專利名稱：苯胺類煉油廢水深度處理菌劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種苯胺類煉油廢水深度處理菌劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
煉油廢水屬高濃度難降解有機(jī)廢水，對(duì)微生物毒性較大，可生化性差，且 廢水中含油成分復(fù)雜，含鹽量大，酸堿度變化大，因此處理難度極大。其中所含 的苯胺及苯胺類污染物深度處理較為困難，無法達(dá)到新排放標(biāo)準(zhǔn)要求的矛盾曰 益突出。目前國(guó)內(nèi)大多數(shù)煉油行業(yè)均采用物理、化學(xué)方法加以處理，但這些方 法處理能耗較高，處理中多采用強(qiáng)酸堿，處理后廢水中殘留的有機(jī)污染物難降 解，難處理，難利用，易造成水體的重復(fù)污染，在實(shí)際應(yīng)用中難以推廣。
生物處理方法是處理苯胺類煉油廢水的最有效方法。它是利用好氧與厭氧 微生物交替作用，使苯胺及苯胺類化合物得到深度分解。由于采用生物處理方 法比物理、化學(xué)方法成本低，生產(chǎn)能耗低，又無二次污染，且微生物又具有很 強(qiáng)的惡劣環(huán)境適應(yīng)性以及很高的循環(huán)利用率，因此生物處理方法已成為深度處 理苯胺類煉油廢水的理想方法。
高活性的苯胺類化合物降解菌使苯胺及苯胺類化合物的深度降解得以實(shí) 現(xiàn)。目前許多化工廠己應(yīng)用降解性微生物處理工業(yè)廢水中的苯胺及苯胺類化合
物，并取得顯著效果，但污染環(huán)境中化合物成分復(fù)雜，pH波動(dòng)大，含鹽量大， 很有可能抑制降解菌的生長(zhǎng)或誘導(dǎo)其變異，致使降解菌對(duì)環(huán)境污染物降解速度 減慢，很難達(dá)到實(shí)際需要的要求，受污染環(huán)境不能有效維持降解菌的生物活性， 使降解菌菌數(shù)難以保持較高水平。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種釆用生物法深度處理含有苯胺類煉油廢水的菌 劑及其制備方法。
本發(fā)明苯胺類煉油廢水深度處理菌劑的制備方法，包括下列步驟 將好氧微生物與厭氧微生物共17株菌按體積百分含量為2%-7%的比例分別 對(duì)應(yīng)接入制備好的17個(gè)50-150ml液體種子培養(yǎng)基的三角瓶中，好氧菌的液體 種子培養(yǎng)基三角瓶用2層10Mm的透氣膜封口，厭氧菌的液體種子培養(yǎng)基三角瓶 用三層厚封口膜封口，共同置于28-35'C的恒溫振蕩培養(yǎng)床中，振蕩培養(yǎng)4-7天，然后將17個(gè)菌種液體種子分別對(duì)應(yīng)接與17個(gè)固體擴(kuò)大培養(yǎng)基，好氧菌固體擴(kuò)
大培養(yǎng)基采用3層200目紗布覆蓋，厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用2層牛皮紙覆 蓋，共同置于30-35r溫室中，培養(yǎng)7-ll天，然后將13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng) 物混合制得好氧微生物固體菌劑，將4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合制得厭氧 微生物固體菌劑；
好氧微生物由棒桿菌屬、氣單胞桿菌屬、假單胞桿菌屬、節(jié)桿菌屬、芽孢 桿菌屬和微桿屬組成，13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為
棒桿菌屬HY1 (GSICC 30337):棒桿菌屬HY4 (GSICC 30336):棒桿菌屬 HY5(GSICC 30338):氣單胞桿菌屬HY2 (GSICC 30136):氣單胞桿菌屬HY3 (GSICC 30137):假單胞桿菌屬HY6 (GSICC31603):節(jié)桿菌屬B-lll (GSICC30144):芽 孢桿菌屬HY9(GS工CC32824):芽孢桿菌屬HY10 (GSICC 32825):酚8 (GSICC 32838) :酚13 (GSICC 32821):酚82 (GSICC 32811):微桿屬HY7 (GSICC 31301) =1-10 :1-10 : 1-10 : 1-10 : 1-10 : 1-10 : 1-10 : 1-10 : 1-10 : 1-7 : 1-7 : 1-7 :
1-10，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；
厭氧微生物由腸桿菌屬、假單孢菌屬、芽孢桿菌屬和微桿菌屬組成，4個(gè)厭 氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為
腸桿菌屬YY2(GSICC 30509):假單孢菌屬YY4(GSICC 31616):芽孢桿菌屬 YY5(GSICC 32812):微桿菌屬YY7(GSICC 31302) =1-10 : 1-10 : 1-10 : 1-1。，余
量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基，均在甘肅省工業(yè)微生物菌種保藏中心購(gòu)得。
