專利名稱：顯微操作針和分離樣品的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種顯微操作工具，更具體地，涉及一種顯微操作針以及利用該顯微操作針分離樣品的方法。
背景技術(shù)：
獲取少量細(xì)胞和組織塊樣本進(jìn)行檢驗(yàn)是臨 床中經(jīng)常使用的檢驗(yàn)手段。在樣本量極其珍貴或須保證其最大活性的情況下，精確、有效地獲得樣本顯得尤為重要。以囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞活檢為例，目前獲得少量用于活檢的滋養(yǎng)層細(xì)胞主要通過顯微注射針的拉伸以及激光的輔助獲得。選取需要量的細(xì)胞團(tuán)，用顯微注射針卡住并向外拉伸，使選取的細(xì)胞團(tuán)與樣本之間的連接拉長(zhǎng)變細(xì)，然后用激光在拉長(zhǎng)處進(jìn)行切割，從而獲得需要的細(xì)胞團(tuán)。由于顯微注射針沒有切割功能，在拉伸過程中，經(jīng)常使得整個(gè)囊胚與透明帶分離，而且激光的介入使得熱效應(yīng)對(duì)胚胎的損傷加大，在一定程度上限制了其在臨床上的推廣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種顯微操作針，用于精確、有效地獲得少量緊密相連的細(xì)胞或組織塊。本發(fā)明的顯微操作針包括管體、連接管和針頭,針頭遠(yuǎn)離連接管一端具有凹槽。所述凹槽的形狀可以是任意形狀。作為優(yōu)選實(shí)施方式，所述凹槽的形狀為沿內(nèi)陷方向逐漸變窄；更優(yōu)選地，所述凹槽為尖角形；尖角的角度為0-90°，優(yōu)選為15° -45°。所述凹槽的槽深為1-999 u m，優(yōu)選為2-300 U m。所述凹槽的個(gè)數(shù)至少為I個(gè)，優(yōu)選為2個(gè)。當(dāng)針頭具有2個(gè)或2個(gè)以上凹槽時(shí)，凹槽之間形成前叉結(jié)構(gòu)。所述前叉結(jié)構(gòu)可以是任何形狀，如梯形、方形、尖叉形等等。優(yōu)選地，所述前叉結(jié)構(gòu)是尖叉形。作為優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明的顯微操作針包括管體、連接管和針頭，針頭遠(yuǎn)離連接管一端有兩個(gè)凹槽，凹槽為尖角形，尖角的角度為15° -45°。兩個(gè)凹槽之間形成兩個(gè)尖叉結(jié)構(gòu)。在一種實(shí)施方式中，所述針頭的軸線方向與管體和連接管的軸線方向一致，成一直線。在另一種實(shí)施方式中，所述針頭的軸線方向與管體和連接管的軸線方向有夾角a，夾角a為0< a彡90°，優(yōu)選為30°彡a彡45°。優(yōu)選地，針頭的內(nèi)徑是1_999 u m,優(yōu)選是5-30 U m ;外徑是2-999 u m,優(yōu)選是6-35u mD優(yōu)選地，顯微操作針的連接管沿管體至針頭方向逐漸變細(xì)。作為優(yōu)選實(shí)施方式，顯微操作針的長(zhǎng)度為2-25cm，優(yōu)選為3-18cm。管體的外徑為100-10000 u m,優(yōu)選為 500-1000 u m ；內(nèi)徑為 99-9999 u m,優(yōu)選為 499-999 u m ;管體的橫斷面形狀可以是任何形狀，如圓形、橢圓形、三角形、方形等等。
作為優(yōu)選實(shí)施方式，所述顯微操作針的材質(zhì)可以是玻璃、石英、塑料、不銹鋼、銅、金或銀。管體、連接管和針頭可以由同一材質(zhì)一體制作而成，例如由玻璃一次拉制而成；也可以由不同材料焊接或粘結(jié)而成。本發(fā)明的顯微操作針可以對(duì)各個(gè)時(shí)期的胚胎、細(xì)胞團(tuán)、組織決、組織片、毛細(xì)血管等取樣；為方便操作，可以采用顯微操作儀上的固定臂、手持固定臂或由操作人員固定該顯微操作針。本發(fā)明的另一目的是提供一種利用本發(fā)明的顯微操作針分離樣品的方法，該方法包括(I)將兩根顯微操作針的凹槽分別卡住需要分離的樣品與其它樣品的連接處；(2)將兩根顯微操作針的凹槽相對(duì)并相向搓動(dòng)，分離樣品。所述樣品可以是各個(gè)時(shí)期的胚胎、細(xì)胞團(tuán)、組織塊、組織片、毛細(xì)血管等。本發(fā)明通過利用兩個(gè)顯微操作針的凹槽結(jié)構(gòu)將樣品固定在凹槽處，兩根顯微操作針同時(shí)從兩個(gè)方向固定樣品，相向運(yùn)動(dòng)，使樣品連接處在被固定的同時(shí)被切割，快速、有效。同時(shí)，本發(fā)明的顯微操作針的針頭軸線與管體軸線可以有夾角，使用者可以根據(jù)實(shí)際需要制作具有不同夾角的顯微操作針，以在不同情況下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。本發(fā)明的顯微操作針的有益之處在于1、精確快速地獲得所需要的樣品；2、不需要借助于激光及其它工具，減少對(duì)樣品的損傷；3、操作簡(jiǎn)單，不需特別的經(jīng)驗(yàn)，便于操作；4、可以適用于更多類型的樣本分離，特別是緊密相連的樣品。


