氟苯基、2-碘苯基、 3_碘苯基、4-碘苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2,3-二甲氧基苯基、2,4-二甲氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基苯基、 3,4-二氧化亞甲基苯基、4-三氟甲基苯基、4-硝基苯基、l-萘基、2-萘基及3- 吡啶基，特別優(yōu)選苯基、2-甲苯基、3-甲苯基、4-甲苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2,3-二氯苯基、2,4-二氯苯基、3，4-二氯苯基、3,5-二氯 苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、 3,4-二氟苯基、2-碘苯基、3-碘苯基、4-碘苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基 苯基、4-甲氧基苯基、2,3-二甲氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧 基苯基或3,4-二氧化亞甲基苯基。作為上述R中可以具有取代基的雜芳基中的雜芳基，例如可以列舉 2-呋喃基、3-呋喃基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-吡咯基、3-吡咯 基、2-噻嗯基、3-噻嗯基、2』引噪基、3』引哚基、2-咪唑基、4-咪唑基、3-吡唑基、2-嘧啶基、4-嘧啶基及喹啉基。作為可以具有取代基的雜芳基的取代基，可以列舉甲基、乙基、丙基、 丁基等碳原子數(shù)為1~4的垸基(還有，這些基團包括各種異構體)；羥基;氯原子、溴原子、碘原子、氟原子等鹵素原子；乙氧基等碳原子數(shù)為2~4 的烷氧基(還有，這些基團包括各種異構體)；氨基；硝基；氰基及三氟 甲基等碳原子數(shù)為1 4的鹵化烷基。作為這種可以具有取代基的雜芳基，可以具體地列舉例如2-(3-甲基) 呋喃基、2- (4-甲基)呋喃基、2- (3-乙基)呋喃基、2- (4-乙基)呋喃基、 2- (3-氟)呋喃基、2- (3-氯)呋喃基、2- (3-羥基)呋喃基、2- (3-甲氧 基)呋喃基、2- (3-氨基)呋喃基、2- (3-硝基)呋喃基、2- (3-氰基)呋 喃基、2- (3-甲基)吡啶基、2醫(yī)(4-甲基)吡啶基、2- (3-乙基)吡啶基、 2- (4-乙基)吡啶基、2- (3-氟)吡啶基、2- (4-氯)吡啶基、2- (3-羥基) 吡啶基、2- (3-甲氧基)吡啶基、2- (3-氨基)吡啶基、2- (3-硝基)吡啶 基、2- (3-氰基)吡啶基、2- (3,5-二氯)吡啶基、3- (2-氯)吡啶基、2-(3-甲基)吡咯基及2- (3-甲基)噻嗯基等，但優(yōu)選2- (3-甲基)呋喃基、 2- (3-氟)呋喃基、2- (3-甲基)吡啶基、2- (3-氟)吡啶基、2- (3-硝基) 吡啶基、2- (3-氰基)吡啶基及2- (3,5-二氯)吡啶基?；衔?I)中的R'表示可以具有取代基的烷基。上述R1中可以具有取代基的烷基中的烷基是直鏈狀或支化鏈狀的碳 原子數(shù)為1 10的垸基，例如可以列舉甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、 己基、庚基、辛基、壬基、癸基之類的烷基，優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、 異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、正戊基、正己基等直鏈狀或支化鏈狀 的碳原子數(shù)為1 6的烷基，更優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、正丁基、異丁基 等直鏈狀或支化鏈狀的碳原子數(shù)為1~4的烷基。還有，這些基團包括各種 異構體。作為可以具有取代基的烷基中的取代基，例如可以列舉氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等鹵素原子；羥基；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧 基等碳原子數(shù)為1~4的垸氧基；二甲氨基、二乙氨基等被碳原子數(shù)為1~6 的烷基二取代的二垸基氨基；及氰基，但是優(yōu)選氟原子、氯原子、甲氧基、 乙氧基、羥基及氰基，更優(yōu)選氟原子、氯原子、甲氧基及乙氧基。作為這種可以具有取代基的垸基，可以具體地列舉例如氟甲基、2-氟 乙基、2-氯乙基、2,2-二氟乙基、2,2-二氯乙基、2,2,2-三氯乙基、2,2,2-三 氟乙基、2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基、甲氧基甲基、2-羥基乙基、2-氰基乙基、2-溴乙基、2-二甲氨基、2-氯丙基、3-氯丙基等，優(yōu)選2-氯乙基、 2,2,2-三氯乙基、2，2，2-三氟乙基、甲氧基甲基、2-甲氧基乙基及2-乙氧基 乙基。關于本發(fā)明的反應中使用的脂肪酶，優(yōu)選使用可從酵母或細菌中分離 的微生物的脂肪酶，更優(yōu)選源于洋蔥伯克霍爾德菌(假單胞菌)的脂肪酶 (例如，AmanoPS (77乂工yfV厶社制)等)。另外，關于本發(fā)明的 反應中使用的蛋白酶，可以使用例如源于脊椎動物的胰臟、米曲霉 (Aspergillus Olyzae)、蜂蜜曲霉(Aspergillus Melleus)、枯草桿菌(Bacillus subtilis)、嗜熟脂肪芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)等的蛋白酶。還有，脂肪酶或蛋白酶可以直接使用天然形態(tài)或作為固定化酶的市售 制品，可以單獨使用或兩種以上混合使用。另外，也可以將市售制品中的 酶固定劑除去后進行使用。關于上述脂肪酶或蛋白酶，也可以對天然形態(tài)的物質(zhì)或作為固定化酶 的市售制品進行化學處理或物理處理后進行使用。作為上述化學處理或物理處理的方法，可以具體地列舉例如使脂肪酶 或蛋白酶溶解在緩沖液中(必要時也可以存在有機溶劑)，直接或攪拌后 進行冷凍干燥等方法。還有，冷凍干燥是將水溶液及含有水分的物質(zhì)迅速 冷卻到冰點以下的溫度，減壓至該冷凍物的水蒸汽壓以下，通過升華除去 水，從而對物質(zhì)進行干燥的方法(例如，參見非專利文獻3)。還有，通過 該處理，可以提高催化劑活性(反應性及選擇性等)。作為上述緩沖液，例如可以列舉磷酸鈉水溶液、磷酸鉀水溶液等無機 鹽的水溶液；醋酸鈉水溶液、醋酸銨水溶液、檸檬酸鈉水溶液等有機酸鹽 的水溶液，但優(yōu)選使用磷酸鈉水溶液、磷酸鉀水溶液、醋酸銨水溶液。還 有，這些緩沖液可以單獨使用或兩種以上混合使用。上述緩沖液的濃度優(yōu)選為0.01~2摩爾/L，更優(yōu)選為0.05~0.5摩爾/L， 緩沖液的pH值優(yōu)選為4~9，更優(yōu)選為7 8.5。冷凍時使用的緩沖液的量沒有特別的限制，只要是能夠完全溶解脂肪 酶或蛋白酶的濃度即可，但優(yōu)選相對于lg脂肪酶或蛋白酶為 10ml 1000ml，更優(yōu)選為10ml 100ml。上述脂肪酶或蛋白酶的使用量相對于lg化合物(I)優(yōu)選為0.1~1000mg，更優(yōu)選為1 200mg。本發(fā)明的反應是在脂肪酶或蛋白酶的存在下，在有機溶劑中進行。在 本發(fā)明的反應中，脂肪酶或蛋白酶涉及在反應溶液中實質(zhì)上以懸浮態(tài)存在 下進行的反應，但是溶解時也沒有問題。還有，本發(fā)明中的"有機溶劑" 是指水解中使用的反應溶劑為有機溶劑，并且從反應體系中除去脂肪酶或 蛋白酶(也存在含有固定劑的情況)及結晶析出的生成物等后，有機溶劑 中溶解的液體部分表現(xiàn)為不發(fā)生相分離的狀態(tài)(即，水(也可以含有后述 的無機鹽或有機鹽)、基質(zhì)及有機溶劑形成一個相的狀態(tài))。作為本發(fā)明的反應中使用的水，通?？梢允褂秒x子交換水或蒸餾水等 精制水，但是水中也可以含有磷酸鈉、磷酸鉀等無機鹽，或醋酸鈉、醋酸 銨、檸檬酸鈉等有機鹽。關于這些無機鹽或有機鹽的量，優(yōu)選以相對于水 為0.01 10mol/L的量進行使用，更優(yōu)選0.1 lmol/L。