液體種子培養(yǎng)基的組成及重量百分含量為蛋白胨0.05-0.3%、酵母膏 0. 1-0. 3%、 NaClO. 1-0. 5%、蔗糖0, 2-0. 5%、牛肉膏0. 1-0. 3%、 KH2P040. 01-0. 04%、 MgSOA 01-0. 03%、 CaCl20. 01-0 . 03%和尿素0. 01-0. 05%，用水定容至50-150ml ， pH值為6.4-7.0;
固體擴(kuò)大培養(yǎng)基的組成及重量百分含量為麥芽渣70-75%、麩皮15-22%、 玉米粉2-3°/。、蛋白胨0.05-0.3%、酵母膏0. l-O. 3%、 NaClO. l-O. 5%、蔗糖 0. 2-0. 5°/。、 牛肉膏 0.1-0. 3% 、 KH2P040. 01-0. 04% 、 MgS040. 01-0. 03% 、 CaCl20. Ol-O. 03%、尿素0. 01-0. 05%和水4. 95-9. 95%， pH值為6.4-7.2。
用本發(fā)明方法就能制得本發(fā)明產(chǎn)品苯胺類煉油廢水深度處理菌劑，本發(fā)明 終產(chǎn)品苯胺類煉油廢水深度處理菌劑不需保藏。菌劑的使用方法將重量配比為10%-15%的好氧與厭氧固體菌劑分別裝填至 好氧菌曝氣筒與厭氧菌曝氣筒中，然后開啟好氧曝氣與厭氧廢水循環(huán)連續(xù)處理
裝置，按0.5ml/min (裝置的最大處理能力)的速度連續(xù)流加含有0-160mg/L苯 胺及苯胺化合物的煉油廢水，該廢水按順序分別流經(jīng)沉淀筒、營(yíng)養(yǎng)調(diào)配筒、酸 堿度調(diào)整筒、溫度平衡筒、初級(jí)曝氣筒、好氧菌曝氣筒、好氧菌曝氣筒、酸堿 度調(diào)整筒、厭氧菌循環(huán)筒、厭氧菌循環(huán)筒、酸堿度調(diào)整筒、好氧菌曝氣筒、好 氧菌曝氣筒，共13個(gè)處理筒，即可連續(xù)深度處理含有苯胺類物質(zhì)的煉油廢水。 本發(fā)明解決了目前煉油廢水處理中苯胺處理效率不高和處理后仍含有少量 苯胺類難降解污染物等問題，具有如下優(yōu)點(diǎn)
1. 節(jié)能環(huán)保，節(jié)能環(huán)保，現(xiàn)有的苯胺類煉油廢水處理技術(shù)，多采用物理化 學(xué)技術(shù)，其投資巨大，
同時(shí)水、電、煤以及強(qiáng)酸強(qiáng)堿的大量使用會(huì)導(dǎo)致二次污染，破壞生態(tài)環(huán)境。而 本發(fā)明采用生物法深度處理技術(shù)，其生產(chǎn)能耗低，可循環(huán)利用率高，不會(huì)對(duì)環(huán) 境造成重復(fù)污染，具有長(zhǎng)遠(yuǎn)的生態(tài)效益。
2. 本發(fā)明菌劑是通過多濃度苯胺類、硝基苯類、芳香烴類化合物和微生物 必須營(yíng)養(yǎng)元素的引導(dǎo)、馴化、篩選而來，其生物活性在含苯胺類化合物較寬濃 度范圍內(nèi)均能達(dá)到最高。
3. 本發(fā)明的菌劑是由多種好氧與厭氧微生物菌屬組成，其在pH、溫度、環(huán) 境上有較寬的適應(yīng)性，同時(shí)制備方法簡(jiǎn)單，易于操作。
4. 降解率高，采用本發(fā)明的菌劑，將其通過自制的好氧曝氣與厭氧循環(huán)連 續(xù)處理裝置實(shí)施在含有苯胺類煉油廢水中，其降解率可達(dá)到95%-100%。
5. 工廠化處理易于操作，采用本發(fā)明專利的菌劑，只須將自制好氧曝氣與 厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝置按比例、原理放大，即可實(shí)現(xiàn)工廠化清潔連續(xù)深度處理 含苯胺類煉油廢水。
具體實(shí)施例方式
下面的實(shí)施例可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方 式限制本發(fā)明。
在使用本發(fā)明產(chǎn)品苯胺類煉油廢水深度處理菌劑處理廢水時(shí)，用自制的好 氧曝氣與厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝置，該裝置由沉淀筒、營(yíng)養(yǎng)調(diào)配筒、酸堿度調(diào)整 筒、溫度平衡筒、初級(jí)曝氣筒、好氧菌曝氣筒、好氧菌曝氣筒、酸堿度調(diào)整筒、厭氧菌循環(huán)筒、厭氧菌循環(huán)筒、酸堿度調(diào)整筒、好氧菌曝氣筒和好氧菌曝氣筒
組成，容積為9.4L，其中厭氧菌循環(huán)筒采用全封閉式內(nèi)置隔板循環(huán)，其余筒均
采用不銹鋼巻筒，該裝置處理含有苯胺類煉油廢水時(shí)，最大處理能力為
0. 5ml/mim。
以下通過制備1Kg好氧微生物菌劑、制備1Kg厭氧微生物菌劑的具體實(shí)施 方法來說明本發(fā)明，本發(fā)明制備好的混合前的終產(chǎn)品好氧微生物固體菌劑及厭 氧微生物固體菌劑這17株菌的含水量分別為9%-14%。
實(shí)施例1