圖I:本發(fā)明一種顯微操作針的結(jié)構(gòu)示意圖，其中管體、連接管和針頭的軸線方向成一直線；圖2:本發(fā)明另一種顯微操作針的結(jié)構(gòu)示意圖，其中針頭的軸線方向與管體和連接管的軸線方向有夾角a ;圖3 :具有一個(gè)凹槽的針頭結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施例方式現(xiàn)結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式
說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限于此。如圖I所示，本發(fā)明的顯微操作針包括管體I、連接管2和針頭3，連接管2沿管體I至針頭3方向逐漸變細(xì)，針頭3遠(yuǎn)離連接管2 —端具有凹槽4。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，凹槽4的作用是卡住樣品后通過兩個(gè)操作針之間的相向運(yùn)動(dòng)而切割樣品，從而分離樣品，因此凹槽4可以是任意形狀，如方形、梯形、尖角形等。實(shí)際應(yīng)用中，凹槽的形狀以沿內(nèi)陷方向逐漸變窄，如尖角形為優(yōu)，尖角的角度可以是0-90°，更好地可以是15° -45°。凹槽的槽深以卡住樣品為準(zhǔn)，可以是1_999 u m,最好是2_300 u m。凹槽的數(shù)量也可以是任意的，如一個(gè)凹槽4”(如圖3)、兩個(gè)凹槽4或4’(如圖I或圖2)、三個(gè)凹槽等。實(shí)際應(yīng)用中，兩個(gè)凹槽是最佳的。當(dāng)針頭具有兩個(gè)或兩個(gè)以上凹槽時(shí)，凹槽之間形成前叉結(jié)構(gòu)，該前叉結(jié)構(gòu)隨凹槽結(jié)構(gòu)不同可以是任何形狀，如梯形、方形、尖叉形等；其中以尖叉形為最優(yōu)，方便刺穿樣品進(jìn)行操作。前叉的長(zhǎng)度與凹槽的深度一致。如圖I所示，顯微操作針針頭3的軸線方向與管體I和連接管2的軸線方向可以、是一致的，即成一直線，此時(shí)顯微操作針是直的；如圖2所示，顯微操作針針頭3’的軸線方向與管體I’和連接管2’的軸線方向有夾角a，即顯微操作針在針頭3’處是彎的，夾角a范圍為0< a <90°，更好地是30° < a <45°。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，在實(shí)際操作中，直的操作針和彎的操作針可以滿足不同的需要。為實(shí)際應(yīng)用需要，針頭 的內(nèi)徑是1-999 u m,更好地可以是5_30 U m ;外徑是2-999 u m,更好地可以是6-35 u m。顯微操作針的長(zhǎng)度可以是適于應(yīng)用的任何長(zhǎng)度，如2_25cm，更好地是3_18cm。管體的外徑D1、內(nèi)徑dl可以是適于應(yīng)用的任何范圍，如外徑Dl可以是100-10000 iim，更好地是500-1000 ii m ;內(nèi)徑dl是99-9999 u m,更好地是499-999 u m。管體橫斷面形狀不限，可以是圓形、橢圓形、三角形、方形等等。這樣的顯微操作針的材質(zhì)可以是玻璃、石英、塑料、不銹鋼、銅、金或銀。管體、連接管和前叉可以由同一材質(zhì)一體制作而成，例如由玻璃一次拉制而成；也可以由不同材料焊接或粘結(jié)而成。用顯微操作針分離樣品時(shí)，需要用兩根顯微操作針同時(shí)固定樣品，主要是利用針頭處的凹槽卡住樣品，然后將兩根顯微操作針的凹槽相對(duì)并相向搓動(dòng)，利用凹槽的作用切割樣品，從而達(dá)到分離的目的。這樣的樣品可以是各個(gè)時(shí)期的胚胎、細(xì)胞團(tuán)、組織塊、組織片、毛細(xì)血管等，特別是連接緊密的樣品。相對(duì)于現(xiàn)有的樣品分離方法，采用本發(fā)明的顯微操作針對(duì)樣品進(jìn)行分離免除了因?qū)?xì)胞的過分拉扯、灼燒而對(duì)樣品產(chǎn)生的損傷。下面通過一個(gè)具體實(shí)施例描述本發(fā)明的顯微操作針的具體結(jié)構(gòu)、制作過程和利用該顯微操作針進(jìn)行樣品分離的過程。顯微操作針的制作用外徑0. 1cm、內(nèi)徑0. 08cm的毛細(xì)管作為材料，采用本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)拉制毛細(xì)管，得到長(zhǎng)度為18cm、包括管體、連接管和針頭的操作針胚,連接管沿管體至針頭的方向逐漸變細(xì)。打磨操作針胚的針頭部位，形成兩個(gè)尖角形凹槽，槽角為35°，槽深為35pm;針頭的內(nèi)徑是30 u m,外徑是35 u m。兩個(gè)凹槽之間形成兩個(gè)尖叉結(jié)構(gòu)，即得到顯微操作針。