還有，也可以預先將 上述無機鹽或有機鹽溶解在水中，配制成緩沖液后用于反應。上述水的使用量是所使用的有機溶劑的溶解度以下的量(因為如果超 過溶解度，則液體部分會產(chǎn)生相分離)，上限隨化合物(I)的種類而變化， 但優(yōu)選相對于化合物(I) 1摩爾為0.5-10摩爾，更優(yōu)選為0.5~5.0摩爾， 進一步優(yōu)選為1.0~3.0摩爾，特別優(yōu)選為1.5~2.5摩爾。還有，雖然取決于 化合物(I)的種類，但水的使用量相對于化合物(I) 1摩爾超過10摩爾 時，例如會導致使光學純度下降的化合物(I)的本身水解、水稍微不溶于 有機溶劑而呈現(xiàn)懸浮狀態(tài)(液體部分產(chǎn)生相分離的狀態(tài))，從而出現(xiàn)了不 能期待進行長時間反應等的狀態(tài)，因此應當將水的使用量調(diào)節(jié)到有機溶劑 的溶解度以下，優(yōu)選10摩爾以下。作為上述有機溶劑，例如可以列舉正戊烷、正己烷、正庚烷、正辛垸、 環(huán)戊垸、環(huán)己烷及環(huán)戊烷等脂肪族烴類；苯、甲苯及二甲苯等芳香族烴類; 二乙基醚、叔丁基甲基醚、二異丙基醚、環(huán)戊基甲基醚、四氫呋喃及1，4-二噁烷等醚類；丙酮及甲乙酮等酮類，但優(yōu)選正己烷、正庚垸、環(huán)戊垸、 環(huán)己烷、甲苯、二異丙基醚、叔丁基甲基醚及環(huán)戊基甲基醚，特別優(yōu)選環(huán) 己垸、甲苯及叔丁基甲基醚。還有，這些有機溶劑可以單獨使用或兩種以 上混合使用。上述有機溶劑的使用量相對于lg化合物(I)優(yōu)選為2 200mL，更優(yōu)選為5~80mL。上述水和有機溶劑的比率沒有特別限制，所使用的水量是 相對于有機溶劑的溶解度以下的量(即，低于在有機溶劑中達到飽和的量) 即可。本發(fā)明的反應最好在有表面活性劑的存在下進行。作為使用的表面活 性劑，例如可以使用聚乙二醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯月桂基醚、聚 乙烯鯨蠟基醚、聚氧乙烯辛基苯基醚等非離子性表面活性劑；3-[ (3-氯酰 胺丙基)-二甲基銨基]-2-羥基-1-丙磺酸鹽、3-[ (3-氯酰胺丙基)-二甲基銨 基]-l-丙磺酸鹽等兩性表面活性劑；二辛基磺基琥珀酸酯鈉鹽、十二垸基 磺酸鈉、三(羥甲基)氨基甲垸十二烷基硫酸鹽等陰離子表面活性劑；鯨 蠟基三甲基溴化銨及鯨蠟基二甲基乙基溴化銨等陽離子表面活性劑，但優(yōu) 選非離子表面活性劑，更優(yōu)選聚乙二醇、聚乙烯鯨蠟基醚、聚氧乙烯辛基 苯基醚，特別優(yōu)選聚氧乙烯辛基苯基醚。還有，這些表面活性劑可以單獨 使用或兩種以上混合使用。上述表面活性劑的使用量相對于lg化合物(0優(yōu)選為10 1000mg， 更優(yōu)選為50 200mg。本發(fā)明的反應可以按以下方法進行，例如將化合物(1)、脂肪酶或蛋 白酶、水(如果需要，可以含有無機鹽或有機鹽)及有機溶劑進行混合， 一邊攪拌一邊進行反應等。此時的反應溫度優(yōu)選為0 8(TC，更優(yōu)選為10 50 。C，特別優(yōu)選30 45t:，反應壓力沒有特別限制。還有，反應中脂肪酶或 蛋白酶實質(zhì)上為懸浮液狀態(tài)，另外，雖然也取決于化合物(I)的種類，反 應進行的同時化合物(I)可能形成白色固體而沉淀，但是這些懸浮及沉淀 對反應沒有什么影響。對于由本發(fā)明的反應得到的化合物(II)及化合物(III)，例如反應完 成后化合物(II)析出時，可以在反應液中添加適當?shù)挠袡C溶劑(例如， 乙腈、丙酮等)并進行過濾，得到化合物(11)，通過濃縮有機層來得到化 合物(m)。另外，當反應完成后，化合物(II)不析出時，例如調(diào)節(jié)pH值，用水萃取出化合物(n)，再調(diào)節(jié)pH值并用有機溶劑進行萃取，將得到的有機層濃縮，得到化合物(II),通過對用水萃取化合物(II)時分離的有機層進行濃縮，可以得到化合物(ni)。還有，對于得到的化合物(n) 及化合物(m)，可以通過晶析、重結晶、蒸餾、柱色譜等常規(guī)方法進行進一步精制。在本發(fā)明中，從水和通過反應生成的上述通式(II)表示的光學活性(S或R) -a-氨基酸和上述通式(III)表示的光學活性(R或S) -cc-氨基 酸酯的混合物中分別分離出各物質(zhì)后，通過使得到的光學活性(R或S)-a-氨基酸酯和酸反應，可以制得光學活性(R或S) -a-氨基酸酯的酸鹽。作為可以用于上述反應的酸，例如可以列舉鹽酸、硫酸、醋酸、對甲 苯磺酸、草酸、甲酸及碳酸，但優(yōu)選使用鹽酸。上述酸的使用量相對于1摩爾化合物(III)優(yōu)選為0.5 2.0摩爾，更 優(yōu)選為0.9 1.5摩爾。另外，上述反應優(yōu)選在有機溶劑中進行。作為這種有機溶劑，例如可 以列舉選自醚類、酮類、酯類、脂肪族烴類及芳香族烴類的至少一種有機 溶劑。上述有機溶劑的使用量相對于lg化合物(III)優(yōu)選為1 50mL，更優(yōu) 選為3 20mL。上述反應可以按以下方法進行，例如將化合物(III)、酸及有機溶劑 進行混合， 一邊攪拌一邊進行反應。此時的反應溫度優(yōu)選為-20 8(TC，更 優(yōu)選為-10 50'C，特別優(yōu)選-5 4(TC，反應壓力沒有特別限制。對于通過本發(fā)明的反應得到的光學活性(R或S) -oc-氨基酸酯的酸鹽， 可以通過晶析、重結晶、蒸餾、柱色譜等常規(guī)方法進行進一步精制。實施例以下，列舉實施例對本發(fā)明進行具體說明，但本發(fā)明的范圍并不局限 于這些實施例。參考例1 (2-氨基-3-苯基丙酸乙酯(外消旋體混合物)的合成)在乙醇10.0mL (171mmo1)中，添加2-氨基-3-苯基丙酸(外消旋體 混合物)2.00g (12.1mmo1)及濃硫酸1.42g (14.5mmo1)， 一邊攪拌一邊 在60。C下反應4小時。反應完成后，對得到的反應液進行減壓濃縮，然后 添加6mol/L的氫氧化鈉水溶液，將反應液的pH值調(diào)節(jié)到8.5。接著添加 叔丁基甲基醚10mL及水4mL進行萃取，用無水硫酸鎂干燥有機層。過濾 后對濾液進行減壓濃縮，得到作為無色液體的2-氨基-3-苯基丙酸乙酯(外消旋體混合物)2.34g (以2-氨基-3-苯基丙酸(外消旋體混合物)為基準 的分離收率89.0%)。還有，2-氨基-3-苯基丙酸乙酯(外消旋體混合物)的物性值如下。 H畫NMR (S (ppm)， CDC13): 1.22 (t， 3H， J=7.1Hz)、 2.85 (dd， 1H, J=7.8、 13.5Hz)、 3,06 (dd， 1H， J=5.4、 13,5Hz)、 3.69 (dd， 1H， J=5.4、 7.8Hz)、 4.14 (q， 2H， J=7.1Hz)、 7.17-7.30 (m， 5H) 13C-NMR(S(ppm)， CDC13): 14.2， 41.2， 55.9， 60.8， 126.7， 128.5， 129.3， 137.4， 175.0MS (CI， i-C4H10) m/z: 194 (MH+)實施例1 ((S) -2-氨基-3-苯基丙酸及(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯的合成) 在飽和了水的叔丁基甲基醚l.OOmL中，添加2-氨基-3-苯基丙酸乙酯 (外消旋體混合物)lOOmg (0.517mmol)、源于洋蔥伯克霍爾德菌(假單 胞菌)的脂肪酶(AmanoLipasePS(商品名)，K !i 、_y于社制)20.0mg， 一邊攪拌一邊在3(TC下進行反應。156小時后，在反應混合物中添加丙酮 0.5mL進行過濾，得到(S) -2-氨基-3-苯基丙酸36.111^ (以2-氨基-3-苯基 丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收率42.2%)和脂肪酶的混 合物。用常規(guī)方法將(S) -2-氨基-3-苯基丙酸衍生為(S) -2- (2-呋喃甲酰 氨基)-3-苯基丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液相色譜測定光學純 度時，結果為96.5。/。ee。