將好氧微生物與厭氧微生物共17株菌按體積百分含量為2%的比例分別對(duì)應(yīng) 接入制備好的17個(gè)裝有150ml液體種子培養(yǎng)基的容積為500ml的三角瓶中，好 氧菌的液體種子培養(yǎng)基三角瓶用2層IO陶的透氣膜封口 ，厭氧菌的液體種子培 養(yǎng)基三角瓶用三層厚封口膜封口，共同置于35。C的恒溫振蕩培養(yǎng)床中，振蕩培 養(yǎng)6天，然后將17個(gè)菌種液體種子分別對(duì)應(yīng)接與17個(gè)固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；好氧 菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用3層200目紗布覆蓋，厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用2層 牛皮紙覆蓋，共同置于3(TC溫室中，培養(yǎng)7天，然后將13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培 養(yǎng)物混合制得好氧微生物固體菌劑，將4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合制得厭 氧微生物固體菌劑；
13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為
棒桿菌屬HY1 (GSICC 30337):棒桿菌屬HY4 (GSICC 30336):棒桿菌屬 HY5(GSICC 30338):氣單胞桿菌屬HY2 (GSICC 30136):氣單胞桿菌屬HY3 (GSICC 30137):假單胞桿菌屬HY6 (GSICC31603):節(jié)桿菌屬B-111 (GSICC30144):芽 孢桿菌屬HY9(GSICC32824):芽孢桿菌屬HY10 (GSICC 32825):酚8 (GSICC 32838) :酚13(GSICC 32821):酚82(GSICC 32811):微桿屬HY7 (GSICC 31301) =8: 8: 8: 7: 9: 8: 8: 8: 8: 7: 7: 7: 10，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；
4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為腸桿菌屬YY2(GSICC 30509): 假單孢菌屬YY4(GSICC 31616):芽孢桿菌屬YY5(GSICC 32812):微桿菌屬 YY7(GSICC 31302)= 9: 9: 10: 10，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基。
液體種子培養(yǎng)基各組分用量為蛋白胨0.45g、酵母膏0.45g、 NaC10.75g、 蔗糖0. 75g、牛肉膏0. 45g、KH2P040. 06g、MgS040. 045g、CaCl20. 045g、尿素0. 075g, 用水定容至150ml， pH7.0。固體擴(kuò)大培養(yǎng)基按各組分用量為麥芽渣750g、麩皮100g、玉米粉30g、 蛋白胨3g、酵母膏3g、 NaC15g、蔗糖5g、牛肉膏3g、 KH2PO40. 4g、 MgS040. 3g、 CaCl在3g、尿素O. 5g、水99. 5g， pH7. 2。
菌劑的使用方法處理的含苯胺類煉油廢水的主要成分為苯胺及苯胺類
化合物60mgZL，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、 NaC15g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、 KHfO". 4g/L 、 MgSO力.3g/L、 CaCl20. 3g/L、尿素0. 5g/L， pH7. 2。將重量配比 為15%的好氧與厭氧固體菌劑分別裝填至好氧菌曝氣筒與厭氧菌曝氣筒中，然后 開啟好氧曝氣與厭氧廢水循環(huán)連續(xù)處理裝置，按0. 5ml/min (裝置的最大處理能 力)的速度連續(xù)流加含有60mg/L苯胺及苯胺化合物的煉油廢水，該廢水按順序 分別流經(jīng)沉淀筒、營(yíng)養(yǎng)調(diào)配筒、酸堿度調(diào)整筒、溫度平衡筒、初級(jí)曝氣筒、好 氧菌曝氣筒、好氧菌曝氣筒、酸堿度調(diào)整筒、厭氧菌循環(huán)筒、厭氧菌循環(huán)筒、 酸堿度調(diào)整筒、好氧菌曝氣筒、好氧菌曝氣筒，共13個(gè)處理筒，取出水口水樣， 測(cè)得苯胺濃度下降至0. Omg/L，降解率可達(dá)100%。 對(duì)比例1
在好氧曝氣與厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝置中不填加任何微生物菌劑，在裝置開 啟后，取出水口水樣，苯胺及苯胺化合物由初始濃度為60mg/L下降到57. 3mg/L， 降解率只達(dá)到4. 5%。
實(shí)施例2