顯微操作針的使用實(shí)施例I :取一滋養(yǎng)層細(xì)胞部分孵出的囊胚。將兩根針頭外徑為35 U m、內(nèi)徑為30 y m的顯微操作針的凹槽卡住滋養(yǎng)層細(xì)胞與透明帶的連接處；將兩根顯微操作針的凹槽相對(duì)并朝相對(duì)方向搓動(dòng)；透明帶外面的滋養(yǎng)層細(xì)胞與透明帶內(nèi)部的滋養(yǎng)層細(xì)胞分離。實(shí)施例2 取一滋養(yǎng)層細(xì)胞完全孵出的囊胚。將兩根針頭外徑是30 U m、內(nèi)徑是25 ii m的顯微操作針的凹槽卡住滋養(yǎng)層細(xì)胞與透明帶的連接處；將兩根顯微操作針的凹槽相對(duì)并朝相對(duì)方向搓動(dòng)；透明帶外面的滋養(yǎng)層細(xì)胞與透明帶內(nèi)部的滋養(yǎng)層細(xì)胞分離。實(shí)施例3:取從擬胚體中分離出來的部分胚層結(jié)構(gòu)。將兩根針對(duì)外徑是20 U m,內(nèi)徑是18 ii m的顯微操作針的凹槽卡住所要獲取的那部分胚層結(jié)構(gòu)的根部；將兩根叉狀操作針的凹槽相對(duì)并朝相對(duì)方向搓動(dòng)；所要獲得的部分胚層塊與主體胚層塊分離。
權(quán)利要求
1.一種顯微操作針，包括管體、連接管和針頭，其特征在于，針頭遠(yuǎn)離連接管一端具有凹槽。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的顯微操作針，其特征在于，所述凹槽的形狀為沿內(nèi)陷方向逐漸變窄，凹槽個(gè)數(shù)至少為1，槽深為1-999 μ m，優(yōu)選為2-300 μ m。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的顯微操作針，其特征在于，所述凹槽為尖角形，尖角的角度為0-90。，優(yōu)選為15° -45。。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的顯微操作針，其特征在于，當(dāng)針頭具有2個(gè)或2個(gè)以上凹槽時(shí)，凹槽之間形成前叉結(jié)構(gòu)，所述前叉結(jié)構(gòu)的形狀為梯形、方形或尖叉形。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任何一項(xiàng)所述的顯微操作針，其特征在于，所述針頭的軸線方向與管體和連接管的軸線方向一致，成一直線；或者所述針頭的軸線方向與管體和連接管的軸線方向有夾角α，夾角α為0< α彡90°，優(yōu)選為30°彡α彡45°。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任何一項(xiàng)所述的顯微操作針，其特征在于，所述針頭的內(nèi)徑是1-999μ m,優(yōu)選是 5-30 μ m ;外徑是 2-999 μ m,優(yōu)選是 6-35 μ m。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4任何一項(xiàng)所述的顯微操作針，其特征在于，顯微操作針的長(zhǎng)度為2-25cm，優(yōu)選為3-18cm ;管體的外徑為100-10000 μ m，優(yōu)選為500-1000 μ m ;內(nèi)徑為99-9999 μ m,優(yōu)選為 499-999 μ m。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-4任何一項(xiàng)所述的顯微操作針，其特征在于，所述顯微操作針的材質(zhì)是玻璃、石英、塑料、不銹鋼、銅、金或銀。
9.一種利用權(quán)利要求1-8任何一項(xiàng)所述的顯微操作針分離樣品的方法，包括 (1)將兩根顯微操作針的凹槽分別卡住需要分離的樣品與其它樣品的連接處； (2)將兩根顯微操作針的凹槽相對(duì)并相向搓動(dòng)，分離樣品。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述樣品是各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞團(tuán)、組織塊、組織片、毛細(xì)血管。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種顯微操作針以及利用該顯微操作針分離樣品的方法。本發(fā)明的顯微操作針包括管體、連接管和針頭，針頭遠(yuǎn)離連接管一端具有凹槽結(jié)構(gòu)。利用本發(fā)明的顯微操作針可以精確快速地獲得所需要的樣品。
文檔編號(hào)C12M1/26GK102757892SQ20111011202
公開日2012年10月31日 申請(qǐng)日期2011年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月27日
發(fā)明者吳克良, 陳子江, 馬金龍 申請(qǐng)人:山東大學(xué)附屬生殖醫(yī)院