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯衍生為(R) -2- (2-呋喃 甲酰氨基)-3-苯基丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液相色譜測定光 學純度時，結果為89.5Mee。還有，本反應中的E值為170。高速液相色譜的分析條件光學活性2- (2-呋喃甲酰氨基)-3-苯基丙酸乙酯柱Chiralcel OJ-H (0.46cmOx25cm，夕、、一 ir少化學工業(yè)制)溶劑己烷/異丙醇(=8/2 (容量比))流速0.5mL/min溫度30°C波長220nm另外，(S) -2-氨基-3-苯基丙酸的物性值如下。 'H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 3.12 (dd， 1H， J=8.0、 14.5Hz)、 3.29 (dd， 1H， J=5.2、 14.5Hz)、 3.99 (dd， 1H， J=5.2、 8.0Hz)、 7.32-7.45 (m， 5H) 13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 39.2， 58.9， 130.5， 132.0， 132.2， 138.0， 176.8MS (CI， i-C4H10) m/z: 166 (MK) 比旋光度..[a]25D—26.5° (c0.5， H20)還有，將得到的光學活性2-氨基-3-苯基丙酸的.比旋光度和和光純藥工 業(yè)(株)目錄中記載的(S) -2-氨基-3-苯基丙酸的比旋光度的符號([a]25D 一33.4 一35.0。 (c2， H20))進行比較，確定絕對構型。(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯的物性值與參考例1中所示的值相同。高速液相色譜的分析條件.-光學活性2- (2-呋喃甲酰氨基)-3-苯基丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0,46cmOx25cm，夕、Vir/^化學工業(yè)制) :己烷/異丙醇(=8/2 (容量比)) :0.5mL/min :3(TC :220nm，(S) -2-氨基-3-苯基丙酸的物性值與實施例1中所示的值相同。 (R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯的物性值與參考例1中所示的值相同。 參考例2 (2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的合成)在乙醇lO.OmL (171mmo1)中，添加2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸(外 消旋體混合物)2.00g (10.9mmo1)及濃硫酸1.29g (13.1mmo1)， 一邊攪 拌一邊在6(TC下反應4小時。反應完成后，對得到的反應液進行減壓濃縮， 然后添加6mol/L的氫氧化鈉水溶液，將反應液的pH值調(diào)節(jié)到8.5。接著 添加醋酸乙酯10mL及水4mL進行萃取，用無水硫酸鎂干燥有機層。過濾 后對濾液進行減壓濃縮，得到作為無色液體的2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸 乙酯(外消旋體混合物)1.97g (以2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸(外消旋體 混合物)為基準的分離收率85.1%)。劑速度長外溶流溫波另還有，2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的物性值 如下。'H-NMR (5 (ppm)， CDC13): 1.25 (t， 3H， J=7.1Hz)、 2.88 (dd， 1H， J=7.8、 13.6Hz)、 3,07 (dd， 1H， J=5.5、 13.6Hz)、 3.71 (dd， 1H， J=5.5、 7.8Hz)、 4.17 (q， 2H， J=7.1Hz)、 6.91-7.00 (m， 3H)、 7.26 (m， 1H) 13C-NMR(5(ppm)， CDC13): 14.2， 40.8， 55.7， 61.1， 113.7， 113.8， 116.1， 116.3， 125.01， 125.02， 129.9， 130.0， 139.9， 140.0， 161.9， 163.9， 174.7 MS (CI， i-C4H10) m/z: 212 (MH+)實施例2 ((S) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (3-氟苯基) 丙酸乙酯的合成)在飽和了水的叔丁基甲基醚l.OmL中，添加2-氨基-3- (3-氟苯基)丙 酸乙酯(外消旋體混合物)100mg (0.473mmo1)、源于洋蔥伯克霍爾德菌 (假單胞菌)的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7"々Ki; 、乂于社制) 30.0mg，在30。C下迸行反應。48小時后，在反應混合物中添加丙酮0.5mL 進行過濾，得到(S) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸3Umg (以2-氨基-3-(3-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收率40.5%) 和脂肪酶的混合物。用常規(guī)方法將(S) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸衍生為(S) -3- (3-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液 相色譜測定光學純度時，結果為98.0%ee。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸乙酯衍生為(R) -3-(3-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高 速液相色譜測定光學純度時，結果為82.8%ee。 還有，本反應中的E值為258。高速液相色譜的分析條件光學活性3- (3-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cmOx25cm，夕'^ ir少化學工業(yè)制) 溶劑己烷/異丙醇(=9/1 (容量比)) 流速0.5mL/min 溫度30°C波長220nm另外，(S) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸的物性值如下。 'H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 3.02 (dd， 1H， J=8.6、 14.6Hz)、 3.31 (dd， 1H， J=4.5、 14.6Hz)、 3.77 (dd， 1H， J=4.5、 8.6Hz)、 7,00 (m， 1H)、 7.08 (m， 1H)、 7.12 (m， 1H)、 7.34 (m， 1H) 13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 37.9， 57.3， 115.1， 115.2， 117.1， 117,3， 126.32， 126.34， 131.6， 131.7， 140.0， 140.1， 163.5， 165.5， 173.4 MS (CI， i-C4H10) m/z: 184 (MH+) 元素分析Cakd: C， 59.01%; H， 5,50%; N， 7.65% Found: C， 57.86%; H， 5.46%; N， 7.90% (R) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸乙酯的物性值與參考例2中所示的 值相同。參考例3 (2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的合成)在乙醇10.0mL (171mmo1)中，添加2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸(外 消旋體混合物)2.00g (10.9mmo1)及濃硫酸1.29g (13.1mmo1)， 一邊攪 拌一邊在6(TC下反應4小時。