將好氧微生物與厭氧微生物共17株菌按體積百分含量為5%的比例分別對(duì)應(yīng) 接入制備好的17個(gè)裝有100ml液體種子培養(yǎng)基的容積為250ml的三角瓶中，好 氧菌的液體種子培養(yǎng)基三角瓶用2層10Mni的透氣膜封口，厭氧菌的液體種子培 養(yǎng)基三角瓶用三層厚封口膜封口，共同置于33i:的恒溫振蕩培養(yǎng)床中，振蕩培 養(yǎng)7天，然后將17個(gè)菌種液體種子分別對(duì)應(yīng)接與17個(gè)固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；好氧 菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用3層200目紗布覆蓋，厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用2層 牛皮紙覆蓋，共同置于35"C溫室中，培養(yǎng)ll天，然后將13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大 培養(yǎng)物混合制得好氧微生物固體菌劑，將4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合制得 厭氧微生物固體菌劑；
13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為
棒桿菌屬HY1 (GSICC 30337):棒桿菌屬HY4 (GSICC 30336):棒桿菌屬 HY5(GSICC 30338):氣單胞桿菌屬HY2 (GS工CC 30136):氣單胞桿菌屬HY3 (GSICC30137):假單胞桿菌屬HY6 (GSICC31603):節(jié)桿菌屬B-111 (GSICC30144):芽 孢桿菌屬HY9(GSICC32824):芽孢桿菌屬HY10 (GSICC 32825):酚8 (GSICC 32838) :酚13(GSICC 32821):酚82(GSICC 32811):微桿屬HY7 (GSICC 31301) =10:
10: 10: 10: 10: 10: 10: 10: 10: 7: 7: 7: 10，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；
4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為腸桿菌屬YY2(GSICC 30509): 假單孢菌屬YY4(GSICC 31616):芽孢桿菌屬YY5 (GSICC 32812):微桿菌屬 YY7(GSICC 31302)= 10: 10: 10: 10，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基。
液體種子培養(yǎng)基的用量為蛋白胨0. 3g、酵母膏0. 3g、NaC10. 5g、蔗糖0. 5g、 牛肉膏O. 3g、 K&POA 04g、 MgSO/). 03g、 CaCl20. 03g、尿素0. 05g、用水定容至 100ml， pH7. 0。
固體擴(kuò)大培養(yǎng)基按重量組成計(jì)為麥芽渣750g、麩皮150g、玉米粉30g、 蛋白胨3g、酵母膏3g、 NaC15g、蔗糖5g、牛肉膏3g、 KH2P040. 4g、 MgSO40. 3g、 CaCLO. 3g、尿素O. 5g、水49. 5g， pH7. 2。
菌劑的使用方法處理的含苯胺類煉油廢水的主要成分為苯胺及苯胺類 化合物100mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、 NaC15g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、 KH，.4g/L、 MgS(U). 3g/L、 CaCl20. 3g/L、尿素0. 5g/L、 pH7. 2。將重量配比為 20%的好氧與厭氧固體菌劑分別裝填至好氧菌曝氣筒與厭氧菌曝氣筒中，然后開 啟好氧曝氣與厭氧廢水循環(huán)連續(xù)處理裝置，按0. 5ml/min (自制裝置的最大處理 能力)的速度連續(xù)流加含有100mg/L苯胺及苯胺化合物的煉油廢水，取出水口 水樣，測(cè)得苯胺濃度下降至1. 4mg/L，降解率可達(dá)98. 6%。
對(duì)比例2
在好氧曝氣與厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝置中不填加任何微生物菌劑，在裝置開 啟后，取出水口水樣，苯胺及苯胺化合物由初始濃度為100mg/L下降至96. 7mg/L, 降解率達(dá)到3. 3%。
實(shí)施例3
將好氧微生物與厭氧微生物共17株菌按體積百分含量為5%的比例分別對(duì)應(yīng) 接入制備好的17個(gè)裝有50ml液體種子培養(yǎng)基的容積為150ml的三角瓶中，好 氧菌的液體種子培養(yǎng)基三角瓶用2層10Mm的透氣膜封口，厭氧菌的液體種子培 養(yǎng)基三角瓶用三層厚封口膜封口，共同置于33i:的恒溫振蕩培養(yǎng)床中，振蕩培 養(yǎng)7天，然后將17個(gè)菌種液體種子分別對(duì)應(yīng)接與17個(gè)固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用3層200目紗布覆蓋，厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用2層 牛皮紙覆蓋，共同置于35。C溫室中，培養(yǎng)9天，然后將13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培 養(yǎng)物混合制得好氧微生物固體菌劑，將4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合制得厭 氧微生物同體菌劑；
13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為
棒桿菌屬HY1 (GSICC 30337):棒桿菌屬HY4 (GSICC 30336):棒桿菌屬 HY5(GSICC 30338):氣單胞桿菌屬HY2 (GSICC 30136):氣單胞桿菌屬HY3 (GSICC 30137):假單胞桿菌屬HY6 (GSICC31603):節(jié)桿菌屬B-111 (GSICC30144):芽 孢桿菌屬HY9(GSICC32824):芽孢桿菌屬HY10 (GSICC 32825):酚8 (GSICC 32838) :酚13(GSICC 32821):酚82(GSICC 32811):微桿屬HY7 (GSICC 31301) =1:
1: 1: 1: 1: 1: 1: h 1: 1: 1: 1: 1，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；
4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為腸桿菌屬YY2(GSICC 30509): 假單孢菌屬YY4(GSICC 31616):芽孢桿菌屬YY5(GSICC 32812):微桿菌屬 YY7(GSICC 31302)= 1: 1: 1: l余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基。
液體種子培養(yǎng)基的用量為蛋白胨O. 15g、酵母膏O. 15g、 NaC10.25g、蔗 糖0. 25g、牛肉膏0. 15g、 KH2P040. 02g、 MgS040 . 0 1 5g、 CaCl20. 015g、尿素0, 025g， 用水定容至50ml， pH7. 0。
固體擴(kuò)大培養(yǎng)基按重量組成計(jì)為麥芽渣750g、麩皮150g、玉米粉30g、 蛋白胨3g、酵母膏3g、 NaC15g、蔗糖5g、牛肉膏3g、 KH靡.4g、 MgS040. 3g、 CaCl20. 3g、尿素O. 5g、水49. 5g， pH7.2。
菌劑的使用方法處理的含苯胺類煉油廢水的主要成分為苯胺及苯胺類 化合物160mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、 NaC15g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、 KH2P(W). 4g/L、 MgS040 . 3g/L、 CaCl20. 3g/L、尿素0. 5g/L、 pH7. 2。將重量配比為 20%的好氧與厭氧固體菌劑分別裝填至好氧菌曝氣筒與厭氧菌曝氣筒中，然后開 啟好氧曝氣與厭氧廢水循環(huán)連續(xù)處理裝置，按0. 5ml/min (自制裝置的最大處理 能力)的速度連續(xù)流加含有160mg/L苯胺及苯胺化合物的煉油廢水，取出水口 水樣，測(cè)得苯胺濃度下降至6. 7mg/L，降解率可達(dá)95. 8%。
對(duì)比例3
在好氧曝氣與厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝置中不填加任何微生物菌劑，在裝置開 啟后，取出水口水樣，苯胺及苯胺化合物由初始濃度為160mg/L下降至156. 5mg/L，降解率達(dá)到2. 2%。
實(shí)施例4 菌劑僅由好氧微生物組成，
將好氧微生物按按體積百分含量為5%的比例分別接入制備好的50ml液體種 子培養(yǎng)基的容積為150ral的三角瓶中，液體種子培養(yǎng)基三角瓶用2層10Mm的透 氣膜封口，置于33"C的恒溫振蕩培養(yǎng)床中，振蕩培養(yǎng)7天，然后將13個(gè)菌種液 體種子分別對(duì)應(yīng)接與13個(gè)固體擴(kuò)大培養(yǎng)基，好氧固體培養(yǎng)基采用3層200目紗 布覆蓋，置于35。C溫室中，培養(yǎng)9天，然后將13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合， 即制得好氧菌固體菌劑。
13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為
棒桿菌屬HY1 (GSICC 30337):棒桿菌屬HY4 (GSICC 30336):棒桿菌屬 HY5(GSICC 30338):氣單胞桿菌屬HY2 (GSICC 30136):氣單胞桿菌屬HY3 (GSICC 30137):假單胞桿菌屬HY6 (GSICC31603):節(jié)桿菌屬B-111 (GSICC30144):芽 孢桿菌屬HY9(GSICC32824):芽孢桿菌屬HY10 (GSICC 32825):酚8 (GSICC 32838) :酚13(GSICC 32821):酚82(GSICC 32811):微桿屬HY7 (GSICC 31301) = 1:
l.- 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基。