反應完成后，對得到的反應液進行減壓濃縮， 然后添加6mol/L的氫氧化鈉水溶液，將反應液的pH值調(diào)節(jié)到8.5。接著 添加叔丁基甲基醚10mL及水4mL進行萃取，用無水硫酸鎂干燥有機層。 過濾后對濾液進行減壓濃縮，得到作為無色液體的2-氨基-3- (4-氟苯基) 丙酸乙酯(外消旋體混合物)1.95g (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸(外消 旋體混合物)為基準的分離收率84.6%)。還有，2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的物性值 如下。'H-薩R (5 (ppm)， CDC13): 1.23 (t， 3H， J=7.1Hz)、 2.96 (dd， 1H，J=7.6、 13，7Hz)、 3.04 (dd， 1H， J=5.5、 13.7Hz)、 3.68 (dd， 1H， J=5.5、7.6Hz)、 4.16 (q， 2H， J=7.1Hz)、 6.99 (m， 2H)、 7.17 (m， 2H)13C-NMR(5(ppm)， CDC13): 14.2， 40.2， 55.9， 61.0， 115.2， 115.4， 130.75，130.81， 132.97， 133.00, 160.9， 162.9， 174.9MS (CI， i-C4H10) m/z: 212 (MH+)元素分析Calcd: C， 62.55%; H， 6.68%; N， 6.63%Found: C， 61.19%; H， 6.54%; N， 6.51% 實施例3 ((S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基) 丙酸乙酯的合成)在飽和了水的叔丁基甲基醚1.0mL中，添加2-氨基-3- (4-氟苯基)丙 酸乙酯(外消旋體混合物)100mg (0.473mmo1)、源于洋蔥伯克霍爾德菌 (假單胞菌)的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7AKy :y于社制) 30.0mg， 一邊攪拌一邊在3(TC下進行反應。56小時后，在反應混合物中 添加丙酮0.5mL進行過濾，得到(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸36.7mg (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收 率42.3%)和脂肪酶的混合物。用常規(guī)方法將(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸衍生為(S) -3- (4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液 相色譜測定光學純度時，結果為99.1%ee。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯衍生為(R) -3-(4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高 速液相色譜測定光學純度時，結果為91.2n/。ee。 還有，本反應中的E值為698。高速液相色譜的分析條件光學活性3- (4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cm<Dx25cm，夕、Vir少化學工業(yè)制) 溶劑己烷/異丙醇(=8/2 (容量比)) 流速0.5mL/min溫度30°C波長220nm另外，(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸的物性值如下。 'H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 3.00 (dd， 1H， J=8.5、 14.7Hz)、 3.27 (dd， 1H， J=4.5、 14.7Hz)、 3.74 (dd， 1H， J=4.5、 8.5Hz)、 7.05 (m， 2H)、 7.31 (m， 2H)13C-NMR (S (ppm)， CD3OD): 37.5， 57.6， 116.5， 116,6， 132.2， 132.3， 133.2， 133.3， 162.9， 164.6， 173.6MS (CI， i-C4H10) m/z: 184 (MH+) 元素分析Calcd: C， 59.01%; H， 5.50%; N， 7,65% Found: C， 58.73%; H， 5.49%; N， 7.68% (R) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯的物性值與參考例3中所示的 值相同。參考例4 (2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的合成)在乙醇5.00mL (85.7mmo1)中，添加2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸(外 消旋體混合物)l.OOg (4.10mmo1)及濃硫酸482mg (4.92mmo1)， 一邊攪 拌一邊在6(TC下反應4小時。反應完成后，對得到的反應液進行減壓濃縮， 然后添加6mol/L的氫氧化鈉水溶液，將反應液的pH值調(diào)節(jié)到8.5。接著 添加叔丁基甲基醚10mL及水4mL進行萃取，用無水硫酸鎂干燥有機層。 過濾后對濾液進行減壓濃縮，得到作為無色液體的2-氨基-3- (4-溴苯基) 丙酸乙酯(外消旋體混合物)916mg (以2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸(外 消旋體混合物)為基準的分離收率82.5%)。還有，2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的物性值 如下。'H-雨R (5 (ppm)， CDC13): 1.25 (t, 3H， J=7.1Hz)、 2.83 (dd, 1H， J=7.7、 13.7Hz)、 3.03 (dd， 1H， J=5.5、 13.7Hz)、 3.68 (dd， 1H， J=5.5、 7.7Hz)、 7.08 (m， 2H)、 7.42 (m， 2H)13C-NMR(S(ppm)， CDC13): 14.2， 40.4， 55.7， 6U， 120.8， 131.1， 131.7， 136.3， 174.7MS (CI， i-C4H10) m/z: 272 (Mf) 元素分析Calcd: C， 48.55%; H， 5.19%; N， 5.15% Found: C， 47.71%; H， 5.21%; N， 5.06% 實施例4 ((S) -2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (4-溴苯基) 丙酸乙酯的合成)在飽和了水的叔丁基甲基醚l.OmL中，添加2-氨基-3- (4-溴苯基)丙 酸乙酯(外消旋體混合物)200mg (0.367mmo1)、源于洋蔥伯克霍爾德菌(假單胞菌)脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，K !i 、7于社制) 30.0mg， 一邊攪拌一邊在3(TC下進行反應。56小時后，在反應混合物中200680030867.5說明書第24/34頁添加丙酮0.5mL進行過濾，得到(S) -2-氨基-3-苯基丙酸36.2mg (以2-氨基-3-(4-溴苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收率:41.8%) 和脂肪酶的混合物。用常規(guī)方法將(S) -2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸衍生為(S) -3- (4-溴苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液 相色譜測定光學純度時，結果為98.5%ee。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸乙酯衍生為(R) -3-(4-溴苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高 速液相色譜測定光學純度時，結果為87.7%ee。還有，本反應中的E值為388。 高速液相色譜的分析條件光學活性3- (4-溴苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯柱Chiralcel OJ-H (0.46cmOx25cm，夕、V i /W七學工業(yè)制)溶劑己烷/異丙醇(=8/2 (容量比)) 流速0.5mL/min 溫度30°C 波長220nm另外，(S) -2-氮基-3- (4-溴苯基)丙酸的物性值如下。 H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 2.99 (dd， 1H， J=8,4、 14.6Hz)、 3.25 (dd， 1H， J=4.5、 14.6Hz)、 3.74 (dd， 1H， J=4.5、 8.4Hz)、 7.22 (m， 2H)、 7.48 (m， 2H)13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 37,7， 57.3， 122.2， 132.4， 133.0， 136.6， 173.5MS (CI， i-C4H10) m/z: 244 (MH+) 元素分析Calcd: C， 44.29%; H， 4.13%; N， 5.74% Found: C， 43.95%; H， 4.06%; N， 5.66% (R) -2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸乙酯的物性值與參考例4中所示的 值相同。參考例5 (2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的合成) 在乙醇9.0mL (154mmo1)中，添加2-氨基-3-(萘基)丙酸(外消旋體混合物)1.80g (8.36mmol)及濃硫酸1.23g (12.5mmol)，一邊攪拌一 邊在6(TC下反應6小時。反應完成后，對得到的反應液進行減壓濃縮，然 后添加6mol/L的氫氧化鈉水溶液，將反應液的pH值調(diào)節(jié)到8.5。接著添 加叔丁基甲基醚18mL及水4mL進行萃取，用無水硫酸鎂干燥有機層。過 濾后對濾液進行減壓濃縮，得到作為淡黃色液體的2-氨基-3- (2-萘基)丙 酸乙酯(外消旋體混合物)1.73g (以2-氨基-3- (2-萘基)丙酸(外消旋體 混合物)為基準的分離收率85.0%)。還有，2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的物性值如下。'H-麗R (S (ppm)， CDC13): 1.20 (t， 3H， J=7.1Hz)、 1.58 (s， 2H)、 3.00 (dd， 1H，風9、 13.5Hz)、 3.23 (dd， 1H， J=5,3、 13.5Hz)、 3.78 (dd， 1H， J=5.3、 7.9Hz)、 4.15 (q， 2H， J=7.1Hz)、 7.31 (dd， 1H， J=1.7、 8.4Hz)、 7.39-7.45 (m， 2H)、 7.64 (m， 1H)、 7.76-7.79 (m， 3H) 13C-NMR(5(ppm)， CDC13): 14.2， 40.2， 55.9， 61.0， 115.2， 115.4， 130.75， 130.81， 132.97， 133.00， 160.9， 162.9， 174.9 MS (EI) m/z: 243 (M+) MS (CI， i-C4H10) m/z: 244 (函+) 元素分析Calcd: C， 74.05%; H， 7.04%; N， 5.76% Found: C， 72.89%; H， 6.72%; N， 5.58% 實施例5 ((S) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (2-萘基)丙 酸乙酯的合成)在飽和了水的叔丁基甲基醚2.0mL中，添加2-氨基-3- (2-萘基)丙酸 乙酯(外消旋體混合物)200mg (0.822mmo1)、源于洋蔥伯克霍爾德菌(假 單胞菌)脂肪酶(Amano Lipase PS(商品名)，7》H， 、7于社制)10.0mg， 一邊攪拌一邊在30'C下進行反應。168小時后，在反應混合物中添加叔丁 基甲基醚2.0mL進行清洗，得到(S) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸86.1mg (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收 率43.0%)和脂肪酶的混合物。另外，過濾后對濾液進行減壓濃縮，得到作為淡黃色液體的(R) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯110 mg (以2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯(外29消旋體混合物)為基準的分離收率55.0%)。用常規(guī)方法將(S) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸衍生為(S) -2- (2-呋喃 甲酰氨基)-3- (2-萘基)-丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液相色譜 測定光學純度時，結果為99.3。/。ee。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯衍生為(R) -2- (2-呋喃甲酰氨基)-2- (2-萘基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液相 色譜測定光學純度時，結果為79.3%ee。還有，本反應中的E值為711。 高速液相色譜的分析條件光學活性3- (2-呋喃甲酰氨基)-3- (2-萘基)丙酸乙酯柱ChiralcelOJ-H (0.46cmOx25cm，夕、Vir^化學工業(yè)制)溶劑己烷/異丙醇(=8/2 (容量比))流速0,5mL/min溫度30°C波長220nm另外，(S) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸的物性值如下。 'H-麗R (5 (ppm)， D20): 3.41 (dd， 1H， J=7.7、 14.6Hz)、 3.53 (dd， 1H， J=5.7、 14.6Hz)、 4.50 (dd， 1H， J=5.7、 7.7Hz)、 7,46 (d， 1H，風4Hz) 7.57-7.61 (m， 2H)、 7.84 (s， 1H)13C-NMR (5 (ppm)， D20): 38.6， 56.8， 129.4， 129.67， 130.0， 130.6，131.4， 131.8， 134.4， 135.4， 136.1， 174.0MS (EI) m/z: 215 (M+)MS (CI， i-C4H10) m/z: 216 (MH+)(R) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯的物性值與參考例5中所示的值相同。參考例6 (2-氨基-3- (3-吲哚基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的合成)在乙醇5.0mL (85.6mmo1)中，添加2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸(外 消旋體混合物)l.OOg (4.90mmo1)及濃硫酸0.96g (9,79mmo1)， 一邊攪 拌一邊在6(TC下反應4小時。反應完成后，對得到的反應液進行減壓濃縮， 然后添加6mol/L的氫氧化鈉水溶液，將反應液的pH值調(diào)節(jié)到8.5。接著添加叔丁基甲基醚10mL及水4mL進行萃取，用無水硫酸鎂干燥有機層。 