液體種子培養(yǎng)基的用量為蛋白胨O. 15g、酵母膏O. 15g、 NaC10.25g、蔗 糖0. 25g、牛肉膏0. 15g、 KH2POA 02g、 MgS040 . 0 1 5g、 CaCl20. 015g、尿素0. 。25g、 用水定容至50ml， pH7.0。
固體擴(kuò)大培養(yǎng)基的用量為麥芽渣750g、麩皮150g、玉米粉30g、蛋白胨 3g、酵母膏3g、 NaC15g、蔗糖5g、牛肉膏3g、 KH2P040. 4g、 MgS040 . 3g、 CaCl20. 3g、 尿素0.5g、水49. 5g, pH7. 2。
菌劑的使用方法處理的含苯胺類煉油廢水的主要成分為苯胺及苯胺類 化合物160mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、 NaC15g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、 KH2PO40. 4g/L、 MgSO力.3g/L、 CaCl20. 3g/L、尿素0. 5g/L、 pH7丄將重量配比為 20%的好氧固體菌劑裝填至自制的好氧曝氣與厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝置中的好氧 筒，厭氧筒中不裝填菌劑，然后開啟裝置，按0.5ml/min (自制裝置的最大處理 能力)的速度連續(xù)流加含有160mg/L苯胺及苯胺化合物的煉油廢水，取出水口 水樣，測(cè)得苯胺濃度下降至53.9mg/L，說明僅用好氧菌固體菌劑也能處理廢水， 降解率達(dá)66. 3%，效果不如同時(shí)使用好氧微生物固體菌劑和厭氧微生物固體菌劑 處理廢水。對(duì)比例4
在好氧曝氣與厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝置中不填加任何微生物菌劑，在裝置開
啟后，取出水口水樣，苯胺及苯胺化合物由初始濃度為160mg/L下降至156. 5mg/L， 降解率達(dá)到2. 2%。
實(shí)施例5菌劑僅由厭氧微生物組成，
將厭氧微生物按5%分別接入制備好的50ml液體種子培養(yǎng)基的容積為150ml 的三角瓶中，液體種子培養(yǎng)基三角瓶用三層厚封口膜封口，置于33。C的恒溫振 蕩培養(yǎng)床中，振蕩培養(yǎng)7天，然后將4個(gè)菌種液體種子分別對(duì)應(yīng)接與4個(gè)固體 擴(kuò)大培養(yǎng)基，厭氧固體培養(yǎng)基釆用2層牛皮紙覆蓋，置于35'C溫室中，培養(yǎng)9 天，然后將4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合，即制得厭氧菌固體菌劑。
4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為腸桿菌屬YY2(GSICC 30509): 假單孢菌屬YY4(GSICC 31616):芽孢桿菌屬YY5(GSICC 32812):微桿菌屬 YY7(GSICC 31302)= 1: 1: 1: 1,余量固體擴(kuò)大培養(yǎng)基。
液體種子培養(yǎng)基的用量蛋白胨O. 15g、酵母膏O. 15g、 NaC10.25g、蔗糖 0. 25g、牛肉膏O. 15g、 KH，.02g、 MgSO在015g、 CaCl20. 015g、尿素0. 025g、 用水定容至50ml， pH7.0。
固體擴(kuò)大培養(yǎng)基的用量為麥芽渣750g、麩皮150g、玉米粉30g、蛋白胨 3g、酵母膏3g、 NaC15g、蔗糖5g、牛肉膏3g、 KH2PO40. 4g、 MgSO力.3g、 CaCl20. 3g、 尿素0.5g、水49. 5g， pH7. 2。
菌劑的使用方法處理的含苯胺類煉油廢水的主要成分為苯胺及苯胺類化合
物160mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、 NaC15g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、 KH2P040. 4g/L、 MgS040. 3g/L、 CaCl20. 3g/L、尿素0. 5g/L、 pH7.2。
將重量配比為20%的厭氧固體菌劑裝填至好氧曝氣與厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝 置中的厭氧筒，好氧曝氣筒中不填加菌劑，然后開啟裝置，按0.5ml/min (自制 裝置的最大處理能力)的速度連續(xù)流加含有160nig/L苯胺及苯胺化合物的煉油 廢水，取出水口水樣，測(cè)得苯胺濃度下降至125.9mg/L，說明僅用厭氧微生物固 體菌劑也能處理廢水，效果不如同時(shí)使用好氧微生物固體菌劑和厭氧微生物固 體菌劑處理廢水。降解率只達(dá)21.3%。
對(duì)比例5
在好氧曝氣與厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝置中不填加任何微生物菌劑，在裝置開啟后，取出水口水樣，苯胺及苯胺化合物由初始濃度為160mg/L下降至156. 5mg/L， 降解率達(dá)到2. 2%。 實(shí)施例6