過濾后對濾液進行減壓濃縮，得到作為無色液體的2-氨基-3- (3-吲哚基) 丙酸乙酯(外消旋體混合物)0.97g (以2-氨基-3- G』引哚基)丙酸(外消 旋體混合物)為基準的分離收率85.0%)。還有，2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的物性值 如下。'H-麗R (3 (ppm)， D20): 1.21 (t， 3H， J=7.0Hz)、 1.63 (s， 2H)、 3.01 (dd， 1H， J=7.9、 14.4Hz)、 3.25 (dd， 1H， J=4.8、 14.4Hz)、 3.80 (dd，1H， J=4.8、 7.9Hz)、 4.14 (q， 2H， J=7.0Hz)、 6.90 (s， 1H)、 7,06-7.26 (m， 3H)、 7.59 (d， 1H， J=7.9Hz)、 9.07 (s， 1H)13C-NMR (S (ppm)， CDC13): 14.1， 49.4， 55.0， 61.0， 110.6， 111.4， 118.6，119.2， 121.8， 123.3， 127.5， 136.4， 175.4MS (EI) m/z: 232 (M+)MS (CI， i-C4H10) m/z: 233 (MH+)實施例6 ((S) -2-氨基-3- (3-吲哚基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (3-卩引哚基) 丙酸乙酯的合成)在飽和了水的叔丁基甲基醚4.0mL中，添加2-氨基-3- (3-吲哚基)丙 酸乙酯(外消旋體混合物)200mg (0,822mmo1)、源于洋蔥伯克霍爾德菌 (假單胞菌)的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7少K!i 、;/于社制) 10.0mg， 一邊攪拌一邊在3(TC下進行反應。108小時后，過濾反應混合物， 用叔丁基甲基醚2.0mL進行洗滌，得到(S) -2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸 78.3mg (以2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的 分離收率44.5%)和脂肪酶的混合物。另外，過濾后對濾液進行減壓濃縮，得到作為無色液體的(R) -2-氨 基-3- (3』引哚基)丙酸乙酯106mg (以2-氨基-3- (3-吲哚基)丙酸乙酯(外 消旋體混合物)為基準的分離收率53.0%)。用常規(guī)方法將(S) -2-氨基-3- (3-吲哚基)丙酸衍生為(S) -2- (2-氟苯基)-3- (3』引哚基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液相色譜 測定光學純度時，結果為98.7%"。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸乙酯衍生為(R) -2-(2-氟苯基)-3- (3』引哚基)丙酸乙酯，使用釆用光學活性柱的高速液相色譜測定光學純度時，結果為81.8%ee。 還有，本反應中的E值為392。高速液相色譜的分析條件光學活性2- (2-呋喃甲酰氨基)-3- (3』引哚基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cmd)x25cm，夕、V ir/P化學工業(yè)制)溶劑己烷/異丙醇(=8/2 (容量比))流速1.0mL/min 溫度30°C 波長220nm另外，(S) -2-氨基-3- (3-剛哚基)丙酸的物性值如下。 'H-薩R (S (ppm), D20): 3.43 (dd， 1H, J=7.0、 15.4Hz)、 3.50 (dd， 1H， J=5.5、 15.4Hz)、 4.40 (dd， 1H， J=5.5、 7.0Hz)、 7.21-7.69 (m， 5H) 13C-NMR (5 (ppm)， D20): 29.2， 56.8， 109.7， 115.6， 121.8， 123.1， 125,8， 129.0， 130.1， 139.9， 175.1 MS (EI) m/z: 204 (M+) MS (CI， i-C4H10) m/z: 205 (MH+)(R) -2-氨基-3- G』引哚基)丙酸乙酯的物性值與參考例6中所示的 值相同。實施例7 ((S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基) 丙酸乙酯的合成)在飽和了水的叔丁基甲基醚2.0mL中，添加2-氨基-3- (4-氟苯基)丙 酸乙酯(外消旋體混合物)200mg (0.947mmo1)、 a-糜蛋白酶l.Omg， 一 邊攪拌一邊在3(TC下進行反應。84小時后，過濾反應混合物，得到(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸70.8mg (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯 (外消旋體混合物)為基準的分離收率40.8%)。用常規(guī)方法將(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸衍生為(S) -3- (4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液 相色譜測定光學純度時，結果為98.1%"。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯衍生為(R) -3-(4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液相色譜測定光學純度時，結果為83.3%ee。 還有，本反應中的E值為271。高速液相色譜的分析條件光學活性3- (4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cmOx25cm，夕、V "fe少化學工業(yè)制) 溶劑己垸/異丙醇(=9/1 (容量比)) 流速0.5mL/min 溫度30°C波長220nm另外，(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸的物性值與實施例3中所示值 相同。(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯的物性值與參考例3中所示的 值相同。參考例7 (2-氨基-4-甲基戊酸乙酯(外消旋體混合物)的合成)在乙醇40mL (69mmo1)中，添加2-氨基-4-甲基戊酸(外消旋體混合 物)4.00g (8.36mmo1)及濃硫酸4.49g (61.0mmo1)， 一邊攪拌一邊在60 x:下反應6小時。反應完成后，對得到的反應液進行減壓濃縮，然后添加 6mol/L的氫氧化鈉水溶液，將反應液的pH值調(diào)節(jié)到8.5。接著添加二氯 甲烷40mL及水10mL進行萃取，用無水硫酸鎂干燥有機層。過濾后對濾 液進行減壓濃縮，得到作為無色液體的2-氨基-4-甲基戊酸乙酯(外消旋體 混合物)3.79g (以2-氨基-4-甲基戊酸(外消旋體混合物)為基準的分離 收率78.0%)。還有，2-氨基-4-甲基戊酸乙酯(外消旋體混合物)的物性值如下。 'H-NMR(S (ppm)， CDC13): 0.92-0.95 (m， 6H)、 1.28 (t， 3H， J=7.1Hz)、 1.39-1.45 (m， 1H)、 1.50 (s， 2H)、 1.53-1.59 (m， 1H)、 1.74-1.81 (m， 1H)、 3.45 (dd， 1H, J=5.6、 8.7Hz)、 4.17 (q、 2H、 J二7.1HZ) 13C-NMR (5 (ppm)， CDC13): 14.2， 21,9， 23.0， 24.8, 44.2， 52.9， 60.7, 176.7MS (CI， i-C4H10) m/z: 160 (MH+)實施例8 ((S) -2-氨基-4-甲基戊酸及(R) -2-氨基-4-甲基戊酸乙酯的合成) 在飽和了水的叔丁基甲基醚2.0mL中，添加2-氨基-4-甲基戊酸乙酯 (外消旋體混合物)畫mg (0.63mmo1)、 a-糜蛋白酶l.Omg， 一邊攪拌一邊在3(TC下進行反應。64小時后，過濾反應混合物，用叔丁基甲基醚2.0mL進行洗滌，得到(S) -2-氨基-4-甲基戊酸37.1mg (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收率45.0°/。)。另外，過濾后對濾液進行減壓濃縮，得到作為無色液體的(R) -2-氨基-4-甲基戊酸乙酯50mg (以2-氨基-4-甲基戊酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收率50.0%)。用常規(guī)方法將(S) -2-氨基-4-甲基戊酸衍生為(S) -2-苯甲酰氨基-4-甲基戊酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液相色譜測定光學純度時，結果為98.2%ee。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-4-甲基戊酸乙酯衍生為(R) -2-苯甲酰氨 基-4-甲基戊酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液相色譜測定光學純度 時，結果為88.8。/。ee。還有，本反應中的E值為323。 高速液相色譜的分析條件光學活性2-苯甲酰氨基-4-甲基戊酸乙酯柱Chiralcel OD-H (0.46cmOx25cm，夕、V七/W七學工業(yè)制)溶劑己垸/異丙醇(=9/1 (容量比))流速0.5mL/min溫度30°C 波長220nm另外，(S) -2-氨基-4-甲基戊酸的物性值如下。 'H-NMR (5 (ppm)， D20): 0.96-1.01 (m， 6H)、 1.74-1.90 (m， 3H)、 4.11 (m， 1H)13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 23.9， 24.5， 26.8， 41.6， 54.3， 175,2 MS (CI， i-C4H10) m/z: 132 (MH4) 元素分析Calcd: C， 54.94%; H， 9,99%; N， 10.68% Found: C， 54.42%; H， 9.83%; N， 10.73%(R) -2-氮基-4-甲基戊酸乙酯的物性值與參考例7中所示的值相同。參考例8 (2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的合 成)在乙醇6.0mL (103mmo1)中，添加2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸 (外消旋體混合物)600mg (3.07mmo1)及濃硫酸603mg (6.15mmo1)， 一邊攪拌一邊在6(TC下反應4小時。反應完成后，對得到的反應液進行減 壓濃縮，然后添加6mol/L的氫氧化鈉水溶液，將反應液的pH值調(diào)節(jié)到 8.5。接著添加叔丁基甲基醚6mL及水2mL進行萃取，用無水硫酸鎂干燥 有機層。過濾后對濾液進行減壓濃縮，得到作為無色液體的2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)618mg (以2-氨基-3- (4-甲氧 基苯基)丙酸(外消旋體混合物)為基準的分離收率90.0%)。還有，2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)的物 性值如下。'H-NMR (S (ppm)， CDC13): 1.25 (t, 3H， J=7.1Hz)、 1.58 (s， 2H)、 2.82 (dd， 1H， J=7.8、 13.7Hz)、 3.02 (dd， 1H， J=5.4、 13.7Hz)、 3.66 (dd， 1H， J=5.4、 7.8Hz)、 3.79 (s， 3H)、 1.17 (q， 2H， J=7.1Hz)、 6.82-6.86 (m， 2H)、 7,10-7.12 (m， 2H) 13C-NMR (5 (ppm)， CDC13): 14.2， 40.3， 55.3， 56.1， 60.9， 114.0， 129.3， 130.3， 158.6， 175.1 MS (CI， i-C4H10) m/z: 224 (MPf) 元素分析Calcd: C， 64.55%; H， 7.67%; N， 6.27% Found: C， 64.27%; H， 7.27%; N， 6.17% 實施例9 ((S) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (4-甲 氧基苯基)丙酸乙酯的合成)在飽和了水的叔丁基甲基醚4.0mL中，添加2-氨基-3-(4-甲氧基苯基) 丙酸乙酯(外消旋體混合物)200mg (0.900mmo1)、源于洋蔥伯克霍爾德 菌(假單胞菌)的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7小K U 、7于社 制)10.0mg， 一邊攪拌一邊在30。C下進行反應。96小時后，過濾反應混 合物，用叔丁基甲基醚2.0mL進行洗滌，得到(S) -2-氨基-3- (4-甲氧基 苯基)丙酸90.0mg (以2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收率48.6%)和脂肪酶的混合物。另外，過濾后對濾液進行減壓濃縮，得到作為淡黃色液體的(R) -2-氨基_3_ (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯100mg (以2-氨基-3- (4-甲氧基苯基) 丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收率50.0°/。)。用常規(guī)方法將(S) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸衍生為(S) -2-(2-呋喃甲酰氨基)-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯，使用采用光學活性柱 的高速液相色譜測定光學純度時，結果為99.0%ee。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯衍生為(R) -2- (2-呋喃甲酰氨基)-2- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯，使用采用光學活性 柱的高速液相色譜測定光學純度時，結果為98.8。/。ee。還有，本反應中的E值為1042。高速液相色譜的分析條件光學活性3- (2-呋喃甲酰氨基)-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cmd)x25cm，夕、V i /W七學工業(yè)制) 溶劑己垸/異丙醇(=8/2 (容量比)) 流速0.5mL/min 溫度30°C 波長220nm另外，(S) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸的物性值如下。 'H-固R (S (ppm)， CD3OD): 3.20 (dd， 1H， J=7.4、 14.7Hz)、 3.30 (dd， 1H， J=5.6、 14.7Hz)、 4.36 (dd， 1H， J=5.6、 7.4Hz)、 5.06 (s, 3H)、 7.00-7.02 (m， 2H)、 7.27-7.29 (m， 2H)13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 37,6， 57,0， 58.4， 117.6， 129.2， 133.7， 161.4， 174.1MS (EI) m/z: 195 (M+) MS (CI， i-C4H10) m/z: 196 (MH+) 元素分析Calcd: C， 61.53%; H， 6.71%; N， 7.18% Found: C， 60.40%; H， 6.56%; N， 7,04% (R) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯的物性值與參考例8中所 示的值相同。