將好氧微生物與厭氧微生物共17株菌按體積百分含量為2%的比例分別對(duì)應(yīng) 接入制備好的17個(gè)裝有150ml液體種子培養(yǎng)基的容積為500ml的三角瓶中，好 氧菌的液體種子培養(yǎng)基三角瓶用2層IO陶的透氣膜封口，厭氧菌的液體種子培 養(yǎng)基三角瓶用三層厚封口膜封口，共同置于35。C的恒溫振蕩培養(yǎng)床中，振蕩培 養(yǎng)6天，然后將17個(gè)菌種液體種子分別對(duì)應(yīng)接與17個(gè)固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；好氧 菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用3層200目紗布覆蓋，厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用2層 牛皮紙覆蓋，共同置于3(TC溫室中，培養(yǎng)7天，然后將13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培 養(yǎng)物混合制得好氧微生物固體菌劑，將4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合制得厭 氧微生物固體菌劑；
13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為
棒桿菌屬HY1 (GSICC 30337):棒桿菌屬HY4 (GSICC 30336):棒桿菌屬 HY5(GSICC 30338):氣單胞桿菌屬HY2 (GSICC 30136):氣單胞桿菌屬HY3 (GSICC 30137):假單胞桿菌屬HY6 (GSICC3細(xì)):節(jié)桿菌屬B-111 (GSICC30144):芽 孢桿菌屬HY9(GSICC32824):芽孢桿菌屬HYIO (GSICC 32825):酚8(GSICC 32838) :酚13(GSICC 32821):酚82(GSICC 32811):微桿屬HY7 (GSICC 31301) =8:
8: 8: 7: 9: 8: 8: 8: 8: 7: 7: 7: 10，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；
4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為腸桿菌屬YY2(GSICC 30509):
假單孢菌屬YY4(GSICC 31616):芽孢桿菌屬YY5 (GSICC 32812):微桿菌屬
YY7(GSICC 31302)二 9: 9: 10: 10，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基。
液體種子培養(yǎng)基的用量為蛋白胨0.45g、酵母膏0.45g、 NaCl 0. 75g、蔗
糖0. 75g、牛肉膏0. 45g、 KH2P040. 06g、 MgSO40. 045g、 CaCl20. 045g、尿素0. 075g、
用水定容至150ml, pH7.0。
固體擴(kuò)大培養(yǎng)基的用量為麥芽渣750g、麩皮100g、玉米粉30g、蛋白胨
3g、酵母膏3g、 NaCl 5g、蔗糖5g、牛肉膏3g、 KH2P040. 4g、 MgS040. 3g、 CaCl20. 3g、
尿素O. 5g、水99. 5g， pH7. 2。菌劑的使用方法處理的含苯胺類煉油廢水的主要成分為苯胺及苯胺類
化合物160mg/L，蛋白胨3g/L、酵母膏3g/L、 NaC15g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏3g/L、 K眼,O. 4g/L、 MgS040 . 3g/L、 CaCl20. 3g/L、尿素0. 5g/L、 pH7.2。
將好氧固體菌劑按重量配比為15%接種于500ml含有苯胺及苯胺類化合物濃 度160mg/L煉油廢水的容積為1000ml的三角瓶中，置于35°C140r/min振蕩培 養(yǎng)4天，然后再將厭氧固體菌劑按重量配比為15%接種至其中，35。C靜置培養(yǎng)4 天，苯胺及苯胺類化合物濃度降至11. 36mg/L，降解率達(dá)92. 9%。
對(duì)比例6
在含有苯胺及苯胺類化合物濃度160mg/L煉油廢水中添加15%蒸餾水當(dāng)作菌 劑，苯胺及苯胺化合物由初始濃度為160mg/L下降到158. lmg/L，降解率達(dá)到 1. 2%。
試驗(yàn)結(jié)果表明
1. 不加任何微生物，處理效果極低，而投加本發(fā)明微生物菌劑，處理效果 明顯提高；
2. 單獨(dú)使用本發(fā)明中的好氧或厭氧微生物菌劑雖然有一定的降解效果，但 不能達(dá)到深度處理的目的；
3. 配合使用本發(fā)明中的好氧與厭氧微生物菌劑能達(dá)到深度處理苯胺類煉油 廢水的目的；
4. 本發(fā)明微生物菌劑配合自制的好氧曝氣與厭氧循環(huán)連續(xù)處理裝置能達(dá)到 最佳處理效果。
權(quán)利要求