實施例10 ((R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯鹽酸鹽的合成)在飽和了水的叔丁基甲基醚80mL中，添加2-氨基-3-苯基丙酸乙酉旨(外 消旋體混合物)4.00g (20.7mmo1)、源于洋蔥伯克霍爾德菌(假單胞菌) 的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7V^卜、、iJ y^社制)800mg， 一 邊攪拌一邊在3(TC下進行反應。168小時后，過濾反應混合物，用硫酸鎂 進行干燥，然后進行過濾、減壓濃縮，在殘渣中加入環(huán)己垸12mL。在0 。C下向得到的環(huán)己烷溶液中添加鹽酸乙醇溶液(鹽酸含量為24.3重量％) 1.52g (鹽酸lO.lmmoI)，在相同溫度下攪拌1小時。過濾反應混合物，得 到作為白色結晶的(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯鹽酸鹽1.90g (以2-氨基 -3-苯基丙酸乙酯(外消旋體混合物)為基準的分離收率40.0%)。用常規(guī)方法將(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯鹽酸鹽衍生為(R) -2- (2-呋喃甲酰氨基)-3-苯基丙酸乙酯，使用采用光學活性柱的高速液相色譜測 定光學純度時，結果為97.P/。ee。 高速液相色譜的分析條件光學活性3- (2-呋喃甲酰氨基)-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯柱ChiralcdOJ-H (0,46cmOx25cm，夕、、一 ir/W七學工業(yè)制)溶劑..己烷/異丙醇(=8/2 (容量比))流速0.5mL/min溫度30°C波長220nm另外，(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯鹽酸鹽的物性值如下。 H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 1.27 (t， 3H， J=7.2Hz)、 3.26 (dd， 1H， J=7.3、 14.5Hz)、 3.33 (dd， 1H， J=6.2、 14.5Hz)、 4,30 (q， 4H， J=7.2Hz)、 4.40 (dd， 1H， J=6.2、 7.3Hz)、 7.30-7.47 (m， 5H) "C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 16.0， 38.5， 57.0， 66.4， 130.9， 132,0， 132.2， 136.6， 172.4 MS (CI， i-C4H10) m/z: 194 (Mf) 元素分析Calcd: C， 57.52%; H， 7.02%; N， 6.10% Found: C， 57.29%; H， 6.81%; N， 6.13%工業(yè)實用性本發(fā)明涉及由a-氨基酸酯(外消旋體混合物)同時獲得光學活性(S 或R) -a-氨基酸和作為其對映體酯的光學活性(R或S) -a-氨基酸酯的方法。這些光學活性(X-氨基酸及其酯是可以用作具有生理活性的肽及內(nèi)酰胺類抗生素的原料或合成中間體的化合物。
權利要求
1、一種通式(II)表示的光學活性(S或R)-α-氨基酸及通式(III)表示的光學活性(R或S)-α-氨基酸酯的制造方法，其特征在于，在脂肪酶或蛋白酶的存在下，在有機溶劑中使水和通式(I)表示的作為外消旋體混合物的α-氨基酸酯的對映體中的僅一種進行反應；式中，R表示可以具有取代基的烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基、雜芳烷基、芳基或雜芳基，R1表示可以具有取代基的烷基；式中，R與上述同義，*表示不對稱碳原子；式中，R及R1與上述同義，*表示不對稱碳原子，但是具有與通式(II)的化合物相反的立體絕對構型。
2、 根據(jù)權利要求1所述的制造方法，其中，使用的水量相對于作為外消旋體混合物的a-氨基酸酯1摩爾為0.5~10摩爾。
3、 根據(jù)權利要求1或2所述的制造方法，其中，月旨肪酶是源于Burkholderia cepacia (Pseudomonas cepacia)的月旨肪酶。
4、 根據(jù)權利要求1所述的制造方法，其中， 反應體系內(nèi)存在緩沖液。
5、 根據(jù)權利要求4所述的制造方法，其中，緩沖液是選自磷酸鈉、磷酸鉀、醋酸鈉、醋酸銨及檸檬酸鈉中的至少 一種物質(zhì)的水溶液。
6、 根據(jù)權利要求1~5中任一項所述的制造方法，其中， 脂肪酶或蛋白酶在緩沖液的存在下經(jīng)過冷凍干燥。
7、 根據(jù)權利要求1~6中任一項所述的制造方法，其中， 反應中存在選自非離子表面活性劑、兩性表面活性劑、陰離子表面活性劑及陽離子表面活性劑中的至少一種表面活性劑。
8、 根據(jù)權利要求1 7中任一項所述的制造方法，其中， R是可以具有取代基的芐基。
9、 根據(jù)權利要求1~8中任一項所述的制造方法，其中， R1是可以具有取代基的甲基或乙基。
10、 根據(jù)權利要求9所述的制造方法，其中， R1中的取代基是氯原子或垸氧基。
11、 根據(jù)權利要求1 10中任一項所述的制造方法，其中， 有機溶劑使用選自醚類、酮類、酯類、脂肪族烴類及芳香族烴類中的至少一種。
12、 根據(jù)權利要求1~10中任一項所述的制造方法，其中， 有機溶劑是叔丁基甲基醚。
13、 根據(jù)權利要求1所述的制造方法，其中，將通過權利要求1所述的反應生成的通式(II)表示的光學活性(S 或R) -a-氨基酸和通式(III)表示的光學活性(R或S) -a-氨基酸酯從它 們的混合物中分別分離出來； (n)式中，R與上述同義，*表示不對稱碳原子;o(邁)3式中，R及R'與上述同義，*表示不對稱碳原子，但是具有與通式(II) 的化合物相反的立體絕對構型。
14、 一種光學活性(R或S) -ct-氨基酸酯的酸鹽的制造方法，其特征 在于，將通式(II)<formula>formula see original document page 4</formula>表示的光學活性(S或R) -a-氨基酸和通式(III)<formula>formula see original document page 4</formula>表示 的光學活性(R或S) -a-氨基酸酯從它們的混合物中分別分離出來，然后 使得到的光學活性(R或S) -a-氨基酸酯與酸進行反應；式中，R表示可以具有取代基的垸基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基、雜 芳烷基、芳基或雜芳基，*表示不對稱碳原子；式中，R與上述同義，W表示可以具有取代基的烷基，*表示不對稱碳原 子，但是具有與通式(II)的化合物相反的立體絕對構型。
15、 根據(jù)權利要求14所述的制造方法，其中，酸為選自鹽酸、硫酸、醋酸、對甲苯磺酸、草酸、甲酸及碳酸中的至 少一種。
16、 根據(jù)權利要求15所述的制造方法，其中， 酸為鹽酸。
17、 根據(jù)權利要求14所述的制造方法，其中， 反應在有機溶劑中進行。
18、 根據(jù)權利要求17所述的制造方法，其中，有機溶劑為選自醚類、酮類、酯類、脂肪族烴類及芳香族烴類中的至少一種。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(II)表示的光學活性(S或R)-α-氨基酸及通式(III)表示的光學活性(R或S)-α-氨基酸酯的制造方法，其特征在于，在脂肪酶或蛋白酶的存在下，在有機溶劑中使水和通式(I)表示的作為外消旋體混合物的α-氨基酸酯的對映體中的僅一種進行反應；式(Ⅰ)中，R表示可以具有取代基的烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基、雜芳烷基、芳基或雜芳基，R¹表示可以具有取代基的烷基；式(Ⅱ)中，R與上述同義，*表示不對稱碳原子；式(Ⅲ)中，R及R¹與上述同義，*表示不對稱碳原子，但是具有與通式(II)的化合物相反的立體絕對構型。
文檔編號C12P13/00GK101248184SQ20068003086
公開日2008年8月20日 申請日期2006年8月25日 優(yōu)先權日2005年8月25日
發(fā)明者古根川唯泰, 宮田博之, 山本康仁 申請人:宇部興產(chǎn)株式會社