1、一種苯胺類煉油廢水深度處理菌劑的制備方法，其特征在于它包括下列步驟將好氧微生物與厭氧微生物共17株菌按體積百分含量為2％-7％的比例分別對(duì)應(yīng)接入制備好的17個(gè)50-150ml液體種子培養(yǎng)基的三角瓶中，好氧菌的液體種子培養(yǎng)基三角瓶用2層10μm的透氣膜封口，厭氧菌的液體種子培養(yǎng)基三角瓶用三層厚封口膜封口，共同置于28-35℃的恒溫振蕩培養(yǎng)床中，振蕩培養(yǎng)4-7天，然后將17個(gè)菌種液體種子分別對(duì)應(yīng)接與17個(gè)固體擴(kuò)大培養(yǎng)基，好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用3層200目紗布覆蓋，厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)基采用2層牛皮紙覆蓋，共同置于30-35℃溫室中，培養(yǎng)7-11天，然后將13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合制得好氧微生物固體菌劑，將4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合制得厭氧微生物固體菌劑；好氧微生物由棒桿菌屬、氣單胞桿菌屬、假單胞桿菌屬、節(jié)桿菌屬、芽孢桿菌屬和微桿屬組成，13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為棒桿菌屬HY1(GSICC 30337)∶棒桿菌屬HY4(GSICC 30336)∶棒桿菌屬HY5(GSICC 30338)∶氣單胞桿菌屬HY2(GSICC 30136)∶氣單胞桿菌屬HY3(GSICC30137)∶假單胞桿菌屬HY6(GSICC31603)∶節(jié)桿菌屬B-111(GSICC30144)∶芽孢桿菌屬HY9(GSICC32824)∶芽孢桿菌屬HY10(GSICC 32825)∶酚8(GSICC 32838)∶酚13(GSICC 32821)∶酚82(GSICC 32811)∶微桿屬HY7(GSICC 31301)＝1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-7∶1-7∶1-7∶1-10，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；厭氧微生物由腸桿菌屬、假單孢菌屬、芽孢桿菌屬和微桿菌屬組成，4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物的混合比例為腸桿菌屬YY2(GSICC 30509)∶假單孢菌屬YY4(GSICC 31616)∶芽孢桿菌屬YY5(GSICC 32812)∶微桿菌屬YY7(GSICC 31302)＝1-10∶1-10∶1-10∶1-10，余量為固體擴(kuò)大培養(yǎng)基；液體種子培養(yǎng)基的組成及重量百分含量為蛋白胨0.05-0.3％、酵母膏0.1-0.3％、NaCl0.1-0.5％、蔗糖0.2-0.5％、牛肉膏0.1-0.3％、KH2PO40.01-0.04％、MgSO40.01-0.03％、CaCl20.01-0.03％和尿素0.01-0.05％，用水定容至50-150ml，pH值為6.4-7.0；固體擴(kuò)大培養(yǎng)基的組成及重量百分含量為麥芽渣70-75％、麩皮15-22％、玉米粉2-3％、蛋白胨0.05-0.3％、酵母膏0.1-0.3％、NaCl0.1-0.5％、蔗糖0.2-0.5％、牛肉膏0.1-0.3％、KH2PO40.01-0.04％、MgSO40.01-0.03％、CaCl20.01-0.03％、尿素0.01-0.05％和水4.95-9.95％，pH值為6.4-7.2。
2 、根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法制得的苯胺類煉油廢水深度處理菌劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種采用生物法深度處理含有苯胺類煉油廢水的菌劑及其制備方法，包括下列步驟將好氧微生物與厭氧微生物共17株菌按體積百分含量為2％-7％的比例分別對(duì)應(yīng)接入制備好的17個(gè)50-150ml液體種子培養(yǎng)基的三角瓶中，共同置于28-35℃的恒溫振蕩培養(yǎng)床中，振蕩培養(yǎng)4-7天，然后將17個(gè)菌種液體種子分別對(duì)應(yīng)接與17個(gè)固體擴(kuò)大培養(yǎng)基，共同置于30-35℃溫室中，培養(yǎng)7-11天，然后將13個(gè)好氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合制得好氧微生物固體菌劑，將4個(gè)厭氧菌固體擴(kuò)大培養(yǎng)物混合制得厭氧微生物固體菌劑；本發(fā)明采用生物法深度處理技術(shù)，其生產(chǎn)能耗低，可循環(huán)利用率高，降解率高，即可實(shí)現(xiàn)工廠化清潔連續(xù)深度處理含苯胺類煉油廢水。
文檔編號(hào)C12N1/20GK101555462SQ20091011728
公開日2009年10月14日 申請(qǐng)日期2009年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月14日
發(fā)明者周劍平, 孫智敏, 彬 季, 楊 曾, 暉 楊, 王治業(yè), 祁宏山, 趙小峰 申請(qǐng)人:甘肅省科學(xué)院生物研究所